Спосіб відбору експлантів та отримання асептичної культури магнолії кобус (magnolia kobus dc.)

Реферат: Спосіб відбору експлантів та отримання асептичної культури магнолії кобус (Magnolia kobus DC.) включає сезонний відбір експлантів від рослини-донора та отримання асептичної культури. UA 70037 U (12) UA 70037 U UA 70037 U 5 10 15 20 25 30 35 Корисна модель спосіб відбору експлантів та отримання асептичної культури магнолії кобус (Magnolia kobus DC.) належить до сільськогосподарської галузі, зокрема садово-паркового господарства. Аналогом способу відбору та отримання асептичної культури магнолії кобус слугували роботи А. Каменіцької та М. Ланакової [http://www.sprmgerlink.com/content/x501xk8u5405hx72/, http://www.springerlink.com/content/p252362357084708/]. Спосіб передбачає відбір експлантів з однорічних наймолодших пагонів магнолії Суланжа довжиною 6-15 см. Як стерилянт використовували розчині сулеми 0,1 % з додаванням декілька крапель Твіну 20 (0,03-0,05 %) протягом 5-7 хв. Після чого промивали тричі стерильною дистильованою водою. Даний спосіб не передбачає диференційованого підходу щодо відбору рослинного матеріалу в залежності від сезону і при ньому спостерігається невисокий відсоток отриманих асептичних експлантів. Запропонований корисною моделлю спосіб передбачає використання як вихідні експланти активно вегетуючі одно-дворічні пагони з верхівковими та пазушними бруньками. Для отримання асептичної культури використовується живильне середовище Мурасіге і Скуга [Murashige Т., Skoog F. A resived medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures // Physiol. Plant. - 1962 - V. 15, № 3. - C. 473-497] з додаванням антибіотика Кантаміцин -1 100-200 мг*л , а також ступінчаста стерилізація рослинного матеріалу. Перший етап включає в себе ретельне промивання рослинного матеріалу в мильному бактерицидному розчині протягом 40 хв., далі передбачається відмивання експлантів під проточною водою з таким же часом експозиції, та дистильованій воді. Наступним етапом є занурення у 70 % етанол упродовж 1 хв., після в 1 % розчин азотнокислого срібла 5-20 хв. з подальшим відмиванням стерильною дистильованою водою близько 1 хв. Подальшим стерилянтом слугував 2,5 % розчин гіпохлориду натрію (NaHClO) та часом експозиції 10 хв., відмивання у стерильній дистильованій воді тричі по 10 хв. Аналізуючи дослідження робимо висновки (табл.), що відбирати експланти з пазушними та листовими бруньками найбільш доцільно у період активного росту рослин, а саме - веснянолітні місяці. У цей термін експланти значно менше інфікуються як внутрішньою, так і зовнішньою мікрофлорою в порівнянні з іншими строками відбору. Тоді, як основні видові морфологічні особливості магнолії кобус (Magnolia kobus DC.) опушення бруньок та близьке їх прилягання до пагонів, найбільш вагомо ускладнюють отримання асептичної культури, що є особливо характерним при взятті експлантів з пагонів у осінньо-зимовий період. Використання пропонованого корисною моделлю способу відбору експлантів та отримання асептичної культури магнолії кобус (Magnolia kobus DC.) дасть можливість забезпечити потреби ринку садивним матеріалом вітчизняного виробництва для озеленення та садово-паркового будівництва. Таблиця Загальна характеристика варіантів експерименту з дослідження впливу термінів взяття експлантів Стан експаланта З* АСЕ НЗ* OK З AgNo3 НЗ OK З 5 % NaHClO +мікроцид НЗ OK З AgNo3 +мікроцид НЗ OK Стерилянт Місяці І II III IV V VI VII VIII IX X XI XII Загальна кіл-ть 44 0 9 10 13 5 35 37 26 84 0 9 34 33 8 82 3 3 39 12 33 43 23 24 39 0 3 33 43 29 48 13 28 35 22 33 60 25 8 90 0 0 90 0 0 249 3 24 352 151 76 124 36 102 115 71 83 1 37 11 41 37 26 26 UA 70037 U Продовження таблиці Загальна характеристика варіантів експерименту з дослідження впливу термінів взяття експлантів Стерилянт AgNo3 1 %+2,5 % NaHClO AgNo3 1 %+2,5 % NaHClO +антибіотик 100 мг/л AgNo3 1 %+2,5 % NaHClO +антибіотик 200 мг/л Стан експаланта З НЗ OK З НЗ OK З НЗ OK Місяці І II III IV V VI VII VIII IX X XI XII 53 33 19 33 34 10 22 32 14 49 31 23 39 29 6 23 36 8 51 30 21 27 39 12 21 28 20 Загальна кіл-ть 153 94 63 99 102 28 66 96 42 2129 *З - заражені; НЗ - незаражені; OK - окислені. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб відбору експлантів та отримання асептичної культури магнолії кобус (Magnolia kobus DC.), який відрізняється тим, що включає сезонний відбір експлантів від рослини-донора та отримання асептичної культури. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2