Спосіб корекції анаеробного піхвового дисбіозу у вагітних жінок

Реферат: Спосіб корекції дисбіозу статевих шляхів у вагітних жінок включає проведення забору мазка на мікрофлору та бакпосіву урогенітальних виділень, та визначення антибіотикочутливості з призначенням пацієнтам еубіотиків. Відбирають піхвовий вміст у пробірку Еппендорфа, проводять його лабораторну підготовку, обробку, цифрову обробку даних та їх оцінку. Як піхвовий вміст відбирають епітеліальні клітки з задньобічного зведення піхви шляхом зскрібання за допомогою одноразового стерильного інструмента. При лабораторній обробці біопроби виділяють ДНК і піддають її ампліфікації, проводять полімеразну ланцюгову реакцію, реєструють продукти реакції в режимі реального часу за допомогою детектора. При наявності анаеробних мікроорганізмів проводять етіотропну корекцію за допомогою вагінальних свічок, які містять кліндаміцин по одній свічці впродовж 3 днів, з подальшим призначенням пробіотика перорально протягом 10 днів до кесаревого розтину. UA 98258 U (54) СПОСІБ КОРЕКЦІЇ АНАЕРОБНОГО ПІХВОВОГО ДИСБІОЗУ У ВАГІТНИХ ЖІНОК UA 98258 U UA 98258 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, зокрема до акушерства та гінекології, і може бути використана для виділення та одержання ДНК як засобу ідентифікації умовно-патогенних анаеробних мікроорганізмів на ранніх етапах розвитку інфекційного процесу піхви у вагітних та засобу корекції піхвового дисбіозу у вагітних жінок до кесаревого розтину. Невисока чутливість критеріїв Р. Амсела до мікроорганізмів, неможливість проведення етіологічної діагностики з урахуванням виду, запліднення піхвового біотопу мікробним спектром, наявність безсимптомного перебігу анаеробного дисбіозу змушують шукати діагностичні засоби та способи його корекції. Найбільш близьким по технічній суті та результату, що досягається, є спосіб корекції дисбіозу статевих шляхів у вагітних жінок [патент України № 67283, МПК А61Р 5/24 опубл. 10.02.2012], який включає проведення забору мазка на мікрофлору та бакпосіву урогенітальних виділень та визначення антибіотикочутливості з призначенням пацієнтам еубіотиків. Пацієнткам додатково призначають аскорбінову кислоту у вигляді вагінальних таблеток вагінорм С у кількості 250 мг, тобто одна таблетка в піхву на ніч протягом 6 днів, з подальшим переходом до інтравагінального застосування еубіотиків вагінально у вигляді капсул біокапфемі у кількості одна капсула двічі на добу впродовж 15 днів, при цьому терапію поєднують з одночасним прийомом еубіотиків перорально у вигляді препарату лактомун у кількості одне саше щодня натще, курсом 21 день, а після закінчення курсу лікування здійснюють контроль вагінального біоценозу. Недоліком відомого способу є те, що він не включає проведення полімеразно-ланцюгової реакції, з'ясування типу піхвового дисбалансу, його кількісної оцінки та виявлення етіологічної структури умовно-патогенних мікроорганізмів. Спосіб в діагностиці безсимптомних форм анаеробного дисбіозу не досить інформативний та об'єктивний. Ідентифікація збудників умовнопатогенного ряду у жінок, що страждають на дисбіоз, у запропонованому діагностичному процесі компенсує відсутність чітких діагностичних критеріїв і розбіжностей (у розумінні етіології та патогенезу неспецифічних інфекційно-запальних процесів піхви), зумовлених умовнопатогенними мікроорганізмами, які утрудняють вироблення диференціальної діагностики захворювань цієї групи. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалити спосіб корекції дисбіозу статевих шляхів у вагітних жінок шляхом підвищенню об'єктивності та інформативності з можливістю проведення адекватної етіотропної терапії дисбіозу з метою уникнення у породіль гнійносептичних ускладнень в післяпологовому періоді. Поставлена задача вирішується тим, що в способі корекції дисбіозу статевих шляхів у вагітних жінок, що включає проведення забору мазка на мікрофлору та бакпосіву урогенітальних виділень, та визначення антибіотикочутливості з призначенням пацієнтам еубіотиків, відповідно до корисної моделі, відбирають піхвовий вміст у пробірку Еппендорфа, проводять його лабораторну підготовку, обробку, цифрову обробку даних та їх оцінку, при цьому як піхвовий вміст відбирають епітеліальні клітки з задньобічного зведення піхви шляхом зскрібання за допомогою одноразового стерильного інструмента, при лабораторній обробці біопроби виділяють ДНК і піддають її ампліфікації, проводять полімеразну ланцюгову реакцію, реєструють продукти реакції в режимі реального часу за допомогою детектора, при наявності анаеробних мікроорганізмів проводять етіотропну корекцію за допомогою вагінальних свічок, які містять кліндаміцин по одній свічці впродовж 3 днів, з подальшим призначенням пробіотика перорально протягом 10 днів до кесаревого розтину, при визначенні грибів роду Candida spp. > 3 10 КОЕ/мл призначають одноразово перорально флуконазол 0,15 мг, а в післяопераційному періоді - хлоргексидинові свічки місцево протягом 7 днів одноразово на ніч. Перевагою цього способу є проведення полімеразно-ланцюгової реакції, з'ясування типу піхвового дисбалансу, його кількісної оцінки та виявлення етіологічної структури умовнопатогенних мікроорганізмів. Спосіб також включає лабораторну підготовку, обробку, цифрову обробку даних та їх оцінку, тому цей спосіб в діагностиці безсимптомних форм анаеробного дисбіозу э інформативніший та об'єктивніший за відомі аналоги. Ідентифікація збудників умовно-патогенного ряду у жінок, що страждають на дисбіоз, у запропонованому діагностичному процесі є самим найточнішим на сьогоднішній день. Використання ПЛР (полімеразно-ланцюгової реакції) дозволило одержати у реальному часі якісну та кількісну оцінку піхвового мікробіоценозу, з можливістю проведення адекватної етіотропної терапії дисбіозу. Спосіб корекції анаеробного піхвового дисбіозу у вагітних жінок виконується наступним чином. Відбирають епітеліальні клітки з задньо-бічного зведення піхви шляхом зішкрібання за допомогою одноразового стерильного інструмента "Cytobrush", при лабораторній обробці 1 UA 98258 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 біопроби виділяють ДНК і піддають її ампліфікації, проводять полімеразну ланцюгову реакцію, реєструють продукти реакції в режимі реального часу за допомогою детектора, визначаючи кількість загальної бактеріальної маси, нормофлори Lactobacillus spp., мікоплазми Mycoplasma (hominis+genitalium) і уреаплазми Ureaplasma (urealyticum+parvum) та мікрофлори Candida spp., наявність аеробних мікроорганізмів Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp., Atopobinm vaginae, Hubacterium spp, , Sneathia spp, , Leptotrihia spp., Fusobacterium spp., Megasphera spp., Veilonella spp, , Dialister spp., Lachnobacterium spp., Clostridium spp., Mobiluncus spp., Corynebacterium spp., Peptostreptococciis spp., анаеробної умовно-патогенної мікрофлори Enterobacteraceae, Streptococcus spp., Staphylococcns spp., під час цифрової обробки даних обліковують показники індикаторного циклу в абсолютних або відносних значеннях за допомогою програмного забезпечення детектора, априоцінцістану біоценозу визначають 6 нормоценоз, якщо кількість загальної бактеріальної маси сягає > 10 ГЕ (показник колонієутворюючих одиниць на 1 мл), або кількість нормофлори Lactobacillus spp. дорівнює 106108 ГЕ за абсолютним значенням, а за відносним - 80-100 %, або кількість аеробної та 4 анаеробної умовно-патогенної мікрофлори дорівнює < 10 ГЕ за абсолютним значенням, а за відносним - 0,10-1,00 %, або вміст мікоплазми Mycoplasma (hominis+genitalium) і уреаплазми 4 Ureaplasma (urealyticum+parvum) становить < 10 за абсолютним значенням, або концентрація 3 Candida spp. сягає 10 ГЕ. Або кількість нормофлори 6 8 Eactobacillus spp. дорівнює 10 -10 ГЕ за абсолютним значенням, а за відносним - 20-80 %, або 4 кількість аеробної та анаеробної умовно-патогенної мікрофлори дорівнює > 10 ГЕ за абсолютним значенням, а за відносним - 0,10-10,0 %. Або вміст мікоплазми Mycoplasma 4 (hominis+genitalium) і уреаплазми Ureaplasma (urealyti-cum+parvurn) становить > 10 за 3 абсолютним значенням, або концентрація Candida spp. сягає > 10 ГЕ за абсолютним значенням, або встановлюють виражений дисбаланс біоти, якщо кількість загальної 6 6 6 бактеріальної маси становить 10 , або кількість нормофлори Lactobacillus spp. сягає 10 ГЕ за абсолютним значенням, а за відносним - 0,01-100,0 %. Або вміст мікоплазми Mycoplasma (hominis+genitalium) і уреаплазми 4 Ureaplasma (urealyticum+parvum) відсутній або становить > 10 за абсолютним значенням, або 3 концентрація Candida spp. відсутня або сягає > 10 ГЕ за абсолютним значенням, і визначають етіологічні структури анаеробного дисбалансу, якщо дисбаланс викликаний наявністю будьякого з мікроорганізмів Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp., Atopobium vaginae, Eubacterium spp., Sneathia spp., Leptotrihia spp., Fusobacterium spp., Megasphera spp., Veilonella spp., Dialister spp., Lachnobacterium spp., Clostridium spp., Mobiluncus spp., Corynebacterium spp. або Peptostreptococcus spp., або встановлюють аеробну структуру дисбалансу, якщо дисбаланс, викликаний наявністю будь-якої мікрофлори Hnterobacteraceae, Streptococcus spp. або Staphylococcus spp., або констатують змішаний дисбаланс, якщо він викликаний наявністю будь-яких анаеробних мікроорганізмів, аеробної мікрофлори або Candida spp. будь-якому сполученні; за умов, що для ампліфікації залучають ДНК-зонди з флуоресцентними позначками та поглиначами флуоресценції; під час комп'ютерної обробки даних враховують показник ампліфікації геномної ДНК людини. Надалі при наявності анаеробних мікроорганізмів проводять етіотропну корекцію за допомогою вагінальних свічок, які містять кліндаміцин (Далацин С, Мілагин) по одній свічці впродовж 3 днів, з подальшим призначенням пробіотика (Лактогин, Вагісан) перорально 3 протягом 10 днів до кесаревого розтину, а при визначенні грибів роду Candida spp. >10 КОЕ/мл призначають одноразово перорально флуконазол 0,15 мг, а в післяопераційном періоді хлоргексидинові свічки (Гексикон) місцево протягом 7 днів одноразово на ніч з метою уникнення гнійно-септичних ускладнень в післяпологовому періоді, зокрема післяпологового ендометриту. Можливість здійснення способу доведено у прикладі. Приклад. Пацієнтка P., 28 років, II вагітність, 36 тижнів. Скарги на рясні виділення біло-сірого кольору з неприємним запахом. Виконано дослідження біоценозу піхви за допомогою тестсистеми ПЛР-ДНК. У відповідності зі шкалою біоценозу встановлений виражений вагінальний дисбіоз: Lactobacillus spp. - Lg 8; Enterobacteriaceae-Lg 6; Streptococcus spp. - lg 5; Staphylococcus spp. - Lg 6; Gardnarella vaginalis-Lg 7; Eubacterium spp. - Lg 6; Fusobacterium spp. - Lg 3; Megasphera spp. - Lg 5; Lachnobacterium spp. - Lg 5; Mobiluncus spp. - Lg5,5; Peptostreptococcus spp. - Lg 5; Atopobium vaginae-Lg 6; Mycoplasma hominis - не обнаружена; Mycoplasma genitalium - не обнаружена; Ureaplasma spp. - Lg5; Candida spp. - Lg 7. На підставі проведених досліджень встановлено діагноз - вагітність 37 тижнів, головне передлежання, рубець на матці, бактеріальний вагіноз, виражений анаеробний вагінальний дисбіоз. Було 2 UA 98258 U 5 10 15 20 проведено лікування кліндаміцином у вигляді вагінальних свічок ("Далацин" протягом 3-х днів по 1 свічці 100 мг) і пробіотиком ("Вагісан" по 1 капсулі 1 млр/КУО/мл протягом 10 днів). Після закінчення лікування, проведений контроль ефективності лікування до операції кесарів розтин, де виявлено: 1. При прямій мікроскопії: гр.(+) флора, лейкоцити - 2-3 в п/зр, епітелій - 5-6 в п/зору, "ключові клітини" - не виявлені. 2. При дослідженні біоценозу піхви за допомогою тестсистеми ПЛР-ДНК: Lactobacillus spp. - Lg6; Enterobacteriaceae-Lg4,5; Streptococcus spp. - lg 5; Staphylococcus spp. - Lg 3,5; Gardnarella vaginalis-Lg3; Eubacterium spp. - Lg4; Fusobacterium spp. - не виявлена; Megasphera spp. - Lg3; Lachnobacterium spp. - Lg4; Mobiluncus spp. - Lg3,5; Peptostreptococcus spp. - Lg3; Atopobium vaginae - не виявлена; Mycoplasma hominis - не виявлена; Mycoplasma genitalium - не виявлена; Ureaplasma spp-Lg4; Candida spp. - Lg3, звідки видно значне зменшення кількості умовно-патогенних облігатно-анаеробних мікроорганізмів. Жінка розроджена шляхом кесаревого розтину у плановому порядку. Післяродовий період протікав гладко. Виявлений ефект швидкого та тривалого відновлення нормальної мікрофлори у піхві, гладкий післяопераційний період дає підстави рекомендувати запропонований спосіб для корекції анаеробного дисбіозу статевих шляхів у жінок з передбаченим кесаревим розтином. Застосування пропонованого способу корекції анаеробного піхвового дисбіозу у вагітних жінок дає можливість уникнення прогресування дисбіотичних процесів статевих шляхів вагітних пацієнток, виникнення та поширення висхідних інфекційно-запальних процесів під час вагітності та уникнення гнійно-септичних ускладнень в післяопераційному періоді. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 30 35 Спосіб корекції дисбіозу статевих шляхів у вагітних жінок, що включає проведення забору мазка на мікрофлору та бакпосіву урогенітальних виділень, та визначення антибіотикочутливості з призначенням пацієнтам еубіотиків, який відрізняється тим, що відбирають піхвовий вміст у пробірку Еппендорфа, проводять його лабораторну підготовку, обробку, цифрову обробку даних та їх оцінку, при цьому як піхвовий вміст відбирають епітеліальні клітки з задньобічного зведення піхви шляхом зскрібання за допомогою одноразового стерильного інструмента, при лабораторній обробці біопроби виділяють ДНК і піддають її ампліфікації, проводять полімеразну ланцюгову реакцію, реєструють продукти реакції в режимі реального часу за допомогою детектора, при наявності анаеробних мікроорганізмів проводять етіотропну корекцію за допомогою вагінальних свічок, які містять кліндаміцин по одній свічці впродовж 3 днів, з подальшим призначенням пробіотика перорально протягом 10 днів до кесаревого розтину, при визначенні грибів роду Candida spp. > 103 КОЕ/мл призначають одноразово перорально флуконазол 0,15 мг, а в післяопераційном періоді - хлоргексидинові свічки місцево протягом 7 днів одноразово на ніч. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3