Використання erbb3-інгібіторів у лікуванні тричі негативного раку молочної залози

Реферат: Передбачено способи пригнічення зростання тричі негативних пухлин молочної залози й базальноподібних пухлин молочної залози, пов'язані з контактом пухлинних клітин з ЕrbВ3 інгібітором, наприклад, антитілом проти ЕrbВ3. Також передбачені способи лікування тричі негативного раку молочної залози або базально-подібного раку молочної залози у пацієнта шляхом введення пацієнтові ЕrbВ3 інгібітору, наприклад, антитіла проти ЕrbВ3. Способи лікування можуть також включати вибір пацієнта із тричі негативним раком молочної залози або базальноподібним раком молочної залози, а потім введення ЕrbВ3 інгібітору пацієнтові. Способи лікування також можуть додатково містити введення щонайменше одного додаткового протиракового агента пацієнтові в поєднанні з інгібітором ЕrbВ3. UA 111149 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Перехресне посилання на споріднену заявку. Ця заявка має пріоритет попередньої заявки на патент США № 61/312895, поданої 11 березня 2010 року за назвою "Використання ErbB3 інгібіторів у лікуванні тричі негативного й базально-подібного видів раку молочної залози", зміст якої включено тут як посилання в повному обсязі. Рівень техніки. У жінок рак молочної залози є одним з найпоширеніших видів раку й п'ятою найпоширенішою причиною смерті від раку. У зв'язку з неоднорідністю раку молочної залози, 10-літня виживаність без прогресування може широко варіюватися залежно від стадії й виду, від 98 % до 10 %. Різні форми раку молочної залози можуть мати надзвичайно різні біологічні характеристики й клінічне поводження. Таким чином, класифікація раку молочної залози у пацієнта стала критичним компонентом для визначення схеми лікування. Наприклад, поряд із класифікацією гістологічних типів і класів, форми раку молочної залози в цей час звичайно оцінюються по експресії гормональних рецепторів (рецепторів естрогена (ER) і прогестерона (PR)) і по експресії HER2 (ErbB2), тому що в цей час доступна велика кількість умов лікування, коли ціль -гормональні рецептори або HER2 рецептор. ER і PR є ядерними рецепторами (вони переважно розташовані в ядрах клітин, хоча вони також можуть бути знайдені на клітинній мембрані) і малі молекули інгібітори, націлені на ER і/або PR, були розроблені. HER2, або людський рецептор епідермального фактору росту 2 типу, являє собою рецептор, що звичайно перебуває на поверхні клітини й антитіл, тому мішень HER2 була розроблена як терапія. HER2 є єдиним членом сімейства EGFR (воно також містить у собі HER1 (EGFR), HER3 (ErbB3) і HER4 (ErbВ4), який не здатний зв'язуватися з лігандом активації сам по собі. Таким чином, HER2 є функціональним тільки тоді, коли рецептор включений у гетеродімерний рецепторний комплекс із іншим членом сімейства EGFR, таким як HER3. Форми раку класифікуються за експресією рецепторів естрогена (естроген рецептор позитивні або ER + пухлини), які можна трактувати по взаємодії з антагоністом ER, таким як тамоксифен. Крім того, рак молочної залози класифікується по високих рівнях експресії HER2 рецептора, які можна вивчати з антитілами проти HER2, такими як трастузумаб, або з HER2-aKTHBHHM інгібітором рецептора тирозинкінази, такими як лапатиніб. Тричі негативний (TN) рак молочної залози - це термін, використовуваний для позначення чіткого клінічно значимого підтипу карцином молочної залози, які становлять приблизно 15 % від всіх випадків раку молочної залози. Скоринг TN пухлин негативний (наприклад, з використанням звичайних гістопатологічних способів і критеріїв) по експресії ER і PR і не показує збільшення рівнів HER2 (тобто, вони ER", PR', HER2"). TN рак молочної залози містить у собі, у першу чергу, але не винятково, молекулярно й гістологічно помітний підтип раку молочної залози, відомий як базально-подібний (BL) підтип. Підтип BL також характеризується експресією цитокератинів (наприклад, СК, СК5/6, СК14, СК17) і інших білків, виявлених у нормальних базальних / міоепітеліальних клітинах молочної залози. Однак на додаток до підтипу BL деякі інші види раку молочної залози, у тому числі "нормальній молочній залозі подібний", метапластичні карциноми, медулярні карциноми й пухлини подібні до раку слинних залоз, можуть також мати тричі негативний (TN) фенотип. Крім того, TN форми раку молочної залози частіше виникають при наявності мутації BRCA1 і в пременопаузі жінок афроамериканського або іспанського походження. TN пухлини звичайно показують дуже агресивне поводження, з більш коротким виживанням після рецидиву й низькою загальною виживаністю в порівнянні з іншими типами раку молочної залози. Не всі BL форми раку молочної залози є TN. Базально-подібні пухлини молочної залози є гетерогенним типом пухлини, які становлять до 15 % всіх випадків раку молочної залози й проявляють агресивне клінічне поводження, що робить їх такими, що особливо важко піддаються успішному лікуванню. Більшість BL форм раку молочної залози є ER-, PR- і HER2 1+ низького типу (HER2 або HER2 негативний). Крім того, вони зазвичай експресують білки, які зазвичай знаходяться у нормальних базальних (міоепітеліальних) клітинах молочної залози. До них відносяться високомолекулярні цитокератини (наприклад, 5/6, 8, 14, 17 і 18), р-кадгерін, кавеоліни 1 і 2, нестін, αВ кристалин і EGFR. Крім того, клітини BL пухлини, як правило, не мають у своєму розпорядженні можливостей для компетентної гомологічної рекомбінації, яка репарує ДНК. Гістологічно більшість BL форм раку молочної залози мають IDC-NST тип, високого гістологічного класу, і демонструють дуже високі показники мітотичності. Крім того, вони зазвичай мають центральну некротичну або фіброзну зони, розширені границі, помітний лімфоцитарний інфільтрат, і типові / атипічні медулярні особливості, і зазвичай мають функції, аналогічні плоскоклітинному раку голови й шиї, викликаному вірусом папіломи людини. 1 UA 111149 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Більшість форм медулярного й нетипового медулярного, метапластичного, секреторного, міоепітеліального й лімфоїдного кістозного раку молочної залози також мають BL характеристики. З огляду на відсутність експресії рецепторів гормонів або значну кількість HER2 у клітинах TN рака молочної залози, варіанти лікування були дуже обмежені, тому що пухлина не реагує на лікування, у якого ціль ER (наприклад, тамоксифен, інгібітори ароматази) або HER2 (наприклад, трастузумаб). Навпроти, ці пухлини лікуються звичайною неоадьювантною та адьювантною хіміотерапією, що має обмежену ефективність і багато цитотоксичних побічних ефектів. Крім того, такі режими хіміотерапії можуть призвести до медикаментозної стійкості пухлин, а ризик рецидиву захворювання TN раком молочної залози вище протягом перших трьох років лікування, ніж для інших типів раку молочної залози. Базально-подібні форми раку молочної залози також важко піддаються лікуванню й пов'язані з поганими прогнозами, хоча BL лімфоідний кистозний рак, як правило, асоційований із кращими клінічними результатами використовувати їх для виробництва. У зв'язку з вищевикладеним, зберігається необхідність у додаткових способах лікування й способах лікування тричі негативного раку молочної залози й BL рака молочної залози. Сутність винаходу. Способи, передбачені в цьому документі, є способами лікування тричі негативних форм рака молочної залози (наприклад, пухлин) і базально-подібних форм раку молочної залози (наприклад, пухлин), а також фармацевтичні композиції, які можуть бути використані в таких способах. Способи й композиції, що базуються, принаймні частково, на відкритті, що ЕebВЗ інгібування може подавити зростання TN клітин раку молочної залози й BL клітин рака молочної залози. Зокрема, застосування антитіла проти ЕrbВЗ продемонструвало подавления зростання клітин TN рака молочної залози in vivo. Таким чином, передбачається використання ЕrbВЗ інгібітора (наприклад, використання його для виготовлення лікарського засобу) для лікування TN або BL рака молочної залози. В іншому аспекті, передбачається спосіб подавления зростання TN ракової пухлини молочної залози або BL рака молочної залози, що включає контакт пухлини з ефективною кількістю ЕrbВЗ інгібітора. В іншому аспекті, передбачається спосіб подавлення зростання TN ракової пухлини молочної залози або BL ракової пухлини молочної залози в пацієнта, що включає введення пацієнтові ефективної кількості ЕrbВЗ інгібітора. У ще одному аспекті, передбачається спосіб лікування пацієнта з TN раковою пухлиною молочної залози або BL раковою пухлиною молочної залози, що включає введення пацієнтові ефективної кількості ЕrbВЗ інгібітора. У ще одному аспекті, передбачається спосіб лікування пухлин молочної залози або BL ракової пухлини молочної залози в пацієнта, що включає: вибір пацієнта з пухлиною тричі негативного раку молочної залози або BL раку молочної залози, а також введення пацієнтові ефективної кількості інгібітору ЕrbВЗ. У зразковому варіанті втілення, інгібітор ЕrbВЗ є антитілом проти ЕrbВЗ. Типовим антитілом проти ЕrbВЗ є ММ-121 (Аb # 6), що складається з VH і VL послідовностей, як показано в SEQ ID NO: 1 і 2 відповідно. Інше типове антитіло проти ЕrbВЗ є антитілом, що включає, опціонально, у напрямку від амінотермінального до карбоксітермінального, VH CDR1, 2 і 3 послідовності,як показано в SEQ ID NO: 3-5 відповідно, і, можливо, у напрямку від амінотермінального до карбоксітермінального, VL CDR1, 2 і 3 послідовності, як показано в SEQ ID NO: 6-8 відповідно. В інших варіантах втілення, антитіло проти ЕrbВЗ є Аb # 3 (включаючи VH і VL послідовності, як показано в SEQ ID NO: 9 і 10 відповідно), Аb # 14 (включає VH і VL послідовності, як показано в SEQ ID NO: 17 і 18 відповідно), Аb # 17 (включає VH і VL послідовності, як показано в SEQ ID NO: 25 і 26 відповідно) або Аb # 19 (включає VH і VL послідовності, як показано в SEQ ID NO: 33 і 34 відповідно). В інших варіантах втілення антитіло проти ЕrbВЗ вибирають із групи, що складається з mAb 1B4C3, mAb 2D1D12, AMG-888 і гуманізованого mAb 8B8. В іншому варіанті втілення, введення антитіл проти ЕrbВЗ інгібує зростання та інвазії, або метастазування пухлини. Способи, представлені тут, можуть бути використані в лікуванні TN рака молочної залози різних гістопатологічних фенотипів. Наприклад, в одному варіанті втілення, тричі негативна ракова пухлина молочної залози гістологічно характеризується як базально-подібний фенотип. В іншому варіанті втілення, ракова TN пухлина молочної залози гістологічно характеризується як фенотип, що не є BL. У кожному із зазначених способів і композицій, інгібітор ЕrbВЗ може містити в складі фармацевтично прийнятний носій. В іншому аспекті, способи лікування, передбачені тут, додатково включають введення пацієнтові принаймні одного додаткового протиракового агента, що не є ЕrbВЗ інгібітором. В 2 UA 111149 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 одному з варіантів втілення, щонайменше один додатковий протираковий агент містить, щонайменше один хіміотерапевтичний препарат, такий як препарат(и), обраний із групи, що складається з хіміотерапевтичних препаратів на основі платини, таксанів, інгібіторів тирозинкіназьі і їхньої комбінації. У цей час відзначено, що в підгрупі TN рака молочної залози, 2 + що тестується як HER2 , лікування агентами проти HER2, такими як трастузумаб, пертузумаб або лапатиніб може дати переваги при використанні в комбінації з антитілами проти ЕrbВЗ. Таким чином, в іншому аспекті способи лікування, передбачені тут, додатково включають введення пацієнтові ефективної кількості щонайменше одного додаткового протиракового агента, що є агентом проти HER2. Такі агенти проти HER2 добре відомі й можуть включати одне або більше антитіло проти ЕrbВ2, такі як С6.5 (і численні його похідні), описане у патенті США 5977322, трастузумаб, як описано в патенті США 6054297, і пертузумаб, як описано в патенті США 6949245; також як малі молекули агенти проти HER2, такі як лапатиніб (який також інгібує EGFR тирозинкіназу) і AG879. В іншому варіанті втілення, щонайменше один додатковий протираковий агент включає EGFR інгібітор, такий як антитіло проти EGFR або малу молекулу інгібітор EGFR сигналізації. Типове антитіло проти EGFR включає цетуксимаб. Інші приклади антитіл проти EGFR включають матузумаб, панитумумаб, нимотузумаб і mAb 806. Типова невелика молекула інгібітор EGFR сигналізації включає гефитиніб. Інші приклади використання невеликих молекул інгібіторів EGFR сигналізації включають лапатиніб, канертиніб, ерлотиніб HCL, пелитиніб, РКІ166, PD158780 і AG 1478. У ще одному варіанті втілення, щонайменше один додатковий протираковий агент включає інгібітор VEGF. Типовий інгібітор VEGF включає антитіло проти VEGF, таке як антитіло бевацизумаб. В іншому варіанті втілення, введення антитіла проти ЕrbВЗ і, щонайменше, одного додаткового протиракового агента інгібує зростання або інвазію, або метастазування пухлини. В іншому аспекті, способи лікування TN рака молочної залози або BL рака молочної залози в пацієнта включають введення зазначеному пацієнтові комбінації із ММ-121 і паклитаксела. В одному варіанті втілення комбінація має терапевтичну синергію при лікуванні TN або BL форм раку молочної залози. У деяких прикладах, комбінація впливає на загибель клітин по log10 i становить, щонайменше 2,8, щонайменше 2,9 або щонайменше 3,0. В інших аспектах, комбінація забезпечує покращення інгібування зростання пухлини, що, щонайменше, адитивно в порівнянні з покращенням, отриманим від кожного індивідуального агента комбінації. В іншому варіанті втілення, пропонується композиція, що містить комбінацію ММ-121 і паклитаксела, у якій поєднання має терапевтичний синергізм при лікуванні TN або BL рака молочної залози. У деяких прикладах, комбінація впливає на загибель клітин по log10 i становить, щонайменше 2,8, щонайменше 2,9 або щонайменше 3,0. Набори, що містять поєднання фармацевтичних композицій, також передбачаються. Короткий опис фігур. Фігура 1 представляє графік, що показує відносний об'єм пухлини (%) ксенотрансплантата MAXF449 (вісь Υ - нормована на первинний об'єм пухлини), побудований проти часу в днях після рандомізації (вісь X) в NMRI голої миші, обробленої ММ-121 або середовищем для розчинення лікарського засобу в якості контролю. TGI=200 %. Фігура 2 представляє графік, що показує процентну зміну об'єму пухлини ксенотрансплантата MDA-MB-231 (вісь Υ - нормована на первинний об'єм пухлини), побудований проти часу в днях після ін'єкції MDA-MB-231 клітин (вісь X) в Balb/c голу мишу, оброблену ММ-121 або середовищем для розчинення лікарського засобу в якості контролю. Криві з відкритими площами під крапками часу або кружки показують мишей, оброблених ММ121. Криві із заповненими площами під крапками часу або кола вказують на середовище для розчинення лікарського засобу в якості контролю. На вставці: "mр" означає, що MDA-MB-231 клітини вводили в жирову тканину, a "sc" показує, що MDA-MB-231 клітини вводили підшкірно в бік. 3 Фігура 3 представляє графік, що показує об'єм пухлини MDA-MB-231 у мм (вісь Y), побудований проти часу в днях (вісь X), починаючи з 28 днів після ін'єкції MDA-MB-231 клітин у жирові подушечки Balb/c голих мишей. Лікування здійснювалося ММ-121 (150 мкг/миша), паклитакселом (5 мг/кг), комбінацією ММ-121 (150 мкг/миша) і паклитаксела (5 мг/кг), або середовищем для розчинення лікарського засобу в якості контролю. Використане позначення у фігурах, "mpk" = мг/кг. 3 Фігура 4 представляє графіки, що показують об'єм пухлини MDA-MB-231 у мм (вісь Y), побудований проти часу в днях (вісь X), починаючи з 28 днів після ін'єкції MDA-MB-231 клітин у жирові подушечки Balb/c голих мишей. Фігура 4А показує лікування ММ-121, цетуксимабом або 3 UA 111149 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 паклитакселом; ММ-121 і цетуксимабом; і потрійною комбінацією ММ-121, цетуксимаба й паклитаксела. Фігура 4В показує лікування ММ-121, ерлотинібом, ММ-121 і ерлотинібом, або потрійною комбінацією ММ-121, ерлотиніба й паклитаксела. Докладний опис. Способи, передбачені в цьому документі, є способами лікування тричі негативного й базально-подібного видів раку молочної залози, також фармацевтичними композиціями, які можуть бути використані в практиці таких способів. Як зазначено далі в прикладах, у цей час показано, що інгібітор ЕrbВЗ, зокрема, антитіла проти ЕrbВЗ, здатний пригнічувати зростання клітин TN рака молочної залози в природних умовах. Відповідно, способи для пригнічування зростання TN рака молочної залози й BL рака молочної залози, а також способи лікування рака молочної залози таких хворих за допомогою інгібітору ЕrbВЗ передбачені в цьому документі. Визначення: Використовуваний тут термін "тричі негативний" або "TN" відноситься до пухлин (наприклад, карцином), як правило, пухлин молочної залози, у яких пухлинні клітини скоринг негативні (тобто, використовуючи традиційні способи гістопатології) для рецептора естрогена (ER) і рецептора прогестерона (PR), обоє з яких є ядерними рецепторами (тобто, вони знаходяться переважно в ядрах клітин), і пухлинні клітини не ампліфікуються для рецептора епідермального фактору росту типу 2 (HER2 або ЕrbВ2), рецептор звичайно знаходиться на клітинній поверхні. Пухлинні клітини вважаються негативними відносно експресії ER і PR, якщо менш 5 % ядер клітин пухлини забарвлюється по ознаці ER і PR експресії з використанням стандартних імуногістохімічних способів. Пухлинні клітини вважаються досить ампліфікуючимися для HER2 3+ ("HER2 "), якщо при випробуванні з HercepTest ™ Kit (код К5204, Dako North America, Inc, Carpinteria, CA), напівкількісний імуногістохімічний аналіз за допомогою поліклональних первинних антитіл проти HER2, дає оцінку результату тесту на 3+, або тест на HER2 позитивний за флуоресценцією при in-situ гібридизації (FISH). Як використовується тут, пухлинні клітини вважаються негативними по гіперекспресії HER2, якщо при оцінці результатів тесту вони дають 0 або 1+, або 2+, або якщо вони HER2 FISH негативні. Крім того, термін "тричі негативний вид(и) рака молочної залози" або "TN вид(и) рака молочної залози" містить у собі рак різних гістопатологічних фенотипів. Наприклад, деякі TN види раку молочної залози класифікуються як " базально-подібні" ("BL"), у яких неопластичні клітини експресують гени, які звичайно знаходяться у нормальних базальних/міоепітеліальних клітинах молочної залози, такі як високомолекулярні базальні цитокератіни (СК, СК5/6, СК14, СК17), виментін, р-кадгерін, αВ кристалін, фасцін і кавеоліни 1 і 2. Деякі інші види TN рака молочної залози, однак, мають гістопатологічний фенотип що відрізняється, прикладами яких є високого ступеня інвазивності рак проток неспеціального типу, метапластичні карциноми, медулярні карциноми й форми раку слинних залоз як пухлини молочної залози. Терміни "ЕrbВЗ", "HER3", "ЕrbВЗ рецептор" і "HER3 рецептор" тут використовуються як синоніми й відносяться до людського ЕrbВЗ білку, як описано в патенті США № 5480968. Використовуваний тут термін "ЕrbВЗ інгібітор" призначений для визначення терапевтичних агентів, які перешкоджають, понижаючи модулюють, пригнічують або понижаючи регулюють активність ЕrbВЗ. Термін призначений для включення хімічних сполук, таких як невеликі молекули інгібіторів і біологічних агентів, таких як антитіла, інтерферуючи РНК (shRNA, siRNA), розчинні рецептори тощо. Зразковий ЕrbВЗ інгібітор є антитілом проти ЕrbВЗ. "Антитіло", використовуване тут, являє собою білок, що складається з одного або декількох поліпептидів, що включає обов'язкову область, істотно закодовану генами імуноглобуліну або фрагментами генів імуноглобулінів, у яких білок імуноспецифічно зв'язується з антигеном. Визнані гени імуноглобуліну включають каппа, лямбда, альфа, гама, дельта, епсилон і мю постійні області генів, а також безліч генів імуноглобуліну вариабельної області. Легкі ланцюги підрозділяються на каппа або лямбда. Важкі ланцюги класифікуються як гама, мю, альфа, дельта або епсилон, які, у свою чергу визначають імуноглобуліни класів IgG, IgM, IgA, IgD i IgE відповідно. Типова структурна одиниця імуноглобуліну містить у собі тетрамер, що складається із двох ідентичних пар поліпептидних ланцюгів, кожна пара має один "легкий" (близько 25 кДа) і один "важкий" ланцюг (50-70 кДа). "VL" і "VH" позначає ці легкі й важкі ланцюги відповідно. Антитіла включають інтактні імуноглобуліни, а також їхні антиген-зв'язуючі фрагменти, які можуть бути зроблені при обробці різними пептидазами або синтезовані de novo хімічно або при використанні технології експресії рекомбінантної ДНК. Такі фрагменти включають, наприклад, F(ab)2 димери й Fab мономери. Використовувані антитіла включають одноланцюгові антитіла (антитіла, які існують в одному поліпептидному ланцюзі), наприклад, одноланцюгові Fv антитіла (scFv), у яких VH і VL ланцюги з'єднуються між собою (безпосередньо або через пептидний лінкер), щоб сформувати безперервний поліпептид. 4 UA 111149 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Терміни "імуноспецифічно" або "імуноспецифічні" відносяться до антитіл, які зв'язуються через домени, істотно закодовані генами імуноглобуліну або фрагментами генів імуноглобуліну, одного або більше епітопів білка, що представляє інтерес, але не істотно розпізнають і зв'язуються з іншими молекулами в зразку, що містить змішану популяцію антигенних молекул. Як правило, антитіла зв'язуються імуноспецифічно з спорідненим антигеном з IQ зі значенням не більше 50 нМ, вимірюваним аналізом поверхневого плазмонного резонансу або аналізом зв'язування клітини. Використання таких тестів добре відомо в даній області й описано в Прикладі 3, нижче. "Антитіло проти ЕrbВЗ" є антитілом, що імуноспецифічно зв'язується з ектодоменом ЕrbВЗ і "антитіло проти ЕrbВ2" є антитілом, що імуноспецифічно зв'язується з ектодоменом ЕrbВ2. Антитіло може бути ізольованим антитілом. Таке зв'язування з ЕrbВЗ або ЕrВ2 демонструє К