Спосіб моделювання гострого церебрального ішемічного інсульту у щурів

Винахід відноситься до експериментальної медицини і може бути використаний при моделюванні гострих ішемічних станів головного мозку у лабораторних тварин. Складність моделювання гострого ішемічного церебрального інсульту (ГЦІ) обумовлено великою кількістю колатеральних шляхів кровопостачання великих півкуль головного мозку щурів, що повністю компенсують відсутність кровотоку по магістральних судинах. Тому задача моделювання наближеної до природньої ГЦІ з показовою клінічною картиною однієї з півкуль головного мозку щурів без допоміжних викривлень вихідних параметрів на даний момент не має задовільного вирішення. Ще більш тяжкою задачею є моделювання ГЦІ різних ступенів тяжкості. Так, найбільш поширеним способом моделювання ГЦІ є коагуляція середньої мозкової артерії щурів через трепанаційну рану [1]. Суттєвими недоліками цього способу вважаються супутні трепанаційна, термічна та електрична травми, які викривлюють клінічну картину ГЦІ, обтяжують загальний стан тварин. Відомий також спосіб моделювання ГЦІ шляхом перев'язки обох сонних артерій (СА) з розрізу на шиї та одночасна коагуляція базилярної артерії через трепанаційну рану. В результаті перекривається все магістральне та колатеральне кровопостачання обох півкуль головного мозку. На вихідні параметри ГЦІ накладаються наслідки тяжкого операційного втручання [2]. Найбільш близьким аналогом (прототипом) є спосіб моделювання ГЦІ у щурів шляхом перев'язки СА з розрізу на шиї (3, 4). В цьому випадку зберігається колатеральний кровотік з конгрлатеральної СА та вертебро-базилярного басейну. Показової картини ГЦІ не спостерігається. Задачею винаходу є виключення не тільки магістрального, а й колатерального кровопостачання в одній (запланованій) півкулі головного мозку. Досягаємий технічний результат полягає в більшому наближенні до природнього формування ГЦІ в одній з гемісфер головного мозку і виключенні за рахунок цього викривлень вихідної морфологічної і клінічної картини ішемічного інсульту у щурів. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі моделювання ГЦІ у щурів, що включає перев'язування однієї з СА через розріз на шиї, згідно винаходу, після перев'язування СА в її дистальний відрізок вводять завись барія сульфату в воді в кількості 0,1 - 0,5мл. Відрізняючою особливістю заявляємого способу моделювання ГЦІ є гарантоване виключення не тільки магістрального, але і колатерального кровопостачання відповідної гемісфери головного мозку шляхом емболізації колатеральних судин часточками зависі барія сульфату. Це дозволяє отримати більш наближену до природ-ньої патоморфологічну і клінічну картини ГЦІ. Заявляємий спосіб здійснюється наступним чином. Тварину вводять у наркоз за прийнятою методикою і фіксують на препараційному столі у положенні на спині. Виконують розріз шкіри по середній лінії від верхньої третини шиї до грудини. Тупим шляхом відводять вгору щитовидну залозу. Латеральне зміщують грудинноключично-сосцевидний м'яз. Роз'єднують нервовосудинний пучок шиї, виділяючи СА. Підводять дві лігатури під загальну СА. Проксимальну лігатуру зав'язують. Пунктують СА тонкою голкою зі шприцем, в який набрано завись барія сульфату у воді у пропорції 4/5. Вводять завись інтраартеріально у кількості 0,1 - 0,5мл (менша кількість не викликає картини ГЦІ, більша - призводить до смерті щура). Дистальну лігатуру зав'язують. Накладають шви на м'які тканини. Конкретні приклади. Щур 8. Моделювання проведено згідно заявляємого способу. Інтраартеріально введено 0,4мл BaSO4 у праву СА. Після виходу з наркозу відмічався лівосторонній глибокий геміпарез, внаслідок чого спостерігалася латеропульсія при пересуванні, гіподинамія, а також птоз правої повіки. Таким чином отримана клінічна картина ГЦІ середнього ступеню тяжкості. Щур 15. Інтраартеріально введено 0,1мл BaSO4 у праву СА. Після виходу з наркозу відмічається монопарез лівої задньої лапи, птозування правої повіки. Тварина при пересуванні має тенденцію до ходіння по колу. Таким чином отримана клінічна картина ГЦІ легкого ступеню тяжкості. У групі з 72 щурів після моделювання ГЦІ за даним способом отримано 100% відтворення клінічної картини ішемічного інсульту заданого ступеня тяжкості. Для підтвердження отримання патоморфологічної картини ГЦІ проведено гістологічне і електронномікроскопічне дослідження тканини та судин головного мозку у 17 щурів. Для світооптичного дослідження біоптати мозку фіксувалися в 12% нейтральному формаліні, збезводнювались і заливались впарафін. Приготовані гістологічні зрізи фарбувалися гематоксиліном і еозіном. Для електронномікроскопічного дослідження шматочки тканини головного мозку оброблювались за стандартними методиками і заливались в епоксидні смоли. Ультратонкі зрізи товщиною 600А виготовлялись на ультратомах ЛКБ і Рейхардт. Для підвищення контрасту дофарбовувались по Рейнтгольдсу і продивлялись в електронному мікроскопі ЕМ-400Т фірми "Філіпс". Ідентифікація процесів, що спостерігались в клітинах головного мозку, проводилась за допомогою морфометричної обробки електроннограм на системі аналізу зображень IBAS - 2000 фірми "Оптон" (ФРГ). На підставі проведеного гістологічного і електронно-мікроскопічного досліджень виявлено явища еритростазу у нерівномірно розширених судинах лівої півкулі головного мозку вже через 30 хвилин від моменту інтервенції. На електронномікроскопічному рівні було видно судини з розширеним просвітом, заповненим або еритроцитароною масою, або електроннощільним гомогенним матеріалом (частками барію сульфату). Додатковою перевагою заявляємого способу є можливість визначення локалізації емболізуючої речовини у артеріях головного мозку при ренгенграфії, внаслідок ренгенконтрасності зависі барія сульфату.