Спосіб визначення особливостей ранніх стадій канцерогенезу у передміхуровій залозі у хворих, які проживають на забруднених радіонуклідами територіях

Спосіб визначення особливостей ранніх стадій канцерогенезу у передміхуровій залозі у хворих, які проживають на забруднених радіонуклідами територіях, що включає імуногістохімічне визначення експресії протеїну р53, який відрізняється тим, що додатково проводять імуногістохімічне дослідження експресії протеїнів р63, Кі-67, р27КіР1, P161NK4a, Bcl-2, -Н2АХ та iNOS та при склеротичних змінах сполучної тканини строми у 3 лозі у хворих, які проживають на забруднених радіонуклідами територіях шляхом імуногістохімічного дослідження експресії протеїну р53 р6З, Кі-67, р27КіР1,P161NK4a, Bс1-2, -Н2АХ та iNOS та при склеротичних змінах сполучної тканини строми у передміхуровій залозі у хворих, які проживають на забруднених радіонуклідами територіях, яку характеризують висока експресія протеїну -Н2АХ у лейоміоцитах, фібробластах, лімфоцитах, ендотеліальних клітинах, з виразною дилатацією судин часто з потовщеними склерозованими стінками, незначною лімфоцитарною, здебільше периваскулярною інфільтрацією, а також розвитком проліферативних диспластичних змін у вигляді вогнищ простатичної інтраепітеліальної неоплазії, часто атипової проліферативної запальної атрофії, базальноклітинної гіперплазії та фокальної атрофії багатьох ацинусів із значними порушеннями регуляції процесів клітинного циклу, апоптозу та проліферації, що дозволяє називати таку форму простатиту, як хронічний атиповий проліферативний простатит, який являє собою передрак передміхурової залози. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб визначення особливостей ранніх стадій канцерогенезу у передміхуровій залозі у хворих, які проживають на забруднених радіонуклідами територіях, який включає імуногістохімічне визначення експресії протеїну р53, згідно з корисною моделлю, додатково проводять імуногістохімічне дослідження експресії протеїнів р6З, Кі-67, р27КіР1,P161NK4a, Bс1-2, -Н2АХ та iNOS та при склеротичних змінах сполучної тканини строми у передміхуровій залозі у хворих із забруднених радіонуклідами територіях з високою експресією протеїну -Н2АХ у лейоміоцитах, фібробластах, лімфоцитах, ендотеліальних клітинах, з виразною дилатацією судин, часто з потовщеними склерозованими стінками, незначною лімфоцитарною, здебільше периваскулярною, інфільтрацією, а головне - розвитком проліферативних диспластичних змін у вигляді вогнищ простатичної інтраепітеліальної неоплазії, атипової проліферативної запальної атрофії, базальноклітинної гіперплазії та фокальної атрофії багатьох ацинусів із значними порушеннями регуляції процесів клітинного циклу, апоптозу та проліферації, що дозволяє називати таку форму простатиту, як хронічний атиповий проліферативний простатит, який являє собою передрак передміхурової залози. Запропонований спосіб виконують наступним чином: з метою діагностики патологічного процесу з операційного матеріалу, отриманого після операційного втручання - відкритої трансвезикальної простатектомії - виконують гістологічні зрізи товщиною 4-6 мкм, забарвлюють гематоксилін еозином та пікрофуксином по Ван-Гізону, а також проводять імуногістохімічне дослідження експресії протеїнів генів - регуляторів клітинного циклу, апоптозу р53, р6З, p27Kip1,pl6INK4a, Bcl-2 та маркера проліферації протеїну Кі-67. Особливої уваги заслуговує імуногістохімічне дослідження експресії протеїну -Н2АХ - чутливого маркера дволанцюгових розривів ДНК. Відомо, що під впливом навіть малих доз іонізуючого опромінення, реактивних 62740 4 кисневих частин (ROS) руйнується ДНК з формуванням розривів її комплементарних ланцюгів (double-strand break-DSB), що супроводжується фосфориляцією гістону Н2АХ, який перетворюється у -Н2АХ, саме він і є найбільш раннім та чутливим маркером пошкодження ДНК, а також грає важливу роль у її репарації. Іншим важливим маркером оксидативного стресу, який також призводить до пошкодження ДНК, особливо в умовах запалення, -опромінення, та деяких хімічних канцерогенів, що супроводжується біосинтезом оксиду азоту (NO), є фермент індуцибельна NO синтаза (iNOS), який каталізує реакції, що генерують пероксинітрит, який також індукує дволанцюгові розриви ДНК та мутагенез. Імуногістохімічні дослідження експресії протеїнів р53, р6З, Кі67,p27Kip1,pl6INK4a, Bcl-2, -Н2АХ та iNOS проводять із застосуванням стандартного авідин-біотин пероксидазного комплексу. Спосіб визначення особливостей ранніх стадій канцерогенезу у передміхуровій залозі у хворих, які проживають на забруднених радіонуклідами територіях був досліджений у відділі патоморфології ДУ "Інститут урології АМН України" на операційному матеріалі, що одержаний від 120 хворих на доброякісну гіперплазію передміхурової залози та поділений на дві групи. У першу (контрольну) групу (І) увійшли 30 хворих на доброякісну гіперплазію передміхурової залози, які протягом останніх 20-25 років проживали на так званих "чистих" (незабруднених радіонуклідами) територіях України. Другу групу (II) складають 90 хворих на доброякісну гіперплазію передміхурової залози, які протягом останніх 20-25 років проживали на забруднених радіонуклідами після аварії на ЧАЕС у 1986 році територіях України, де рівень терито137 ріального забруднення Цезієм 137 (Cs ) коливається від 5 до 30 Кі/Кт2. У Києві, який також належить до забруднених радіонуклідами територій, 137 рівень забруднення Cs коливається від 0,5 до 5 Кі/Кm2. Вік 120 хворих на доброякісну гіперплазію передміхурової залози (перша та друга групи дослідження) складав 64,0±1,08 (від 51 до 88) років. Серед мешканців найбільш забруднених територій величина очікуваної (ретроспективно-прогнозної) дози, накопичуваної протягом усього життя, складає 80-400 м3в (паспортизація 2008). Порівняльне гістологічне та імуногістохімічне дослідження передміхурової залози у хворих на доброякісну гіперплазію передміхурової залози І та II групи виявило вірогідно вищу розповсюдженість хронічного, але дуже специфічного простатиту у хворих, що мешкали у забруднених радіонуклідами регіонах країни (р