Спосіб визначення цитотоксичності отрути блідої поганки
Номер патенту: 22019
Опубліковано: 30.04.1998
Автори: Чекман Іван Сергійович, Локай Борис Анатолійович, Кузьменко Сюзанна Антонівна, Бойчук Богдан Романович
Завантажити PDF файл.
Формула / Реферат
Спосіб визначення цитотоксичності отрути блідої поганки шляхом спільної її інкубації з кров'ю людини з наступним підрахунком змінених форм еритроцитів, який відрізняється тим, що в якості культури використовують клітини крові донорів, інкубацію ведуть протягом 3 год при 37°С і підрахунок змінених форм еритроцитів проводять через 1 і 3 год і при збільшенні їх числа через 1 год у 5 раз і через 3 год - у 9 раз і більше визначають цитотоксичність отрути блідої поганки.
Текст
Винахід відноситься до медицини, а саме до експериментальної токсикології, і може бути використаний для моделювання гострого отруєння токсичними грибами, зокрема блідою поганкою. Відомий спосіб визначення цитотоксичності, зокрема дифтерійного токсину (А.с. СССР №860764, кл. A61K35/74, 1981), який складається з одержання культури клітин амніотичного епітелію людини, тривалою інкубацією з токсином у різних режимах і обліком результатів через 6 і 27год. В основу винаходу поставлено задачу визначення цитотоксичності отрути блідої поганки шляхом заміни культури клітин на донорську кров і забезпечити спрощення, прискорення та здешевлення способу. Поставлена задача досягається інкубацією екстракту блідої поганки з кров'ю донорів і за кількістю змінених форм-еритроцитів, визначають цитотоксичність отрути блідої поганки. Спосіб виконується таким чином: з 0,05г свіжої блідої поганки (або 0,005г сухої) одержують екстракт відомим способом: шматочок шапинки гриба вміщують у пробірку, додають 1мл метилового спирту, кип'ятять на пісочній бані 30хв, фільтрують, з фільтрату випаровують метанол до одержання маслянистої краплі, яку розчиняють в 0,2мл ізотонічного розчину хлориду натрію, додають 1мл гепаринізованої (12МО/мл) крові людини і інкубують при 37°C протягом 3год. Через 1 і 3год. 0,1мл крові змішують з 0,4мл ізотонічного розчину хлориду натрію, го тують препарат типу "роздавлена крапля" і в світловому мікроскопі при збільшенні 900 1350 підраховують кількість змінених форм еритроцитів (стоматоцити, ехіноцити, пойкілоцити і шизоцити) і при збільшенні їх через 1год. у 5 раз і через 3год. - у 9 раз і більше в порівнянні з контролем визначають цитотоксичність отрути блідої поганки. Дані, які характеризують запропонований спосіб, слідуючі: кількість змінених форм еритроцитів у контролі через 1год. інкубації складала (%): 3,5 ± 0,1, через 3 год 6,8 ± 0,2, з отрутою блідої поганки 19,4 ± 0,71 64,7 ± 4,2 відповідно.
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for determination of death-cup poison cytotoxicity
Автори англійськоюKuzmenko Siuzanna Antonivna, Chekman Ivan Serhiiovych, Lokai Borys Anatoliiovych, Boichuk Bohdan Romanovych
Назва патенту російськоюСпособ определения цитотоксичности яда бледной поганки
Автори російськоюКузьменко Сюзанна Антоновна, Чекман Иван Сергеевич, Локай Борис Анатольевич, Бойчук Богдан Романович
МПК / Мітки
МПК: A61K 35/74
Мітки: поганки, отрути, визначення, спосіб, цитотоксичності, блідої
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/1-22019-sposib-viznachennya-citotoksichnosti-otruti-blido-poganki.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб визначення цитотоксичності отрути блідої поганки</a>
Попередній патент: Спосіб інтенсифікації енергетичного обміну
Наступний патент: Спосіб оцінки розладів гемодинаміки
Випадковий патент: Тест-система діагностична імуноферментна для визначення протилейкозних антитіл у сироватках крові та в молоці великої рогатої худоби (врх)