Трансгенна стійка до гербіцидів рослина сої, яка містить пакетовану подію 8264.44.06.1

Формула / Реферат | Подібні патенти | МПК / Мітки | Додаткова інформація | Код посилання

Номер патенту: 115766

Опубліковано: 26.12.2017

Автори: Хельд Брюс, Райт Террі, Колон Джулісса, Толедо Сандра, Цуй Юньсін, Рассел Шон, Секар Вайтхілінгам, Паркхерст Дон, Новак Стефен Н., Хоффман Том, Чжоу Нін

Є ще 77 сторінок.

Дивитися все сторінки або завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

1. Трансгенна клітина рослини сої, що містить геном, який містить полінуклеотидну ділянку, що має послідовність SEQ ID NO:27, де залишки 1-1494 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 5'-геномні фланкуючі послідовності, залишки 1495-1497 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку з трьох пар основ, залишки 1498-11774 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку Т-ланцюга pDAB8264, і залишки 11775-13659 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 3'-фланкуючі послідовності, і де з'єднання або перехід для 5'-кінця вказаної вставки виникає на залишках 1494-1495, і з'єднання або перехід для 3'-кінця вказаної вставки виникає на залишках 11774-11775.

2. Насінина сої, що містить геном, який містить полінуклеотид, що має послідовність SEQ ID NO:27, де залишки 1-1494 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 5'-геномні фланкуючі послідовності, залишки 1495-1497 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку з трьох пар основ, залишки 1498-11774 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку Т-ланцюга pDAB8264, і залишки 11775-13659 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 3'-фланкуючі послідовності, і де з'єднання або перехід для 5'-кінця вказаної вставки виникає на залишках 1494-1495, і з'єднання або перехід для 3'- кінця вказаної вставки виникає на залишках 11774-11775.

3. Клітина рослини за п. 1, де вказана клітина присутня в насінині сої.

4. Рослина сої, отримана в результаті вирощування насінини за п. 2, де вказана рослина містить вказаний полінуклеотид, що має послідовність SEQ ID NO:27.

5. Рослина-потомок рослини сої за п. 4, де вказана рослина-потомок містить вказаний полінуклеотид, що має послідовніcть SEQ ID NO:27.

6. Трансгенна рослина сої, що містить множину клітин за п. 1.

7. Рослина за п. 6, де вказані клітини додатково містять ген резистентності до комах.

8. Рослина за п. 6, де рослина є резистентною щонайменше до одного гербіциду, вибраного із групи, яка складається з гербіциду на основі феноксіоцтової кислоти, гербіциду на основі феноксибутанової кислоти, гербіциду на основі піридилоксіалканової кислоти, гербіциду на основі гліфосату й гербіциду на основі глуфосинатів, де вказана рослина містить трансгенну геномну вставку, що містить залишки 2026-9222 SEQ ID NO:13.

9. Виділений полінуклеотид, де вказаний полінуклеотид містить нуклеотидну послідовність, вибрану із групи, яка складається з SEQ ID NO:13-17, 20 і 27.

10. Спосіб захисту рослин від бур'янів, де вказаний спосіб включає нанесення щонайменше одного з гербіциду із групи, що включає гербіцид на основі арилоксіалканоату, гербіцид на основі піридилоксіалканової кислоти, гербіцид на основі гліфосату, гербіцид на основі біалафосу, гербіцид на основі фосфінотрицину або гербіцид на основі глуфосинату, на полі, де вказане поле включає рослину за п. 6.

11. Спосіб за п. 10, де вказаний спосіб включає одночасне застосування щонайменше двох із вказаних гербіцидів.

12. Спосіб за п. 10, де вказаний спосіб включає послідовне нанесення щонайменше двох із вказаних гербіцидів.

13. Спосіб за п. 10, де вказаний гербіцид на основі арилоксіалканоату вибраний із групи, яка складається з 2,4-D; 2,4-DB; MCPA і MCPB; і вказаний гербіцид на основі піридилоксіалканової кислоти вибраний із групи, яка складається із триклопіру й флуроксипіру.

14. Спосіб за п. 10, де вказаний спосіб включає нанесення щонайменше одного додаткового гербіциду на вказане поле.

15. Спосіб за п. 14, де вказаний щонайменше один додатковий гербіцид являє собою дикамбу.

16. Спосіб за п. 10, де вказаний спосіб включає висаджування насіння рослини на полі протягом 14 діб після застосування гербіциду(ів).

17. Спосіб за п. 16, де вказаний етап застосування проводять перед вказаним етапом садіння.

18. Спосіб за п. 10, де вказаний щонайменше один гербіцид наносять на верхівку вказаної рослини.

19. Касета експресії, трансгенно вбудована в єдиний хромосомний локус геному клітини рослини таким чином, що геном містить SEQ ID NO:27, де залишки 1-1494 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 5'-геномні фланкуючі послідовності, залишки 1495-1497 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку з трьох пар основ, залишки 1498-11774 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку Т-ланцюга pDAB8264, і залишки 11775-13659 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 3'-фланкуючі послідовності, і де з'єднання або перехід для 5'-кінця вказаної вставки виникає на залишках 1494-1495, і з'єднання або перехід для 3'-кінця вказаної вставки виникає на залишках 11774-11775.

20. Спосіб ідентифікації SEQ ID NO:27 у зразку, де вказаний спосіб включає детектування з'єднувальної послідовності SEQ ID NO:27, такої, як та, що міститься в насінні, яке зберігається під номером доступу ATCC PTA-11336, де залишки 1-1494 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 5'-геномні фланкуючі послідовності, залишки 1495-1497 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку з трьох пар основ, залишки 1498-11774 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою вставку Т-ланцюга pDAB8264, і залишки 11775-13659 вказаної послідовності SEQ ID NO:27 являють собою 3'-фланкуючі послідовності, із застосуванням зонда, що має послідовність SEQ ID NO:20, або щонайменше одного праймера, який специфічно зв'язується з або ампліфікує вказану з’єднувальну послідовність, де вказаний праймер має послідовність SEQ ID NO:18 або SEQ ID NO:19, де вказана з’єднувальна послідовність містить послідовність SEQ ID NO:14.

21. Спосіб за п. 20, де вказаний спосіб додатково включає ампліфікацію фрагмента ДНК із нуклеїнової кислоти, яка міститься у вказаному зразку, за допомогою полімеразної ланцюгової реакції із застосуванням щонайменше першого і другого праймерів, де вказаний перший праймер специфічно зв'язується із вбудованою послідовністю в SEQ ID NO:27, а вказаний другий праймер специфічно зв'язується з послідовністю, що входить до складу щонайменше однієї з вказаних фланкуючих послідовностей.

22. Набір для визначення зиготності події рослини сої, що містить SEQ ID NO:27, де вказаний набір містить перший праймер до події, другий праймер до події, референсний прямий праймер, референсний зворотний праймер, зонд до події і референсний зонд, де вказані перший та другий праймери до події складаються з SEQ ID NO:18 і SEQ ID NO:19, вказані референсні прямий та зворотний праймери складаються з SEQ ID NO:24 і SEQ ID NO:25, вказаний зонд до події складається з SEQ ID NO:20, і вказаний референсний зонд складається з SEQ ID NO:26.

23. Зонд, який має послідовність, вибрану із групи, яка складається з SEQ ID NO:14 і SEQ ID NO:15 і комплементарних їм послідовностей.

Текст

Реферат: Винахід належить до події сої pDAB8264.44.06.1, яка включає експресуючі касети й трансгенні вставки, що містять численні ознаки, що забезпечують резистентність до гербіцидів на основі гліфосату, арилоксіалканоату й глуфосинату. Послідовність події можливо "пакетувати" з іншими ознаками, включаючи, наприклад, інші білки стійкості до гербіцидів і/або комах. UA 115766 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Рівень техніки, який передує винаходу Гліфосат (N-фосфонометилгліцин), гербіцид широкого спектра, інгібує 5енолпірувілшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS), фермент шикіматного шляху біосинтезу, який синтезує незамінні ароматичні амінокислоти в рослинних клітинах. Інгібування EPSPS ефективно порушує синтез білка й тим самим, убиває уражені рослинні клітини. Оскільки гліфосат є неселективним, він убиває як бур'яни, так і сільськогосподарські культури. Таким чином, його можна застосовувати для сільськогосподарських культур тільки в тому випадку, якщо сільськогосподарським культурам можна додати стійкості до гліфосату, яка дозволить бажаним рослинам вижити при впливі гліфосату. Технологію рекомбінантних ДНК застосовували для ізоляції мутантних EPSP синтаз, стійких до гліфосату. Такі стійкі до гліфосату мутантні EPSP-синтази можна трансформувати в рослини й передавати стійкість до гліфосату трансформованим рослинам. Як приклад, ген стійкості до гліфосату виділяли зі штаму Agrobacterium CP4, як описано в патенті США № 5633435. Це посилання й усі цитовані в даному документі посилання включені в документ як посилання. Інші гени стійкості до гліфосату були створені за допомогою введення мутацій. Вони включають ген AroA, ізольований Comai і описаний у патентах США №№ 5094945, 4769061 і 4535060. Одну мутацію вводили, як описано в патенті США № 5310667, за допомогою заміни залишку аланіну на залишок гліцину між амінокислотними позиціями 80 і 120. Дві мутації вводили, як описано в патентах США №№ 6225114 і 5866775, у яких, на додаток до вказаної вище мутації, уводили другу мутацію (заміна залишку треоніну на залишок аланіну між позиціями 170 і 210) у ген EPSPS дикого типу. В інших роботах одержували стійку до гліфосату кукурудзу, за допомогою введення модифікованого гена EPSPS кукурудзи, що несе мутації залишку 102 (заміна треоніну на ізолейцин) і залишку 106 (заміна проліну на серин) амінокислотної послідовності, з номером доступу Genebank X63374. Див. патенти США №№ 6566587 і 6040497. Приклади подій, що забезпечують стійкість до гліфосату в сої, включають лінію сої GTS 403-2 (Padgette et al. 1995), подію сої MON89788 (патент США № 7608761), патент США № 7608761, який стосується події сої MON89788, кожне з яких було отримано за допомогою вставки гена cp4 epsps у сою. Повсюдне впровадження стійкої до гліфосату системи вирощування сільськогосподарських культур і зростаюче застосування гліфосату сприяло поширенню стійких до гліфосату й важких для контролю бур'янів в останні роки. У регіонах, де фермери зустрічаються зі стійкими до гліфосату бур'янами або зі зрушенням убік більш важких для контролю видів бур'янів, фермери можуть компенсувати недоліки гліфосату баковими сумішами або чергуванням з іншими гербіцидами, які допомагають боротися із пропущеними бур'янами. Широко використовуваним і ефективним компонентом бакової суміші для боротьби із широколистяними бур'янами в багатьох випадках 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота (2,4-D). 2,4D, яку використовують як гербіцид протягом більше 60 років, являє собою післясходовий гербіцид із широким спектром для боротьби з багатьма однорічними, дворічними і багаторічними широколистяними бур'янами, включаючи декілька ключових бур'янів кукурудзи, сої й бавовни. Ключові бур'яни, які контролює 2,4-D (витрата 560-1120 г ке/га) при вирощуванні просапних культур, включають Ambrosia artemisiifolia, Ambrosia trifida, Xanthium strumarium, Chenopodium album, Helianthus annuus, Ipomoea sp., Abutilon theophrasti, Conyza Сanadensis і Senna obtusifolia. 2,4-D забезпечує частковий контроль декількох ключових бур'янів, включаючи Polygonium pensylvanicum, Polygonium persicaria, Cirsium arvense, Taraxacum officinale і Amaranthus sp., включаючи Amaranthus rudis і Amaranthus palmeri. Обмеження для подальшого застосування 2,4-D полягає в тому, що її селективність відносно дводольних сільськогосподарських рослин, таких як соя або бавовна, дуже низька, і, у такий спосіб 2,4-D, як правило, не застосовують для (і, як правило, не застосовують біля) чутливих дводольних сільськогосподарських рослин. Крім того, застосування 2,4-D для трав'янистих сільськогосподарських рослин почасти обмежене природою ушкоджень, які можуть виникати в рослин. 2,4-D у комбінації із гліфосатом застосовують для забезпечення більш сильної обробки випалюванням перед безорним посівом сої й бавовни; однак через чутливість цих дводольних видів рослин до 2,4-D, таку обробку випалюванням потрібно проводити щонайменше за 14-30 діб до посіву (Agriliance, 2005). Організм, який інтенсивно вивчали, завдяки його здатності руйнувати 2,4-D, являє собою Ralstonia eutropha, яка містить ген, що кодує tfdA (Streber et al., 1987), фермент, який каталізує перший етап метаболічного шляху мінералізації. (Див. патент США № 6153401 і GENBANK Acc. No. M16730). Показано, що tfdA руйнує 2,4-D (Smejkal et al, 2001). Продукти, що утворюються в результаті руйнування, мають дуже низьку або нульову гербіцидну активність в порівнянні з 2,4 1 UA 115766 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 D. tfdA використовували в трансгенних рослинах для передачі стійкості до 2,4-D дводольних рослин (наприклад, бавовни й тютюну), у нормі чутливих до 2,4-D (Streber et al. (1989), Lyon et al. (1989), Lyon (1993), і патент США № 5608147). Багато які гени типу tfdA, які кодують білки, здатні руйнувати 2,4-D, були ідентифіковані з їхнього оточення, і поміщені в базу даних Genbank. Багато гомологів подібні до tfdA (>85 % ідентичних амінокислот). Однак існує ряд полінуклеотидних послідовностей зі значно меншою ідентичністю з tfdA (25-50 %), які при цьому містять характерні залишки, асоційовані з αкетоглутарат-залежним Fe (II) діоксигеназами. Приклад руйнуючого 2,4-D гена з низькою ідентичністю послідовності (

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Stacked herbicide tolerance event 8264.44.06.1, related transgenic soybean lines, and detection thereof

Автори англійською

Cui, Yonxing, Hoffman, Thom, Zhou, Ning, Novak, Stephen, N., Colon, Julissa, Parkhurst, Dawn, Toledo, Sandra, Wright, Terry, Russell, Sean, Held, Bruce, Sekar, Vaithilingam

Автори російською

Цуй Юньсин, Хоффман Том, Чжоу Нин, Новак Стэфен Н., Колон Джулисса, Паркхерст Дон, Толедо Сандра, Райт Тэрри, Рассел Шон, Хельд Брюс, Секар Вайтхилингам

МПК / Мітки

МПК: C07H 21/04, C12N 5/14, A01H 5/00, C12N 15/82

Мітки: яка, 8264.44.06.1, трансгенна, подію, стійка, рослина, гербіцидів, містить, сої, пакетовану

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/85-115766-transgenna-stijjka-do-gerbicidiv-roslina-so-yaka-mistit-paketovanu-podiyu-826444061.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Трансгенна стійка до гербіцидів рослина сої, яка містить пакетовану подію 8264.44.06.1</a>

Подібні патенти