Спосіб біохімічної ідентифікації сортів картоплі

Винахід відноситься до галузі сільського господарства, зокрема до ідентифікації сортів картоплі. Відомий спосіб ідентифікації сортів картоплі за їх морфологічними ознаками: за формою та забарвленням бульб та квіток картоплі, стебел та листків (Прототип 1, 2, 3) Згаданий спосіб має такі недоліки: 1. Він є довго тривалим, оскільки займає цілий вегетаційний період розвитку картоплі (з квітня по серпень місяці). 2. Він є трудомістким, оскільки ідентифікацію сортів картоплі за морфологічними ознаками необхідно проводити по всіх характеристиках. В основу винаходу поставлено завдання розробити спосіб біохімічної ідентифікації сортів картоплі, який може бути використаний селекціонерами та робітниками сільського господарства. Поставлене завдання досягається тим, що у запропонованому способі ідентифікацію сортів картоплі проводять лабораторним способом - шляхом виділення білків з бульб картоплі і їх аналіз методом ізоелектрофокусування у поліакриламідному гелі в інтервалі рН 3,5-10,0. Таким чином, сорти картоплі ідентифікуються за їх білковим спектром. Результати, що досягаються внаслідок цього, є більш точними, ніж при проведенні способу-прототипу. 1. Запропонований спосіб дозволяє визначити сорти картоплі за значно коротший термін часу (за 3 години). 2. Ідентифікацію сортів картоплі даним способом проводити легко. 3. Істотною відмінністю нового способу є те, що ізоелектрофокусуванням білків сортів картоплі вдається точніше визначити будь-який сорт картоплі. Отже, спосіб, що заявляється, відповідає критерію винаходу "новизна" та "суттєві відміни". Приклад 1 Навесні висаджують сорти картоплі: Божедар, Бородянська рожева, Водограй, Гарт, Доброчин, Зарево, Зов, Кобза, Купава, Луговська, Малич, Незабудка, Обрій, Поліська рожева, Ракурс, Світанок Київський. В червні місяці проводять ідентифікацію сортів картоплі за кольором квіток. В серпні місяці, коли викопують бульби, проводять ідентифікацію за кольором та формою бульб. Результати наведено в додатку 1 і таблиці 1, де показано ботанічну характеристику сортів картоплі за їх морфологічними ознаками. Приклад 2 Для біохімічної ідентифікації сортів картоплі з бульб виділяли білки шляхом розтирання на холоді у фарфоровій ступці, центрифугували протягом 10 хвилин при 8000об./хв. [4, 5]. При цьому білки виділяються в супернатант, а суміші випадають в осад, який видаляють. Супернатант використовували для ізоелектрофокусування білків у поліакриламідному гелі (Т-5%, С-3%) з амфолітом діапазону рН 3,5-10,0 [4]. Білкові спектри виявляли за допомогою барвника Кумассі блю G-250. Для цього спочатку відмивали амфоліти сумішшю: три хлороцтова кислота:етанол:вода (10:25:65) і забарвлювали 0,05% Кумассі блю G-250 в суміші: трихлороцтова кислота:етанол:вода (10:25:65). Відмивку від надлишку барвника проводили цією ж сумішшю. Білкові компоненти розраховували за допомогою комп'ютерної програми, розробленої Російським Інститутом фітопатології і вдосконаленої на УкрНДСКР. В результаті проведених досліджень білковий спектр кожного сорту картоплі має свій специфічний, унікальний білковий спектр, який не повторюється в жодному зразку картоплі (фігура 1 - фігура 16). Література. 1. Назар В.М. Руководство по апробации картофеля. - К., 1989. - 71 с. 2. Кучко А.А. Наші сорти картоплі - запорука вашого успі ху. - Немішаєве, 1998. - 18 с. 3. Осипчук А.А. Основні характеристики сортів картоплі. - Немішаєве, 1999. - 82 с. 4. Ригетти Т. Изоэлектрическое фокусирование: Теория, методы, применение. - М.: Мир, 1986. - 360 с. 5. Троицкий И.Г. Изоэлектрическое фокусирование белков в самоорганизующихся и искусственных рН градиентах. - К.: Наукова думка, 1984. - 280 с. Спосіб біохімічної ідентифікації сортів картоплі представлений в таблиці 1 Таблиця 1 Ботанічна характеристика сортів картоплі № п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Назва сорту Божедар Бородянська рожева Водограй Гарт Доброчин Зарево Зов Кобза Купава Луговська Малич Незабудка Форма бульб Овальні Округлі Округлі Округлі Округлі Округлі Округлі Округлі Овальні Округло-овальні Округло-овальні Округло-овальні 13 Обрій Коротко-овальні 14 15 16 Поліська рожева Ракурс Світанок київський Овальні Округло-овальні Округлі Забарвлення бульб Рожеві Рожеві Білі Білі Рожеві Рожеві Білі Білі Рожеві Світло-рожеві Білі Білі Білі з жовтим відтінком Рожеві Білі Рожеві Забарвлення цвіту Червоно-фіолетові Рожеві Білі Синьо-фіолетові Червоно-фіолетові Червоно-фіолетові Червоно-фіолетові Білі Червоно-фіолетові Білий Білий Білий Білий Рожевий Білий Рожевий