Застосування інгібітора дипептидилпептази iv для лікування ранніх стадій діабету типу 2

1. Застосування інгібітора дипептидилпептидази IV або його проліків для одержання фармацевтичної композиції для лікування пацієнта на ранніх стадіях діабету типу 2, яка затримує розвиток діабетичних ускладнень, при цьому інгібітор 3 76452 4 бою добре відому модель діабету типу 2 людини. 0528858, 0610317, 0731789, 1043328, 1050540 та ZDF пацюки є гіперфагічними, і коли утримуються 1,082314. на кормах з високим вмістом жирів, вони стають У бажаному втіленні даного винаходу інгібітор діабатичними і проявляють як гіперглікемію, гіперDP-IV представляє собою -аміноацилпіролідид, тригліцеридемію, полідепсію, так і збільшення ци-аміноацилтіазолідид, ркуляції вільних жирних кислот. Поява симптомів аміноацилпіролідиненнітрил або захворювання спостерігається приблизно через 8 аміноацилтіазолідиненнітрил. У більш бажаному тижнів, тварини стають повністю діабетичними у втіленні інгібітор DP-IV представляє собою сполуку віці 11 тижнів. Ми виявили, що постійне лікування загальної формули 1 або загальної формули 2 або пацюків ZDF за допомогою інгібіторів DP-IV привофармацевтично прийнятну сіль будь-якої з них. дить до значної затримки появи симптомів діабетичного стану, це свідчить про те, що таке постійне лікування буде корисним для людей, які мають ризик розвитку діабету типу 2 або для пацієнтів на ранніх стадіях захворювання. Згідно з цим, перший аспект даного винаходу представляє собою спосіб лікування пацієнтів, що мають ризик розвитку діабету типу 2, або пацієнтів на ранніх стадіях діабету, для того, щоб затримати появу симптомів та розвиток захворювання. ЛікуУ цих загальних формулах X вибраний з метивання включає введення вказаному пацієнтові ленової групи СН2 та атома сірки S; R1 вибраний з повторюваних доз інгібітора DP-IV. С1-С6 алкільних груп, включаючи розгалужені та Оцінка того факту, що пацієнт має ризик розциклічні алікільні групи та (CH2)nR3; R2 вибраний з витку діабету типу 2, може бути зроблена досвідатома водню Η та нітрильної групи CN; R3 вибраченим лікарем, який бере до уваги такі фактори, як ний з NH-Het та NHCO-Het; Het представляє совік та вагу (більш специфічно індекс маси тіла, бою піридильну, піримідильну або піразинільну ВМІ) пацієнта, а також історію діабету у сім'ї пацієгрупу, що необов'язково заміщена до двох разів нта та інші фактори ризику. Подібно до цього, діаггрупами, незалежно вибраними з метилу, СІ, F, CN ноз ранньої стадії діабету типу 2 може бути зробта CF3; та n дорівнює 2, 3, 4 або 5. лений досвідченим лікарем на основі ряду Сполуки згідно з загальними формулами 1 та стандартних аналізів та тестів. 2 усі мають, принаймні, один основний атом азоту Інгібітор DP-IV може представляти собою та, таким чином, здатні до утворення солей приєдбудь-яку сполуку, що інгібує ферментативну актинання протонвмісних кислот. Приклади таких кисвність DP-IV в аналізах in vitro у концентраціях, лот включають соляну кислоту, сірчану кислоту, нижче 10мкМ. Особливо прийнятними сполуками є фосфорну кислоту, оцтову кислоту, трифтороцтоті, що інгібують ферментативну активність DP-IV у ву кислоту, фумарову кислоту, малеїнову кислоту, концентраціях, нижчих 0,1мкМ. Така активність лимонну кислоту, памоїнову кислоту, метансульможе бути легко визначена середнім спеціалістом фонову кислоту. До тих пір, поки ці кислоти є фару даній галузі при використанні одного з опублікомацевтично прийнятними, такі солі включаються в ваних способів аналізу. Прийнятні сполуки повинні об'єм даного винаходу. Сполуки згідно з загальбути, крім того, бажано селективними, тобто вони ною формулою 1 мають стереогенний центр (асине повинні значним чином інгібувати інші ферменметричний атом вуглецю) в аміноацильній групі. ти, які не мають відношення до даного, у концентКоли R2 представляє собою нітрил, сполуки згідно раціях, що дорівнюють таким, при яких досягаєтьз обома загальними формулами мають стереогенся інгібування DP-IV, та більш бажано, щоб вони ний центр у п'ятичленному кільці. Згідно з цим ці не інгібували цих ферментів у концентраціях у десполуки можуть існувати як оптичні ізомери, такі, сять разів більших, навіть більш бажано у сто раяк енантіомери та діастереомери. Усі такі ізомери зів більших, ніж ті, при яких вони суттєво інгібують включені в об'єм даного винаходу. Бажана стереоDP-IV. хімія є такою, як ілюструється загальними формуОб'єм даного винаходу охоплює застосування лами 3 та 4. проліків інгібіторів DP-IV. Проліки добре відомі у галузі техніки. Проліки є сполукою, що взагалі є неактивною per se, але яка піддається хімічній або метаболічній модифікації після введення, така модифікація викликає вивільнення активного фармацевтичного агента. Проліки типово застосовують для збільшення пероральної біодоступності або для подовження терміну дії сполуки. Приклади прийнятних сполук та способи їх У бажаному втіленні даного винаходу інгібітор приготування розкриті, наприклад, у міжнародних є сполукою загальної формули 1. Більш бажано, заявках WO91/16339, WO93/08259, WO95/15309, коли він є сполукою загальної формули 1, де R1 є WO98/19998, WO99/46272, WO99/61431, розгалуженою алкільною групою, такою, як вторWO99/67279, WO01/14318; патентах США бутил або трет-бутил. Більш бажано, коли він є 5,462,928, 5,543,396, 5,939,560, 6,011,155, такою сполукою, в якій X є СН2, a R2 є нітрилом, 6,107,317, 6,110,949, 6,124,305, 6,166,063 та або X є S, R2 є Н. 6,201,132 та європейських патентних заявках 5 76452 6 В іншому бажаному втіленні даного винаходу Інгібітори DP-IV можна приготувати згідно з інгібітор є сполукою загальної формули 2. Більш опублікованими способами бажано, коли він є сполукою загальної формули 2, Приклад 1А (2S)-1-((2'S)-2'-аміно-3',3'де R1 є (CH2)nR3, π є 2 та R3 є NH-Het. Більш бадиметилбутаноїл)піролідин-2-карбонітрил гідрохжано, коли він є сполукою, в якій X є СН2, R2 є нітлорид рилом, a Het є 5-ціано-2-піридилом. У способі лікування згідно з даним винаходом інгібітор DP-IV може вводитися пацієнтові як фармацевтична композиція у такому вигляді, як, наприклад, таблетка, капсула, порошок, супозиторій, розчин або суспензія. Загальні принципи приготування таких композицій добре відомі у галузі техніВказану в назві сполуку одержують згідно зі ки. Композиція може також включати фармацевтиспособами WO95/15309, і зокрема, так, як описано чно прийнятні наповнювачі як агенти для у Прикладі 18. Коротко, ВОС-захищений третзбільшення об'єму, зв'язувальні агенти, консервабутилгліцин конденсують з пролінамідом, первиннти, розчинники, смакові агенти, такі, як діабетичні ну амідну групу піддають дегідруванню з трифтоагенти, але бажано, коли інгібітор DP-IV міститься роцтовим ангідридом для одержання нітрилу, а як єдиний активний агент. ВОС-групу видаляють за допомогою НСІ в діоксаКомпозиції можна вводити будь-яким прийнятні. ним чином, включаючи пероральне, буккальне, Приклад 1В (2S)-1-((2'S)-2'-аміно-5'під'язикове, ректальне, інтравагінальне та транспіразинкарбоніламінопентаноїл) піролідин-2дермальне введення, а також внутрішньовенну, карбонітрил трифторацетат підшкірну та внутрішньом'язову ін'єкцію. Бажано, коли композиція вводиться перорально як таблетка або капсула. Доза буде визначатися практикуючим лікарем, беручи до уваги усі релевантні фактори. Типово, одинична доза містить від 1мг до 100мг, бажано від 5мг до 250мг. Дозу можна вводити один раз на день або частіше, наприклад, двічі або тричі на день. Лікування продовжують протягом тривалого періоду часу, такого, як декілька тижнів, місяців або навіть років. Альтернативно, композицію можна вводити як депо, яке вивільняє активну сполуку протягом періоду часу від одного тижня до трьох місяців. Такі композиції контрольованого вивільнення відомі у галузі техніки, в загальному випадку вони включають фармацевтично активні форми, асоційовані з біосумісними полімерами. Полімер може просто інкапсулювати активний агент, створюючи фізичний бар'єр для його вивільнення у загальну циркуляцію, або це може бути хімічна асоціація, така, як ковалентна або іонна взаємодія між полімером та активним агентом. Такі композиції взагалі вводяться шляхом внутрішньовенної або підшкірної ін'єкції. У цих випадках введення буде повторюватися з інтервалами від одного тижня до трьох місяців так, щоб проводити лікування протягом тривалого періоду часу. Другим аспектом даного винаходу є фармацевтична композиція для лікування пацієнта, що має ризик розвитку діабету типу 2, або пацієнта на ранніх стадіях діабету для того, щоб затримати або запобігти розвитку захворювання. Композиція включає інгібітор DP-IV, як описано вище, сформульований прийнятним чином разом з інструкціями стосовно повторюваного дозування. У третьому аспекті даного винаходу застосування інгібітора DP-IV для приготування фармацевтичної композиції для лікування пацієнта, що має ризик розвитку діабету типу 2, або пацієнта на ранніх стадіях діабету для того, щоб затримати або запобігти розвитку захворювання. Приклади Приклад 1 - Приготування інгібіторів DP-IV Вказану в назві сполуку одержують згідно з Прикладом 1А вище. Коротко, N -BOC-захищений N -піразинкарбонілорнітин конденсують з пролінамідом, первинну амідну групу піддають дегідруванню з трифтороцтовим ангідридом для одержання нітрилу, а ВОС-групу видаляють за допомогою трифтороцтової кислоти. Приклад 1С - N-ізолейцилтіазолідин гідрохлорид Вказану в назві сполуку одержують згідно зі стандартними способами. Коротко, ВОСзахищений ізолейцин конденсують з тіазолідином, а ВОС-групу видаляють за допомогою НСІ в діоксані. Приклад 1D (2S)-1((2'-(5"-ціано-2'піридиламіно)етиламіно)ацетил)піролідин-2карбонітрил Вказану в назві сполуку одержують згідно зі 7 76452 8 способами WO98/19998 та, зокрема, у Прикладі 3. рольній групі тварин, що страждають на ожиріння, Коротко, бромацетил бромід піддають реакції з концентрація інсуліну швидко підвищується та допролінамідом, а продукт піддають дегідруванню з сягає піку на 8 день перед зниженням в результаті трифтороцтовим ангідридом для одержання Nзагибелі -клітин підшлункової залози. У групі, яку бромацетилпіролідин-2-карбонітрилу. Продукт піддають лікуванню один раз на день за допомореакції обробляють 2-(5-ціано-2гою інгібітора, спостерігають подібну модель, але піридиламіно)етиламіном для одержання зазначепік рівня інсуліну наступає тільки на 11 день. У ного продукту. групі, яку піддають лікуванню двічі на день за доПриклад 2 - Інгібування OP-IV in vitro помогою інгібітора, концентрації інсуліну не досяIn vitro інгібіторну активність сполук визначагає такого високого рівня, і це є основним симптоють у флуориметричному аналізі. DP-IV людини мом виживання -клітин наприкінці періоду інкубують зі стандартним субстратом, Ala-Pro-AFC, дослідження. Результати представлені на Фігурі 2. у присутності різних концентрацій інгібітора. За Приклад 3С - Досягнута вага тіла ходом реакції спостерігають шляхом вимірювання Усі три групи тварин, що страждають на ожипідвищення флуоресценції завдяки продукту реакріння, набирають вагу швидше, ніж тварини групи ції, AFC. Використовуючи стандартні маніпуляції, худих пацюків, але група, яку піддають лікуванню визначають константу інгібування, Кi. Типові редвічі на день за допомогою інгібітора, набирають зультати представлені нижче. меншої ваги, ніж контрольна група тварин, що страждають на ожиріння, та група, яку піддають Сполука за Прикладом № Кі лікуванню один раз на день. Результати представлені на Фігурі 3. 1А 1,0 Приклад 3D - Споживання їжі та води 1В 0,4 Усі три групи тварин, що страждають на ожи1С 33,0 ріння, споживають більше їжі, ніж група худих па1D 5,0 цюків, але на 17 день споживання їжі для групи, яку піддають лікуванню двічі на день, було значно Приклад 3 - Ефект довгострокового інгібуванменшим, ніж таке для контрольної групи тварин, ня DP-IV у ZDF пацюків що страждають на ожиріння, та групи тварин, яких Самцям пацюків ZDF віком 6,5 тижнів на почапіддають лікуванню один раз на день. На 10 день тку вивчення (день 0) вводять сполуку за пунктом контрольна група та група, яку піддають лікуванню 1А (10мг/кг, перорально) один або два рази на один раз на день показують збільшення спожидень протягом чотирьох тижнів. Контрольні тваривання води, у той час, як група, яку піддають лікуни одержують носій. Групу худих пацюків, яких не ванню двічі на день підтримує рівень нормального піддавали лікуванню, використовують для порівспоживання води. Ці результати представлені на няння. За глікемією, інсулінемією, вагою тіла, споФігурах 4 та 5. живанням їжі та води та за рівнем триглііцеридів Приклад 3Е - Рівень тригліцеридів у плазмі та жирних кислот у плазмі крові спостерігають крові протягом усього періоду дослідження. Рівні вільних жирних кислот та тригліцеридів у Приклад 3А - Глікемія плазмі крові є значно підвищеними у тварин, що На початку дослідження глікемія суттєво не вістраждають на ожиріння на 0 день, а у контрольдрізняється у худих тварин та пацюків, що стражних пацюків, що страждають на ожиріння, ці рівні дають на ожиріння. На 8 день контрольна група підвищуються протягом усього періоду дослідженпацюків, що страждають на ожиріння, розвиває ня. Ці результати представлені на Фігурах 6 та 7. гіперглікемію, яка підвищується та виходить на Результати, описані вище, чітко показують, що плато на 19 день. Тварини, яких піддають лікувандовгострокове інгібування DP-IV є ефективним у ню один раз на день за допомогою інгібітора, не затримці появи симптомів діабету у ZDF пацюків і, розвивають суттєвої гіперглікемії до 15 дня, а ті, таким чином, що інгібітори DP-IV будуть кориснияких піддають лікуванню двічі на день, не розвими як профілактичні агенти для людей, що мають вають суттєвої гіперглікемії до 24 дня. Результати ризик розвитку діабету типу 2, та для лікування представлені на Фігурі 1. людей на ранніх стадіях захворювання для затриПриклад 3В - Інсулінемія мки розвитку ускладнень діабету. Усі три групи тварин, що страждають на ожиріння, показують підвищені концентрації інсуліну в плазмі крові на початку періоду вивчення. У конт 9 Комп’ютерна верстка О. Гапоненко 76452 Підписне 10 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601