Вакцина інактивована лейкозав-н (leukozav-h) проти злоякісної пухлинної хвороби (рак) у людей

Вакцина інактивована проти злоякісної пухлинної хвороби (рак) людей, що містить протеїни вірусів - збудників, яка відрізняється тим, що як специфічний антиген до її складу входить кров великої рогатої худоби, ураженої вірусом типу С родини Retroviridae та допоміжні речовини (стимулятори імунної системи бактеріального походження): продукти метаболізму збудника сибірки Bac.anthracis K – 79 Z, депонований в ДНКІБШіМ під № 069; продукти метаболізму кишкової палички E.coli М-17, висіяної з офіційного препарату "Колібактерін"; продукти метаболізму Pasteurella multocida Z – 84, депонованої в ДНКІБШіМ під № 015; амізон - стимулятор імунітету у людини та розчин Рінгер-Локка для інфузій при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: Кров великої рогатої худоби, враженої вірусом типу С родини Retroviridae 2-98,0 Культуральна рідина Bac.anthracis 2-98,0 Культуральна рідина після культивування E.coli М-17 2-98,0 Культуральна рідина після культивування Pasteurella multocida Z – 84 2-98,0 Амізон - стимулятор імунітету у людини 2-98,0 Розчин Рінгер-Локка для інфузій 2-98,0. (19) UA (21) a201007940 (22) 24.06.2010 (24) 25.06.2011 (46) 25.06.2011, Бюл.№ 12, 2011 р. (72) ЗАВІРЮХА АНАТОЛІЙ ІВАНОВИЧ, ЗАВІРЮХА ГАННА АНАТОЛІЇВНА (73) ЗАВІРЮХА АНАТОЛІЙ ІВАНОВИЧ, ЗАВІРЮХА ГАННА АНАТОЛІЇВНА (56) OHBAI M. et all.:Parasporin, a New Anticancer Protein Group from Bacillus thuringiensis. Anticancer Research January 2009, vol. 29, no. 1, 427-433. Ma EL et al.: The anticancer effect of probiotic Bacillus polyfermenticus on human colon cancer cells is mediated through ErbB2 and ErbB3 inhibition. Int J Cancer, 2010, 127(4): 780-90. Завірюха Г.А. РОЗРОБКА НОВОЇ ТЕХНОЛОГІЇ ВИГОТОВЛЕННЯ АНТИГЕНУ СИБІРКОВОГО СТАНДАРТНОГО. АВТОРЕФЕРАТ. Дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата сільськогосподарських наук. Біла Церква - 2002. Потебня Г.П. Підвищення ефективності протипухлинної вакцини пробіотичним препаратом субалін. Онкологія, 2008, Том 10, №2, С.246-251. UA 32525 U, 26.05.2008. Завірюха Г. А., Дзюба С. М., Завірюха A. I. Випробування вакцини Лейкозав проти лейкозу великої рогатої худоби на вівцях// Ветеринарна біотехнологія. - Бюл. № 2. - Аграрна наука. - 2002, - с. 7378. UA 73377 C2, 15.07.2005. C2 2 (11) 1 3 95038 супутніх чинників (перенесення важкої хвороби вірус-бактеріальної етіології, раптове або тривале сильне охолодження, важкі стреси, травми, пестициди і гербіциди в харчах, радіонукліди після аварії на Чорнобильській АЕС тощо). Перебіг хвороби розвивається мляво, має великий латентний період і як правило закінчується генералізацією пухлинного процесу (канцероматоз) і смертю. На сьогодні медичною наукою не розроблено, а тому практична медицина не має специфічного методу ранньої діагностики (антиген-антитіло), активної профілактики (відсутність вакцин) та ефективного специфічного лікування. Лікування онкохворих здійснюється паліативними методами (протипухлинна хіміотерапія, гамаопромінення, хірургічне видалення уже сформованої пухлини, гормональна терапія тощо). Гормональну терапію застосовують в ранній стадії розвитку пухлинної хвороби (вузловий зоб, мастопатія, фіброміома матки, аденома тощо), бо вважають, що це прояв розладу гормональної системи організму. З часом таке лікування закінчується розвитком клініки пухлинної хвороби, яка характеризується появою сформованих пухлин. Вірусна етіологія злоякісної пухлинної хвороби доведено експериментально у тварин (Miller J.M., Van der Maaten M.J., 1980; Мандигра M.C., 2000; Завірюха Г.А., Дзюба С.М., Завірюха А.І., 2002) та підтверджена Нобелівською премією німецькому вченому Харальдцур Хаузену за відкриття віруса папіломи людини, який спричиняє рак шийки матки, (hftp: www.rian.ru/science/20081006/151919689.html). Загально відомо, що самим ефективним способом боротьби з інфекційними хворобами вірусбактеріальної етіології у людей і тварин є розробка та застосування специфічних імуногенних вакцин, за допомогою яких у щепленому організмі формується специфічний імунітет, що захищає від спонтанного та експериментального зараження вірулентними збудниками. Прототипом нашого винаходу є вакцина Церварікс для профілактики захворювань, спричинених папіломавірусною інфекцією (Cervarix Papilomavirus vaccina) виробництва Ylaxo Smith Kline. Вона являє собою суспензію для ін’єкцій. Одна доза вакцини (0,5 мл) містить: протеїн папіломавіруса людини тип 16L1 – 20 мкг, протеїн папіломавіруса людини тип 18L1 – 20 мкг та допоміжні речовини (свідоцтво про держрегістрацію №686/07 – 300200000 від 27.09.2007 до 27.09.2012). Вакцина Cervarix застосовується для профілактики цервікальної інтраепітеліальної неоплазії 23-ї ступені та раку шийки матки у дівчат і жінок, починаючи з 12 років, спричинених вірусом папіломи людини типами 16 і 18. Відмінними ознаками, запропонованої нами вакцини Лейкозав – Н від прототипу є: № п/п Ознака Прототип 1 2 3 1 Матеріал для виго- Протеїн папіломавіруса людини товлення тип 16L1, протеїн папіломавіруса людини тип 18L1 та допоміжні речовини. 2 Склад Протеїн папіломавірусів людини типу 16L1 та типу 18L1 і допоміжні речовини: 3--дезацил-4′ монофосфірил ліпіда А, алюмінію гідроксид, натрію хлорид, натрію дігідрофосфат, вода для ін’єкцій q.S. 3 Застосування Для запобігання виникнення цервікальної інтраепітеліальної неоплазії (СІN) 2–3 ступені та раку шийки матки, спричинених вірусом папіломи людини (ВПЛ) типами 16 і 18 у дівчат і жінок, починаючи з 12 років. 4 Спосіб введення Внутрішньом’язево в ділянці дельтовидного мускула. 5 Доза на одне вве- Суспензія для ін’єкції 1 доза дення шприц 0,5 мл. Інтервал між вве- 0; 1; 6 міс. деннями 6 4 Винахід 4 Кров великої рогатої худоби, враженої ретровірусом типу С (джерело ретровіруса) та допоміжні речовини. Інактивована кров великої рогатої худоби, враженої ретровірусом типу С (хвора на лейкоз) та допоміжні речовини: Амізон – стимулятор імунітету у людини; стерильний фільтрат культуральної рідини збудника сибірки, наприклад вакцинного штаму Bac.anthracis K – 79 Z; стерильний фільтрат культуральної рідини E.coli М-17; стерильний фільтрат культуральної рідини Pasteurella multocida Z–84; розчин РінгерЛокка для інфузій. Для профілактичних щеплень з метою створення специфічного імунного захисту у людини від спонтанного зараження онкогенними ретровірусами, попередження розвитку метастазів після хірургічного видалення основної пухлини та для лікування онкохворих в різні стадії розвитку пухлинного процесу. Внутрішньошкірно три ін’єкції, як реакція Манту. Наступні введення – підшкірно в різні ділянки (плече, передпліччя, живіт, сідниці тощо). Від 0,2 мл внутрішньошкірно до 1,0 мл – підшкірно. 3–7 діб. Між півкурсами 14–21 день. Між курсами 2 – 6 міс. 5 7 8 9 10 11 Кратність 95038 6 Курс щеплення складається із Один повний курс складається із двох піввведення 3х доз. курсів по 4 ін’єкції кожний. Між ін’єкціями інтервал 2–7 днів, між півкурсами – 14–21 день (ревакцинація). При застосуванні вакцини, як лікувального засобу необхідно пройти три курси впродовж календарного року з інтервалом між курсами 1–4 місяців. Профілактичні ще- Рекомендованою схемою вак- Повний курс профілактичних щеплень плення цинації є 0; 1; 6 місяців. У випа- складається з семи ін’єкцій (внутрішньошкідку необхідності другу дозу мо- рно і підшкірно) з інтервалом 1–7 днів. Режна вводити між 1 і 2,5 міс. після вакцинація через 14–21 день – 4 ін’єкції. введення першої дози. Необхід- Не встановлено потреби у введенні буетеність введення буферної дози рної дози. не встановлена. Застосування вакцини особам молодше 10 років не рекомендується. Лікування онкохво- Не передбачено При застосуванні вакцини для лікування рих онкохворих необхідно пройти три курси з інтервалом 1–4 місяці. У випадку успішного лікування, для підтримання специфічного імунітету відповідної напруги, впродовж року вакцину щеплюють один раз на 6 місяців. В подальшому один раз на рік до одужання. Повний курс лікування складається з трьох курсів впродовж календарного року. Інтервал між курсами 1-4 місяці. Перший курс лікування складається після встановлення діагнозу. Кожний курс складається із двох півкурсів по 5 ін’єкції кожний (0,2 мл, 0,4 мл, 0,5 мл, 1 мл, 1 мл). Після проведення півкурсу призначається перерва 14-21 день для формування імунітету. Потім приступають до ревакцинації (0,2 мл внутрішньошкірно, через 2 доби – 0,5 мл підшкірно, через 2 доби – 1 мл , через 3 доби – 1 мл підшкірно, через 7 діб – 1 мл підшкірно). Специфічність Не описано Визначається шляхом імунізації морських свинок вакциною. Вакцина вводиться підшкірно. В результаті імунізації у тварин формується противірусний специфічний імунітет у вигляді антитіл. Сироватка їх крові реагує позитивно із стандартним антигеном за реакцією імунодифузії в агаровому гелі (РІД) в нативному виді та в розведенні 1:2 – 1:8. Імунітет з таким титром антитіл захищає чутливих тварин від експериментального та спонтанного зараження. Протипоказання Не можна назначати пацієнтам з Якщо перед щепленням пацієнт хворий з відомою алергією до будь-яких проявом лихоманки, то вакцинацію відклакомпонентів вакцини. Застосу- дають (формується імунітет недостатньої вання вакцини необхідно відк- напруги). ласти, якщо у пацієнта підвищена температура (лихоманка). Наявність легкого респіраторного захворювання не суперечить застосуванню імунізації. 7 12 Побічні ефекти 95038 Біль на місті введення слабка або помірна та швидко проходить. Головні болі, нудота, блювання, діарея, біль у животі. Сверблячка, висипи на шкірі, кропивниця, часта лихоманка (38°С), рідко індурація, парестезія. За дорученням Кабінету Міністрів випробування вакцини Лейкозав - Н проводило Державне підприємство "Центр імунобіологічних препаратів" МОЗ України. Встановлено, що препарат містить 3 40,5 мг/см білка за Лоурі. При посіві в тіогліколеве середовище виявлено ріст сторонньої непатогенної мікрофлори. Хоч за даними досліджень на стерильність лабораторії бактеріології Інституту ветеринарної медицини НААН України не виявлено росту сторонньої мікрофлори в посівах на МПА, МПБ, МППБ та середовище Сабуро. Також не виявлено ускладнень на місці ін'єкції вакцини, розладів в загальному стані та загибелі білих мишей і морських свинок впродовж 10 діб після ін'єкції. Вакцина нетоксична. Концентрація ендотоксину 0,08-0,09 МО/мл, що відповідає рівню ендотоксинів в ін'єкційних препаратах, які застосовуються в медицині. Безпечність підтверджена відсутністю в препараті збудників вірусних інфекцій. За допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПРЛ) та імуноферментного аналізу (ІФА) в препараті не виявлено антигенів вірусу гепатиту В, ВІЛ, гепатиту С, вірусів герпесу І і II типів, вірусів Енштейна-Барра, вірусів лейкозу великої рогатої худоби, а також збудників туберкульозу. Не встановлено наявності токсичності препарату для клітин перещеплюваних культур L 41, Vero, НГУК, ВНК, МАБК, Hep-2. Антитіла сформовані після введення препарату піддослідним тваринам нейтралізують вірус візакулярного стоматиту - 1:320 та бичачого вірусу вірусної діареї - 1:1280. В організмі, щеплених вакциною тварин активізується індукція ендогенного інтерферону. Висновок: Препарат Лейкозав - Н відповідає вимогам імунобіологічних препаратів придатних для застосування людині (див. додаток 1). Наявність високих захисних властивостей вакцини Лейкозав - Н доведено на групі овець (чутлива до зараження біологічна модель) із 7 клінічно здорових тварин віком 5-7 місяців (6 піддослідних, одна контрольна). Трьох овець проімунізували 3 підшкірно двічі з інтервалом 21 день по 2 см на 3 одне введення (2+2 см ). А трьох тварин за такою 3 3 ж схемою по 1 см (1+1 см ). Через 60 днів після останнього введення вакцини відібрали кров і дослідили за РІД. Сироватка крові щеплених овець реагувала позитивно в РІД із стандартним антигеном (ретровірус тип С). Щеплених тварин зарази3 ли підшкірно по 0,5 см вірусовмісним матеріалом (кров корови хворої на лейкоз (60,0 г/л лейкоцитів, 8 У переважної більшості (95%) побічних симптомів не спостерігається. При наявності хронічних захворювань легень, печінки, суглобів, дихальних шляхів, радикуліт тощо, після імунізації відбувається легке загострення хронічного процесу і виліковування. Застосування вакцини онкохворим одночасно і зразу після проведення протипухлинної терапії не сприяє формуванню противірусного імунітету достатньої напруги. Це стосується і застосування імуносупресорних препаратів. 86% лімфоцитів). Результати проведених досліджень наведені в табл. 1. З даних табл. 1 видно, що вакцина Лейкозав Н володіє високими імуногенними властивостями. Вона захищає піддослідних тварин від експериментального зараження вірусовмісною кров'ю. Оптимальною дозою вакцини для створення противіру3 сного імунітету є 2+2 см підшкірно. За даними, Van der Maaten M.J., Miller J.M., (1978), щоб заразити велику рогату худобу вірусом лейкозу достатньо ввести парентерально 2500 лімфоцитів від інфікованої вірусом тварини. За об'ємом така кількість лімфоцитів міститься в 0,0005 мл крові. В нашому досліді ми вводили підшкірно 0,5 мл або в 1000 разів більше. Не зважаючи на таке навантаження вірусом, тварини 3 щеплені профілактичною дозою вакцини (2+2 см ) не захворіли, що підтверджується даними таблиці 1. 3 Вакцина в дозі 1+1 см також створює імунітет, який забезпечує 70% захисту тварин, що є достатнім показником імуногенності для любих вакцин. Однак, захворювання однієї із трьох тварин в групі 3 щеплених (1+1 см ) дає підставу надати перевагу 3 профілактичній дозі 2+2 см , де всі щеплені вівці залишились захищеними і не захворіли. Лікувальні властивості вакцини Лейкозав - Н вивчали на групі гематологічно хворих злоякісною пухлинною хворобою (лейкоз) корів в неблагополучному стаді агрофірми "Аврора" Нікопольського району Дніпропетровської області. В дослід було взято 22 гематологічно хворих тварини з високими показниками лейкоцитів та відсотка лімфоцитів (табл. 2). Корів щеплювали 3 лікувальною дозою вакцини 4+4 см підшкірно 3 3 (4 см , через 21 день, - ревакцинація – 4 см ). Корови були проліковані двічі з інтервалом 6 місяців. Результати застосування вакцини, як лікувального засобу наведені в табл. 2. З табл. 2 видно, що після введення лікуваль3 них доз (4+4 см ) вакцини у 8 корів (36.40%, інв. №№6222, 6290, 2806, 6078, 2851, 7300, 2847, 6276) морфологічні показники крові відновились до норми. У 4-х тварин (18,4% інв. №№1802, 6515, 4080, 2842) подальший розвиток інфекційного процесу призупинився, а у 10 корів (45,4%) відбулося збільшення кількості лейкоцитів, т.т. наступило загострення перебігу пухлинної хвороби. Отже, позитивна лікувальна дія вакцини проявилась у 54,60% (12 корів) онкохворих тварин. 9 95038 Злоякісна пухлинна хвороба у людей розвивається мляво (хронічний перебіг). Загально відомо, що хронічні хвороби лікуються лише після переведення їх в гостру форму. З цих позицій загострення перебігу лейкозу у 10 гемхворих корів не можна оцінювати однозначно, як негативний результат. 10 Не виключено, що подальше лікування їх вакциною сприяло б видужанню ще частини тварин, але виконуючи вимоги чинної інструкції по боротьбі з лейкозом великої рогатої худоби, ці тварини були здані на забій. Продовжити дослід в умовах епізоотологічного експерименту стало неможливим. Таблиця 1 Захисні властивості інактивованої вакцини Лейкозав - при зараженні імунних овець вірусовмісною кров’ю від хворої раком крові корови в гематологічній стадії розвитку інфекції До зараження Доза, см 3 Результати лабораторних досліджень 29.01.2000р. 26.02.2000р. 30.03.2001р. п/п Інв. № лейкоцити, Щеплення Зараження РІД лейкоцити, Лейкоцити лейкоцити г/л 29.11.2000р. 27.12.2000р. РІД РІД РІД г/л. г/л. г/л 1. 0135 6,60 2+2 0,5 6,00 - - - 6,00 +- - 10,6 + + + +> 2 0596 6,20 2+2 0,5 4,60 - - - 4,0 +- - 6,4 + + + +> 3. 0082 8,80 2+2 0,5 5,00 - - - 5,00 - - - - не досліджували 4. 0634 7,40 1+1 0,5 7,20 +++ 6,80 + + + +> 8,20 - - - 5. 0157 5,40 1+1 0,5 4,00 +++ + 7,40 +- - 4,60 + + + +> 12,00 6. 0416 5,20 1+1 0,5 5,30 +++ + 5,80 + + + +> + + + +> 92% л контроль 11,40 7. 6,80 0,5 8,20 + + + +> 7,40 + + + +> + + + +> 13896 86% H - негативна сироватка; 1:2 - 1:8 - розведення сироватки Таблиця 2 Результати застосування інактивованої вакцини Лейкозав - Н для лікування корів в гематологічній стадії розвитку злоякісної пухлинної хвороби кровотворних органів № п/п Інв. № 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 6222 1802 6290 2806 1890 6078 6546 6435 6515 6073 7374 7261 3706 6420 4080 2851 6214 2842 7300 2847 6276 6816 Результати досліджень до вакцинації лейкоцити, лімфоцити, РІД 3 •10 г/л %% позит. 11,80 79,00 позит. 39,00 98,00 позит. 39,60 64,00 позит. 13,80 84,00 позит. 13,60 73,00 позит. 16,60 64,00 позит. 16,40 71,00 позит. 16,00 74,00 позит. 18,40 91,00 позит. 21,20 80,00 позит. 20,40 89,00 позит. 12,80 76,00 позит. 19,40 82,00 позит. 14,80 76,00 позит. 18,40 90,00 позит. 13,40 69,00 позит. 21,00 74,00 позит. 19,60 97,00 позит. 28,00 94,00 позит. 23,00 84,00 позит. 17,20 78,00 позит. 24,40 71,00 У людей і тварин (ВРХ) збудниками пухлинної хвороби є ретровіруси (лімфотропні), які мають однакову будову основної частини генома, шлях Результати досліджень після двух щеплень лейкоцити, лімфоцити, РІД 3 •10 г/л %% позит. 8,40 65,00 позит. 18,80 58,00 позит. 6,8 54,00 позит. 14,80 52,00 позит. 30,40 91,00 позит. 15,60 62,00 позит. 30,80 94,00 позит. 18,00 93,00 позит. 16,00 78,00 позит. 20,80 88,00 позит. 27,40 96,00 позит. 15,00 86,00 позит. 18,80 96,00 позит. 19,00 81,00 позит. 22,60 85,00 позит. 12,60 63,00 позит. 21,00 87,00 позит. 15,80 96,00 позит. 6,60 62,00 позит. 6,00 63,00 позит. 8,80 52,00 позит. 26,2 80,00 примітки оздоровлення стабілізація оздоровлення оздоровлення загострення оздоровлення загострення загострення стабілізація загострення загострення загострення загострення загострення стабілізація оздоровлення загострення стабілізація оздоровлення оздоровлення оздоровлення загострення зараження клітин, інтеграцію вірусів в геном клітини, їх реплікацію та експресію (Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А., 2001). 11 Цілком логічно можна було зробити висновок, що задовільні результати застосування вакцини для профілактики і лікування у тварин можна використати І в гуманній медицині. Винахід ілюструється таким прикладом 1. Компоненти вакцини (складові). 1.1 Вірусовмісний антиген (кров великої рогатої худоби враженої пухлинною хворобою кровотворних органів в гематологічній стадії розвитку інфекції). 1.2 Амізон офіційний препарат - стимулятор імунітету у людей. 1.3 Стерильний фільтрат культуральної рідини вакцинного штаму Bac.anthracis K-79Z, депонованого в КФ ДНКІ ветеринарних препаратів та кормових добавок під №069. 1.4 Стерильний фільтрат культуральної рідини E.coli M-17, висіяний із офіційного препарату „Колібактерім" 1.5 Стерильний фільтрат культуральної рідини штаму Pasteurella multocide Z-84, депонованого в ДНКІ біотехнології і штамів мікроорганізмів під № 015 2. Виготовлення вакцини До крові великої рогатої худоби хворої на лейкоз в гематологічній стадії розвитку хвороби (п. 1.1) почергово додаються стерильні фільтрати культуральних рідин мікробів (п. 1.3), фільтрати мікробів культуральних рідин (п. 1.4), (п. 1.6) та Амізон, розчинений у ізотонічному фізіологічному розчині або розчиніРінгер-Локка у співвідношенні 2-98%. Проводять інактивацію та перевіряють на стерильність, рН, нетоксичність та імуногенність. Вакцина, виготовлена за такою технологією, достатньо імуногенна і має профілактичні та лікувальні властивості. В зв'язку з тим, що ретровіруси є слабкими антигенами і сильними депресантами імунної системи, ми розробили і випробували на добровольцях з позитивним результатом такі схеми: 1. Профілактика. 3 1.1 Перший день - 0,2 см внутрішньошкірно (як реакція Манту). 3 1.2 Три дні перерви, на четвертий - 0,5 см підшкірно. 3 1.3 Сім днів перерв - 1,0 см підшкірно. 3 1.4 Сім днів перерви - 1,0 см підшкірно. 2. Лікування (курс). 2.1 Чотири ін'єкції за пп. 1-4 2.2 Перерва 14-21 день 3 2.3. Перший день після перерви - 0,2 см внутрішньошкірно (як реакція Манту) 3 2.4 Перерва три дні - 0,5 см підшкірно 3 2.5 Перерва 7 днів - 1,0 см підшкірно 3 2.6 Перерва 7 днів - 1,0 см При проведенні щеплень дотримуються вимог асептики і антисептики. Для лікування онкохворих необхідно пройти три курси впродовж календарного року. Інтервал між курсами 2-4 місяці залежно від стану запущеності хвороби. Ефективність застосування цього винаходу в профілактиці та лікуванні злоякісної пухлинної хвороби у людей підтверджується наступними прикладами. 95038 12 Приклади Онкохворий А. В., 1994р. народження тел. м. 096-772-99-89 Діагноз: Рак середостіння, Mts в легені. Пройшов три курси ПХТ. Відправлений додому вмирати, як такий, що не піддається лікуванню. 25.04.06. мати, повертаючись з Охматдиту, звернулась по допомогу. При клінічному огляді хворий блідий, худий і не має сил рухатись. За згодою батьків та всієї родини хворому надано вакцину Лейкозав - Н для застосування в домашніх умовах перебування. Через 2 місяці після підшкірних ін'єкцій стан здоров'я відновився пішов у школу, до якої почав їздити на велосипеді (12.07.2006). 30.08.2006. - скарг на здоров'я немає, як і всі нормальні діти грає у футбол, учиться на п'ятірки. 2007 рік - почувався добре, скарг на здоров'я нема, добре учиться в школі, переможець олімпіади. 2008-2009р.р. практично здоровий, виріс до 180 см, успішно учиться. 2010 р. учиться в одинадцятому класі, практично здоровий. Онкохворий А. Є., 1928р. народження тел. м. 0504301036 (син). Діагноз: Меланома. Відгнила права п'ята, не міг ходити, лежав, вихуднув, готувався до смерті. Лікарі мали намір ампутувати ногу, але через вік (78 років) та незадовільний стан здоров'я в проведенні операції відмовлено. 27.03.06. - взяли вакцину і проімунізували в домашніх умовах. Через 2 місяці після застосування вакцини (05.2006.) п'ята зажила, здоров'я відновилось, почав виконувати роботи по догляду за коровами та в домашньому господарстві. Зворотній зв'язок припинився. Онкохворий Г. М., 1948р. народження, тел. м. 0963575005 Діагноз: Рак простати IV ст. Пройшов два курси опромінення, протипухлинну терапію (ПХТ), розвинулись сильні болі, хвороба прогресувала, кололи обезболюючі - морфій, не їв, дуже схуднув. Виявили метастази в кістках. Загальний стан здоров'я погіршувався з кожним днем. В липні 2005 року розпочав лікування вакциною Лейкозав-Н, пройшов два курси. 26.06.2006 - родичі приїхали за вакциною для чергового курсу імунізації. З їх слів; почувається добре, пішов на важку фізичну роботу (б'є камінь). 20.06.2008р. скарг на здоров'я немає, метастази зникли, працює. Зворотній зв'язок обірвався. За дорученням KM України та МОЗ України Державним підприємством "Національний інститут раку" проведено аналіз результатів застосування вакцини "Лейкозав - Н" на волонтерах хворих на рак з різною локалізацією злоякісних пухлин: мозок, кістки, легені, підшлункова залоза, кровотворні органи, травний та сечестатевий канали, середостіння тощо в четвертій стадії розвитку хвороби, яким відмовлено лікувальними закладами в лікуванні традиційними неспецифічними методами (специфічні ще не розроблені), це протипухлинна хіміотерапія, -опромінення, операція, через незадовільний і безнадійний на покращення стан здоров'я. При виписуванні з лікарні таким хворим рекомендується в домашніх умовах застосовувати знеболюючі, лікування травами, методами народної медицини та будь-чим. 13 95038 За згодою хворих і їх родини була дана вакцина «Лейкозав-Н» з інструкцією по застосуванню. Відповідно Протоколу наради... від 22 вересня 2009 року (Додаток 2) заступник директора з наукової роботи Крячок І. А. повідомила, що із «даних 65 хворих на день опитування 25 осіб померло, 8 знаходились в край важкому стані, а 32 (50%) були в стадії ремісії». За даними наших спостережень оздоровлені люди жили нормальним життям впродовж 2-4 років (термін спостереження). Комп’ютерна верстка М. Ломалова 14 Джерела інформації: 1. Miller J.M., Van Der Maaten M.J. The biolagi of bovinae Leukemia virus infection in cattele // Virus Natur. Occuring Cancer. Book B. Gold Spring Harbor. - 1980. - №4. - p. 901-909. 2. Завірюха Г.А., Дзюба С.М., Завірюха A.I. Випробування вакцини Лейкозав проти лейкозу великої рогатої худоби на вівцях// Ветеринарна біотехнологія. - Бюл. №2. - Аграрна наука. - 2002, - с.7378. 3. Змушко Е.И., Белозеров B.C., Митин Ю.А. Клиническая Иммунология // Питер. - СанктПетербург. - 2001. - 574с. Підписне Тираж 24 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601