Спосіб визначення порушень ліпідного метаболізму у крові та нирках щурів за відтворення коразолової моделі судомного синдрому

Реферат: Спосіб визначення порушень ліпідного метаболізму в крові та нирках щурів за відтворення коразолової моделі судомного синдрому передбачає дослідження жирнокислотного складу тканин головного мозку та плазми крові при ішемічному процесі. Визначають жирнокислотний склад ліпідів плазми крові та тканин нирок за допомогою газорідинної хроматографії, виявляють зміни вмісту пальмітинової, олеїнової та арахідонової жирних кислот, розраховують їх співвідношення за визначеною формулою і при порівнянні з показниками контролю визначають порушення метаболізму. UA 89177 U (12) UA 89177 U UA 89177 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель, що заявляється, належить до експериментальної медицини, точніше до ліпідології і може використовуватися для покращення результатів порушень ліпідного метаболізму у крові та нирках щурів за коразолової моделі судомного синдрому. Епілепсія - це хронічне поліетіологічне захворювання головного мозку, що проявляється повторними судомними, несудомними і (або) психопатологічними пароксизмами в результаті надмірних нейронних розрядів і нерідко змінами особистості. Клінічний перебіг епілепсії може розвиватися в 2-х варіантах: велика епілепсія і мала епілепсія. Велика епілепсія характеризується сильними нервовими розрядами в усіх областях головного мозку. Великий напад продовжується не більше 5 хвилин; свідомість при цьому глибоко порушена (кома). Мала епілепсія охоплює таламокортикальну активуючу систему мозку. У хворого розвиваються судомні скорочення м'язів, зазвичай в області голови, особливо мигання очей. Малий судомний напад характеризується короткочасним відключенням свідомості (декілька секунд), хворий при цьому не падає [1, 2]. Показано, що в експериментальних умовах великий епілептичний напад відповідає електрошоковому судомному синдрому, а малий - коразоловому. Стан внутрішніх органів в цих ситуаціях не досліджувався, що утруднює розробку адекватних лікувальних фармакологічних схем [3]. Необхідно відзначити, що одним з основних напрямків інтенсивної терапії для відновлення гомеостазу є стабілізація клітинних мембран [4]. Одним із факторів дестабілізації біомембран є процес ПОЛ, який призводить до порушення ліпідного обміну. Таким чином, важливою частиною при дослідженні змін ліпідних показників крові та нирок щурів в умовах судомного синдрому є визначення порушень ліпідного метаболізму. Існує спосіб дослідження метаболічних змін у крові та секреторних органах шлунковокишкового тракту на експериментальних тваринах за умов гіпотиреозу [5]. Однак, вказаний спосіб не дозволяє визначити ліпідні порушення крові та нирок щурів за коразолової моделі судомного синдрому. Найбільш близьким за технічним вирішенням до способу, що заявляється, є спосіб оцінки розвитку порушень ліпідного обміну при експериментальній ішемії головного мозку [6], який обраний як найближчий аналог. Цим способом визначають жирнокислотний склад ліпідів тканин головного мозку і плазми крові щурів методом газорідинної хроматографії. Однак, цей спосіб не дозволяє визначити ліпідні порушення у крові та нирках щурів за коразолової моделі судомного синдрому. В основу корисної моделі поставлено задачу, що полягає у підвищені ефективності цілеспрямованій корекції змін ліпідних показників крові та нирок щурів за коразолової моделі судомного синдрому. Технічний результат, який досягається, полягає у визначенні ліпідних порушень у крові та нирках і забезпечення умов для цілеспрямованої їх корекції. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі, який передбачає дослідження жирнокислотного складу тканин мозку та плазми крові при ішемічному процесі, згідно корисної моделі, визначають жирно-кислотний склад ліпідів плазми крові та тканин нирок за допомогою газорідинної хроматографії, виявляють зміни вмісту пальмітинової, олеїнової та арахідонової жирних кислот, розраховують їх співвідношення за формулою: C C K1  16:0 K 2  16:0 C18:1 і C20:4 , де K1, K 2 - коефіцієнти, які характеризують порушення ліпідного метаболізму, C16:0 - насичена жирна кислота, C18:1 - мононенасичена жирна кислота, C20:4 - ессенціальна поліненасичена жирна кислота і при порівнянні з показниками контролю визначають порушення метаболізму. -9 Переваги цього способу: чутливість газорідинної хроматографії -10 А, висока інформативність, зручність у використанні. За допомогою цього методу можливо прогнозувати ефективність використання антиоксидантної терапії, контролювати загальний стан з метою визначення порушеньліпідного метаболізму. Спосіб здійснювався таким чином: 1. Досліди проведені на білих безпородних щурах масою 200-250 г (n=21), у яких моделювали розвиток судомного синдрому за коразолової моделі згідно [7]. 2. Підготовку і газохроматографічний аналіз жирнокислотного складу ліпідів плазми крові та нирок щурів проводили за методикою [8]. 1 UA 89177 U Результати досліджень ліпідних показників експериментальних тварин наведені у таблиці (в %) Таблиця Назва ЖК Плазма Нирки C16:0 контроль 25,8±1,5 модель 19,1±1,0* контроль 24,6±1,0 модель 19,5±1,0* C18:1 10,2±1,0 8,4±0,5 7,6±0,8 11,6±1,0* C20:4 40,6±1,5 43,7±1,5 40,0±1,5 43,4±1,3 C K1  16:0 C18:1 2,5 2,3 3,2 1,7 C16:0 C20:4 0,64 0,43 0,62 0,45 K2  *) р < 0,05 порівняно з контролем 5 10 15 20 25 30 35 Із таблиці бачимо, що коефіцієнти K 1 і K 2 знижені при зрівнянні з контролем, що свідчить про порушення ліпідного метаболізму. На базі Інституту проблем патології НМУ імені О.О. Богомольця методом газорідинної хроматографії проведено визначення ліпідних порушень в крові та нирках за коразолової моделі судомного синдрому у щурів (n=21). Таким чином, даний спосіб досить точний для корекції порушень ліпідного метаболізму за умов судомного синдрому, і може бути рекомендованим для впровадження в практичну медицину. Джерела інформації: 1. Вицкова Г.Ю., Маркевич В.Б., Башкатова В.Г. Модельные коразоловые судороги сопровождаются усилением генерации окиси азота и устраняются мексидолом и альфатокоферолом. //Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2003. - № 4. - С. 3-5. 2. Ницинская Л.Е. Изучение противосудорожного действия Белка теплового шока 70 кДа в моделях генерализованной эпилепсии у крыс //Автореф. дис. Канд… биол. Наук: СПб:, 2010. 22 с. 3. Сурина Н.М. Физиолого-генетическое исследование предрасположенности к каталепсии //Автореф. дис. канд. биол. наук: Москва, 2011. - 22 с. 4. Барабой В.А., Сутковой Д.А. Окислительно-антиоксидантный гомеостаз в норме и патологии. - К., 1997. - 220с. 5. Мельник О.І. Метаболічні зміни у крові та секреторних органів шлунково-кишкового тракту експериментальних тварин за умов гіпотиреозу // Експериментальна та клінічна фізіологія і біохімія. - 2002. - № 2. - С. 73-76. 6. Яременко Л.М., Брюзгіна Т.С., Грабовой О.М., Холобцева В.Н. „Спосіб оцінки розвитку порушень ліпідного обміну при експериментальній ішемії головного мозку" // Патент України № 33307. - 10.06.2008. - Бюль. № 11. - 3 с. 7. Руководство по експериментальному (доклиническому) изучению нових фармакологических веществ /под общ. Ред. чл. - кор. РАМН, професора Р.У. Хабриева. 2-изд., пере раб. И доп. - М.: Медицина, 2005. 832 с. 8. Губський Ю.І., Яніцька Л.В., Брюзгіна Т.С. Жирнокислотний склад ліпідів головного мозку щурів при токсичному ураженні 1,2 дихлоретаном та введення нікотинаміду // Сучасні проблеми токсикології. - 2005. - № 1. - С. 19-22. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 40 Спосіб визначення порушень ліпідного метаболізму в крові та нирках щурів за відтворення коразолової моделі судомного синдрому, що передбачає дослідження жирнокислотного складу тканин головного мозку та плазми крові при ішемічному процесі, який відрізняється тим, що визначають жирнокислотний склад ліпідів плазми крові та тканин нирок за допомогою газорідинної хроматографії, виявляють зміни вмісту пальмітинової, олеїнової та арахідонової жирних кислот, розраховують їх співвідношення за формулою: 2 UA 89177 U K1  C16 :0 C і K 2  16:0 , де C18 :1 C20:4 K1, K2 - коефіцієнти, які характеризують порушення ліпідного метаболізму, C16:0 - насичена жирна кислота, C18:1 - мононенасичена жирна кислота, 5 C20:4 - ессенціальна поліненасичена жирна кислота і при порівнянні з показниками контролю визначають порушення метаболізму. Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3