Спосіб відбору експлантатів та отримання асептичної культури культиварів роду philadelphus l.

Реферат: Спосіб відбору експлантатів та отримання асептичної культури представників роду чубушник (Philadelphus L.), до складу якого входить асептична культура із використанням як експлантатів верхівкових пагонів з 2 міжвузлями за способом індукції утворення пагонів з пазушних бруньок і стерилізацією у розчині сулеми (HgCl2). У лютому додатково штучно пробуджені бруньки стерилізують у 70 % розчині С2Н5ОН з експозицією 30 с та 0,1 % розчині HgCl2 до 4 хв. і вводять на безгормональне живильне середовище за прописом Мурасіге і Скуга (MS). UA 89630 U (12) UA 89630 U UA 89630 U 5 10 15 20 25 30 35 Корисна модель належить до галузі сільського господарства, зокрема лісівництва, а саме до садово-паркового господарства. Відомим аналогом є (Аубакирова Л.С. Биотехнология микроклонального размножения декоративно-древесных растений для озеленения городов Центрального Казахстана: дис. доктора философии (PhD): 6D060700 - Биология / Аубакирова Люция Саувановна. - Астана, 2011.) при якому для введення в культуру in vitro використовували живильні середовища, приготовані за схемою Мурасіге і Скуга (MS) і Лойда і Мак Коуна (WPM, Lloyd & McCown), при якому ізоляцію первинних експлантів проводять у період із середини травня до середини вересня та стерилізацію їх у розчині сулеми (HgCl2) протягом 7 хвилин, в іншому періоді експланти виділяють у середовище велику кількість фенольних сполук, які інгібують процес регенерації. Як експланти для Philadelphus використовують верхівкові пагони з 2 міжвузлями та спосіб індукції утворення пагонів з пазушних бруньок (меристем). Відомий спосіб не передбачає диференційованого підходу щодо відбору рослинного матеріалу у залежності від сезону, і не дозволяє отримувати потрібну кількість асептичних експлантів в будь-який період року. В основу корисної моделі поставлена задача створення способу по відбору експлантатів від рослин-донорів культиварів роду Philadelphus L., що зростають в осередках культурної дендрофлори, та отримання добре ростучої асептичної культури. Поставлена задача вирішується відбором експлантів та отриманням асептичної культури культиварів роду Philadelphus L., під час якого для введення у культуру in vitro використовуємо штучно пробуджені бруньки, що знаходяться у стані спокою. Для чого молоді живці довжиною 10-15 см поміщаємо у посудину з водою і залишаємо в умовах штучного мікроклімату (t°=+21…+23 °C, освітленість 2,5 тис. лк, фотоперіод 16/8 год.) до початку розкривання бруньок (фіг. 1, 2). При виборі експлантів враховуються пори року, коли є найменша ймовірність ураження їх патогенною мікрофлорою адже, найбільше ураження рослинного матеріалу спостерігається влітку, а найменше - взимку. Спосіб здійснюється наступним чином в кінці лютого живці нарізаються з апікальної частини пагонів у середині крони культиварів роду Philadelphus L. На початковому етапі для очищення поверхні тканин чубушника від епіфітної мікрофлори бруньки промивали Н2О. Подальшу стерилізацію проводимо у ламінарному боксі у 70 % розчині С2Н5ОН протягом 30 с, а стерилізацію - 0,1 % розчином HgCl2 до 4 хв. Для отримання асептичної культури (фіг. 3) експланти культивуємо на безгормональне живильне середовище за прописом Мурасіге і Скуга (MS) Використання пропонованого корисною моделлю способу відбору експлантів культиварів роду Philadelphus L дає можливість забезпечити потреби ринку якісним садівним матеріалом вітчизняного виробництва для озеленення міст та садово-паркового будівництва, що значно скоротить час вирощування рідкісних культиварів чубушника та збільшить його кількість. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 40 45 Спосіб відбору експлантатів та отримання асептичної культури представників роду чубушник (Philadelphus L.), до складу якого входить асептична культура із використанням як експлантатів верхівкових пагонів з 2 міжвузлями за способом індукції утворення пагонів з пазушних бруньок і стерилізацією у розчині сулеми (HgCl2), який відрізняється тим, що у лютому додатково штучно пробуджені бруньки стерилізують у 70 % розчині С2Н5ОН з експозицією 30 с та 0,1 % розчині HgCl2 до 4 хв. і вводять на безгормональне живильне середовище за прописом Мурасіге і Скуга (MS). 1 UA 89630 U 2 UA 89630 U Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3