Спосіб прогнозування індивідуальної чутливості до лікарського засобу

Спосіб прогнозування індивідуальної чутливості до лікарського засобу, що включає забір крові, інкубацію крові з лікарським засобом та без нього, мікроскопічне дослідження цитологічного препарату крові, який відрізняється тим, що при мікроскопічному дослідженні вимірюють різницю показників фактора форми нейтрофільних гранулоцитів між пробами, і якщо вона не перевищує 0,3, то прогнозують індивідуальну чутливість до лікарського засобу Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема - клінічної діагностики і може бути використаний для прогнозування індивідуальної чутливості до лікарських засобів ВІДОМІ способи прогнозування індивідуальної чутливості до лікарських засобів оснований на виконані комплексу морфологічних, імунологічних, патофізіологічних, біохімічних та біологічних досліджень [1 - 5] Недоліком цих способів є їх трудомісткість, тривалість виконання та методична складність Найближчим аналогом є спосіб прогнозування індивідуальної чутливості до лікарських засобів, що включає забір крові, інкубацію крові з лікарським засобом та без нього з послідуючим визначенням активності імунокомпетентних клітин [6] Недоліком аналогу є низька точність, обумовлена складністю (необхідне виділення клітин крові), трудомісткість та тривалість процедури, недостатня чутливість та об'єктивність способу Найбільш продуктивно реагують на лікарський засіб нейтрофільні гранулоцити крові, внаслідок чого вони є універсальним індикатором гомеостазу [2, 3] Задачею винаходу є розробка такого способу прогнозування індивідуальної чутливості до лікарського засобу, який би за рахунок визначення фактора форми нейтрофільних гранулоцитів, підвищував би точність та об'єктивність одержуваних результатів Поставлена задача вирішується тим, що в способі прогнозування індивідуальної чутливості до лікарського засобу, що включає забір крові, інкубацію крові з лікарським засобом та без нього, мікроскопічне дослідження цитологічного препарату крові, згідно з винаходом, при мікроскопічному дослідженні вимірюють різницю показників фактора форми нейтрофільних гранулоцитів між пробами і якщо вона перевершує 0,3, то прогнозують індивідуальну чутливість до лікарського засобу Використання фактора форми нейтрофілів дозволяє підвищити точність отриманих результатів, так як автоматично вимірюється параметри клітин і за цими критеріями встановлюється їх фактор форми КІЛЬКІСНІ способи оцінки форми клітини базуються на вимірах и осей та визначенні фактора конфігурації [5] Характеристики розмірів осей можна одержати на прикладі співвідношення радіусів кіл r/R, де г - радіус кола, вписаного в клітину та R - радіус кола, описаного навколо цієї цитологічної структури Якщо б клітина в ідеалі відповідала кругу, то фактор форми дорівнював би 1, так як г і R були б однакові Насправді ж цей показник завжди менше одиниці Як правило фактор форми клітин визначається відношенням 4ті * 3 / Р2, де S площа клітини, а Р - м периметр [5] Указаний в формулі винаходу параметр різниці фактора форми - 0,3, знайдений в результаті лабораторних досліджень 19 проб крові та обумовлений КЛІНІЧНИМИ дослідженнями 19 хірургічних хворих, яким вводились антибіотики Дані зведено в таблиці (О ю о ю 50562 Таблиця Хворий П Л Н Ш т р 0 1 0 р 3 п н У є к ж А н Різниця фаісгора форми 0,12 0,23 0,20 0,32 0,14 0,01 0,20 0,22 0,23 0,39 0,29 0,10 0,23 0,30 0,08 0,18 0,05 0,15 0,08 Реакція на антибіотики не розвинулась не розвинулась не розвинулась розвинулась не розвинулась не розвинулось не розвинулась не розвинулась не розвинулась розвинулась не розвинулась не розвинулась не розвинулась розвинулась не розвинулась не розвинулась не розвинулось не розвинулась не розвинулась Спосіб виконують таким чином у хворих в дві пластикові пробірки з антикоагулянтом беруть по 0,5мл крові з вени і добавляють в одну з них каплю розчиненого лікарського засобу Вносять пробірки в термостат на час при 37°С Далі з проінкубованої таким чином крові роблять мазки, красять їх по Романовському, розташовують на столику мікроскопа комп'ютерного аналізатора зображення і визначають фактор форми нейтрофілів Якщо значення фактора форми нейтрофілів, контактуючих із лікарським засобом перевищує на 0,3 контрольної проби, прогнозується виникнення у хворого реакції на лікарський засіб Приклад 1 Хворий Ш Брали із вени 1,0мл крові Розливали її на дві пластикові пробірки порівну В одну з пробірок добавляли каплю антибіотика ципрофлоксацина Витримували обидві пробірки в термостаті час при 37°С Робили мазки крові, фіксували їх етанолом і красили по Романовському Приготовлені таким чином препарати крові розташовували на столику мікроскопа "JEN AVAL" і досліджували за допомогою комп'ютерного аналізатора зображення "EVA", визначаючи фактор форми не менше як у ЗО нейтрофілів кожної проби крові Порівнювали середні значення цих показників Фактор форми шкубованих із антибіотиком нейтрофілів становив 0,54 + 0,07 та інтактних клітин - 0,96 + 0,03 Значення різниці дорівнює більше 0,3, тому зроблено висновок, що є вірогідність індивідуальної чутливості на препарат Так, у цього хворого після введення ципрофлоксацину розвинулась алергічна реакція Приклад 2 Хвора К Брали із вени 0,4мл крові Розливали її на дві пластикові пробірки порівну В одну з пробірок добавляли каплю ципрофлоксацину Витримували обидві пробірки в термостаті 15хв при 37°С Робили мазки крові, фіксували їх етанолом і красили по Романовському Приготовлені таким чином препарати крові розташовували на столику мікроскопа "JENAVAL" і досліджували за допомогою комп'ютерного аналізатора зображення "EVA", визначаючи фактор форми не менше як у ЗО нейтрофілів кожної проби крові Порівнювали середні значення цих показників Фактор форми шкубованих з гентаміцином нейтрофілів становив 0,55 + 0,03 та інтактних клітин - 0,73 + 0,06 Значення різниці менше 0 3, тому зроблено висновок, що вірогідність індивідуальної чутливості на препарат низька В даному випадку після введення антибіотика алергічна реакція не виникла Запропонованим способом було прогнозовано виникнення індивідуальної чутливості у 3 хворих із 19 обстежених Подальшими КЛІНІЧНИМИ дослідженнями встановлено, що у цих трьох хворих виникла алергічна реакція після введення антибіотика, тоді як при використанні аналогу тільки у 1 хворого прогнозувалась алергічна реакція Таким чином, запропонований спосіб дозволяє підвищити точність прогнозування виникнення індивідуальної чутливості і тим самим покращати лікування хворих за рахунок швидкої діагностики та своєчасної терапії Джерела інформації 1 А с 1621888 СССР, МКИ Способ прогнозирования гнойно-септических осложнений в послеродовом периоде Стрижова Н В , Петрулина Ю А , Лысенко О Н // Открытия Изобретения - 1991 №46 - с 32 2 Robinson JM, Badwey JA The NADPH oxidase complex of phagocyte leukocytes A biochemical and cytochemical view Histochem Cell Biol 103 163, 1995 3 Thomas MJ, HednckCC, Smith S, Pang J, Jerome WG, Willard AS, Shirley PS Superoxide generation by the human polymorphonuclear leukocyte in response to latex beads J Leukoc Biol 51 591, 1992 4 Hyslop PA, Hmshaw DB, Scraufstatter IU, Cochrane CG, Kunz S, Vosbeck К Hydrogen peroxide as a potent bactenostatic antibiotic Implications for host defense Free Radic Biol Med 19 31, 1995 5 Автандилов Г Г , Яблучанский Н И , Губенко В Г Системная стериометрия в изучении патологического процесса - М Медицина, 1981, 192с 6 Патент України 6А61К31/00 Юр'єв І О , Білогородцева О І .Вихованець В Д та ш Спосіб визначення індивідуальної чутливості до лікарських препаратів Промислова власність Офіційний бюл №3, 1 частина - К, 1998 - найближчий аналог 50562 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71