Спосіб підготовки ендометрія до переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи

Реферат: Спосіб підготовки ендометрія для переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи включає внутрішньоматкове введення препарату стимулювання імунологічного процесу. При цьому пацієнткам старше 36 років проводять гістероскопію з детальним патгістологічним дослідженням ендометрія (ендометрій гістологічно нормальної будови, з ознаками гіпоплазії), в тому числі і з резистентно тонким ендометрієм. У циклі стандартної підготовки до переносу кріопрезервованих ембріонів за 1 день до початку дачі прогестерону вводять внутрішньоматково одноразово препарат філграстим, що містить рекомбінантний гранулоцитарний колонієстимулюючий фактор (Г-КСФ) людини, у дозі 1 мл 0,15 мг/мл через внутрішньоматковий катетер в порожнину матки. При цьому вміст однієї ампули препарату філграстиму аспірують у шприц на 2 мл, вводять внутрішньоматковий катетер Tomcat в порожнину матки, через який повільно вводять вміст шприца в порожнину матки і після завершення введення препарату шприц від'єднують від катетера, аспірують в нього невелику кількість повітря, знову приєднують до катетера і повільно вводять бульбашки повітря в матку, після чого катетер обережно вибирають з порожнини матки. UA 104928 U (54) СПОСІБ ПІДГОТОВКИ ЕНДОМЕТРІЯ ДО ПЕРЕНОСУ ЕМБРІОНІВ У ЖІНОК СТАРШОЇ ВІКОВОЇ ГРУПИ UA 104928 U UA 104928 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до медицини, зокрема до репродуктивної медицини, і може бути використана для підготовки ендометрія до переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи, зокрема з неодноразовими невдалими спробами використання допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі, в тому числі і з резистентно тонким ендометрієм. Відомо, що в окремих країнах застосовують, як один із інноваційних методів лікування, глікопротеїн з функцією фактора росту та цитокіна (Г-КСФ), який продукується в різних клітинах і тканинах людського організму, включаючи ендотелій, макрофаги і в інші імуноцити, як системно (підшкірне введення), так і місцево (внутрішньоматкові інфузії), в контексті лікування невиношування імплантації, або при резистентно тонкому ендометрії в циклах допоміжних репродуктивних технологій вагітності, багаторазових невдачах (ДРТ), як терапевтичний засіб для лікування патології імплантації при повторних викиднях [Scarpellini and Sbracia, 2009; Wurfel et al, 2010; Toth et al., 2011]. Такий спосіб стимулює імунологічний процес, що сприяє проліферативним змінам в ендометрії. Проте призначення Г-КСФ хоч і поліпшує товщину ендометрія і якість яйцеклітин, а також плацентарний ріст і дозволяє народження здорової дитини пацієнткам, в яких не було позитивного ефекту від внутрівенного терапії імуноглобулінами, однак кількість пацієнток, яким вводився Г-КСФ для поліпшення якості яйцеклітин, є дуже малою через недостатньо високі показники настання вагітності, особливо у жінок з резистентно тонким ендометрієм. Резистентно тонкий ендометрій, стійкий до стандартного лікування, виявляється у невеликої кількості пацієнток, що проходять лікування методами ДРТ. Ця проблема, тим не менш, має велике значення, тому що ендометрій тонший 7 мм вважається прогностично несприятливою ознакою для настання імплантації та досягнення вагітності [Casper, 2011; Singh et al., 2011; Revel, 2012]. Відомі також повідомлення про високий відсоток настання вагітності після внутрішньоматкового введення Г-КСФ у пацієнтів з тонким ендометрієм в циклах ДРТ і дані про вплив ГМ-КСФ на ендометрій. Zhao і Chegini (1999) припустили, що експресія ГМ-КСФ і його рецептора протягом менструального циклу визначається аутокринною і паракринною функцією ГМ-КСФ в ендометрії, a Chegini ін. (1999) повідомили, що ГМ-КСФ не є мітогенним для клітин ендометрію, чи то епітеліальних чи залозистих, але в інтерактивному режимі з трансформуючим фактором росту (ТФР) регулює свою власну експресію і експресію ТФР в ендометрії. Зроблені презентації, що збагачення культурального середовища Г-КСФ сприяє розвитку людського ембріона до стадії бластоцисти (Sj?blom ін., 1999). Takasaki та ін. (2008) повідомили, що використання Г-КСФ в комбінації з людським менопаузальним гонадотропіном в поганих відповідачів покращує розвиток фолікулів. Г-КСФ регулює утворення функціонально активних нейтрофільних гранулоцитів, їх диференціацію. Завдяки проліферативним властивостям Г-КСФ сприяє швидкому росту ендометрія. Однак такі дослідження проводились у сфері репродуктивного здоров'я, зокрема у пацієнток з тонким, резистентним до великих доз естрогенів, ендометрієм, в яких були невдалі спроби застосування ДРТ, і ці дослідження не дають конкретного і ефективного способу підготовки ендометрія до переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи з неодноразовими невдалими спробами використання допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі перед переносом ембріонів, який би могли використовувати у практичній медицині. Найбільш близьким до корисної моделі, що заявляється, є спосіб лікування ендометрія у жінок з невдалими спробами використання допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі шляхом призначення гормонального препарату з високою антипроліферативною дією, за яким перед підготовкою ендометрія до ембріотрансферу призначають гормональний препарат аналог антагоніста гонадотропін релізінг гормону з розрахунку 3,75 м один раз на 28 днів [Патент України на корисну модель № 92711, А61Р 15/00, Бюл. № 16, 2014 р.]. Цей спосіб дозволяє ефективно лікувати виявлену внутрішньоматкову патологію для досягнення вагітності в програмах ДРТ, але також не забезпечує підготовку ендометрія до переносу ембріонів для досягнення високих показників настання вагітності серед жінок старшої вікової групи, особливо з резистентно тонким ендометрієм. В основу корисної моделі поставлено задачу винайти ефективний спосіб підготовки ендометрія для переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи шляхом внутрішньоматкового введення препарату, який би стимулював імунологічний процес, що сприяє проліферативним змінам в ендометрії, зокрема пацієнткам з неодноразовими невдалими спробами використання допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі, забезпечити досягнення значно вищих показників частоти настання вагітності серед жінок старшої вікової групи, в тому числі з резистентно тонким ендометрієм. 1 UA 104928 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Поставлена задача вирішується тим, що за пропонованим способом, що включає внутрішньоматкове введення препарату стимулювання імунологічного процесу, що сприяє проліферативним змінам в ендометрії, згідно з корисною моделлю, пацієнткам старше 36 років, з невдалими спробами застосування допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі, проводять гістероскопію з детальним патгістологічним дослідженням ендометрія (ендометрій гістологічно нормальної будови, з ознаками гіпоплазії), в тому числі з резистентно тонким ендометрієм, у циклі стандартної підготовки до переносу кріопрезервованих ембріонів за 1 день до початку дачі прогестерону вводять внутрішньоматково одноразово препарат філграстим, що містить рекомбінантний гранулоцитарний колонієстимулюючий фактор (Г-КСФ) людини, у дозі 1 мл 0,15 мг/мл через внутрішньоматковий катетер в порожнину матки, при цьому вміст однієї ампули препарату філграстиму аспірують у шприц на 2 мл, вводять внутрішньоматковий катетер Tomcat в порожнину матки, через який повільно вводять вміст шприца в порожнину матки і після завершення введення препарату шприц від'єднують від катетера, аспірують в нього невелику кількість повітря, знову приєднують до катетера і повільно вводять бульбашки повітря в матку з введенням залишкової кількості препарату в катетері, після чого катетер обережно вибирають з порожнини матки. Враховуючи те, що Г-КСФ і ГМ-КСФ беруть участь у найрізноманітніших репродуктивних процесах, зокрема в циклічних змінах Г-КСФ мРНК в фолікулярної рідини під час менструального циклу (повідомлення Yanagi et al., 2002 р.) а Г-КСФ і його рецептор - в лютеїнізованих гранульозних клітинах (Salmassi et al., 2004 p.) і те, що у фолікулярній рідині навколо здорової яйцеклітини є вищий рівень природного Г-КСФ у порівнянні з фолікулами, які виробляють бідні яйцеклітини, більш високі рівні Г-КСФ експресуються здоровими ембріонами і в здоровій плаценті, є маркером ембріонально/плацентарної життєздатності і відіграють важливу роль в спілкуванні ембріона з ендометрієм, а отже, в імплантації. Таким чином, завдяки внутрішньоматковому введенню препарату філграстим, який являє собою синтетичний Г-КСФ (рекомбінантна форма), на відміну від Г-КСФ (гранулоцитарний колонієстимулюючий фактор), що є природним цитокіном, опираючись на перші дослідження Gleicher et al., (2011 p.) з опублікованими даними про те, що товщина ендометрія може зрости вже через 48 годин після внутрішньоматкового введення Г-КСФ Gleicher N, Vidali A, Barad DH (2011) Successful treatment of unresponsive thin endometrium. Fertil Steril 95: 2123 e2113-2127. [PubMed] і пізніші, цих же науковців, що підтвердили факт можливості досягнення мінімальної товщини ендометрія 7 мм через 48 годин після введення філграстиму внутрішньоматково у день дачі тригера овуляції, а також після другого введення за день до трансферу 3-денних ембріонів [Gleicher N, Kim A, Michaeli T, Lee HJ, Shohat-Tal A, et al. (2013) A pilot cohort study of granulocyte colony-stimulating factor in the treatment of unresponsive thin endometrium resistant to standard therapies. Hum Reprod 28: 172-177 [PubMed], сукупністю відомих і пропонованих суттєвих ознак отримано нове рішення, яке дозволяє забезпечити пропонованим способом досягнення значно вищих показників, у порівнянні з відомими способами, частоти настання вагітності серед жінок старшої вікової групи, в тому числі і з резистентно тонким ендометрієм, і є достатнім для виконання поставленої задачі корисної моделі. Спосіб підготовки ендометрія для переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи, зокрема з неодноразовими невдалими спробами використання допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі, здійснюють так. Філграстим вводять за 1 день до початку дачі прогестерону у дозі 1 мл 0,15 мг/мл через внутрішньоматковий катетер в порожнину матки пацієнтки. Вміст однієї ампули препарату філграстиму аспірують у шприц на 2 мл. Внутрішньоматковий катетер Tomcat вводять в порожнину матки, як при процедурі внутрішньоматкової інсемінації. Вміст шприца повільно вводять через катетер в порожнину матки. Після завершення введення препарату шприц від'єднують від катетера, аспірують в нього невелику кількість повітря, знову приєднують до катетера і повільно вводять бульбашки повітря в матку таким чином, щоб ввести в матку ту кількість препарату, яка залишилась в катетері. Після чого катетер обережно вибирають з порожнини матки. Приклад. Проведено підготовку ендометрія до переносу ембріонів пропонованим способом препаратом філграстим, як приклад препаратом "Філстим" фірми "Барвафарм", 22 пацієнткам, які проходили лікування безпліддя методами ДРТ. Критеріями включення в групу дослідження було: вік старше 36 років; в анамнезі 2 і більше ембріотрансфери без досягнення вагітності; проведена гістероскопія з детальним патгістологічним дослідженням ендометрія; ендометрій гістологічно нормальної будови або з ознаками гіпоплазії; резистентно тонким ендометрієм. В усіх попередніх циклах: товщина ендометрія не перевищувала 8 мм після тривалого використання естрогенів перорально та трансдермально; усі жінки мали стандартну підготовку ендометрія до кріопереносу (в середині 2 UA 104928 U 5 10 15 20 25 лютеінової фази ін'єкція агоніста ГтРГ, через 3 тижні підготовка ендометрія пероральним і трансдермальним естрогеном). Перенос здійснювали ембріонами на стадії експондованої бластоцисти. Всі пацієнтки групи дослідження були ознайомлені із запропонованим лікуванням і підписали інформовану згоду, що дозволило огляд медичних записів для науково-дослідних цілей. Контрольну групу склало 25 жінок з такими ж критеріями відбору, яким не було введено препарат філграстим. Пацієнткам обох груп провели комплексне обстеження в межах алгоритмів обстеження хворих з безпліддям (Наказ № 582 від 15.12.2003 р. "Про затвердження клінічних протоколів з акушерської та гінекологічної допомоги", розділ "Тактика ведення жінок з безпліддям") та інструкцією застосування ДРТ (Наказ № 787 від 09.09.2013 р. "Про затвердження Порядку застосування допоміжних репродуктивних технологій в Україні"). Товщина ендометрія визначалась за допомогою вагінального УЗД в найбільш широкій ділянці ендометріальної смужки. Характеристика групи дослідження: Середній вік пацієнтів склав 36,95; середній ІМТ був 25,6; середнє число вагітностей (діапазон) 0-2, середня кількість пологів (діапазон) 0-1. Найбільш поширеним діагнозом серед пацієнтів був знижений оваріальний резерв, виявлений у 72,7 % жінок. Ендометріоз виявлений у 9,1 % і безпліддя трубно-перитонеальне у 9,1 % жінок, поєднане безпліддя у 9,1 %. Характеристика контрольної групи: Середній вік пацієнтів склав 35,92 роки; середній ІМТ був 25,9; середнє число вагітностей (діапазон) 0-2, середня кількість пологів (діапазон) 0-2. Найбільш поширеним діагнозом серед пацієнтів контрольної групи також був знижений оваріальний резерв, виявлений у 64 % жінок. Ендометріоз виявлений у 12 % і безпліддя трубноперитонеальне у 8 % жінок, поєднане безпліддя у 16 %. Порівняльна характеристика дослідної і контрольної груп Кількість пацієнтів Вік (років) Середнє число вагітностей в анамнезі (діапазон) Середня кількість пологів в анамнезі (діапазон) Невдалі попередні цикли ЕКЗ (діапазон) 2 ІМТ (кг / м ) Основна причина безпліддя (п/%): знижений оваріальний резерв поєднане безпліддя ендометріоз трубно-перитонеальне безпліддя 30 35 Дослідна група 22 36,95 Контрольна група 25 35,92 0-2 0-2 0-1 0-2 1-4 25,6 1-3 25,9 16/72,7 2/9,1 2/9,1 2/9,1 16/64 4/16 3/12 2/8 Серед пацієнток дослідної групи частота позитивних тестів на вагітність склала 68,2 % (15 пацієнток), на УЗД діагностоване серцебиття у 63,6 % (14 пацієнток). При цьому у контрольній групі частота настання вагітності склала 40 % (10 пацієнток), на УЗД діагностоване серцебиття у 40 % (10 пацієнток). Запропонований спосіб підготовки ендометрія до переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи шляхом внутрішньоматкового введення препарату філграстим забезпечує досягнення значно вищих показників частоти настання вагітності серед жінок старшої вікової групи, з невдалими спробами застосування допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі, в тому числі з резистентно тонким ендометрієм. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 40 Спосіб підготовки ендометрія для переносу ембріонів у жінок старшої вікової групи, що включає внутрішньоматкове введення препарату стимулювання імунологічного процесу, що сприяє проліферативним змінам в ендометрії, який відрізняється тим, що пацієнткам старше 36 років, з невдалими спробами застосування допоміжних репродуктивних технологій в анамнезі, проводять гістероскопію з детальним патгістологічним дослідженням ендометрія (ендометрій 3 UA 104928 U 5 10 гістологічно нормальної будови, з ознаками гіпоплазії), в тому числі і з резистентно тонким ендометрієм, у циклі стандартної підготовки до переносу кріопрезервованих ембріонів за 1 день до початку дачі прогестерону вводять внутрішньоматково одноразово препарат філграстим, що містить рекомбінантний гранулоцитарний колонієстимулюючий фактор (Г-КСФ) людини, у дозі 1 мл 0,15 мг/мл через внутрішньоматковий катетер в порожнину матки, при цьому вміст однієї ампули препарату філграстиму аспірують у шприц на 2 мл, вводять внутрішньоматковий катетер Tomcat в порожнину матки, через який повільно вводять вміст шприца в порожнину матки і після завершення введення препарату шприц від'єднують від катетера, аспірують в нього невелику кількість повітря, знову приєднують до катетера і повільно вводять бульбашки повітря в матку, щоб ввести залишкову кількість препарату в катетері, після чого катетер обережно вибирають з порожнини матки. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4