Спосіб моделювання раку товстої кишки

Реферат: UA 98406 U UA 98406 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до галузі медицини, а саме до експериментальної онкології, і може бути використана для створення злоякісного новоутворення товстої кишки, із використанням дрібних лабораторних тварин. Відомі способи моделювання раку товстої кишки, які включають внутрішньоочеревинне уведення хімічного канцерогену 1,2-диметилгідрозину, у дозі 20 мг/кг маси тварини, раз на тиждень, впродовж одного місяця (Г.Ю. Стручко и соавт., 2009), підшкірне інокулювання в ділянку пахвової западини суспензії клітин аденокарциноми, розведеної у середовищі № 199 (A.M. Козлов та співав., 1978). Недоліками цих способів є видоспецифічність пухлини, що утруднює інтерпретацію отриманих результатів на клінічний перебіг раку товстої кишки, низька частота відтворення злоякісного новоутворення, висока частота метастатичного ураження внутрішніх органів. Прототипом корисної моделі є спосіб моделювання раку товстої кишки, який включає аспелнізацію, ксенотрансплантацію під шкіру міжлопаткової ділянки 1 мл суспензії добової 8 культури клітин аденокарциноми товстої кишки людини, яка містить 4×10 клітин (Патент 2457546 Российская Федерация, МПК G09B23/28. Способ моделирования аденокарциноми толстой кишки человека / Лепехова С.А., Гольдберг О.А., Рой Т.А., Апарций А.Г., Чашкова Е.Ю., Кувшинов А.Г.; Заявитель Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии Сибирского отделения РАМН. - заявл. № 2011108850/14 от 09.03.11; опубл. 27.07.12.). Прототип-спосіб здійснюється таким чином. Під загальним знеболенням тваринам виконують лапаротомію, після перев'язки сегментарних та коротких шлункових судин, видаляють селезінку та всі додаткові селезінкові тіла. Забір біоматеріалу проводять із операційного матеріалу пацієнтів, оперованих з приводу аденокарциноми товстої кишки. Пухлину подрібнюють до отримання фрагментів розмірами від 0,05 до 1,0 мм, видаляють сполучнотканинні елементи. Виконують очистку в фіколовому градієнті, добиваючись видалення клітинного детриту, елементів крові, слизу, сполучнотканинних клітин, великих фрагментів. Суспензію мікрофрагментів відмивають та проводять підрахунок клітин за допомогою тесту на виключення барвника, з використанням камери Фукса-Розенталя. Культивування видалених клітин виконують на матрацах Ру з використанням стандартних живильних середовищ та добавок (Р. Фрешни, 1989). Життєздатність добової культури клітин складає 97,3 %. Для трансплантації використовують зразок добової культури клітин у 8 середовищі культивування при їх вмісті 4×10 в 1 мл. Через одну годину після оперативного втручання шкірні покриви тричі обробляють розчинами антисептика. Виконують ксенотрансплантацію суспензії під шкіру, в кількості 1 мл, 8 яка містить 4×10 клітин. При трансплантації ін'єкційну голку на всю довжину вводять у товщу підшкірно жирової клітковини міжлопаткової ділянки, паралельно шкірі. Під час ін'єкції голку поступово витягують, досягаючи рівномірного розподілу матеріалу в підшкірно жировій клітковині. Прототипом-способу є часте метастатичне ураження внутрішніх органів, внаслідок чого відмічається велика летальність тварин, видалення селезінки та розташування новоутворення поза товстою кишкою робить дану модель далеку від реальної клінічної картини раку товстої кишки. В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалити спосіб моделювання раку товстої кишки, шляхом імплантації шматка пухлини Герена безпосередньо в товсту кишку, без видалення селезінки та селезінкових тіл, який максимально відповідатиме реальній клінічній картині даного захворювання, із високою частотою отримання пухлинного росту та контрольованим процесом канцерогенезу. Поставлена задача вирішується тим, що в способі моделювання раку товстої кишки, який включає виконання лапаротомії, згідно з корисною моделлю, в лапаротомну рану виводять ілеоцекальний кут, виконують розріз товстої кишки, у який заводять та фіксують шматок пухлини Герена, відновлюючи тим самим герметизацію шлунково-кишкового тракту, лапаротомну рану пошарово зшивають. Імплантація шматка пухлини Герена безпосередньо у товсту кишку, а також контакт її із всіма шарами останньої призводить переважно до екзофітного росту новоутворення у потрібному місці шлунково-кишкового тракту, відсутності віддалених метастазів, а також невиконання спленектомії робить цей процес максимально наближеним до реальної клінічної картини даного захворювання. Спільною ознакою корисної моделі та прототипу є виконання лапаротомії. 1 UA 98406 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Відмінністю корисної моделі від прототипу є те, що імплантують шматок пухлини Герена безпосередньо в товсту кишку, тобто у місце локалізації майбутнього новоутворення, не виконують видалення селезінки та селезінкових тіл. На кресленні представлено схему способу, що заявляється: 1 - частина товстої кишки, 2 шматок пухлини Герена, уведений в просвіт товстої кишки, 3 - окремовузлові шви, які фіксують пухлину Герена у просвіті та шарах товстої кишки, забезпечуючи герметизацію останньої. Корисна модель здійснюється таким чином. Під загальним внутрішньом'язовим знеболенням (розчин хлоралгідрату 200-250 мг/кг), після обробки операційного поля, виконують лапаротомію. У рану виводять іліоцекальний кут. Виконують розріз товстої кишки довжиною 3-4 мм у поперечному напрямку, в який заводять шматок пухлини Герена відповідних розмірів, прямокутної форми, на 2/3 її довжини. Декількома окремовузловими швами фіксують шматок пухлини Герена так, щоб всі шари кишки безпосередньо контактували з останньою та була відновлена герметизація шлунково-кишкового тракту. Далі виведений іліоцекальний кут із даною ділянкою товстої кишки занурюють у черевну порожнину, лапаротомну рану пошарово зашивають. Приблизно через два тижні в даній ділянці шлунково-кишкового тракту має місце спайковий процес, в просвіті кишки - злоякісне новоутворення, яке на 2/3 стенозує її просвіт, інколи ускладнюється профузною кровотечею. Пухлину Герена отримують шляхом ксеноімплантації її клітин під шкіру латеральної 8 поверхні стегна у кількості 4×10 , розведені у 0,5 мл фізіологічного розчину. Приклад використання корисної моделі. Після досягнення відповідних розмірів пухлини Герена, яку заздалегідь імплантовано щуру в м'які тканини латеральної поверхні стегна, її видалили та ножицями порізали на шматки прямокутної форми, розмірами 3,0×2,0×5,0 мм. Іншому інтактному щуру масою 180 г виконано серединну лапаротомію та виведено у рану іліоцекальний кут. Відступивши від останнього на 20,0 мм у напрямку товстої кишки виконано поперечний розріз останньої. Шматок пухлини Герена заведено у просвіт товстої кишки та герметично фіксовано до її стінки. Іліоцекальний кут занурено у черевну порожнину та пошарово зшито лапаротомну рану. Через 14 діб щуру виконано лапаротомію. При огляді органів черевної порожнини метастазів не знайдено. В ділянці іліоцекального кута виражений спайковий процес, пальпується щільне пухлиноподібне утворення, розмірами до 8-10 мм у діаметрі, яке локалізовано у дилятованій товстій кишці, а саме у місці її розрізу. Після видалення даної ділянки шлунково-кишкового тракту та розкриття порожнини кишкової трубки має місце новоутворення у 3-4 рази більше за розміри трансплантата, яке на 2/3 перекриває просвіт кишки. При гістологічному досліджені даного утворення шлунково-кишкового тракту має місце недиференційований рак. За запропонованим способом прооперовано 34 лабораторних щурів. У 32 (94,1 %) щурів мав місце рак товстої кишки, який макро- та мікроскопічно підтверджено. Технічний результат. Запропонований спосіб дозволяє технічно нескладно змоделювати злоякісне новоутворення товстої кишки, яке за своїм характеристикам відповідає росту аденокарциноми людини. Використання даної моделі забезпечує можливість вивчення патогенетичних особливостей її перебігу на фоні створених ускладнень раку товстої кишки, а також розробки нових методів лікування. 45 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 50 Спосіб моделювання раку товстої кишки, шляхом виконання лапаротомії, який відрізняється тим, що в лапаротомну рану виводять ілеоцекальний кут, виконують розріз товстої кишки, у який заводять та фіксують шматок пухлини Герена, відновлюючи тим самим герметизацію шлунково-кишкового тракту, лапаротомну рану пошарово зшивають. 2 UA 98406 U Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3