Спосіб біологічної стерилізації тварин

Реферат: Спосіб біологічної стерилізації тварин, при якому використовують прижиттєво взяту кріоконсервовану ксеногенну спинномозкову рідину лактуючих корів, яку отримують методом субокципітальної пункції в перші 2-3 тижні після отелення, вводять її поліестричним ссавцям у ранньому постнатальному періоді внутрішньом’язово або внутрішньочеревинно одноразово із розрахунку дози 2 мл на кг ваги. UA 74220 U (12) UA 74220 U UA 74220 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до експериментальної морфології і фізіології, зокрема до способів стерилізації самок і самців для моделювання безпліддя експериментальних тварин з метою тестування різних препаратів репродуктивно-стимулюючої дії, а також може бути використана для стерилізації тварин у тваринництві і ветеринарії. Аналогом є спосіб біологічної кастрації (Кузнецов А.К. Ветеринарная хирургия, офтальмология и ортопедия. - Л.: Колос, 1980. - С. 152), який здійснюють для самців шляхом введення гомогенату тканини гомологічного сім'яника, а для самок - введенням великих доз гормонів яєчників - фолестрол 2 мл на 100 кг ваги, 0,5 % масляний розчин дистильбестролу пропіонату 1000000 од., 2 % масляний розчин синестролу - 10000000 од. Ознаками аналогів, що збігаються з основними ознаками запропонованої корисної моделі, є забезпечення можливості припинення функції сім'яників та яєчників ссавців. Ознаками, які перешкоджають досягненню очікуваного технічного результату у випадку хірургічного втручання, є такі суттєві недоліки як відмінність в методиці для самців і самок, ненадійність методу, значні матеріальні витраті при приготуванні біопрепаратів. За прототип вибраний спосіб біологічної кастрації тварин (Патент № 30458 А. Україна. МПК 6 А01К 21/00, А61К 35/26. Спосіб біологічної кастрації тварин / Кримський державний медичний університет ім. С.І. Георгіївського. - Заявка № 98052419. - Заявл. 12.05.1998. - Опубл. 15.11.2000, Бюл. № 6), який здійснюють шляхом введення лікарського препарату цереброспінальної рідини великої рогатої худоби за допомогою внутрішньом'язових ін'єкцій самцям дворазово з інтервалом в тиждень, а самкам - одноразово, причому введення спинномозкової рідини корів викликає припинення сперматогенезу у самців та припинення статевої цикліки внаслідок ановуляції у самиць, а причинами таких змін є розлади нейроендокринної системи в регуляції репродуктивної функції. Ознаками, що збігаються з основними ознаками корисної моделі, є введення препарату спинномозкової рідини великої рогатої худоби за допомогою внутрішньом'язових ін'єкцій. Технічним результатом запропонованої корисної моделі є: підвищення ефективності стерилізації та зменшення частоти виникнення ускладнень при проведенні стерилізації. Причинами, що перешкоджають досягненню очікуваного технічного результату, є: велика розбіжність біохімічного складу, та, відповідно, біологічних властивостей, спинномозкової рідини, внаслідок відсутності стандартизації донорів; матеріальні та часові затрати на проведення фільтрування, зменшення біологічної активності ліквору внаслідок фільтрування, оскільки такі великі молекули біологічно активних речовин, наприклад, як тропні гормони аденогіпофізу, залишаються на фільтрі; необхідність отримання у донорів великої кількості спинномозкової рідини внаслідок великої ваги двомісячних свинок та поросят, яка становить понад 15-18 кг, та, відповідно, великої разової дози ліквору (понад 30-36 мл), введення якої може привести до місцевих ускладнень - утворення внутрішньом'язових інфільтратів; доведений ефект використання тільки у сільському господарстві при стерилізації свиней та при стерилізації самців білих щурів. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалення способу-прототипу шляхом отримання спинномозкової рідини лише у лактуючих корів протягом декількох тижнів після першого отелення з наступною кріоконсервацією та одноразового введення отриманого біопрепарату спинномозкової рідини у новонародженому віці самкам і самцям, що дозволяє отримати спинномозкову рідину з максимальними біологічними властивостями, максимально зберегти біологічно активні речовини в її складі, а також забезпечити її максимальний ефект в організмі тварини-реципієнта, оскільки в новонародженому віці проникність гематоенцефалічного бар'єру і пластичність структур гіпоталамо-гіпофізарної системи максимальна, як наслідок, підвищити якість та ефективність стерилізації, зменшити матеріальні витрати, тобто досягти очікуваний технічний результат. Поставлена задача вирішується тим, що в способі біологічної кастрації тварин, що включає введення препарату спинномозкової рідини великої рогатої худоби за допомогою ін'єкцій, згідно корисної моделі, використовують прижиттєво взяту кріоконсервовану ксеногенну спинномозкову рідину лактуючих корів, яку отримують методом субокципитальної пункції в перші 2-3 тижні після отелення, вводять її поліестричним ссавцям у ранньому постнатальному періоді внутрішньом'язово або внутрішньочеревинно одноразово із розрахунку дози 2 мл на кг ваги. Між сукупністю основних ознак способу, який заявляється, та очікуваним технічним результатом, визначається наступний причинно-наслідковий зв'язок: використання як основи для отримання лікарського біопрепарату спинномозкової рідини великої рогатої худобі, а саме лактуючих корів, отриманої протягом 2-3 тижнів після отелення, дозволяє домогтися збільшення кількості біологічно активних речовин стерилізуючої дії у складі сировини, кріоконсервація дозволяє максимально зберегти біологічні властивості ліквору, введення препарату тваринам у 1 UA 74220 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 новонародженому віці дозволяє зменшити об'єм спинномозкової рідини, що вводиться, зменшити кількість місцевих ускладнень, зменшити матеріальні витрати на її отримання тощо, бо вага тварин у новонародженому віці і, відповідно, разова доза спинномозкової рідини, що вводиться, мінімальні; а використання спинномозкової рідини для стерилізації самців і самок лабораторних гризунів дозволяє збільшити сферу даного способу стерилізації, використовувати його не лише в сільському господарстві, а й в експериментальної морфології і фізіології тощо для моделювання безпліддя та пригнічення функції яєчників експериментальних тварин з метою тестування різних препаратів репродуктивно-стимулюючої дії. Запропонований спосіб полягає в наступному. Спинномозкову рідину отримують від лактуючих корів методом субокципітальної пункції в період фізіологічної ановуляції, тобто в перебігу 2-3 тижнів після отелення в стерильну напівзакриту систему, негайно занурюють у посудину Дьюара з рідким азотом для заморожування при температурі -196 °C. Заморожений ліквор транспортують на станцію переливання крові, лабораторію тощо, де його зберігають необхідний час у морозильної камері низькотемпературних холодильників. Доцільно проводити кріоконсервацію спинномозкової рідини у ємкостях того об'єму, який буде потрібен у наступному при проведенні стерилізації, щоб уникнути багатократного розморожування і відтавання, а розморожувати спинномозкову рідину перед введенням лише одноразово. Спинномозкову рідину відтаюють при кімнатній температурі і вводять однократно шляхом ін'єкції самцям і самкам білих щурів, свиней в період новонароджуваності з розрахунку разової дози 2 мл на кг маси тіла. Щурам спинномозкову рідину вводять внутрішньочеревно в першу добу життя, свиням внутрішньом'язово в 1-10-у добу життя. Введена спинномозкова рідина викликає припинення функціонування статевих залоз тварин - ановуляцію у самок та гальмування сперматогенезу у самців внаслідок порушення регуляторної функції гіпоталамо-гіпофізарно-епіфізарної системи. Спосіб підтверджується наступними прикладами його використання. Приклад 1 Самка білого щура в першу добу життя, вага 7,5 г; проведена одноразова внутрішньоочеревинна ін'єкція спинномозкової рідини із розрахунку дози 2 мл на кг ваги (0,015 мл); спостерігається зниження темпів приросту маси тіла, у віці 90 діб не настає відкриття піхви, відсутні естральні цикли, на розтині - зменшена маса гонад, морфологічний статус коркового шару яєчників відповідає яєчникам незрілих щурів, всі порожнинні фолікули мають виражені ознаки атрезії. За даною методикою біологічної стерилізації підлягали 10 самиць, у яких виявлені аналогічні зміни показників фертильності та морфологічні зміни яєчників. Приклад 2 Свинка, вік 14 діб, вага 2,5 кг; проведена одноразова внутрішньом'язова ін'єкція спинномозкової рідини із розрахунку дози 2 мл на кг ваги (5 мл); спостерігається тривала незворотна безплідність, внаслідок відсутності циклічних змін репродуктивної системи, що пов'язано з блокуванням фолікулогенезу на етапі селекції домінантних фолікулів, що підтверджується проведеним гістологічним дослідженням. За даною методикою біологічній стерилізації підлягали 20 самиць, у яких виявлені аналогічні зміни показників фертильності та морфологічні зміни яєчників. Запропонований спосіб дозволяє проводити біологічну стерилізацію з високою ефективністю при одноразовому введенні препарату у свиней та лабораторних гризунів у новонародженому віці, також дозволяє знизити матеріальні витрати при проведенні стерилізації за рахунок зменшення об'єму спинномозкової рідини, полегшення обробки спинномозкової рідини, зменшення частоти виникнення ускладнень при проведенні стерилізації; поширюється сфера використання даного способу стерилізації від сільського господарства та тваринництва до експериментально-морфологічних досліджень. Даний спосіб може бути використаний для стерилізації тварин у тваринництві і ветеринарії, а також для моделювання безплідності експериментальних тварин з метою тестування різних препаратів репродуктивно-стимулюючої дії. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб біологічної стерилізації тварин, що включає введення препарату спинномозкової рідини великої рогатої худоби за допомогою ін'єкцій, який відрізняється тим, що використовують прижиттєво взяту кріоконсервовану ксеногенну спинномозкову рідину лактуючих корів, яку отримують методом субокципітальної пункції в перші 2-3 тижні після отелення, вводять її 2 UA 74220 U поліестричним ссавцям у ранньому постнатальному періоді внутрішньочеревинно одноразово із розрахунку дози 2 мл на кг ваги. внутрішньом'язово Комп’ютерна верстка М. Ломалова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3 або