Біологічно активна добавка з радіопротекторною та імуностимулюючою дією “бузинол +”

Реферат: Винахід належить до біологічно-активної добавки (БАД) з радіопротекторною та імуностимулюючою дією, що містить у своєму складі суміш екстрактів плодів бузини чорної та горобини чорноплідної. UA 108274 C2 (12) UA 108274 C2 UA 108274 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Винахід належить до парафармацевтичної промисловості, зокрема до біологічно активних добавок (БАД) до раціону харчування, і може бути використаний у фармакології для профілактики як радіопротекторний, імуностимулюючий та загальнозміцнюючий засіб. Відомі композиції спиртових екстрактів у сукупності окремих частин рослин, які мають тонізуючий та загальнозміцнюючий ефект [1, 2, 3]. Всі вище вказані БАДи не мають вираженої радіопротекторної та імуностимулюючої дії. Найближчим до запропонованої композиції "Бузинол +" є еліксир "Комфорт" [4]. Еліксир "Комфорт" містить 10 компонентів (екстракти: ягід і листків бузини чорної, кореня ревеню, насіння льону, насіння гарбуза, топінамбура, кмину, насіння кропу, насіння фенхелю, чорносливу). Недоліком еліксиру є те, що концентрація ягід бузини чорної є занадто низькою і не містить горобини чорноплідної, що не дозволяє оцінити їхню радіопротекторну та імуностимулюючу дію. Поставлено задачу запропонувати суміш екстрактів плодів бузини чорної та горобини чорноплідної (композиція "Бузинол +") і оцінити в експерименті їхню радіопротекторну та імуностимулюючу дію. Дана задача вирішується таким чином, що готують композицію "Бузинол +" шляхом комбінування двох екстрактів: плодів бузини чорної та горобини чорноплідної у співвідношенні 8:2. Обидва компоненти, які входять в БАД, мають необхідні якості, що забезпечуть в результаті вирішення даної задачі. Біологічно активна добавка технологічно може бути виготовлена у вигляді водно-спиртового екстракту, сиропу, таблеток, драже. Найоптимальнішими формами випуску є водно-спиртовий екстракт та сироп. Нижче представлений можливий варіант приготування БАДу у вигляді водно-спиртового екстракту. Композиція "Бузинол +" готується у співвідношенні: водний екстракт плодів 60-90 % бузини чорної водний екстракт горобини 10-40 % чорноплідної спирт 95 об. % - до 35,0±0,3 об. %. міцності Екстракцію біологічно активних речовин виконують у екстракторі проточного типу з використанням лікарської рослинної сировини у підв'яленому вигляді. Отримані водні екстракти фільтрують і у запропонованих кількостях купажують. Новоутворений купаж перемішують протягом 60 хв, після чого проводиться фільтрування. Після фільтрування в екстракт добавляють спирт 95 об % - до міцності 35,0±0,3 об. %. Отриманий екстракт тримають при температурі 6-8 С протягом 12-14 днів, після чого відокремлюють від осаду і подають на розливання. Лікувальна дія композиції "Бузинол +" зумовлена наявністю комплексу біологічно активних речовин. У плодах бузини чорної: флавоноїди, які знаходяться у формі глікозидів (рутин, кверцетин, антоціани), полісахариди, фенольні сполуки, ефірні олії, мікроелементи (Са, Fe, Р), вітаміни (А, В, С). Антоціани мають радіопротекторну, антиоксидантну, імуностимулюючу, протипухлинну, антиалергенну, антивірусну активність [5] Механізм дії композиції "Бузинол +" пояснюється тим, що флавоноїди (які знаходяться в екстракті у формі глікозидів) нейтралізують вільні радикали, що утворюються в організмі під дією на організм іонізуючої радіації; а також стимулюють імунну систему, оскільки збільшують вироблення цитокінів - особливих біологічно активних речовин - імунорегуляторів. Окрім того, флавоноїди в поєднанні з аскорбіновою кислотою діють синергічно. У плодах горобини чорноплідної: рутин, біофлавоноїди (близько 500 мг/100 г), органічні кислоти, каротин, тіамін, дубильні речовини, 5-6 % фенольних сполук (флавоноїди і фенолокислоти), до 2,5 % пектинових речовин, цукри (4,6-9,4 %), фенолкарбонові кислоти, фолієву кислоту, рибофлавін, нікотинову кислоту, токоферол, аскорбінову кислоту фосфор, мідь, марганець, залізо, молібден, магній, бор, кобальт, йод (5-6 мкг/100 г). Насіння містить жирну олію (14,8-21,9 %) [6]. Екстракт плодів горобини чорноплідної, що входить до складу композиції "Бузинол +", не тільки посилює, а й доповнює і відповідно розширює спектр впливу композиції "Бузинол +". Адже, будучи скарбницею великої кількості вітамінів та мікроелементів, його можна вживати для 1 UA 108274 C2 зміцнення стінок кровоносних судин і профілактики атеросклерозу (РР), йододефіциту (І), цукрового діабету (сорбіт), нормалізації артеріального тиску. Таблиця 1 Фракційний склад фенольних сполук у ягодах бузини чорної та горобини чорноплідної, мг/100 г (n=3, p0,05) Плід бузина чорна горобина чорноплідна 5 10 Флавони 65,97±4 115,22±7 Антоціани 742,26±11 358,95±7 Сума флавоноїдів 808,23±12 510,17±6 Для визначення радіопротекторних та імуностимулюючих властивостей запропонованої композиції "Бузинол +" було проведено дослідження кількості лейкоцитів та змін у формулі крові у 24 самців сирійських хом'яків. Хом'яки знаходились в однакових умовах: температура в приміщенні - (21-25 °C), харчовий раціон - суміш зернових, корми соковиті (яблука, буряки, морква, конюшина). Усіх хом'яків ми розділили на дві групи, по 12 самців у кожній. Обидві групи, в свою чергу, поділені на підгрупу "А" - основну, де спостерігалося 6 хом'яків, які приймали композицію "Бузинол +", та підгрупу "В", контрольну - 6 хом'яків, які не приймали композицію "Бузинол +" (див табл. 2). Таблиця 2 Схема-структура дослідницької роботи І А - звичайний харчовий раціон + композиція "Бузинол +" (основна) І Б - звичайний харчовий раціон (контрольна) II А - звичайний харчовий раціон + композиція ІІ група - тварини, опромінені рентгенівськими "Бузинол +" (основна) променями 7 Гр. II Б- звичайний харчовий раціон (контрольна) І група - неопромінені тварини 15 20 25 30 35 40 Слід відмітити, що тварин основної підгрупи догодовувати водним екстрактом плодів бузини чорної та горобини чорноплідної у співвідношенні 8:2 ми почали з 4 доби після опромінення. Щодоби хом'яки одержували добавку до основного харчового раціону по 5 мл екстракту розведеного водою у співвідношенні 1:2 протягом 4-ох тижнів. Дослідження тварин проводилося за такими основними показниками: динамікою кількості лейкоцитів та змінами формули крові. У першій групі (неопромінені хом'яки), підгрупа "І А" була інтактною - без жодних факторів опромінення, яким до основного харчового раціону добавляли щодня композицію "Бузинол +". Підгрупа "II В" була контрольною. У другій групі хом'яки опромінені рентгенівськими променями дозою 7 Гр за допомогою рентгенівської установки в районній поліклініці. Підгрупа "II А" була основною, а підгрупа "II Б" контрольною. Зміни в клітинах живого організму, що виникають під впливом рентгенівського випромінювання, можуть бути викликані двома різними механізмами: 1) прямою дією випромінювань; 2) посередньою дією. Пряма дія рентгенівських променів полягає в іонізації та збудженні атомів і молекул опромінених клітин організму. Посередня дія їх характеризується тим, що атоми і молекули не зазнають безпосереднього впливу випромінювання; на них діють на сам перед радикали, що утворилися в зоні опромінювання [7]. Для вивчення морфологічного складу крові хом'яків на початку і в кінці дослідження спеціалістом ветеринарної лабораторії був виконаний забір крові для аналізу та виконаний аналіз крові. Результати аналізів показали, що кількість еритроцитів і гемоглобіну, якщо і змінювалися, то неістотно і знаходилися в межах видової норми. Це пов'язано з тим, що тривалість життя еритроцитів становить 100-120 діб, а наші дослідження тривали місяць. В зв'язку із відсутністю динаміки кількості гемоглобіну та еритроцитів вони при аналізі результатів не інтерпретувалися і в таблицях не наводяться. На таблиці 3 наведено динаміку морфологічного складу крові у піддослідних тварин. 2 UA 108274 C2 Таблиця 3 Зміни показників морфологічного складу крові хом'яків сирійських в процесі дослідження Група ІА ІБ II А II Б 5 10 15 20 25 30 Середня ксть лейкоцитів 8 n10 в 1 л 7,6±0,3 7,0±0,4 10,6±0,4 4,8±0,2 Лейкоцитарна формула, % Л Н М Е Б І 86±3 89±4 38±2 61±3 14±2 11±1,5 2±0,5 3±0,5 14±1,5 26±2 46±2 10±1,5 Позначення: Л - лімфоцити Н - нейтрофіли М - моноцити Е - еозинофіли Б - базофіли (несегментовані клітини) І - імунобласти. Звертаємо увагу на динаміку кількості лейкоцитів та зміни у лейкоцитарній формулі крові. Зважаючи на незначну тривалість життя лейкоцитів (декілька днів) та їх захисні функції в організмі, вони першими реагують на зміни кісткового мозку та обмінних процесів всередині організму. Одержані результати були порівняні з результатами дослідження крові хом'яків сирійських до опромінення та з даними норми для цього виду тварин, які майже співпадали. Дані аналізів свідчать, що у тварин групи І А, які вживали композицію "Бузинол +", збільшена кількість лейкоцитів, лімфоцитів і нейтрофілів до верхньої межі видової норми. Це свідчить про імуностимулюючу дію екстракту, що досліджувався. У тварин II групи, опромінених рентгенівськими променями дозою 7 Гр, спостерігалися істотні зміни складу периферійної крові. Найбільш виражені зміни у підгрупі II Б: в усіх хом'яків розвинулася променева хвороба середнього ступеня тяжкості, яка супроводжується лейкопенією, що свідчить про руйнування кісткового мозку. У гризунів підгрупи II А спостерігалася лейкемоїдна реакція еозинофільного типу. Це патологічний стан процесів кровотворення, при яких картина крові подібна до змін крові при лейкеміях та інших системних захворюваннях. В основі розвитку лейкемоїдних реакцій лежить своєрідна гіперактивація утворення лейкоцитів після опромінення з виходом у кров клітин із класу дозріваючих форм, тоді як у нормі в циркуляції крові мають бути тільки зрілі і функціонально повноцінні клітини [8]. В даному випадку подібна реакція периферійної крові є відповіддю на такий патологічний фактор як іонізуюча радіація, що характеризується збільшенням числа лейкоцитів з появою атипових імунобластів у крові, що є проявом лейкемоїдної реакції. Щоб переконатися, що це дійсно так через 3 тижні було зроблено повторний аналіз крові для гризунів підгрупи II А з метою перевірки нормалізації лейкоцитарної формули крові. Результати повторних аналізів виявилися такими (табл. 4). Таблиця 4 Повторний аналіз крові хом'яків сирійських групи ІІІ А Група II А 35 Середня к-сть лейкоцитів 8 n10 в 1 л 5,6±0,5 Лейкоцитарна формула, % Л Н М Е Б І 71±4 8±1,5 21±1,5 3±0,5 Результати повторних аналізів показали, що у хом'яків підгрупи II А кількість лейкоцитів нормалізувалася, з них кількість лімфоцитів стала близькою до норми і що, найважливіше, різко знизилася кількість імунобластних клітин. Зроблено висновок про наявність у тварин підгрупи II А лейкемоїдної реакції. Це означає, що гризуни підгрупи II А, які були опромінені рентгенівськими променями (доза 7 Гр) і вживали 3 UA 108274 C2 5 10 15 20 25 композицію "Бузинол +", мають кращі шанси на відновлення, ніж піддослідні тварини підгрупи II Б. Таким чином, загальні аналізи дослідження складу крові свідчать про позитивний ефект настою плодів бузини чорної та горобини чорноплідної як при вживанні його інтактними тваринами, так і тваринами, опроміненими рентгенівськими променями. Отже, композиція "Бузинол +" дала позитивний ефект впливу на морфологічний склад крові хом'яків сирійських в нормі та при опроміненні рентгенівськими променями, що свідчить про її радіопротекторну та імуностимулюючу дію. Винахід може бути використаний на підприємствах по виготовленню біологічно активних добавок та підприємствах харчової промисловості України. Джерела інформації: 1. Пат. RU № 2031930 С1 MКИ6 C12G3/06. Композиция ингредиентов для бальзама "Крымский". Опубл. 27.03.95. Бюл. № 9. 2. Патент України на винахід Композиція інгредієнтів лікувально-профілактичного бальзаму "Закарпатський бальзам "Легенда Карпат" авторів Бузаш В.М., Руснак В.І., Ортікова В.В., Чундак С.Ю., патент № 84736, дата подання 18.09.2006 р. реєстр. № а200609928. 3. Патент України № 31154, 7С12G3/06. Опубл. В офіц. Бюл. № 9, 2002. Комендар В.І. Композиція інгредієнтів для лікувально-профілактичного бальзаму "Бальзам Комендаря" прототип. 4. Електронний ресурс: [http://atlantida.kiev.ua/] 5. Смірнов О., Косик О. Флавоноїди рутин і кварцетин. Біосинтез, будова ф-ції./ О. Смірнов, О. Косик // - режим доступу: [Електронний ресус: www.nbuv.gov.ua]. 6. Електронний ресурс: [www://pharmencyclopedia.com.ua]. 7. Ткаченко М.М. Радіологія (променева діагностика та променева терапія). / M.M. Ткаченко//Київ: Книга-плюс. - 2011. - С. 720. 8. Обливач А. В. Клінічна патфізіологія крові. / А. В. Обливач, В. І. Русин, В. М. Вайс // Ужгород: Ужгородський національний університет. - 2005. - С. 395. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 30 35 1. Біологічно активна добавка з радіопротекторною та імуностимулюючою дією, що містить в своєму складі екстракти ягід і листків бузини чорної, яка відрізняється тим, що містить суміш екстрактів плодів бузини чорної та горобини чорноплідної у співвідношенні 8:2. 2. Біологічно активна добавка згідно з п. 1, яка відрізняється тим, що може бути виготовлена як у вигляді водно-спиртового екстракту, так і сиропу. Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4