Препарат для пригнічення алергічних реакцій та неспецифічного запалення, спосіб його одержання і спосіб його використання

1. Застосування N-стеароїлетаноламіну (2-(Nоктадеканоїл)аміноетанолу) із загальною формулою: H C R (13) , де R - вуглеводневий ланцюг стеаринової кислоти (С18:0), як препарату для пригнічення алергічних реакцій та неспецифічного запалення, а саме для пригнічення алергічних реакцій сповільненого типу, насамперед, контактної гіперчутливості у відповідь на дію простих хімічних чинників, алергічні реакції негайного типу (анафілаксія), з метою фармакотерапії алергічних дерматитів різного генезу, неспецифічних запальних процесів, відторгнення алотрансплантантів, при опіках, а також для комплексної терапії захворювань, у патогенезі та лікувальних схемах яких можуть розвиватись алергічні реакції у людини та тварин. 2. Спосіб одержання N-стеароїлетаноламіну (2-(Nоктадеканоці)аміноетанолу), який відрізняється тим, що реакцію конденсації етаноламіну та стеаринової кислоти проводять при температурі 130°С протягом 60 хв. у відкритій ємності. 3. Спосіб застосування N-стеароїлетаноламіну (2(N-октадеканоїл)аміноетанолу), як препарату для пригнічення алергічних реакцій та неспецифічного запалення, який відрізняється тим, що препарат вводять в організм перорально, парентерально, трансдермально в дозах 0,5-65 мг на 1 кг маси тіла до або під час, або після ушкоджуючого впливу. C2 O 77278 N (11) CH2CH2 UA HO (19) (21) 20041008401 (22) 15.10.2004 (24) 15.11.2006 (46) 15.11.2006, Бюл. № 11, 2006 р. (72) Гула Надія Максимівна, Комісаренко Сергій Васильович, Чумак Анатолій Андрійович, Артамонов Михайло Вікторович, Жуков Олександр Дмитрович, Мегедь Олена Федорівна, Петрова Юлія Іванівна, Кіндрук Надія Леонідівна (73) ІНСТИТУТ БІОХІМІЇ ІМ. О.В.ПАЛЛАДІНА НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ НАУК УКРАЇНИ (56) UA, 20031213067, 15.07.2005 E.T. Roe , J.T.Scanlan et al. Fatty Acid Amides. I. Preparation of Amides of Oleic and the 9,10Dihydroxystearic acid//J.Am.Chem.Soc., 1949, 71, P. 2215-2218. RU, 2137755, 20.09.1999 US, 5 925 678, 20.07.1999 D.M. Lambert, S. Vandevoorde et al. The Palmitoylethanolamide Family: A New Class of AntiInflammatory Agents//Current Medicinal Chemistry.2002(9).- P. 663-674. US, 5 792 786, 11.08.1998 UA, 21191, 04.11.1997 US, 3 387 008, 04.06.1968 UA, 10083, 30.09.1996 В.І. Бабич. Характеристика перекисного окислення ліпідів тканин внутрішніх органів при анафілаксії за умов дії гіпо-гіпермагнітного поля.//Фізіологічний журнал.-1996(42).-№ 5-6.-С. 66-71. Влияние противовоспалительных средств и иммуностимуляторов на повышенную чувствительность замедленного типа.//Антибиотики и медицинская биотехнология. - 1987.-Т.XXXII.-№2. С.148-150. Маеда Х., Акаике Т. Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке//Биохимия. -1998. -63(7). С. 1007-1019. Hallivel B., Cutteridge J.M. Free radicals in biology and medicine / Oxford: Clarendon Press.-1986.-346 p. Berdyshev E.V., Schmid P.C. Cannabinoid-receptorindependent cell signalling by Nacylethanolamines.//Biochem. J.- 2001-360(Pt 1). P.67-75. 2 3 Винахід відноситься до біології та медицини і може бути застосований в людей та тварин, а саме як лікарський засіб N-стеароїлетаноламін (NCEA, 2-(N-октадеканоїл)-аміноетанол), торговельна марка - МЕСТАБ, здатний пригнічувати алергічні реакції сповільненого типу, насамперед, контактну гіперчутливість у відповідь на дію простих хімічних чинників, алергічні реакції негайного типу (анафілаксія), застосовується при фармакотерапії алергічних дерматитів різного генезу, неспецифічних запальних процесів, відторгненні аллотрансплантатів, при опіках, а також для комплексної терапії захворювань, у патогенезі та лікувальних схемах яких можуть розвиватись алергічні реакції. Відомий препарат "Супрастин" (Suprastin), який застосовується при алергічних захворюваннях, має антигістамінну та периферичну антихолінергічну активність. Недоліком застосування препарату є побічні явища: загальна слабкість, шлунково-кишкові розлади, сонливість, а також неможливість використання препарату хворим на глаукому, гіпертрофію передміхурової залози, виразку шлунка [1]. Відомий препарат "Фенкарол" (Phencarolum), застосовується для пригнічення та полегшення перебігу алергічних реакцій. Недоліком цього препарату є його протипоказання при застосуванні у хворих з патологіями серцево-судинної системи, шлунково - кишкового тракту (виразки шлунка та дванадцятипалої кишки), захворювань печінки, а також не призначають препарат жінкам при вагітності [1]. Відомо спосіб застосування сполук класу каннабіноїдів (алкалоїди маріхуани - тетрагідроканнабінол та каннабідіол), які, маючи антиоксидантні та нейропротекторні властивості, зменшують прояв запальних процесів [2]. Недоліком цього способу є те, що алкалоїди маріхуани належать до сполук, здатних викликати наркотичну залежність. Відомо спосіб застосування ендогенного ліганду каннабіноїдних рецепторів - анандаміду або Nарахідоноїлетаноламіну (N-(2-додекатетраеноїл)аміноетанолу), для пригнічення імунологічно опосередкованого запалення. На відміну від алкалоїду маріхуани - тетрагідроканнабінолу, Nарахідоноїлетаноламін має менший аддиктивний потенціал [3]. Недоліком даного способу є те, що N-арахідоноїлетаноламін є нестабільною сполукою, оскільки легко окислюється та втрачає свою фармакологічну активність. Найбільш близьким за технічним рішенням є винахід "N-ацильні похідні аміноспиртів як місцеві аутакоїди, що використовуються для лікування аутоімунних процесів". Даний винахід запропоновано для попередження та лікування патологій ссавців, включаючи нейрогенні набряки, викликані дегрануляцією тучних клітин. Недоліком даного прототипу є те, що N-ацильні похідні аміноспиртів рекомендовані для терапевтичного застосування лише у разі дегрануляції та проліферації тучних клітин, яка відбувається внаслідок травматичного, токсичного, дисметаболічного або інфекційного ушкодження периферичних нервів [4]. В основу винаходу поставлена задача знайти ефективний та дешевий препарат, що одержуєть 77278 4 ся з вітчизняної сировини, та має фізичну та хімічну стійкість у зовнішньому та внутрішньому середовищі; здатний пригнічувати алергічні реакції сповільненого та негайного типів, позитивно впливати на неспецифічні запальні процеси, опіки, алергічні дерматити. Крім того, здатний коригувати і компенсувати порушення ліпідного обміну клітин та тканин, зокрема стани, що супроводжуються накопиченням в тканинах сполук з високим атерогенним потенціалом - ефірів холестеролу та інгібувати вільнорадикальні процеси у клітинах та тканинах. Задача вирішується шляхом застосування гідроксиетиламіду жирної кислоти, а саме - N-CEA формули: де R - C17H35, вперше як препарату для пригнічення і лікування алергічних реакцій та неспецифічного запалення. Ця сполука здатна модифікувати та стабілізувати ліпідний склад клітинної мембрани, модулювати метаболізм, як за умов активації процесів пероксидного окиснення ліпідів, так і без неї, що і складає основу антиалергічних та протизапальних фармакотерапевтичних властивостей пропонованого препарату. N-CEA, - дрібнодисперсний кристалічний порошок білого кольору, масний на дотик, без специфічного запаху та смаку, розчинний в органічних розчинниках, нерозчинний у воді, не виділяє токсичних речовин і не створює вибухонебезпечних сумішей. Температура плавлення складає 98101°С. Запропонований фармакоактивний препарат може бути застосований у вигляді твердих, рідких та м'яких лікарських форм для внутрішнього та зовнішнього вживання. Спосіб застосування N-CEA, полягає у введенні до організму (перорально, парентерально, трансдермально) до, під час або після ушкоджуючого впливу. Відомі способи одержання N-CEA шляхом прямого синтезу з моноетаноламіну та стеаринової кислоти [5]. Спосіб одержання антиалергічного та протизапального препарату, що заявляється, базується на реакції конденсації етаноламіну та стеаринової жирної кислоти при температурі 130°С протягом 120хв. у відкритій ємності з наступною перекристалізацією з ацетону і сушкою при кімнатній температурі до встановлення постійної маси продукту. Спосіб дає можливість отримувати стабільну активну речовину з чітко заданими властивостями з відносно дешевої сировини, що має значні переваги перед заявленим способом. Спосіб одержання N-CEA подібний до описаного у винаході [5], але відрізняється тим, що реакцію конденсації етаноламіну та стеаринової жирної кислоти проводять при температурі 130°С 5 77278 6 протягом 120хв. у відкритій ємності без викорисстатей масою 15-20 грамів. За алерген слугувала тання атмосфери азоту. Крім того, зниження темпроста хімічна сполука - динітрохлорбензол ператури дає змогу отримати препарат з більшим (ДНХБ). Сенсибілізацію проводили нанесенням виходом, хоча і збільшує час реакції. однієї краплі 2% розчину ДНХБ в ацетоні на шкіру В колбу вносять 26,8г стеаринової кислоти та черевця миші. 5,0г етаноламіну, нагрівають протягом 60хв. при Водну суспензію N-CEA в дозі 0,5 або 50мг на температурі 130°С. Реакційну масу охолоджують, 1кг маси вводили перорально щодня, починаючи розчиняють у мінімальному об'ємі ацетону, нагрівід дня сенсибілізації до нанесення провокуючої ваючи його до температури 50°С і знову охолодози ДНХБ. Через 8 діб тварини отримували проджують одержаний розчин (для кристалізації). вокуючу дозу ДНХБ (по 1 краплі 0,5% розчину Осад відфільтровують, промивають невеликою ДНХБ в ацетоні на кожен бік правого вуха). Реаккількістю охолодженого ацетону. Продукт перевіцію оцінювали через 24 години. Під ефірним нарряють на чистоту методом тонкошарової хроматокозом мишей декапітували, відрізали обидві вушні графії, у разі необхідності кристалізацію повторюраковини по межі волосяного покриву, зважували і ють. Вихід продукту -12,7г (40%). вираховували процент збільшення маси дослідноПриклад 1 го вуха в порівнянні зі здоровим контралатеральВплив N-CEA на алергічну реакцію сповільненим, оцінюючи, таким чином, інтенсивність алергіного типу. чної реакції гіперчутливості сповільненого типу [6] Для досліду брали статевозрілих мишей обох (табл.1). Таблиця 1 Інтенсивність алергічної реакції гіперчутливості сповільненого типу при застосуванні N-CEA (M±m, n=11) № групи 1 2 3 Сенсибілізація, (ДНХБ, 2%-й N-CEA, мг на 1кг маси Інтенсивність реакції гіперчутливості спорозчин в ацетоні) тіла вільненого типу (%) + Контроль 26,52±5,36 + 0,5 24,94±4,47 + 50 12,86±3,08* * - зміни порівняно з контролем вірогідні, Р