Застосування складу для місцевого нанесення, що містить екстракт рослини hedychium spicatum, проти інфекційної грибкової хвороби шкіри

1. Застосування складу для місцевого нанесення для лікування інфекційної грибкової хвороби шкіри, причому вказаний склад містить ефективну кількість екстракту рослини Hedychium spicatum і фармацевтично прийнятний носій. 2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що вказаний екстракт одержують з кореневищ рослини Hedychium spicatum. 3. Застосування за п. 1 або п. 2, яке відрізняється тим, що екстракт у вказаному складі передбачений у кількості 0,1-20мас. %. 4. Застосування за п. 3, яке відрізняється тим, що екстракт у вказаному складі передбачений у кількості 2,5-10мас. %. 5. Застосування за п. 1 або п. 2, яке відрізняється тим, що вказаний екстракт містить ефективну кількість діючої речовини, етил-р-метоксицинамат. 6. Застосування за п. 5, яке відрізняється тим, що етил-р-метоксицинамат присутній у кількості 410мас. %. C2 2 (19) 1 3 85782 інфекційних грибкових хвороб шкіри, в якій використовується екстракт, одержаний з рослини Hedychium spicatum, який містить як основну діючу речовину етил-р-метоксицинамат, факультативно, у сполученні з іншими біологічно активними речовинами, такими, як інші протидерматофіти й інгібітори меланогенезу. Тіло зазвичай служить господарем самим різноманітним бактеріям і грибкам. Більшість часу підтримується баланс між тілом як господарем і мікроорганізмами. Іноді, однак, виникають умови, які дозволяють цим мікроорганізмам переважити цей баланс, спричиняючи при цьому інфекційне захворювання. Мільйони людей в усьому світі піддаються діянню поверхневих грибкових інфекцій, якими є найпоширеніші хвороби шкіри. Ці інфекції, які мають місце як у здорових, так й у імунологічно ризикових (що мають недостатній імунітет внаслідок імунодефіцитного захворювання або дії імуносупресорів) осіб, викликаються дерматофітами, дріжджами й недерматофітною плісенню. Деякі поверхневі грибкові інфекції шкіри викликаються дерматофітами, які відносяться до родів Trichophynon (патогенні гриби - збудники дерматофитозів), Microsporum (патогенні гриби - збудники дерматомікозів) і Epidermophyton (паразитичні гриби, не здатні уражати волосяні фолікули). Ці схожі на плісень гриби добре розвиваються у теплих, вологи х місцях, добре розповсюджуючись на мертвих тканинах волосся, нігтів і зовнішніх шарів шкіри. До цих інфекційних хвороб відносяться дерматомікоз волосистої частини голови - грибкова інфекція шкіри голови, яка може спричинити випадання волосся; дерматомікоз бороди й вусів - грибкова інфекція бороди й вусів; дерматомікоз гладкої шкіри - грибкова інфекція шкіри, іншої, ніж борода, вуса, пах, р уки або ноги; паховий дерматомікоз - грибкова інфекція паху й промежини; епідермофітія стоп (ступень) - грибкова інфекція ніг, відома як стопа атлета; дерматомікоз рук - грибкова інфекція рук, й епідермофітія нігтів - грибкова інфекція нігтів. Зазначені інфекції можуть спричиняти ураження, які можуть свербіти. Можуть виникати глибокі запальні вузли. Після лікування можуть залишатися шрами на шкірі, призводячи до гіпер- та (або) гіпопігментації. Ці інфекційні хвороби є заразними і можуть передаватися через безпосередній контакт або через контакт з одежею, з поверхонь душових і басейнів, і навіть від кімнатних тварин. Розрахунковий ризик заразитися інфекцією дерматофіту протягом життя складає 10-20 відсотків. Розпізнавання й відповідне лікування цих інфекційних хвороб зменшує як захворюваність, так й дискомфорт і знижує вірогідність передачі. На разі для лікування використовують протигрибкові засоби, такі, як толнафтат, гідрохлорид тербінафіну, гризеофульвін, і імідазоли, такі, як кетоконазол, нітрат міконазола і хлортримазол. Гризеофульвін використовують для системної терапії. Для боротьби з запаленням використовують стероїди разом із протигрибковими засобами. Звичайний режим лікування із використанням цих протигрибкових засобів потребує лікування двічі або тричі на день 4 протягом принаймні 10-14 днів, а для деяких лікарських засобів - до чотирьох тижнів. Можливо, що гідрохлорид тербінафіну у таблетках доведеться приймати протягом тривалого часу, можливо, протягом кількох місяців. Звичайне лікування полягає у нанесенні місцевого протигрибкового засобу протягом двох тижнів після загоєння шкіри, щоб остаточно знищити усі спори грибів, що залишилися. Однак місцеве нанесення не усуває спричинені дерматофітозом запалення й свербіж шкіри. Інфекція часто виникає повторно, і для деяких пацієнтів, наприклад, пацієнтів, хворих на діабет або з циркулярними проблемами, інфекції грибкових хвороб шкіри та їх лікування можуть виявитися вельми серйозними. Нинішня методика лікування є коштовною і має поширені побічні ефекти, такі, як гепатотоксичність, нудота, діарея й імпотенція. Тривале використання і неправильне використання цих лікарських засобів викличе розвинення у мікроорганізмів резистентності до них. Способи зменшення побічних ефектів лікування включають використання трав'яних композицій. Трави давно відомі й використовуються в усьому світі для лікування багатьох станів, включаючи стани шкіри, і є принаймні деякі свідчення, що трав'яні засоби можуть спричиняти менш шкідливі побічні ефекти, ніж відповідні синтетичні лікарські засоби. Але навіть при застосуванні трав'яних засобів при лікуванні медичних станів доводиться наражатися на численні труднощі. Один трав'яний засіб може містити числення активні й іноді конфліктуючі компоненти. Трав'яні засоби, такі, як екстракт чорного горіху, який використовується для лікування стопи атлета, пов'язаних грибкових інфекцій і карцином, а також для зниження артеріального тиску й холестерину, може бути токсичним. Додаткові потенційні труднощі виникають у зв'язку із змінністю концентрації й ефективності активних компонентів від рослини до рослини. У випадку трав'яних композицій ці труднощі значно зростають. Комбінації спричиняють можливість синергічних ефектів між компонентами у різних трав'яних засобах. Хоча це має переваги, можливе й збільшення труднощів, пов'язаних з прогнозуванням й аналізом побічних ефектів. Отже, важливо з'ясувати ефекти / побічні ефекти екстракту лікарських трав шля хом встановлення присутності й характеризації активної діючої речовини. За наявною інформацією, багато лікарських трав справляють значні впливи на хвороби шкіри. Трави цієї групи включають, наприклад, Angelicae pubescentis Radix для лікування псоріазу. Трави, традиційно відомі або використовувані для лікування стопи атлета, включають, зокрема, чайне дерево, часник, гідрастис і різні частини дерева чорного горіха, яке відоме як токсичне. Відомо, що й комбінації лікарських трав справляють значні впливи на хвороби шкіри. Наприклад, в одному способі лікування інфекційних грибкових хвороб шкіри трав'яними засобами використовують екстракти з алое деревоподібного, кореню цикорію, котовнику кошачого, звіробою і вітаміни А й Ε в основі для крему. Це лікування 5 85782 рекомендується 3-4 рази на день протягом 2-3 днів після загоєння усіх уражень. У патенті США №6254897 описується композиція, ефективна проти інфекційних грибкових хвороб шкіри, в якій використовуються натуральні речовини, одержані зі сполучення Angelicae pubescentis Radix, Notopterygium Radix і Haliotis diversicolor Reeve. Недоліками цієї композиції є такі: а) Вона представляє собою суміш трьох або більше рослинних екстрактів. Отже, ці рослини комусь необхідно збирати або розводити. б) У традиційній медицині ці рослини не описуються як такі, що мають активність проти інфекційних грибкових хвороб шкіри, отже, можуть знадобитися детальні дослідження, щоб встановити їх безпечність. в) Патент не містить інформацію про активну діючу речовину, присутню у рослинному екстракті / екстрактах, який „відповідає" за активність проти інфекційних грибкових хвороб шкіри. г) Патент не містить інформацію про синергічний ефект використовуваних рослинних екстрактів. Отже, є потреба розробити нову композицію, спроможну здолати вищезазначені проблеми, пов'язані із синтетичними препаратами або екстрактами лікарських трав, використовуваними на разі, для лікування інфекційних грибкових хвороб шкіри. Hedychium spicatum - це рослина, що природно росте у субтропічних регіонах, таких, як Індія і Китай, де вона використовується як традиційний лікарський засіб. Крім того, її вирощують у різних частинах світу заради її духмяного кореневища. Традиційні показання для використання Hedychium spicatum включають шлунковий засіб , засіб проти диспепсії, заспокоюючий засіб, гіркий тонізуючий засіб, порушення печінки, засіб, сприяючий росту волосся, антибактеріальний, протигрибковий, протизапальний і протималярійний засіб (патентна публікація США №20020155138). Однією з хімічних складових, присутніх у Hedychium spicatum, є етилр-метоксицинамат, про який повідомляється, що він є протидерматофітним (Lloydia, 39(4), 218-222, (1976)). Немає, однак, ніякої інформації про будь-яку композицію для лікування дерматофітів, що містить Hedychium spicatum. Для того щоб здолати проблеми побічних ефектів нинішньої методики лікування і зменшити вартість лікування, пропонується нова трав'яна композиція, яка має протидерматофітну дію, ефективна проти інфекційних грибкових хвороб шкіри і проти реакцій у вигляді свербежу й запалення за таких інфекційних станів, в якій використовується екстракт, одержаний з рослини Hedychium spicatum, який містить як основну діючу речовину е фективну кількість етил-рметоксицинамату, факультативно, у сполученні з іншими біологічно активними речовинами, такими, як інші протидерматофіти й інгібітор меланогенезу. Крім того, композиція має природні дезодоруючі властивості. Відповідно, метою цього винаходу є створення трав'яної композиції для лікування інфекційних грибкових хвороб шкіри, яка містить екстракт 6 Hedychium spicatum й ефективну кількість діючої речовини етил-р-метоксицинамату. Ще однією метою цього винаходу є створення способів приготування й використання композиції для лікування інфекційних грибкових хвороб шкіри, яка містить безпечну й ефективну кількість Hedychium spicatum. Ще однією метою цього винаходу є доставка унікальної трав'яної композиції з інгібуванням фактору альфа некрозу пухлини (TNF-α), що зменшить свербіж і запалення шкіри, пов'язані з інфекціями грибкових хвороб шкіри. Ще однією метою цього винаходу є створення способу використання цих продуктів поодинці або у сполученні з інгібіторами меланогенезу для боротьби з післяінфекційними шрамами на шкірі. Ще однією метою цього винаходу є створення композиції для швидкого й ефективного лікування інфекційних грибкових хвороб шкіри. Інші цілі й подальший обсяг застосовності цього винаходу стануть очевидними з подальшого докладного опису. Втім, слід розуміти, що докладний опис і конкретні приклади, хоча й вказують на варіанти здійснення винаходу, наведені лише для ілюстрації, оскільки фахівцям будуть очевидними різні зміни й модифікації у межах сутності й об'єму винаходу. Фахівець у даній галузі може, ґрунтуючись на наведеному описі, використовувати цей винахід у найповнішій мірі. Наступні конкретні варіанти здійснення мають тлумачитися лише як ілюстративні без обмеження об'єму цього винаходу. За відсутності іншого визначення, усі технічні й наукові терміни, що вживаються у цьому описі, мають те саме значення, яке вони зазвичай мають у галузі, до якої цей винахід відноситься. Термін „місцеве (або топічне) застосування", що вживається у цьому описі, означає безпосереднє накладання на зовнішню шкіру або розмазування на ній, наприклад, руками або аплікатором, скажімо, салфеткою. Термін „безпечна й ефективна кількість", що вживається у цьому описі, означає кількість сполуки або композиції (наприклад, екстракту Hedychium spicatum), достатню, щоб достовірно викликати позитивну модифікацію у стані, що регулюється або лікується, але достатньо низьку, щоб запобігти серйозним побічним ефектам (при розумному співвідношенні між вигодою і ризиком) в обсязі обгрунтованого медичного судження. Безпечна й ефективна кількість сполуки або композиції буде різною залежно від конкретного стану, що лікуватиметься, віку й фізичного стану кінцевого користувача, важності стану, що лікуватиметься / запобігатиметься, тривалості лікування, характеру суп утньої терапії, конкретної використовуваної сполуки або композиції, конкретного використовуваного косметично прийнятного носія і схожих факторів. За відсутності іншого застереження, усі відсотки відображають масову частку Термін „екстракт Hedychium spicatum", згадуваний у цьому описі, означає суміш сполук, присутніх у рослині Hedychium spicatum. Ці сполуки можна екстрагувати з висушеного кореневища цієї рослини добре відомими способами (наприклад, з використанням 7 85782 органічних розчинників, наприклад, нижчі спирти, алкілові складні ефіри, алкілові прості ефіри, алкілкетони, хлороформ, нафтовий простий ефір, гексан, та (або) неорганічних розчинників, наприклад, вода). В одному варіанті здійснення екстракт Hedychium spicatum містить лише гідрофобні сполуки (наприклад, ізольовані з використанням гідрофобного розчинника, такого, як хлороформ, нафтовий простий ефір, гексан). Однією з вказаних гідрофобних сполук є діюча речовина етил-рметоксицинамат. Екстракт переважно містить ефективну кількість (4-10%) етил-рметоксицинамату, яку можна оцінити, користуючись звичайними методами кількісного визначення, наприклад, високоефективна тонкошарова хроматографія або високоефективна рідинна хроматографія. Цей екстракт потім використовують для приготування місцевих препаратів, що містять 0,120мас. % екстракту кореневища, переважно, приблизно 2,5-10мас. %, який ретельно вмішують у звичайну основу, про що докладніше йтиметься нижче. Слід зазначити, що для то го щоб досягти бажаних результатів, для більшості цільових станів достатнім є екстракт кореневища, що містить 410мас. % етил-р-метоксицинамату, переважно, 68мас. %. Місцеві препарати, що використовується за цим винаходом, включають склади, підходящі для місцевого нанесення на шкіру. Композиції можна готувати у вигляді самих різноманітних видів продукту, включаючи серед інших лосьйони, креми, гелі, олівці, аерозолі, мазі, рідкі очищувальні склади й тверді мила, шампуні, пасти, муси, салфетки, бляшки, пов'язки на рани й лейкопластирні пов'язки, гідрогелі, плівки та косметичні засоби. При приготування остаточної композиції можна використовувати кілька традиційних інгредієнтів, наприклад, воду; ланолін; вазелін; гліцерин; тригліцеріди жирних кислот; поліетиленгліколі; оксиетильовані жирні спирти; складні ефіри, такі, як ізопропілпальмінат; міристат і стеарат; силіконові масла; олеїловий олеат і бутилстеарат; тваринні, рослинні й мінеральні масла; жирні спирти; моностеарат гліцерину й органічні й мінеральні парафіни. Ці інгредієнти зазвичай використовуються у кількості приблизно 10-97мас. % загального складу і можуть бути одно- або багатофазовою системою. Одним з продуктів, що можна приготувати, є крем. Крем типово містить приблизно 5-50% (наприклад, приблизно 10-20%) зм'якшувача (зм'якшувачів) і приблизно 45-85% (наприклад, приблизно 50-75%) води. Іншим видом продукту, що можна приготувати, є мазь. Мазь може містити просту основу з тваринних або рослинних масел або напівтвердих вуглеводнів. Крім того, мазі можуть містити абсорбційні основи, які абсорбують воду з утворенням емульсій. Мазь може містити приблизно 2-60% зм'якшувача (зм'якшувачів) плюс приблизно 2-60% загусника (загусників). Крім того, пропоновані композиції можна готувати у вигляді твердого складу (наприклад, склад у вигляді олівця на основі парафіну або куска ми 8 ла). За іншим варіантом здійснення, для одержання синергічного ефекту місцева композиція на додаток до екстракту Hedychium spicatum далі містить ще один рослинний екстракт, що проявляє протидерматофітну активність. Рослина може вибиратися з групи рослин, яка складається з Curcuma zedoaria, Kaempferia galanga, Angelicae pubescentis Radix, Notopterygium Radix і Haliotis diversicolor Reeve для екстрагування. За ще одним варіантом здійснення, для одержання синергічного ефекту місцева композиція на додаток до екстракту Hedychium spicatum далі містить ще одну синтетичну сполук у, що проявляє протидерматофітну активність. Синтетичні сполуки можна вибирати з протигрибкових засобів, таких, як гризеофульвін, толнафтат і гідрохлорид тербінафіну, і імідазолів, таких, як нітрат міконазола і хлортримазол. За ще одним варіантом здійснення, для одержання синергічного ефекту місцева композиція на додаток до екстракту Hedychium spicatum далі містить інші природні інгібітори меланогенезу, які можуть забезпечити бездефектну шкіру після інфекції. Природний інгібітор меланогенезу може вибиратися з лакриці, глабрадину, глабрену, арбутину, курку міну, елагової кислоти, екстракту гранату. Пропоновані композиції підходять для використання при лікуванні як гострих, так і хронічних форм інфекційних грибкових хвороб шкіри, зокрема, інфекційних хвороб, викликаних родами грибів Trichophynon, Microsporum і Epidermophyton у здорових й імунологічно ризикових людей. Пропоновані композиції мають додаткові переваги: а) протизапальна активність екстракту і діючої речовини етил-р-метоксицинамату, завдяки якій лікуються як запалення, так й свербіж, пов'язані з інфекціями грибкових хвороб шкіри; б) природна дезодоруюча властивість екстракту, яка зменшить неприємний запах, пов'язаний з певними інфекціями грибкових хвороб шкіри. Приклад 1 Приготування екстракту Hedychium spicatum Висушене кореневище Hedychium spicatum (100г) перетворили на порошок. Перетворений на порошок матеріал піддали екстрагуванню із використанням хлороформу (500мл) шляхом дефлегмації при температурі +60°С протягом 3 годин. Екстракт відфільтрували у вакуумі. Цей процес екстрагування повторили ще двічі. Екстракти поєднали і концентрували для видалення розчинника. Вихід: 2,5г. Вміст етил-р-метоксицинамату в екстракті (визначений методом високоефективної тонкошарової хроматографії): 6,5мас. %. Приклад 2 Виділення етил-р-метоксицинамату Перетворене на порошок кореневище Hedychium spicatum (5кг) піддали екстрагуванню із використанням гексану при перемішуванні при температурі +60°С протягом 1 години. Екстракт відфільтрували у вакуумі. Цей процес екстрагування повторили ще двічі. Об'єднані фільтрати 9 85782 випарили насухо і одержали сирий екстракт. Вихід: 134г. Сирий екстракт (100г) очистили колонковою хроматографією (силікагель, нафтовий простий ефір) і одержали етил-р-метоксицинамат. Остаточну очистку здійснили шляхом кристалізації із використанням нафтового простого ефіру. Вихід: 3,5г; точка плавлення +48-50°С; 1H ЯМР (ядерний магнітний резонанс) (CDCl3, 300МГц): δ 1,33 (t, 3H, CH3), 3,83 (s, 3Н, ОСН3), 4,26 (q, 2H, СН2), 6,28 (s, 1Н), 6.33 (s, 1Н), 6,88 (т, 3Н), 7,46 (d, 1Н); MS : т/е (EI) 206 (М+). Приклад 3 Проти-TNF-a активність екстракту Hedychium spicatum і лідерної молекули. Кількісне визначення для скринінгу у мононуклеарних (одноядерних) клітинах людської периферійної крові (hPBMCs). Виробництво TNF-α ліпополісахаридом (ЛПС) у hPBMC вимірили методом, описаним Янкськи Л. та іншими (Jansky, L. et αϊ) (Physiol. Res. 52, 593598, (2003)). Кров брали у здорових донорів у пробірки вакуумної тари, покриті етилендіамінтетраацетатом (ЕДТА) калію (Vacutest Plast), і розводили 1:2 фосфатно-буферним розчином (ФБР) Дульбекко (виробник - компанія Sigma Aldrich, м. СентЛуїс, штат Міссурі). Мононуклеарні клітини периферійної крові зібрали з людської крові й суспендували у середовищі культури RPMI 1640 (виробник - компанія Gibco BRL, м. Паслі, Сполучене Королівство), яке містило 10% фетальної бичачої сироватки (ФБС) (виробник - компанія Нусіопе, штат Юта, США), 100 одиниць/мл пеніциліну (ви 10 робник - компанія Sigma Chemical Co., м. СентЛуїс, шта т Міссурі) і 100мкг/мл стрептоміцину (виробник -компанія Sigma Chemical Co., м. СентЛуїс, штат Міссурі). Концентрацію клітин відкоригували до 1x106 клітин/мл. Суспензію клітин (100мкл) додали у лунки 96-лункового культурального планшета. Після посіву клітин до клітин додали 79мкл культурального середовища й 1мкл восьми різних концентрацій дослідницьких зразків (10-100мкг/мл), розчинених у диметилсульфоксиді (ДМСО, виробник - компанія Sigma, штат Міссурі, США). Остаточн у концентрацію ДМСО відкоригували до 0,5-1%. Як стандартну сполуку використовували роліпрам (100мкМ). Планшети інкубували протягом 30 хвилин при температурі +37°С в атмосфері 5%-го СО2. Насамкінець, додали 20мкл (10мкг/мл) на лунку ЛПС Escherichia coli 0127:В8, виробник - компанія Sigma Chemical Co., м. СентЛуїс, штат Міссурі) для одержання остаточної концентрації 2мкг/мл. Планшети інкубували при температурі +37°С протягом 5 годин в атмосфері 5%го СО2. Надосадкові рідини зібрали й піддали аналізу на відсоткове пригнічення TNF-α шляхом імуносорбентного аналізу із застосуванням фіксованих ферментів відповідно до інструкції виробника (виробник - компанія R&D Systems, шта т Міннесота) або біоаналізом на цитотоксичність у кліток L929. Результати. Пригнічення TNF-α екстрактом Hedychium spicatum і лідерною молекулою (етил-рметоксицинамат) у поліморфних ядерних клітинах людської крові наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Пригнічення TNF-a у поліморфних ядерних клітинах людської крові Зразок Екстракт прикладу 1 Екстракт прикладу 1 Етил-р-метоксицинамат Етил-р-метоксицинамат Концентрація (мкг/мл) 10 100 10 100 Висновок. Екстракт Hedychium spicatum і лідернамолекула (етил-р-метоксицинамат) пригнічують активність TNF-альфа. Відсоткове пригнічення TNF-a 5 96 0 80 Результати. Цитотоксичність екстракту Hedychium spicatum і лідерної молекули (етил-рметоксицинамат) у лініях кліток L929 наведена у таблиці 2. Таблиця 2 Цитотоксичність у лініях кліток L929 Зразок Екстракт прикладу 1 Екстракт прикладу 1 Етил-р-метоксицинамат Етил-р-метоксицинамат Висновок. Екстракт Hedychium spicatum і лідерної молекули (етил-р-метоксицинамат) проявляють низьку цитотоксичність при вимірюваннях лініях кліток L929. Приклад 4 Концентрація (мкг/мл) 10 100 10 100 3,5год. 00 03 20 12 24год. 05 14 27 02 Приготування складу мазі Загальна процедура Зважують і переносять усі інгредієнти 01-05 (див. таблицю 3) у заданій кількості у підходящу судину. Інгредієнт плавлять, використовуючи во 11 85782 дяну баню і добре перемішують. У вищезазначену суміш додають задану кількість екстракту Hedychium spicatum прикладу 1 і добре перемішують у гомогенізаторі. Вміст рівномірно охолоджують при перемішуванні до одержання мазі. 12 Результати. Склади, що містять 2.5, 5 і 10% екстракту Hedychium spicatum, наведені у таблиці 3. Таблиця 3 Склад мазі Hedychium spicatum № 01 02 03 04 05 06 ІНГРЕДІЄНТ Мазь І, мас.% Мазь II, мас. % 5,00 13,50 9,00 50,00 12,50 10,00 100,00 5,00 9,50 9,50 52,00 19,00 5,00 100,00 Білий бджолиний віск Твердий парафін Мікрокристалічний віск Білий м'я кий парафін Світлий рідкий вазелін Екстракт прикладу 1 Разом Приклад 5 Приготування складу крему Загальна процедура Зважують і переносять інгредієнти 01, 02, 03 й 05 (див. таблицю 4) у заданій кількості відповідно до розміру партії у підходящу судину. Інгредієнт плавлять, використовуючи водяну баню і добре перемішують. У вищезазначену суміш додають Мазь III, мас. % 4,50 9,50 9,50 55,00 19,00 2,50 100,00 задану кількість інгредієнту 07 (екстракту Hedychium spicatum прикладу 1) і добре перемішують. Зважують і розчинюють інгредієнт 04 в інгредієнті 06 і додають у вищезазначену суміш і добре перемішують до одержання крему. Результати. Склади, що містять 2.5, 5 і 10% екстракту Hedychium spicatum, наведені у таблиці 4. Таблиця 4 Склад крему Hedychium spicatum № 01 02 03 04 05 06 07 ІНГРЕДІЄНТ Білий бджолиний віск Світлий рідкий вазелін Цетостеариловий спирт Лаурилсульфат натрію Феноксиетанол Вода Екстракт прикладу 1 Разом Мазь І, мас. % 18,00 7,20 9,72 1,08 0,90 53,10 10,00 100,00 Приклад 6 Протидерматофітна активність складів Процедура аналізу in vitro Організми: Trichophynon mentagrophytes та Microsporum gypseum. Приготування інокуляту (посівного матеріалу) Культури вирощували на скошеному агаріагарі PDA при температурі +28°С протягом 7 днів. Ріст покрили стерильним соляним розчином с зіскребли, щоб отримати суспензію росту. Результуючу суміш конідій або спорангіоспор і тіпальних фрагментів перенесли у стерильну пробірку. Важким часткам дали осісти, а верхню однорідну суспензію перенесли в іншу пробірку. Ці суспензії відкоригували до оптичної щільності у межах 0,000,11 (коефіцієнт пропускання 80-82%), використовуючи спектрофотометр. Ці маточні суспензії далі розвели 1:10 соляним розчином для одержання дослідного інокуляту 1x103 - 1 x105 куо/мл). Приготування зразків Мазь II, мас. % 17,27 6,91 9,33 1,04 0,86 59,59 5,00 100,00 Мазь III, мас. % 17,73 7,09 9,57 1,06 0,89 61,16 2,50 100,00 Мазь і крем. У демінералізованій воді +0,01 Tween 20 приготували маточний розчин 100 мг/мл мазі й крему із зразків 4 і 5. Розрахункову кількість маточного розчину додали у 20 мл середовища плавленого агару Сабуро й розлили по чашкам Петрі, щоб одержати кілька послідовних двократних розведень екстракту у цьому середовищі. Під час первісного дослідження для обох складів використовували п'ять концентрацій 100, 50, 25, 10 і 5% мг/мл. Повторні дослідження проводили із використанням нижчих концентрацій обох складів: 5, 1, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2 і 0,1. Екстракт прикладу 1 і етил-р-метоксицинамат Вищеописаним способом приготували розведення екстракту з концентрацією 0,01-0,10мг/мл. До досліджень включили контрольний планшет росту без будь-якого екстракту або складу. Як стандарти для порівняння використовували зразки, що є у продажу, кетоконазолу (2%) концен 13 85782 трацією 0,5мг/мл і толнафтату. (1%) концентрацією 0,05мг/мл. Кількісне визначення Суспензії культур, приготовлені вищеописаним способом, нанесли мазками у кількості 10мкл на отверділі планшети. Мазки висушили при кімнатній температурі, після чого планшети інкубували при температурі +28°С протягом 48 годин. 14 Критерії кінцевої точки МПК (мінімальну пригнічуючи концентрацію) визначали як найнижчу концентрацію екстракту або складу, при якій не спостерігається видимий ріст або яка спричиняє майже повне пригнічення росту на планшетах. Результати наведені у таблиці 5. Таблиця 5 Протидерматофітна активність складів аналізу in vitro № 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Зразок МПК (мг/мл) Т. mentagrophytes 1 5 5 0,5 1 5 0,04 0,03 0,3 0,05 Мазь І* Мазь II* Мазь III* Кремі** Крем II** Крем III** Екстракт прикладу 1 Етил-р-метоксицинамат Кетоконазол (2%)* * * Толнафтат (1%)* * * Μ. gypseum 1 5 5 0,5 1 5 0,04 0,03 0,3 0,05 * прикладу 4 ** прикладу 5 *** Місцевий протидерматофітний препарат Висновки: 1. Склади крему й мазі, що містять екстракт Hedychium spicatum, проявляють протидерматофітну активність. 2. Крем проявляє кращу протидерматофітну активність у порівнянні до мазі. 3. Крем, що містить 10% екстракту Hedychium spicatum, проявляє протидерматофітну активність, порівняну зі зразком, що є у продажу, місцевого Комп’ютерна в ерстка Л. Купенко протидерматофітного препарату, що містить кетоконазол (2%). Основні переваги цього винаходу: 1. Склад буде ефективним для зменшення свербежу і запаленні, пов'язаних з інфекцією грибкових хвороб шкіри. 2. Склад матиме природну дезодоруючу властивість, що є переважним при лікуванні інфекційної грибкової хвороби шкіри з неприємним запахом. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601