Спосіб корекції алкогольних пошкоджень печінки

Реферат: Винахід належить до галузі медицини і стосується способу корекції алкогольних пошкоджень печінки, що включає введення суспензії наноалмазів, необов'язково водної. UA 99928 C2 (12) UA 99928 C2 UA 99928 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до медицини та фармації, а саме до засобів для комплексної корекції обмінних процесів при алкогольних гепатитах. Алкогольна хвороба печінки (АХП) становить значну медико-соціальну проблему. За поширеністю і соціальною значимістю вона посідає друге місце після захворювань печінки вірусної етіології [1, 6, 7]. Гострий алкогольний гепатит належить до найбільш тяжких форм алкогольної хвороби печінки, викликаної токсичним некрозом печінкових клітин внаслідок тривалого вживання великих доз алкоголю в період запою. Гострий алкогольний гепатит представляє загрозу життю пацієнта [1]. Для корекції обміну речовин при алкогольних гепатитах використовують як гепатопротекторні препарати так і біологічно-активні добавки (БАД) до їжі. Відомо ефективне застосування БАД, які містять плоди розторопші плямистої [1, 10]. Активні інгредієнти розторопші підвищують активність ферментних антиоксидантних систем клітини (супероксиддисмутази, каталази, глутатіонредуктази), пригнічують процеси фібротизації печінки, поліпшують синтез білків і регенерацію клітин печінки та біосинтетичні процеси в них. До недоліків цих засобів можна віднести повільне всмоктування в шлунково-кишковому тракті. Найбільш близьким за кількістю східних ознак та технічному результату до запропонованого є спосіб використання комплексної БАД - нутріклінз (виробник - New Spirit Naturals (США). Нутріклінз містить харчові волокна, які зв'язують і виводять із організму токсичні продукти обміну, радіонукліди, солі важких металів і т.п. [2]. До недоліків препарату нутріклінз слід віднести недостатню ефективність лікування, послаблюючу дію, а також високу ціну (35-40 у.о. за 1 пачку) [11]. Відомо використання препаратів наноалмазів як ліків, які забезпечували підвищення строку життя та резистентності тварин в онкології та радіології [5]. Але не було знайдено даних про ефективність використання суспензій наноалмазів, наприклад, водної (СНА) для лікування алкогольних пошкоджень печінки, однак виявлені авторами при дослідженнях наноалмазів їх антиоксидантні властивості та можливості їх використання як міцного сорбенту спонукали використати цей препарат як гепатопротектор. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу корекції алкогольних пошкоджень печінки за рахунок використання (застосування), суспензій наноалмазів, наприклад водної та підвищення ефективності лікування, скорочення його строку, покращення функціонального стану печінки та виведенню з організму токсичних речовин. Поставлена задача досягається тим, що у відомому способі корекції алкогольних пошкоджень печінки, що включає введення лікарських препаратів, згідно з винаходом, як лікарський засіб використовують суспензії наноалмазів, наприклад водну (СНА), з гепатозахисною та сорбентною дією. Наслідком застосування препаратів на основі наноалмазів є підвищення відсотку виживання та відсутність ускладнень, крім того, препарат вітчизняного виробництва має значно нижчу ціну. Винахід ілюструється прикладом. Приклад 1. Дослідження проведено на білих безпородних щурах - самцях вагою 150-180 г, які знаходились на стандартному раціоні в стандартних умовах віварію, а як об'єкт дослідження використовували СНА. Досліди по встановленню ефективності застосування СНА при алкогольних пошкодженнях печінки, проводились на моделі підгострого гепатиту у щурів [3], викликаного введенням тетрахлорметану та етанолу (ТЕГ). Гепатотоксини вводять за наступною схемою: 50 % олійний розчин тетрахлорметану підшкірно в дозі 0,4 мл/100 г маси; через 3 год. - внутрішньошлунково 40 % етанол в дозі 1,3 мл/100 г маси. Аналогічну процедуру повторюють протягом 4 діб. СНА вводили перорально через металевий зонд у дозі 1 мл 0,01 % водної суспензії наноалмазів (0,5 мг/кг) у лікувально-профілактичному режимі (тобто за 1 год. до введення гепатотоксичних отрут протягом усього періоду отруєння тварин та через 2 год. після неї) [3]. Як засіб порівняння був БАД - нутріклінз, який застосовували в дозі 3,5 мл/кг внутрішньошлунково в аналогічному режимі. СНА і нутріклінз вводили за 1 год. до введення гепатотоксичних отрут протягом усього періоду отруєння тварин та через 2 год. після неї. По закінченні терміну моделювання патологи проводили облік відсотку виживаності тварин, після чого їх забивали в умовах евтаназії під легким ефірним наркозом. Робили забір крові й органів для подальших біохімічних досліджень. Аналіз функціональних і біохімічних показників проводили через 72 год. після останнього введення гепатотоксичних сполук. 1 UA 99928 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Ефективність впливу досліджуваних речовин на функціональний стан печінки визначали за рівнем аланінамінотрансферази (АлАТ) і аспартатамінотрансферази (АсАТ) за методом S. Reitman и S. Francel [4]. У гомогенаті печінки оцінювали інтенсивність процесів вільнорадикального окислення (ВРО) за рівнем ТБК-активного продукту (ТБК-АП) за методом Стальної Т.Г. [9]. У гомогенатах печінки визначали вмісту глікогену і відновленого глутатіону (ВГ) [3]. Тривалість гексеналового сну (як критерій детоксикаційної функції печінки) вивчали при внутрішньочеревному введенні гексенала в дозі 40 мг на 1 кг маси тіла через 30 хв. після введення досліджуваних речовин [3]. Рівень ендогенної інтоксикації оцінювали, вивчаючи неспецифічну токсичність сироватки крові за вмістом молекул пептидів середньої маси (МСМ) [8]. Статистичну обробку отриманих результатів здійснено методами варіаційної статистики за допомогою стандартних пакетів програм Excel на персональному комп'ютері Pentium III. При порівнянні результатів між двома групами використовували параметричний т-критерій Стьюдента. Результати дослідів представлені на фіг. 1 - фіг. 3. Як видно з даних експерименту, патологія печінки, викликана введенням етанолу та ССl 4, характеризується активацією процесів цитолізу в 1,4 рази, вільнорадикального окислення (рівень ТБК-АП виріс в 1,6 рази) та різким зниженням активності антиоксидантной системи (рівень ВГ зменшився в 2,8 рази). При цьому спостерігається 30 % летальність дослідних тварин. Вочевидь, отримані результати обумовлені погіршенням детоксикаційних процесів у печінці, про що свідчить збільшення тривалості гексеналового сну в 2,6 раз та збільшення рівня молекул середньої маси в 1,8 раз (фіг. 2). Вплив СНА на стан детоксикаційної функції печінки при алкоголь-тертахлорметановому гепатиті у щурів наведено на (фіг. 1). Вплив СНА на рівень молекул середньої маси при алкоголь-тертахлорметановому гепатиті у щурів наведено на Фіг. 2. Також при гострому алкоголь - тетрахлорметановому гепатиті спостерігалось збідніння печінки тварин глікогеном в 1,97 рази в порівнянні з його вмістом у печінці інтактних тварин. Дані впливу СНА на рівень загального білку та глікогену печінки при алкогольтертахлорметановому гепатиті у щурів наведені на Фіг. 3. Рівень загального білку в сироватці крові нелікованих тварин вірогідно знизилося в 1,6 рази (фіг. 3). При застосуванні у лікувально-профілактичному режимі СПА встановлено наявність у досліджуваної речовини детоксикаційної, антиоксидантної та антицитолітичної активності. Використання СНА призвело до покращення функціонального стану дослідних тварин, про що свідчить 100% виживання експериментальних тварин. На фоні застосування СНА рівень ТБК-АП зменшився в 1,6 рази; АлАТ - 1,34 рази, відповідно; рівень ВГ збільшився в 1,7 рази. Тривалість гексеналового сну порівняно з нелікованим контролем зменшилась в 1,6 рази (фіг. 1), а рівень МСМ зменшився в 1,4 рази (фіг. 2), що свідчить про збереження детоксикаційних функцій печінки. При застосуванні нутріклінзу рівень ТБК-АП зменшився в 1,3 рази; АлАТ - 1,1 рази; рівень ВГ збільшився в 1,4 рази. Тривалість гексеналового сну порівняно з нелікованим контролем зменшилась в 1,3 рази; рівень МСМ зменшився в 1,2 рази (фіг. 1 та фіг. 2), а процент виживання тварин дорівнював 80 %. Введення тваринам досліджуваних речовин вірогідно нормалізувало білково-синтетичну й глікогенсинтетичну функції печінки, про що свідчить (фіг. 3) достовірне підвищення вмісту загального білка в сироватці крові й глікогену в тканині органа при використанні СНА в 1,3 та 1,34 рази, відповідно та при використанні нутріклінз - в 1,2 та 1,18 раз, відповідно. Порівняльний аналіз ефективності СНА і нутріклінзу показав, що СНА ефективніші нутріклінзу в середньому на 17 % . Таким чином, отримані результати свідчать про доцільність застосування СНА при алкогольних пошкодженнях печінки. Отже за своєю детоксикаційної та гепатозахисною дією, наприклад водна суспензія наноалмазів, в умовах алкогольного пошкодження печінки перевищує ефективність застосування нутріклінз в середньому на 15-17 %. Отримані результати дозволяють вважати доцільним застосування суспензій наноалмазів, наприклад водної у комплексі корекційних заходів при алкогольних пошкодженнях печінки та перспективними об'єктами для створення гепатозахисних засобів. Джерела інформації: 1. Бабак О.Я. Алкогольная болезнь печени: научные достижения и клинические перспективы // Сучасна гастроентерологія. - 2006. - № 6. - С. 4-9. 2. Дадали В.А. Биохимические механизмы онкопротекторного действия биологически активных добавок // Материалы Международной научно-практической медицинской 2 UA 99928 C2 5 10 15 20 25 конференции корпорации «Витамакс - XXI век» «Комплексная и синдромальная терапия нозологических форм с применением системных продуктов здоровья». Москва-Киев, 17-19 октября 2002 г. - М., 2002. - Часть I. - С. 4-11. 3. Доклінічні дослідження лікарських засобів: Методичні рекомендації /За ред.: член-кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіценна, 2001. - 528 с. 4. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. // Под ред. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина, 1987. 368 с.5. Мамотюк СМ., Русакова В.А., Узленкова Н.Є., Ревенкова СІ., Ненюкова О.В., Іващенко В.Н., Циганюк Р.Ю., Бородін В.Г. Дослідження радіопротекторних властивостей наноалмазів в експерименті // український радіологічний журнал. - 2009. - № 17. - С 65-71. 5. Палий И.Г. Роль энтеросорбции в лечении заболеваний печени // Ліки України. - 2008. №. 4 (120) - С. 95-97. 6. Подымова С.Д. Механизмы алкогольных повреждений печени и их коррекция эссенциальными фосфолипидами // Фарматека. - 2005. - № 14. - С. 25-31. 7. Первушин Ю.В., Бондар Т.П. Лабораторные методы диагностики синдрома эндогенной интоксикации: Метод, рекомендации. Ставрополь, 1993. - 86 с. 8. Стальная И.Д. Метод определения диеновой конъюгации высших жирных кислот // Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С.63-64. 9. Тищенко О.В. Дія розмелених плодів розторопші плямистої на функціональний стан печінки та підшлункової залози при радіаційному і токсичному ураженні 2003 год. Автореф. дис... канд. мед. наук: 03.00.01 // АМН України. Наук, центр радіац. медицини. - К., 2003. - 20 с. 10. Щевелев Т.С., Ципенюк А.В. Анализ причин малоэффективного применения биологически активных пищевых добавок корпорации ВИТАМАКС // «Системные продукты здоровья корпорации ВИТАМАКС и их использование с профилактическими и лечебными целями при наиболее распространенных заболеваниях». Материалы второй Международной медицинской конференции корпорации ВИТАМАКС. Москва, 29-30 апреля 1999 г. - М.,1999. - С. 65-66. 11. Но, Dean (Ed.) Nanodiamonds. Applications in Biology and Nanoscale Medicine. 2009 Springer . - 286 p. 30 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 35 Спосіб корекції алкогольних пошкоджень печінки, що включає введення лікарських препаратів, який відрізняється тим, що як препарат використовують суспензію наноалмазів, необов'язково водну, з гепатозахисною та сорбентною дією. 3 UA 99928 C2 Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП ―Український інститут промислової власності‖, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4