9-(4′-метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридин, що проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність

Реферат: 9-(4'-Метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридин, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. що проявляє протимікробну, UA 87299 U (12) UA 87299 U UA 87299 U 5 10 15 Корисна модель належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема, до синтезу 9(4'-метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридин, який проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Пошук нових засобів з комплексною фармакологічною дією є актуальною проблемою сучасної медицини. Відомий цілий ряд лікарських засобів синтетичного походження, кожен з яких має свою домінуючу дію: етакридину лактат (бактеріостатична дія), фурацилін (протигрибкова дія), оксафенамід (жовчогінна дія), вольтарен (протизапальна дія) [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Μ.: ООО "Издательство Новая Волна", 2005. - 1200 с: ил. С. 951,852, 913, 170]. До недоліків зазначених засобів можна віднести, зокрема, наявність у тій чи іншій мірі негативної побічної дії. У комплексному лікуванні виникає необхідність призначення хворому одночасно декількох лікарських засобів з моноспрямованою фармацевтичною дією, внаслідок чого загальна побічна дія підсилюється. Як найближчий аналог вибраний 4-метил-5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридин загальної формули: CH3 NH N NO2 20 25 CH3 , що виявляє протимікробну та жовчогінну активність [патент України № 46181, МПК С 07 D 219/06, 219/10, А 61 К 31/435. Заявлено 02.08.1988. Опубліковано 15.05.2002. Бюл. № 5]. Сполука за найближчим аналогом проявляє протимікробну та жовчогінну дію, проте діапазон та ступінь фармакологічної активності може бути реально підвищений. В основу корисної моделі поставлене задача, що полягає у створенні нової хімічної сполуки, що проявляє високу протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Поставлена задача вирішується шляхом синтезу нової індивідуальної хімічної сполуки 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітро-акридин формули: NHN=CH OCH3 Cl N Cl 30 35 NO2 , який проявляє протимікробну, фунгіцидну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією 9-гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридину та 4-метоксибензальдегіду у диметилформаміді (ДМФА). Кінцевий продукт 9-(4'-метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридин - порошок жовтого кольору, розчинний у воді (1:100), етанолі, диметилсульфаксиді (ДМСО), ДМФА. Будова сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧ-спектроскопії, а індивідуальність - методом тонкошарової хроматографії. 1 UA 87299 U 5 10 15 20 25 Корисна модель ілюструється наступним прикладом: Приклад 1. 2,82 г (0,01 моль) 9-гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридину та 1,36 г (0,01 моль) 4метоксибензальдегіду в 15 мл ДМФА нагрівають протягом 1 години. Осад, що випав відфільтровують, промивають водою та сушать. Кристалізують із водного ДМФА. Вихід 3,88 г (88 %), Тпл. 201-204 °С, М.м. 441,271 Бруто-формула С21Н14Сl2N4О3 Розраховано: С, % 57,16; N, % 12,70; Н, % 3,20. Знайдено: С, % 57,27; N, % 12,77; Н, % 3,25. -1 S ІЧ-спектр у KBr, см : 3348 (NH), 1602 (C-Ph), 1580 (δΝΗ), 1518 (asNO 2), 1325 ( NO2), 788 (C-Cl). Rf: 0,32 в системі етанол-гексан (1:3). Приклад 2. Визначення протимікробної активності заявленої сполуки проводилося за методом двократних серійних розведень у рідких харчових середовищах [Навашин С.И., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М.: Медицина, 1982. - С. 40-42]. Для культивування бактерій використовувався амінопептид, попередньо розведений у два 5 6 рази дистильованою водою, рН 7,2. Мікробне навантаження склало 10 -10 мікробних тіл в 1 мл середовища. Для випробування використовувалися 8 штамів мікроорганізмів: 1-Sta-phylococcus aureus, штам АТСС 25923; 2-Echerichia coli, штам АТСС 7241; 3-Bacillus subtilis, штам АТСС 25922; 4Pseudomonas aeruginosa, штам АТСС 27853, 5-Salmonella choleraesuis; 6-Salmonella thyphimurium; 7-Salmonella thyphisuis, 8-Salmonella dublin. Як критерій фармакологічної активності вибрано рівень мінімальної пригнічуючої концентрації (МПК) та рівень гострої токсичності (DL50). Результати вивчення антимікробної активності та токсичності 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридину (сполука №1) у порівнянні з 4-метил5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридином (найближчий аналог) та етакридину лактатом наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Протимікробна активність і токсичність заявленої сполуки (№1) у порівнянні з прототипом та етакридину лактатом DL50 (внутрішньошлунково), мг/кг МПК (мкг/мл) Сполука №1 Найближчий аналог Етакридину лактат 1 3,5 2 1,5 Штами мікроорганізмів 3 4 5 6 1,5 3,2 25,0 25,0 31,2 1,8 1,8 31,2 31,2 31,2 15,6 62,5 125 7 12,5 8 15,6 > 5700/2800* 5000/1500* 250 125 250 21* Примітка. * DL50 - при внутрішньочеревинному введені. 30 35 40 За даними табл. 1, сполука № 1 активніше етакридину лактату у відношенні до Staphylococcus aureus та Bacillus subtilis у 8,9-10,4 рази, у відношенні до Echerichia coli у 20,8 рази, у відношенні до Pseudomonas aeruginosa у 19,53 рази. Сполука № 1 також перевищує в аналогічних умовах основні характеристики прототипу у відношенні до Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Echerichia coli. Крім того сполука №1 активніше етакридину лактат у відношенні до мікроорганізмів роду Salmonella у 5-16 рази, а у прототипу ці дані відсутні. Заявлена сполука є менш токсичною ніж прототип і значно менш токсичною ніж рефренс-препарат (етакридину лактат). Приклад № 3. Визначення протигрибкової активності проводилось за відомою методикою (Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред. М.О. Бригера - 3-е изд. перераб. и доп. -М.: Медицина, 1982. - 462 с). Для вирощування грибів використовувалось середовище Сабуро (рН = 6,5-6,7). Навантаження склало 500-600 репродуктивних тілець штамів Candida albicans або Trichophyton 2 UA 87299 U 5 rubrum в 1 мл середовища. Протигрибкову дію оцінювали за мінімальною мікостатичною концентрацією (ММК), вираженою в мкг/мл. Результати вивчення протигрибкової активності та токсичності 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридину (сполука № 1) у порівнянні з 4-метил5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридином (найближчий аналог), фурациліном та грізеофульвіном наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Протигрибкова активність та токсичність сполуки (№1) у порівнянні з найближчим аналогом, фурациліном та грізеофульвіном Сполука Сполука № 1 Найближчий аналог Фурацилін Грізеофульвін 10 15 20 Штами грибків, ММК (мкг/мл) Candida albicans Trichophyton rubrum 12,5 12,5 64,0 50 DL50 (внутрішньо очеревинне) мг/кг >2800 >1500 82,5 За результатами дослідження, наведеними у таблиці 2, сполука № 1 інгібує ріст Candida albicans у концентрації в 5,12 рази меншій ніж фурацилін. Також сполука №1 проявляє протигрибковий ефект у відношенні Trichophyton rubrum у концентрації 12,5 мкг/мл та перевищує за дією грізеофульфін в 4,0 рази. Прототип не проявляє протигрибкову дію. Крім того, сполука № 1 у 33,94 рази менш токсична ніж фурацилін при внутрішньочеревному введені. Таким чином, заявлена сполука перевищує прототип та препарати порівняння за широтою протигрибкової дії. Приклад 4. Вивчення жовчогінної дії заявленої сполуки, прототипу та оксафенаміду здійснювали на білих щурах масою 140-180 г за методом Скакун Н.М., Олійник А.Н. (Фармакологія та токсикологія. - 1967., №3.-С. 334-337). В якості критеріїв фармакологічної активності вибрано ізоефективна доза (DE50), при якій фармакологічний ефект набуває 50 % випадків у експериментальній групі тварин, рівень гострої токсичності (DL 50), терапевтичний індекс ТІ (показник відношення DL50/DE50) та відносний терапевтичний індекс. Результати вивчення жовчогінної активності 9-(4'-метоксибензиліден) гідразино-5,7-дихлор4-нітроакридину (сполука №1), 4-метил-5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридину (найближчий аналог) та оксафенаміду наведені в таблиці 3. 25 Таблиця 3 Жовчогінна активність та токсичність сполуки №1, найближчого аналога та оксафенаміду Кількість Доза, мг/кг досліджень 10 5 Сполука №1 15 5 150 5 5 9 15 5 Найближчий 25 5 аналог 100 5 150 5 15 12 Оксафенамід 50 5 150 5 Сполука Жовчогінна DE50, активність, мг/кг % 30,1±2,3* 67,2±17,1 10,5 59,5±13,7 24,5±2,70 45,7±4,20 55,6±1,20 19,0 26,9±3,70 18,6±3,30 24,7±6,4 32,3±5,3 154,3 49,4±6,3 DL50, мг/кг (в/шлунково) T.I.  DL 50 DE 50 Відносний Т.І. за оксафенамідом >5700 542,86 20,96 5000 263,16 10,16 4000 25,9 1 Примітка. * Ρ 5700 5000 360 647,73 45,0 Відносний Т.І. по натрію диклофенаку 14,40 1 За даними таблиці 4 сполука № 1 має виражену протизапальну активність, за широтою терапевтичного ефекту перевищує натрію диклофенак у 14,40 рази. Найближчий аналог протизапальну активність не проявляє. Таким чином, заявлена сполука 9-(4'-метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4нітроакридину проявляє широкий спектр фармакологічної дії: протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну при низькій токсичності. За окремими видами активності вона перевищує дію препаратів порівняння етакридину лактату, фурациліну, грізеофульвіну, оксафенаміду та натрію диклофенак. При синтезі заявленої сполуки використовуються доступні реактиви, дозволені у фармацевтичній практиці. Речовина одержується за простою технологією, яка може бути відтворена у промислових умовах, є стійкою, що сприяє тривалому терміну зберігання. Заявлена сполука може знайти застосування у медичній практиці при створенні лікарських засобів у різних лікарських формах для лікування інфекційних та запальних процесів різної етіології, які супроводжуються вторинною грибковою інфекцією та застійними явищами жовчного міхура. 30 4 UA 87299 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 9-(4'-Метоксибензиліден)гідразино-5,7-дихлор-4-нітроакридин структурної формули: NHN=CH OCH3 Cl N 5 Cl NO2 що проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5