Спосіб прогнозування прояву індивідуальної гіперчутливості негайного типу у тварин при використанні імунотропних препаратів

Реферат: Спосіб прогнозування прояву індивідуальної гіперчутливості негайного типу у тварин при використанні імунотропних препаратів полягає в заборі периферійної крові, виділенні лейкоцитарно-лімфоцитарної суміші клітин, постановці навантажувального тесту "активних" ЕРУЛ in vitro з додаванням імунотропних препаратів. Після цього встановлюють у тварин рівень Т-рецепції (% інверсії) до імунотропних препаратів, і в залежності від його значення роблять висновок про наявність індивідуальної гіперчутливості до імунотропного препарату, а від так і про недопущення його використання. UA 81830 U (54) СПОСІБ ПРОГНОЗУВАННЯ ПРОЯВУ ІНДИВІДУАЛЬНОЇ ГІПЕРЧУТЛИВОСТІ НЕГАЙНОГО ТИПУ У ТВАРИН ПРИ ВИКОРИСТАННІ ІМУНОТРОПНИХ ПРЕПАРАТІВ UA 81830 U UA 81830 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до ветеринарної медицини, зокрема до фізіології та імунології і може використовуватися в різних галузях практичної ветеринарної медицини для оптимізації застосування імунокорекції з врахуванням індивідуальної чутливості організму тварин до імуномодуляторів для упередження прояву гіперчутливості негайного типу при проведення імунокорекції. Гомеостатичні та імунопатологічні порушення, які виникають в процесі життєдіяльності тварин, обумовлені насамперед щоденним впливом різних інфекційних, інвазійних, стресорних та інших агентів. Слід розглядати функціональний стан організму тварин в цілому тому, що існують досконалі механізми, у нейронімуноендокринній регуляції, які забезпечують пристосовування та адекватну відповідь на негативний вплив вищевказаних чинників. Ведуча роль в захисті організму належить саме імунній системі, яка має в своєму арсеналі величезну кількість адаптивних імунологічних механізмів, що пов'язані як з клітинною так і з гуморальною ланкою імунної відповіді. Незважаючи на могутній арсенал захисних сил в організмі тварин за певних умов, які є індивідуалізованими, можливим є виникнення імунодефіциних станів, коли імунна система не в змозі адекватно відповісти на негативний вплив зовнішніх та внутрішніх чинників, а це призводить до дисфункцій в імунній системі. Клінічний прояв та характер перебігу багатьох захворювань інфекційного та неінфекційного ґенезу обумовлені імунопатологічними зсувами, а від так застосування імунокорекції стало невід'ємною складовою комплексною патогенетично-обґрунтованої терапії. В теперішній час фармакологічна промисловість пропонує достатньо велику кількість імунотропних препаратів, які впливають на різні ланки імунної системи, мають стимулюючу або імунсупресивну дію, а разом з тим слід враховувати те, що тільки за умов специфічної рецепції імунокомпетентних клітин буде здійснюватись імунотропна дія препаратів. Це передбачає вплив безпосередньо на функціональну активність рецепторного апарату імуноцитів і тільки завдяки специфічної рецепції на мембранах імунних клітин визначається рівень індивідуальної чутливості до певних імунокоректуючих засобів. Відомо спосіб клініко-імунологічного обґрунтування доцільності індивідуального підбору препаратів тканинної терапії при проведені імунокорекції у хворих людей. (Дегтяренко Т.В., Макулькин Р.Ф. Биогенные стимуляторы и иммунореактивность // Одесса.-1997. - Т. 2. - С. 67) В основу запропонованої корисної моделі поставлено задачу розробки способу прогнозування прояву індивідуальної гіперчутливості негайного типу у собак при використанні імунотропних препаратів шляхом визначення показника інверсії "активних" Е-РУЛ при додаванні цих препаратів in vitro, за рахунок чого стає можливим визначення індивідуальної гіперчутливості до імунотропного препарату, що дозволить не допустити його використання. Поставлена задача вирішується тим, що у способі прогнозування виникнення гіперчутливості негайного типу у собак при застосуванні імунотропних препаратів, що полягає в заборі 0,5 мл периферічної крові, виділені лейкоцитарно-лімфоцитарної суміші клітин, і постановці навантажувального тесту "активних" Е-РУЛ in vitro з додаванням імунотропних препаратів, згідно з корисною моделлю, у крові тварин встановлюють рівень Т-рецепції (% інверсії) до імунотропних препаратів і при його значенні від 40 % і вище роблять висновок про інд. гіперчутливість до імунотропного препарату і недопущення його використання. Причинно-наслідкові зв'язки: 1) встановлюють значення рівня Т-рецепції (% інверсії) до імунотропних препаратів, це дозволяє визначити індивідуальну гіперчутливість організму тварини до імунотропного препарату, 2) при значенні показника інверсії від 40 % і вище роблять висновок про індивідуальну гіперчутливість до імунотропного препарату і недопущення його використання. Для визначення індивідуальної чутливості тварин до імунотропних засобів використовувались наступні препарати: "Імунофан" - діючою речовиною є аргініл-альфааспартіл-лізил-валіл-тирозіл-аргінін "Ронколейкін" - є аналогом інтерлейкіна-2, "Фоспреніл" - є продуктом фосфорилювання поліпренолів хвої, "Поліферин А" - являє собою високо очищений глікопротеїн, який отримують з молозива. Індивідуальна чутливість організму собак до різних імунокоректуючих препаратів була досліджена на 64 домашніх тваринах. Об'єктивна пропозиція, яка відноситься до корисної моделі, полягає в тому, що спосіб діагностики індивідуальної чутливості до імунотропних засобів для проведення імунокорекції буде застосовуватися на підставі розробленого навантажувального тесту in vitro з імунотропними препаратами завдяки реєстрації показника % інверсії кількості "активних" Е-РУЛ ("активних" Т-лімфоцитів) по відношенню до контрольної проби без додавання імунотропного препарату (Т.В. Дегтяренко, Р.Ф. Макулькин Биогенные стимуляторы и иммунореактивность. Одесса.-1997.) 1 UA 81830 U 5 10 15 20 25 Прогнозування ефективності проведення імунокорекції у тварин здійснюють наступним шляхом: з периферичної крові виділяється лейкоцитарна-лімфоцитарна суміш клітин, визначається функціональна активність рецепторного апарату імунотропних клітин, "активних" Т-лімфоцитів, запроваджується постановка тесту "активних" Е-РУК in vitro з додаванням в дослідні проби імунокорегуючих препаратів, а в контрольну пробу фізіологічного розчину. Прогнозування можливості призначення імунокорегуючих засобів проводили на підставі співвідношення рівня рецепції "активних" Т-лімфоцитів: збільшення інверсії % "активних" Е-РУЛ в дослідній пробі у порівняні з контролем при його значенні від 40 % і вище роблять висновок про гіперчутливість до імунотропного препарату і недопущення його використання. Спосіб прогнозування можливості проведення імунокорекції на підставі запропонованого імунологічного тесту проводять таким чином: Вранці натщесерце у собаки беруть з підшкірної ліктьової вени 0,5 мл. Крові і виділяють лейкоцитарно-лімфоцитарну суміш клітин. Розкапують лейкоцитарно-лімфоцитарну суміш клітин по 0,05 мл у лунки імунологічних планшет. Додають в дослідні лунки 0,05 мл імунотропного препарату (1:1000), а в контрольні лунки - 0,05 мл фізіологічного розчину. Проводять інкубацію суміші клітин в імунологічних планшетах у термостаті протягом 30 o хвилин при t =37 °C. Додають у лунки імунологічних планшет до всіх проб 0,05 мл еритроцитів барана (ЕБ) в стандартній концентрації 0,02 %. Проводять інкубацію 5 хвилин при кімнатній температурі, відразу готують мазки та забарвлюють їх за Романовським-Гімзою. Лічать відносну кількість "активних" Е-РУЛ на 100 клітин лімфоідного ряду в контрольних і дослідних зразках; різниця у відсотку "активних" Т-клітин в контрольних і дослідних зразках визначає ступінь індивідуальної чутливості до препаратів організму собак. Показники ступеню індивідуальної чутливості організму до імуномодуляторів. Таблиця Препарати Ронколейкін Поліферин Імунофан Фоспреніл 30 35 40 45 Рівень індивідуальної чутливості за показником інверсії "активних" Е-РУЛ, % До 5 6-10 11-16 17-40 40 і вище гол. % гол. % гол. % гол. % гол. % 8 13 13 20 19 30 22 34 2 3 5 8 9 14 18 28 28 44 4 6 4 6 10 16 22 34 26 41 2 3 4 6 15 23,5 15 23,5 27 42 3* 5 Аналізуючи отримані дані (таблиця) слід зазначити, що ступінь Т-рецепції до досліджувальних імунокорегуючих засобів має різні значення залежно від індивідуальної чутливості організму собак. Так до препарату "Ронколейкін" найбільша кількість тварин (8 гол.) мала дуже низьку чутливість, на відміну від препаратів "Імунофан" та "Фоспреніл", до яких низьку ступінь мали по 4 собаки. Кращий ефект імунокорекції проявляє препарат при ступені сенсибілізації від 16 до 40 %, у відсотковому відношенні таких тварин більше з препаратом "Поліферин", хоча різниця між іншими препаратами є незначною 2-3 %, крім препарату "Ронколейкін" 8 %. Але разом з тим до останнього препарату найменша кількість тварин (2 гол.) мала чутливість вище 40 %, в той час як до імунокоректору "Поліферин" 4 голови. Різниця між середніми показниками по кожному препарату не суттєво відрізняється від кожного окремого і становить в середньому ±5 %, це може вказувати на те, що до більшості імунокоректуючих препаратів індивідуальна імунореактивність буде саме в межах цих відсотків. Слід зазначити, що у тварин, у яких під час дослідження виявляли надмірну індивідуальну чутливість до імунотропних препаратів (більше 40 %), призначення таких препаратів є ризикованим, оскільки їх застосування призводило до реакції гіперчутливості. Отримані дані свідчать про те, що при введені імунокорегуючих засобів тваринам слід визначати рівень Т-рецепції до імунотропних препаратів, це надасть можливість прогнозувати розвиток гіперчутливості негайного типу та впливати на ефективність імунокорекції. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 50 Спосіб прогнозування прояву індивідуальної гіперчутливості негайного типу у тварин при використанні імунотропних препаратів, що полягає в заборі 0,5 мл периферійної крові, виділенні 2 UA 81830 U 5 лейкоцитарно-лімфоцитарної суміші клітин, постановці навантажувального тесту "активних" ЕРУЛ in vitro з додаванням імунотропних препаратів, після чого встановлюють у тварин рівень Трецепції (% інверсії) до імунотропних препаратів, і при його значенні від 40 % і вище роблять висновок про наявність індивідуальної гіперчутливості до імунотропного препарату, а від так і про недопущення його використання. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3