Одиничний варіабельний домен імуноглобуліну проти рецептора типу 1 tnfa

Реферат: Винахід стосується стійкого при зберіганні одиничного варіабельного домену імуноглобуліну проти рецептора типу 1 TNFα (TNFR1; р55), що включає амінокислотну послідовність, яка є ідентичною амінокислотній послідовності DOM1h-574-208 (SEQ ID NO: 59), антагоніста, що його включає, та мультиспецифічного ліганду, а також їх застосування для лікування та/або попередження запального захворювання, зокрема артриту. UA 107200 C2 (12) UA 107200 C2 UA 107200 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Заявлений винахід стосується поліпептидів протипухлинного фактора некрозу 1(TNFR1, p55, CD120a, P60, член надродини TNF рецептора 1A, TNFRSF1A), імуноглобулінових (антитіл) одиничних змінних доменів та антагоністів, що їх містять. Винахід також стосується способів, застосувань, препаратів, композицій та пристроїв, що містять або застосовують такі антиTNFR1 ліганди. TNFR1 є трансмембранним рецептором, що містить позаклітинну ділянку, яка приєднує ліганд та внутрішньоклітинний домен, що позбавлений притаманної сигнальної трансдукційної активності, але здатен до асоціації з сигнальними молекулами трансдукції. Комплекс TNFR1 з TNF містить три ланцюги TNFR1 та три ланцюги TNF. (Banner et al., Cell, 73(3) 431-445 (1993).) TNF ліганд присутній у вигляді тримера, що пов’язаний трьома ланцюгами TNFR1. (Id.) Три TNFR1 ланцюги тісно зібрані у комплексі рецептор - ліганд та ця конструкція є передумовою TNFR1-опосередкованої передачі сигналу. Фактично, мультивалентні агенти, що зв’язують TNFR1, як-то анти-TNFR1 антитіла, можуть викликати кластерування TNFR1 та передачу сигналу у відсутності TNF та звичайно їх застосовують у якості агоністів TNFR1. (див., наприклад, Belka et al., EMBO, 14(6):1156-1165 (1995); Mandik-Nayak et al., J. Іmmunol, 167:19201928 (2001).) Відповідно, мультивалентні агенти, що зв’язують TNFR1 звичайно не можуть бути ефективними антагоністами TNFR1, навіть якщо вони блокують зв’язування TNF  до TNFR1. Ідентифікаційні номера послідовностей (SEQ ID) у цьому пункті відносяться до нумерування, застосованого у WO2006038027. Позаклітинна ділянка TNFR1 охоплює тринадцять амінокислот аміно - термінального сегмента (амінокислоти 1-13 з SEQ ID NO:603 (людина); амінокислоти 113 з SEQ ID NO:604 (миша)), домен 1 (амінокислоти 14-53 з SEQ ID NO:603 (людина); амінокислоти 14-53 з SEQ ID NO:604 (миша)), домен 2 (амінокислоти 54-97 з SEQ ID NO: 603 (людина); амінокислоти 54-97 з SEQ ID NO:604 (миша)), домен 3 (амінокислоти 98-138 з SEQ ID NO: 603 (людина); амінокислоти 98-138 з SEQ ID NO:604 (миша)), та домен 4 (амінокислоти 139167 з SEQ ID NO:603 (людина); амінокислоти 139-167 з SEQ ID NO:604 (миша)), за яким слідує мембранно-проксимальна ділянка (амінокислоти 168-182 з SEQ ID NO:603_(людина); амінокислоти 168-183 SEQ ID NO: 604 (миша)). ( див., Banner et al., Cell, 73(3) 431-445 (1993) та Loetscher et al., Cell, 61(2) 351-359 (1990).) Домени 2 та 3 утворюють контакт зі зв’язаним лігандом (TNF, TNF). (Banner et al., Cell, 73(3) 431-445 (1993).) Позаклітинна ділянка TNFR1 також містить ділянку, що позначена, як перед-лігандний монтажний домен зв’язування або PLAD домен (амінокислоти 1-53 з SEQ ID NO:603_(людина); амінокислоти 1-53 з SEQ ID NO:604 (миша)) (Уряд США, WO 01/58953; Deng et al., Nature Medicine, doi: 10.1038/ нМ 1304 (2005)). TNFR1 розповсюджується in vivo з клітинної поверхні завдяки процесу, що полягає у протеолізі TNFR1 у домені 4 або у мембранно-проксимальній ділянці (амінокислоти 168-182 з SEQ ID NO:603; амінокислоти 168-183 з SEQ ID NO:604), до отримання розчинної форми TNFR1. Розчинний TNFR1 зберігає здатність зв’язувати TNF, тим самим функціонуючи в якості ендогенного інгібітору його активності. WO2006038027, WO2008149144 та WO2008149148 стосуються анти-TNFR1 імуноглобулінових одиничних змінних доменів та антагоністів, що їх містять. Ці документи також висвітлюють застосування таких доменів та антагоністів для лікування та/або запобігання станів, опосередкованих TNFα. Бажаним є отримання анти-людських TNFR1 імуноглобулінових одиничних змінних доменів з підвищеною стабільністю при зберіганні та антагоністів, лігандів та продуктів, що їх містять, з метою отримання покращених діагностичних реагентів для визначення TNFR1 людини у зразках, а також або альтернативно, для отримання покращених ліків в для терапії та/або попередження TNFR1-опосередкованих станів та захворювань у людей або інших ссавців. Буде особливо бажаним отримати анти-TNFR1 імуноглобулінові одиничні змінні домени, антагоністи, ліганди та продукти, що їх містять, що будуть потенційними нейтралізаторами TNFR1, особливо TNFR1 людини. Різні аспекти заявленого винаходу задовольняють цім бажаним характеристикам. У одному аспекті, винахід стосується анти-TNFα рецептора типу 1 (TNFR1; p55), імуноглобулінового одиничного змінного домену, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 95, 96, 97, 98 або 99% тотожності ( або 100% тотожності) до амінокислотної послідовності DOM1h-574-188, DOM1h-574-189, DOM1h-574-190, DOM1h-574-191, DOM1h-574192, DOM1h-574-195, DOM1h-574-196, DOM1h-574-201, DOM1h-574-202, DOM1h-574-203, DOM1h-574-204, DOM1h-574-205, DOM1h-574-206, DOM1h-574-207, DOM1h-574-208, DOM1h574-209¸ DOM1h-574-211, DOM1h-574-212, DOM1h-574-213 або DOM1h-574-214, де одиничний змінний домен має OD320