Вакцина інактивована проти лейкозу великої рогатої худоби

Вакцина інактивована "Лейкозав" проти лейкозу великої рогатої худоби. Винахід відноситься до ветеринарної медицини і може бути використаний для профілактичних щеплень великої рогатої худоби проти лейкозу та лікування інфікованих вірусом (РІД-позитивних) і гематологічно хворих тварин у ранніх стадіях розвитку хвороби. В країнах далекого зарубіжжя боротьбу з лейкозом великої рогатої худоби ведуть шляхом повної заміни неблагополучного стада здоровим поголів'ям. Розробка активних засобів профілактики вважається неможливою. В Україні боротьбу з лейкозом великої рогатої худоби проводять згідно вимог діючої інструкції "Інструкція по профілактиці та оздоровленню великої рогатої худоби від лейкозу" 28.09.1992р. № 15-15/220). За вимогами інструкції в неблагополучному щодо лейкозу стаді (господарстві) кров великої рогатої худоби досліджують через кожні 30-45 днів за реакцією імунодифузії (РІД). У РІД-позитивних тварин визначають кількість лейкоцитів та відсоток лімфоцитів. РІД-позитивних здають на забій або утримують ізольовано. Гематологічно хворих здають на забій. Тварин приватного сектора досліджують один раз на рік і РІДпозитивних негайно здають на забій. РІД виявляє хворих тварин у продромальній стадії розвитку хвороби, коли в крові накопичується достатньо антитіл, які позитивно реагують з лейкозним антигеном. Тварини, які знаходяться у інкубаційному періоді розвитку лейкозу, коли рівень антитіл нижче порогу чутливості РІД, а також хворі тварини організм яких нездатний виробляти необхідну кількість антитіл залишаються в стаді і служать джерелом інфекції для здорових тварин. З цих причин за допомогою РІД оздоровити господарство важко, і потрібно багато часу. Більш досконалими діагностичними тестами є реакція імуноферментного аналізу (ІФА) і полімеразна ланцюгова реакція (ПРЛ). Перша дає значну кількість неспецифічних реакцій, друга - дорога і вимагає застосування специфічної апаратури. Найефективнішим засобом боротьби з інфекційними хворобами людей і тварин є створення відповідних імуногенних вакцин, застосування яких забезпечує імунний захист чутливих тварин від зараження вірулентним збудником. Однак спроби зарубіжних і вітчизняних науковців створити ефективну вакцину проти лейкозів людей чи тварин до цього часу не мали успіхів. Прототипом нашого винаходу є рідка інактивована адсорбована вакцина проти лейкозу великої рогатої худоби, Л.І Нагаєва (1994-1995). Одна доза (2 см 3) такої вакцини містить: білки - 5см 3 (лізат підрощених (37С°) лейкоцитів крові гематологічно хворої тварини (не менше 50тис/см 3) лейкозом крові, тритон X - 100 - 0,02см 3) (10 %розчин), фенол - 0,05см 3 (50% розчин). Виготовлення такої вакцини складне - особливо багато технічних операцій при заготівлі, лейкоцитарної маси. В умовах виробничої лабораторії ветмедицини лейкоцити виділяють центрифугуванням на холоді і у спеціальних контейнерах доставляють в біоцех. Там їх підрощують (37°С) і додають хімічні інактиватори. Вакцину застосовують профілактично великій рогатій худобі з 4 - місячного віку. Імунізують тричі з інтервалом по 14 днів у дозі 2см 3 на одне введення. Заборонено вакцинувати РІД - позитивних тварин. Відмінними ознаками, розробленої вакцини Лейкозав від прототипу є: № п/п ОЗНАКА 1. Матеріал для виготовлення 2. Склад 3 Застосування 4 Спосіб введення Доза на одне введення і Кратність введення Інтервал між введеннями, дні 5 6 7 8 Лікування хворих лейкозом тварин 9 Напруга поствакцинального імунітету, титр антитіл. ПРОТОТИП Лейкоцити хворої корови відсепаровані на виробництві (лабораторія ветмедицини) ВИНАХІД Стабілізована гепаріном чи лімоннокислим натрієм кров гематологічно хворої худоби (20тис/см 3). 1. інактивована кров гематологічно хворої тварини 5 - 95% 2. біостимулятор імунітету у тварин (АС білки - 5 см 3 (лізат підрощених (37С°) № 965046 СССР) - 5 - 95% лейкоцитів крові гематологічно хворої 3. стерильний фільтрат культуральної лейкозом тварини тритон X-100-0,02 рідини вірулентного штама Е. Coli IBM см 3 фенол - 0,05 см 3 1 - 5-95% 4. стерильний фільтрат культуральної рідини вірулентного штама Pasteurella multociga Z - 84 5-95% Для профілактичних щеплень ВРХ з 4 Для профілактичних щеплень ВРХ з 4 -5 - місячного віку - місячного віку Внутришньом'язево Підшкірно 2cm 3 2см 3 Тричі Двічі 14 21-30 Щеплювати РІД - позитивну ВР ЗАБОРОНЕНО Вакцину вводять підшкірно, двічі з інтервалом 21-30 днів по 4см 3 на одну ін'єкцію. Лікування проводять два рази на рік з інтервалом 6 місяців. Не визначається 1:2-1:16 за реакцією імунодифузії противірусного лейкозного антигену Після застосування у щеплених тварин формується імунітет у вигляді антитіл в титрі 1:2 - 1:16 за реакцією імунодифузії. Елімінація поствакцинальних антитіл з організму тварини відбувається переважно на протязі 612 місяців (термін спостереження). Визначення напруги імунітету при застосуванні вакцини - прототипу не передбачено. В гострому експерименті на вівцях (сама чутлива біологічна модель до зараження вірусом лейкозу великої рогатої худоби) нами встановлено , що щеплені вакциною Лейкозав тварини не хворіють після парентерального введення 0,5см 3 крові хворої лейкозом корови (60 тис. лейкоцитів/см ). (див.акт). За даними літературних джерел (М.С.Мандигра,2000) для зараження вівці вірусом лейкозу ВРХ достатньо 250-300 лейкоцитів хворої лейкозом великої рогатої худоби, тобто в 100 разів менше, ніж було нами взято для зараження імунних овець.. Застосування вакцини Лейкозав в неблагополучних щодо лейкозу стадах корів приватного сектора зменшує виділення РІД- позитивних тварин через 12 місяців після щеплення в 3-5разів. Винахід ілюструється таким прикладом. 1. Компоненти вакцини. 1.1. Інактивована кров хворої лейкозом великої рогатої худоби з вмістом лейкоцитів не менше 20 тис./см 3. Чим більше в крові хворої тварини лейкоцитів, тим вакцина краща за своїми імуногенними і лікувальними властивостями. 1.2. Стимулятор імунітету в тварин. Стерильна культуральна рідина вакцинного штаму Bac.anthracis K-79Z з титром специфічного сибіркового білка 1:2-1:512 за реакцією диск-преципітації. 1.3.Стерильна культуральна рідина вірулентного збудника колібактеріозу Е. coli IBM-1. 1.4. Стерильна культуральна рідина патогенного штаму Pasteurella multocida Z-84. Виготовлення вакцини. До інактивованої крові хворої лейкозом великої рогатої худоби (1.1) додають стерильно стимулятор імунітету у тварин (1.2), культуральну рідину штама Е. coli ІВМ-1 та культуральну рідину штама Pasteurella multocida Z-84 у співвідношенні 5,0-95,0%. Вакцину перевіряють на стерильність, нешкідливість та імуногенність. Застосовують для профілактичних щеплень здорової великої рогатої худоби та лікування РІД-позитивної і гематологічно хворої худоби в ранніх періодах розвитку інфекції. Ефективність вакцини висока (захист більше 80%). Імунітет триває більше 12 місяців. Застосування вакцини зараженим тваринам в інкубаційному періоді розвитку хвороби сприяє швидкому виявленню таких тварин за РІД. Вакцину вводять підшкірно двічі по 2см 3 з інтервалом 21-30 днів у ділянці верхної третини шиї. Місце введення вистрігають і дезинфікують 70 спиртом. З метою профілактики вакцину Лейкозав щеплюють великій рогатій худобі один раз на рік. З лікувальною метою хворих лейкозом тварин (РІД-позитивних, гематологічно хворих) щеплюють двічі по 4см 3 з інтервалом 21-30 днів. Лікування проводять 2-4 рази з інтервалом 6 місяців. Тварин, які не піддаються лікуванню (не стають РІД - негативними) здають на забій. Строк придатності вакцини 18 місяців з дати виготовлення. Вакцину випускають готовою до застосування в ампулах, пеніцілінових флаконах і флаконах об'ємом 50-100см 3. Література. 1. Інструкція по профілактиці та оздоровленню великої рогатої худоби від лейкозу від 28.09.1992р. №1515/220. 2. Нагаєва Л.І. Вакцина, яка захищає тварин від лейкозу// Ветеринарна газета,2002,№20(116). Мандигра М.С. Генетичні аспекти лейкозу великої рогатої худоби // Ветеринарна медицина України, 2000, №4, С 18-19. 3. Настанова по застосуванню вакцини рідкої інактивованої адсорбованої проти лейкозу великої рогатої худоби (№118, 30. 08. 2000р.)