Застосування екстракту з листя мати-й-мачухи (tussilago farfara l.) як противиразкового засобу

Реферат: Застосування екстракту з листя мати-й-мачухи (Tussilago farfara L.) як противиразкового засобу. UA 88100 U (12) UA 88100 U UA 88100 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до фармації та медицини, а саме до засобів рослинного походження з противиразковою дією. Відомі противиразкові препарати рослинного походження: бефунгін - екстракт чаги, альтан екстракт суплідь вільхи, алантон - екстракт кореневищ і коренів оману, ліквиритон - сума флавоноїдів із коренів і кореневищ солодки, а також насіння льону, обліпихова олія, багатокомпонентні лікарські засоби, що містять екстракти квіток ромашки, квіток календули, трави звіробою звичайного, кореневищ аїру, коренів цикорію, трави сухоцвіту багнового, листя м'яти перцевої, трави перстачу гусячого, коренів дягелю тощо. Відомий препарат альтан (http://www.piluli.kharkov.ua/drugs/drug/altanum/), який містить комплекс речовин поліфенольного походження - похідних елаготанінів (елагова та галова кислоти, етилгалат, альнітанін), одержаний з суплідь вільхи клейкої та вільхи сірої Alnus glutinosa (L.) Gaertn. Alnus incana (L.) Moench. Лікарські форми препарату таблетки або мазь. Фармакологічні ефекти: ранозагоюючий, противиразковий, протизапальний, репаративний, антибактеріальний, антиоксидантний, мембраностабілізуючий, в'яжучий, місцевоанестизуючий (мазь). Таблетки альтану призначають при лікуванні виразкової хвороби шлунка і дванадцятипалої кишки, гастритів, гастродуоденітів, колітів, ентероколітів. Мазь застосовують для лікування піодермій, опіків, гнійних ран. Фармакологічна дія засобів рослинного походження обумовлена видом лікарської сировини, а також способами вилучення з неї певних компонентів біологічно активних речовин (БАР). Для забезпечення індивідуального підходу до лікування хворих, які потребують препарати, зокрема з противиразковою дією, необхідно розширювати арсенал таких засобів. Існує екстракт насіння амаранта багряного, який використовують як гастропротекторний засіб (пат. UA, № 9192, А61K36/21, 15.09.2005, бюл. № 9). Недоліками є обмеженість сировинної бази, складність отримання сировини, висока вартість лікування та лімітований вплив на інші етіопатогенетичні лапки ульцерогенезу і, перш за все, на судинний фактор та репаративні властивості. Відомий препарат плантаглюцид (ТОВ "Фармацевтична компанія "Здоров'я", м. Харків, Україна), який містить суму полісахаридів листя подорожника великого, застосовується як спазмолітичний і протизапальний засіб для лікування гіпоацидних гастритів, виразкової хвороби шлунка та дванадцятипалої кишки зі зниженою та нормальною кислотністю, а також для профілактики рецидивів хвороби. Найбільш близьким за механізмами впливу вибрано препарат плантаглюцид з противиразковою активністю, який має широке клінічне застосування. В основу корисної моделі поставлена задача розширення арсеналу противиразкових засобів рослинного походження для профілактики та терапії при лікуванні виразкової хвороби шлунка і дванадцятипалої кишки, гастритів, гастродуоденітів, колітів, ентероколітів. Поставлена задача вирішується шляхом застосування екстракту з листя мати-й-мачухи як противиразкового засобу. Відомо, що мати-й-мачуха - це цінний засіб від кашлю. Поряд з використанням проти хвороб легенів її використовують також для обробки ран і запалень шкіри, при шкірних висипах і для очищення крові. Авторами вперше було досліджено противиразкову дію екстракту з листя мати-й-мачухи, одержаного за відомим способом. Такий екстракт може бути у вигляді рідкого або густого або сухого екстракту в залежності від подальшого застосування в якості активної діючої субстанції при створенні препаратів з противиразковою дією у різних лікарських формах. Екстракт листя мати-й-мачухи містить комплекс біологічно активних речовин, а саме глікозиди гіркі, флавоноїди, ситостерин, сапоніни, каротиноїди, кислоти органічні, дубильні речовини, вітамін С. Комплекс біологічно активних речовин листя мати-й-мачухи (Tussilago farfara L) запропоновано в якості антимікробного, противиразкового, протизапального та мембраностабілізуючого засобу. Спосіб одержання екстракту. Для отримання екстракту з листя мати-й-мачухи, що містить комплекс біологічно активних речовин, сировину вичерпно екстрагували гарячою водою у співвідношенні сировина-екстрагент 1:10 до повного вилучення біологічно активних речовин з сировини. Екстрагували при температурі 70-80 °С протягом 1,5-2 годин двічі. Отримані витяжки об'єднували, фільтрували і концентрували у вакуум-випарному апараті при температурі 50-60 °С і тиску 80-87 кПа до необхідної консистенції. Отриманий густий екстракт висушували до сухого у вакуумній сушильній шафі при температурі 100-120 °С і тиску 80-87 кПа. 1 UA 88100 U 5 10 15 20 25 30 35 Гостру токсичність вивчали на кафедрі біології, фізіології та анатомії Національного фармацевтичного університету під керівництвом професора Малоштан Л.М. Визначення гострої токсичності проводили за методом Пастушенко Т.В. на білих мишах. Було встановлено, що LD50 становила більше 15000 мг/кг. Це дозволило віднести цю субстанцію, відповідно з класифікацією Сидорова К.К., до класу практично нешкідливих сполук, що дало змогу продовжити вивчення біологічної активності. Приклад 1. Вивчення антимікробної активності. Вивчення антимікробної активності комплексу біологічно активних речовин листя мати-ймачухи проводили методом послідовних розведень у рідкому живильному середовищі на кафедрі мікробіології, вірусології та імунології Національного фармацевтичного університету під керівництвом професора Філімонової Н.І. Відповідно до рекомендацій ВООЗ для оцінки активності препаратів використовували референтні тест-штами мікроорганізмів: Staphylococcus aureus АТСС 25923, Escherichia coli АТСС 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853F1, Bacillus subtilis АТСС 6633, Candida albicans ATCC 885/653. Використовували поживний бульйон для культивування мікроорганізмів, виробництва НПО "Живильні середовища" МОЗ Російської федерації, з додаванням глюкози в розрахунку 3 мл на 100 мл бульйону. Метод серійних розведень, що використовувався, дозволяє дати кількісну оцінку антимікробної активності досліджуваних препаратів. М'ясо-пептоне живильне середовище розливали в 10 пробірок по 2 мл. В першу пробірку додавали 2 мл приготовленого розчину комплексу біологічно активних речовин листя мати-й-мачухи перемішували, забирали 2 мл і переносили в наступну пробірку і т.д. З останньої пробірки зливали 2 мл суміші. У кожну 7 пробірку, включаючи контрольну, вносили по 0,2 мл приготовленої культури з розрахунку 10 8 10 КОЕ/мл. Стандарт посівної культури встановлювали за оптичним стандартом каламутності ДІКС ім. Л.О. Тарасевича. Посіви вміщували в термостат на 18-24 години при 37 °С. Результати відмічали за наявністю або відсутністю помутніння середовища в пробірках, що містять різні розведення досліджуваного екстракту. Концентрація препарату в останній пробірці із прозорим середовищем (відсутність росту тест-мікроба) відповідає мінімально інгібуючій концентрації препарату (МІК). Для визначення бактерицидної концентрації з 2-3 останніх пробірок із прозорим середовищем (відсутність видимого росту) робили висів 0,1 мл вмісту на чашки зі щільним живильним середовищем або пробірки з бульйоном. Інкубування проводили 18-24 години при 37 °С і відзначали ту мінімальну концентрацію препарату, посів з якої не давав росту на агарі або в бульйоні. Ця кількість препарату відповідає його мінімальній мікробіоцидній концентрації (ММК). Результати визначення антимікробної активності комплексу біологічно активних речовин листя мати-й-мачухи наведені в таблиці 1. Таблиця 1 Тест-штамп S. aureus АТСС- 25923 В. subtilis АТСС-6633 P. aeruginosa ATCC27853F1 Е. coli АТСС- 25922 С. albicans АТСС885653 Примітки: 40 45 МІКМ1 11,5±0,3 7,6±0,5 Антимікробна активність розчину, мг/мл ММКМ2 М1-М2 18,7±3,9 7,2 14,8±1,7 7,2 Р >0,05