Спосіб прогнозування туберкульозу легень у дорослих

Реферат: Спосіб прогнозування туберкульозу легень у дорослих, що включає забір крові, визначення діагностичного показника, прогнозування за його значенням вірогідності туберкульозу легень. Виконують забір капілярної крові, готують мазок, висушують його, фіксують етанолом, фарбують за Романовським-Гімза, мікроскопують, підраховують лейкоцитарну формулу, визначають діагностичний показник за формулою: Дп  0,05Ся  0,1  0,3Еоз , (1) Пя де: Дп - діагностичний показник, %; Ся - вміст сегментоядерних нейтрофілів, %; Еоз - вміст еозинофілів, %; Пя - вміст паличкоядерних нейтрофілів, %; 0,05; 0,1; 0,3 - коефіцієнти рівняння регресії, безрозмірна величина; за значеннями цього показника прогнозують вірогідність захворювання на туберкульоз легенів. UA 71160 U (54) СПОСІБ ПРОГНОЗУВАННЯ ТУБЕРКУЛЬОЗУ ЛЕГЕНЬ У ДОРОСЛИХ UA 71160 U UA 71160 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Спосіб діагностики туберкульозу належить до галузі медицини, а саме до пульмонології, фтизіатрії та лабораторної діагностики. Може бути використаний у диференціальній діагностиці туберкульозу. Відомий спосіб діагностики туберкульозу з використанням проби Манту [Наказ від 05.04.2006 № 198 «Про затвердження Інструкції про проведення туберкулінодіагностики у ВІЛінфікованих та хворих на СНІД»], який включає підшкірне введення у середній третині передпліччя однієї дози розчину туберкуліну, діагностику туберкульозу за розміром папули, який визначають через 72 години після постановки реакції. Реакція позитивна, якщо діаметр папули перевищує 5 мм. Недоліками цього способу є: - можливість неточного вимірювання діаметра папули, що може призвести до помилкової інтерпретації результатів тесту; - можливість розвитку хибнопозитивної реакції у хворих на алергію; - неможливість відрізнити інфікування мікобактеріями туберкульозу від захворювання на туберкульоз. Ознаками, спільними з рішенням, що заявляється, є: - визначення діагностичного показника; - прогнозування захворювання на туберкульоз за значенням цього показника. Відомий спосіб діагностування туберкульозу [Корначев А.С., Тюлькова Т.Е., Чугаев Ю.П., Кашуба Э.А., Козлов Л.Б. Способ диагностики туберкулезной инфекции. Патент RU 23990557. 10.09.2010, Бюл. № 25], який включає забір двох зразків венозної крові, один із яких стабілізований гепарином, виділення із стабілізованого гепарином зразка моноцитів і нейтрофілів на градієнті густини фікол-верографін; визначення кількості моноцитів із рецептором CD14 (кластер диференціювання 14 на поверхні моноцитів у хворих із туберкульозом) з використанням кон'югатів моноклональних антитіл із флуоресцеїнізотіоціонатом (ФІТЦ) та проточного цитофотометра; визначення функціональної активності нейтрофілів у нестимульованому тесті відновлення тетразолію нітросинього (НСТтесті); у сироватці другого зразка крові визначення вмісту циркулюючих імунних комплексів (ЦІК), шляхом осадження їх 7, % розчином поліетиленгліколю з фотометрією ступеня мутності, та IgE й кортизолу з використанням тест-систем для імуноферментного аналізу; порівняння отриманих значень досліджуваних показників з нормою у популяції; діагностування туберкульозу при відхиленні кожного з показників від норми в межах двох помилок. Недоліками цього способу є: - необхідність взяття венозної крові; - використання дорогих імпортних тест-систем та устаткування, доступних тільки в деяких науково-дослідних лабораторіях; - висока вартість обстеження хворого; - тривалий час обстеження. Ознаками, спільними з рішенням, що заявляється, є: - дослідження крові хворого; - дослідження складових імунного захисту; - визначення діагностичного показника; - прогнозування захворювання на туберкульоз за значенням цього показника. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб прогнозування туберкульозу легень у дорослих, який шляхом визначення показників лейкограми периферичної крові, знаходження діагностичного показника дозволяє здійснити експрес-прогнозування наявності туберкульозу в лікарнях будь-якої категорії, знизити вартість дослідження, підвищити його точність і коректність, своєчасно виявляти початок захворювання. Суттєвими ознаками способу є: - забір капілярної крові; - приготування мазка крові; - висушування його на повітрі; - фіксація етиловим спиртом 20-30 хв; - фарбування мазка за Романовським-Гімза; - підрахунок лейкоцитарної формули за допомогою світлового мікроскопа; - розрахунок діагностичного показника за формулою: Дп  0,05Ся  0,1  0,3Еоз , (1) Пя де: Дп - діагностичний показник, %; Ся - вміст сегментоядерних нейтрофілів, %; 1 UA 71160 U Еоз - вміст еозинофілів, %; Пя - вміст паличкоядерних нейтрофілів, %; 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 0,05; 0,1, 0,3; - коефіцієнти рівняння регресії, безрозмірна величина; визначення вірогідності туберкульозу за значенням Дп. Відмінними від прототипу ознаками є: - забір капілярної крові; - приготування мазка крові; - висушування його на повітрі; - фіксація етиловим спиртом 20-30 хв; - фарбування за Романовським-Гімза; - підрахунок лейкоцитарної формули за допомогою світлового мікроскопа; розрахунок діагностичного показника за формулою 1. Дослідження Дп в осіб при підозрі на туберкульоз легень в умовах поліклініки будь-якого рівня акредитації дозволяє з високим ступенем вірогідності прогнозувати наявність туберкульозу легень та цілеспрямовано проводити додаткові дослідження. Теоретичну основу способу склали сучасні дані про те, що під час туберкульозу легень у дорослих: 1) бурхливо активується місцевий імунітет у тканині легенів, що проявляється посиленням мікобактеріями туберкульозу антиген-специфічної відповіді Тх1 (Т хелпери 1) [Herrera МТ, Torres М, Nevels D et al. Compartmentalized bronchoalveolar IFN-gamma and IL-12 response in human pulmonary tuberculosis. Tuberculosis (Edinb). - 2009. -Vol. 89. - P. 38-47]; 2) мікобактерії туберкульозу фагоцитуються макрофагами і дендритними клітинами після розпізнавання цими клітинами комплементарних хімічних структур. Рецепція мікобактерій туберкульозу (МБТ) визначає активацію синтезу і секреції макрофагами багатьох прозапальних цитокінів, включаючи цитокіни TNF-, ІЛ-1, IL -12, ІЛ-18 і хемокінів, які привертають нейтрофіли, природні кілери (ПК) клітини, моноцити, Т-клітини і незрілі дендритні клітини у вогнище локалізації МБТ [Trinchieri G, Sher A. Cooperation of Toll-like receptor signals in innate immune defence // Nat. Rev. Immunol.- 2007. -Vol. 7.-P. 179-190]; 3) в альвеолах збільшується число нейтрофілів [Schwander SK, Torres M, Carranza CC et al. Pulmonary mononuclear cell responses to antigens of Mycobacterium tuberculosis in healthy household contacts of patients with active tuberculosis and healthy controls from the community. J. Immunol. 2000; 165: 1479-85]; 4) поряд із секрецією прозапальних цитокінів інфіковані макрофаги і дендритні клітини презентують антигени кільком Т-клітинним популяціям, в тому числі Тх1, Тх2, Тх17 і Трег (Т регуляторні), які вступають у проліферацію, диференціювання, синтез і секрецію спектра цитокінів [К. Dheda, SK Schwander, В. Zhu [et al.] The immunology of tuberculosis: From bench to bedside // Respirology. - 2010. - Vol. 15, № 3. - P. 433-450]; 5) клітинами-мішенями комплексу цитокінів Т-лімфоцитів є окремі популяції лейкоцитів циркулюючої крові, які вибірково мобілізуються до місця локалізації МБТ і формують специфічне за клітинним складом вогнище запалення; лейкоцитарна формула є дзеркальним відображенням як цитокінового спектра, так і клітинного складу вогнища запалення [А.А. Ярилин. Основы иммунологии. - М.: Медицина, 1999. - С. 156-168]. Спосіб обґрунтовано дослідженням вмісту лейкоцитів та лейкограми у 22 хворих зі вперше діагностованим туберкульозом легень (ВДТЛ); в 11 хворих із загостренням та рецидивом хвороби (РТЛ); у 26 хворих, що отримали курс хіміотерапії протитуберкульозними препаратами; у 20 хворих на негоспітальну пневмонію (НГП), та у 20 практично здорових осіб (контроль). Статистичний аналіз даних здійснювали за допомогою ППП SPSS, v.13, OS Windows XP. Достовірність відмінності показників між групами визначали з використанням тестів Мана-Уїтні та Колмогорова-Смірнова - непараметрична статистика для незв'язаних вибірок. Чутливість та специфічність значень показників знаходили за допомогою бінарної логістичної регресії з визначенням відношення правдоподібності (likelihood ratio): ймовірність того, що даний результат діагностичного тесту буде очікуватися в пацієнта із туберкульозом у порівнянні з імовірністю, що той же самий результат буде очікуватися в пацієнта без захворювання. Відношення правдоподібності показує у скільки разів вище (нижче) імовірність одержати даний результат тесту у хворих, ніж у здорових. Якщо відношення правдоподібності позитивного результату тесту дорівнює 1, то це означає, що ймовірність позитивного результату тесту у хворого така ж, як ймовірність позитивного результату тесту в здорового. Якщо відношення правдоподібності позитивного результату тесту дорівнює 5, то це означає, що ймовірність позитивного тесту у хворого в 5 разів вище, ніж вірогідність позитивного результату тесту в здорового. Достовірними вважали відмінності при Р