Спосіб прогнозування ризику розвитку остеопорозу у вагітних

Реферат: UA 80634 U UA 80634 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до області медицини, а саме до акушерства і гінекології, і може бути використана для прогнозування ризику розвитку остеопенії у вагітних. У клінічній практиці для дослідження стану кісткового метаболізму і прогнозування ризику розвитку остеопорозу використовують визначення рівня загального і іонізованого кальцію та фосфору в крові; виміру в крові рівня кальцієрегулюючих гормонів - паратиреоїдного гормона, кацітоніна та вітаміну Д [1, 2]. Однак вказані методи дослідження кісткового метаболізму мають ряд недоліків: - вимірення вмісту кальцію та фосфору в крові і екскреція їх з сечею не є специфічними тільки для кісткового обміну й виявлені зміни супроводжують вже наявну картину остеопорозу; - на секрецію паратиреоїдного гормона, кацітоніну та вітаміну Д створюють вплив функціональний стан нирок, шлунково-кишкового тракту, інші системні гормони (тиреоїдні, статеві), а також елементарний вміст кальцію та фосфору у їжі. Найбільш чутливими маркерами діагностики остеопорозу є біохімічні маркери ремоделювання кісткової тканини: карбокси - і амінотермінальні тілопептиди колагену І типу (βCross-Lapps), кісткова тартратрезистентна кисла фосфатаза - 5b (ТРКФ - 5b), оксипролін, остеокальцин та інш. [3]. Найбільш близьким до заявленого технічного рішення є спосіб оцінки стану кісткової тканини шляхом визначення в крові паратиреоїдного гормона (ПТГ), який оснований на імунохемолюмінесцентному визначенні останнього на автоматичному аналізаторі "Elecsys2010" фірми Hoffman-La-Roche з використанням тест - систем "Elecsys - РТН" з моноклональними антитілами. Однак наведений спосіб має ряд недоліків: - зміна вмісту ПГТ не є специфічним тільки для остеопорозу, на його рівень впливають різні захворювання щитоподібної залози і вторинний гіперпаратиреоз, псевдогіперпаратиреоз, первинний гіпопаратиреоз, саркоїдоз, синдром Золінгера - Еллісона та інш.; - його секреція залежить також від функціонального стану нирок і шлунково-кишкового тракту. В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалення способу прогнозування ризику розвитку остеопенії у вагітних шляхом визначення в сироватці крові концентрації ТРКФ - 5b як маркера кісткової резорбції, що дозволить з високим ступенем точності прогнозувати розвиток демінералізації кісткової тканини, який є предиктором розвитку остеопорозу, що, в свою чергу, дозволить провести ранню профілактику остеопорозу у вагітних, забезпечити адекватне формування і розвиток кісткової тканини внутрішньоутробного плода. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно з корисною моделлю, додатково до визначення кальцієрегулюючих гормонів у сироватці крові шляхом імунохемолюмінесцентного дослідження, виявляють концентрацію тартратрезистентної кислої фосфатази - 5b як високочутливого маркера кісткової резорбції і при зростанні концентрації ТРКФ - 5b у міру збільшення гестаційного строку прогнозують демінералізацію кісткової тканини, що є предиктором розвитку остеопорозу. Спосіб виконується наступним чином. Після визначення у сироватці крові пацієнтки рівня ПТГ досліджують концентрацію ТРКФ 5b як маркера кісткової резорбції. Для цього натще вранці здійснюють забір венозної крові, протягом години кров центрифугують, відділяють сироватку в кількості 1 мл. Визначення ТРКФ здійснюють імунохімічним аналізом зі специфічними для ТРКФ - 5b моноклональними антитілами (O1А, виявлення за допомогою р - нітрофенілфосфату) на автоматичному аналізаторі "IMMULITE-2010". ТРКФ - 5b належить до кислих фосфатаз; на сьогоднішній день відомо 5 ізоформ, з котрих не інгібується тартратом ізоформа 5, яка зустрічається у двох варіантах: тип 5а та тип 5b. ТРКФ - 5b - кісткова, синтезується виключно у остеокластах; локалізована в ендоплазматичному ретикулумі остеокластів та вивільнюється з них у кісткові лакуни в місті резорбції кістки, збільшується при впливі ПТГ, зменшується при дії кальцитоніну; є кореляція між її активністю та даними гістоморфометрії [1, 4, 5, 6]. Спосіб пояснюється прикладом його виконання. При дослідженні кісткового метаболізму у вагітних виявлено, що у міру прогресування гестаційного строку спостерігається достовірне збільшення вмісту ТРКФ - 5b у сироватці крові з 1,98±0,03 U/I до 2,87±0,04 U/I (р < 0,01). Зменшення концентрації загального (2,41±0,01 до 2,12±0,01 ммоль/л) та іонізованого кальцію (з 1,14±0,02 до 1,08±0,02 ммоль/л) в крові, посилення добової екскреції кальція з сечею (з 7,75±0,14 до 9,14±0,19 ммоль/л). У таблиці 1 наведені дані ультразвукової денситометрії, які підтверджують погіршення структурно функціонального стану кісткової тканини у досліджуваних вагітних. 1 UA 80634 U Таблиця 1 Показник ТРКФ-5b U/I (N-1,81-3,37) Кальцій загальний, ммоль/л Кальцій іонізований, ммоль/л ІЖК, % Т - критерій - SD Z - критерій - SD Обстежені вагітні, n=363 2-й триместр 3-й триместр 1,98±0,03* 2,87±0,04* 2,41±0,01 2,12±0,01 1,14±0,02 1,08±0,02 85,25±0,59* 77,09±0,61* 0,66±0,02* 1,04±0,02* 0,65±0,03* 1,22±0,03* Примітка: * - р < 0,01 5 10 15 20 25 30 35 40 Таким чином, збільшення вмісту у крові вагітних ТРКФ - 5b, котра синтезується тільки остеокластами у зоні свіжого вогнища резорбції кістки, свідчить про розвиток остеопенії. Заявлений спосіб має наступні переваги: - не має великого значення час доби для забору зразків крові, так як для ТРКФ - 5b не властиві добові коливання; - активність ТРКФ - 5b не залежить від функціонального стану печінки та нирок; - рівень ТРКФ - 5b відображає інтенсивність кісткової резорбції за останні 24 години, що важливо з точки зору особливої імунологічної толерантності організму вагітної жінки; - при виявленні ТРКФ - 5b використовується тест-система, яка виявляє тільки активні, а не старі, інактивовані форми молекул або їх фрагменти, декретовані у позаклітинний простір кістки; - спосіб дозволяє оцінити вираженість порушення мікроархитектоніки кісткової тканини; - спосіб дозволяє прогнозувати ризик розвитку остеопенії у вагітних; - можливість проводити ранню профілактику і своєчасне лікування остеопорозу у вагітних, покращити якість життя пацієнток; - спосіб дозволяє також забезпечити адекватне формування і правильний розвиток кісткової системи внутрішньоутробного плоду; - імунохемолюмінесцентний метод є одним з найбільш чутливих методів досліджень, який реєструє концентрацію речовини з високім рівнем точності; - технологія автоматичного аналізатора дозволяє стандартизувати всі етапи аналізу і запобігти можливих помилок лаборанта (не потребує ручної підготовки реагентів, ручного програмування методик). У порівнянні з прототипом, заявлене технічне рішення дозволяє вперше, за рахунок додаткового до дослідження ПТГ визначення ТРКФ - 5b як високочутливого маркера, з високим ступенем вірогідності прогнозувати розвиток демінералізації кісткової тканини у вагітних, що є предиктором розвитку остеопорозу. Джерела інформації: 1. Руководство по остеопорозу. Под ред. Л.И. Беневоленской. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний.-2003.-524 с. 2. Клинические рекомендации: Остеопороз. Диагностика, профилактика и лечение. Под ред. Л.И. Беневоленской и проф. О.М. Лесняк. М.: ГЭОТАР - Медиа, 2005; 171с. 3. Системный остеопороз. Практическое руководство / В.К. Рожинская - Москва, Издатель Мокеев, 2000.-563 с. 4. Кушлинский Н.Е., Тюляндин С.А., Гольдберг В.Е., Любимова Н.В., Пашков М.В. Тартратрезистентная кислая фосфатаза как маркер метастазов в кости у больных раком молочной и предстательной желез // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2004. - №7.-С. 91-93. 5. Halleen J.M., Alatalo S.L., Jackal A.J. et al/ Tartrate-resistant Acid Phosphatase 5b: a novel serum marker of bone resorption // J. Bone Min. Res. 2000. Vol. 15, №7. P. 16-19. 6. Lhoste Y., Vergnaud P., Garnero P. A new specific immunoassay for intact serum TRACP5b demonstrates increased in osteoporosis // J. Bone Miner. Res., 2007-22 (Suppl. 1): P. 192. 2 UA 80634 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб прогнозування ризику розвитку остеопорозу у вагітних шляхом визначення кальцієрегулюючих гормонів у сироватці крові, який відрізняється тим, що додатково виявляють концентрацію тартратрезистентної кислої фосфатази-5b (ТРКФ-5b) як високочутливого маркера кісткової резорбції і, при зростанні концентрації ТРКФ-5b у міру збільшення гестаційного строку, прогнозують демінералізацію кісткової тканини, що є предиктором розвитку остеопорозу. 10 Комп’ютерна верстка М. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3