Засіб “офтокорд” для лікування дефектів рогівки після механічного ушкодження

Реферат: Засіб для лікування дефектів рогівки після механічного ушкодження містить низькомолекулярну (до 5 кДа) фракцію крові на основі гелю. Містить низькомолекулярну фракцію кордової крові людини. UA 91142 U (54) ЗАСІБ "ОФТОКОРД" ДЛЯ ЛІКУВАННЯ ДЕФЕКТІВ РОГІВКИ ПІСЛЯ МЕХАНІЧНОГО УШКОДЖЕННЯ UA 91142 U UA 91142 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до галузі експериментальної медицини, зокрема офтальмології, і може бути використана при розробці нових препаратів для профілактики і лікування помутніння рогівки. Відомий засіб для лікування дефектів рогівки, який містить кріоконсервовані стовбурові, кровотворні, імунокомпітентні клітини кордової крові людини [1]. Недоліками цього засобу є можливість виникнення реакції РТПХА, контамінація, неконтрольована проліферація клітин. Найбільш близьким до заявленого засобу "Офтокорд", є засіб для лікування дефектів рогівки після механічного ушкодження, який містить низькомолекулярну (до 5 кДа) фракцію крові молочних телят (ФТ) на основі гелю [2]. Недоліком цього засобу є низька його ефективність щодо швидкості відновлення рогівки, через що існує ризик її помутніння і втрати зору. В основу корисної моделі поставлено задачу створити ефективний засіб для лікування дефектів рогівки після механічного ушкодження, який би забезпечив можливість прискорити процес відновлення рогівки і таким чином запобігти її помутніння. Поставлена задача вирішується тим, що засіб для лікування дефектів рогівки після механічного ушкодження, який містить низькомолекулярну (до 5 кДа) фракцію крові на основі гелю, згідно з корисною моделлю, містить низькомолекулярну фракцію кордової крові людини (ФККЛ). Використання засобу "Офтокорд", який включає ФККЛ, що містить високу концентрацію біологічно активних сполук, дозволяє прискорити відновлення рогівки, запобігаючи розвитку помутніння. Спосіб пояснюється прикладом. Засіб "Офтокорд", отримували з цільної кордової крові людини. Методом ультрафільтрації [3] виділяли фракцію з компонентами молекулярної маси (до 5 кДа). Отриману низькомолекулярну фракцію вводили до складу гелю у кількості 0,8 г. Вплив засобу "Офтокорд" на відновлення рогівки після механічного ушкодження у порівнянні з прототипом вивчали на кролях породи Шиншила вагою 2,5-3 кг. Моделювання стандартного дозованого дефекту рогівки проводили під місцевою анестезією за допомогою тріпана для пошарової пересадки рогової оболонки з подальшим видаленням епітелію і 1/2 строми. Контроль дефекту проводили шляхом фарбування поверхні рогівки 1 % розчином флюоресцеїну. Після відтворення моделі тварин підрозділяли на три групи. Першій групі тварин на пошкоджену ділянку рогівки протягом 21 доби, 4 рази на добу наносили "Офтокорд"; другій - ФТ на основі гелю; третій - гель-плацебо (контроль). Для профілактики антибактеріальних ускладнень всім тваринам на ділянку ушкодження рогівки перед використанням лікувальних засобів наносили антибіотик, який містить консервант левофлоксацин (4 рази на добу протягом 14 діб). Результати дослідження площі дефекту та помутніння рогівки після механічного ушкодження наведені в Таблиці 1. З Таблиці 1 видно, що на 7 добу лікування рогівки засобом "Офтокорд", площа дефекту у 3 рази менша у порівнянні з прототипом. Прозорість рогівки, яку визначали за шкалою Куренкова [4], на 21 добу лікування була па 45 % вища ніж у найближчого аналога. Результати гістохімічного дослідження синтезу несульфатованих [5] та сульфатованих [6] глікоаміногліканів (ГАГ) наведені в Таблиці 2, з якої видно, що після лікування ушкодженої рогівки засобом "Офтокорд" нормалізація вмісту несульфатованих ГАГ відбувалась на 14 добу, сульфатованих - на 21 добу дослідження. В прототипі протягом експерименту нормалізації вмісту ГАГ в ушкодженій рогівці не спостерігалося. Апоптичні зміни в рогівці після лікування засобом "Офтокорд" і ФТ досліджували методом Brosmana [7]. Результати наведені в Таблиці 3, з якої видно, що апоптозний індекс клітин рогівки на 21-у добу лікування засобом "Офтокорд" на 31 % нижчий у порівнянні з прототипом. В Таблиці 4 наведені результати імуногістохімічного дослідження синтезу колагенів І і III типів в рогівці експериментальних тварин за методом Губіной - Вакулік [8]. З таблиці 4 видно, що на 21 добу лікування рогівки засобом "Офтокорд" вміст колагенів І і III типу на 20,3 % і 17 %, відповідно, менший у порівнянні з прототипом. Морфологічне дослідження рогівки експериментальних тварин показало, що лікування засобом "Офтокорд" прискорює відновлення епітелію рогівки і запобігає розвитку васкуляризації і помутніння. 1 UA 91142 U Таблиця 1 Площа дефекту і інтенсивність помутніння рогівки (n=6) Групи тварин Після формування моделі Контроль ФТ "Офтокорд" 2 Площа дефекту, мм 14±1,37 7 доба експерименту 1,9±0,2 0,9±0,2§ 0,3±0,05§# Інтенсивність помутніння 21 доба експерименту 3,1±0,3 1,1±0,7§ 0,6±0,9§# (р