Спосіб лікування інфаркту міокарда за допомогою glp-1 або його аналогів (варіанти)

1 Спосіб зниження смертності і захворюваності після інфарісгу міокарда, що включає введення пацієнту, що потребує цього, сполуки, вибраної з групи, що включає GLP-1, GLP-1 аналоги, GLP-1 ПОХІДНІ і їх фармацевтично прийнятні солі, в дозі, яка є ефективною для нормалізації вмісту глюкози в крові 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначену сполуку вводять внутрішньовенно 3 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначену сполуку вводять підшкірно 4 Спосіб за п 2 або 3, який відрізняється тим, що зазначене введення здійснюють безперервно 5 Спосіб за п 4, який відрізняється тим, що швидкість введення зазначеної сполуки становить від 0,25 пмоль/кг/хв до 6 пмоль/кг/хв 6 Спосіб за п 5, який відрізняється тим, що Передумови створення винаходу 1 Галузь, до якої відноситься винахід Даний винахід відноситься до способу зниження смертності і захворюваності пацієнтів-діабетиків після інфаркту міокарда 2 Допоміжна інформація Захворюваність і смертність від серцево-судинних хвороб вище у пацієнтів з діабетом, що проявляється, або порушеною толерантністю до глюкози, в порівнянні з пацієнтами, що не мають подібних розладів Діабетики складають до 24% від загального числа пацієнтів, що поступають у відділення інтенсивної терапії для хворих з гострою коронарною недоста швидкість введення зазначеної сполуки становить від 0,5 пмоль/кг/хв до 2,4 пмоль/кг/хв 7 Спосіб за п 5, який відрізняється тим, що зазначена швидкість становить від приблизно 0,5 пмоль/кг/хв до приблизно 1,2 пмоль/кг/хв 8 Спосіб за п 2, який відрізняється тим, що зазначене внутрішньовенне введення здійснюють періодично 9 Спосіб за п 2, який відрізняється тим, що зазначену сполуку вводять внутрішньовенно і, крім того, іншим парентеральним шляхом 10 Спосіб за п 9, який відрізняється тим, що зазначеним іншим парентеральним шляхом є підшкірний шлях 11 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначеною сполукою, що вводять, є GLP(7-36) амід або його фармацевтично прийнятна сіль 12 Спосіб зниження смертності і захворюваності після інфаркту міокарда, що включає введення сполуки, що виявляє інсулінотропну активність через взаємодію з тим самим рецептором або тими самими рецепторами, з яким або якими взаємодіє GLP-1 при виявленні своєї інсулінотропної активності 13 Спосіб зниження захворюваності і смертності після інфаркту міокарда, що включає введення сполуки, що посилює чутливість до інсуліну через взаємодію з тим самим рецептором або тими самими рецепторами, з яким або якими взаємодіє GLP-1 для посилення чутливості до інсуліну тністю за підозрою на інфаркт, в той час як вони складають лише біля 5% від загального числа пацієнтів [Мальмберг (Malmberg) і Райден (Ryden), ФалерДжМ (Fuller J H ) , Diabet Metab 19 96-99 (1993)] Лікарняна смертність пацієнтів-діабетиків з інфарктом міокарда в два рази перевищує ВІДПОВІДНІ показники для недіабетиків [Хемстен А (Hamsten А) і ІНШІ, J Int Med 736 1-3 (1994), Додаток 236, Мальмберг К і Райден Л , Eur Heart J 9 256-264 (1988)] Діабетики частіше захворюють і частіше вмирають на етапі видужання після гострого приступу хвороби, головним чином, внаслідок смертельного повторного інфаркту і застійної сер О C O СЧ о> (О 61923 цевої недостатності [Мальмберг і Райден, Стоун був розроблений алгоритм вливання інсуліну для П (Stone Р) і ІНШІ, J Am Coll Cardiol 14 49-57 діабетиків [Хендра Т Дж (HendraT J ) і ІНШІ, (1989), Карлсон Б В (Karlson B W ) і ІНШІ, Diabet Diabetes Res Clm Pract, 16 213-220 (1992)] ОдMed 10 (5)449-54 (1993), Барбаш ГI (Barbash нак, у разі застосування згаданого алгоритму, гіпоG l ) і ІНШІ, J Am Coll Cardiol 22 707-713 (1993)] глікемія розвинулася у 2 1 % пацієнтів У іншому ВІДМІННІСТЬ В рівні смертності і захворюваності між дослідженні, присвяченому контролюванню рівня діабетиками і недіабетиками після інфаркту міокаглюкози після інфаркту міокарда, гіпоглікемія розрда зберігається, незважаючи на зниження КІЛЬКОвинулася у 18% пацієнтів у разі вливання інсуліну і СТІ випадків захворюваності і смертності після госглюкози [Мальмберг К A (Malmberg К А) і ІНШІ, трого інфаркту міокарда [Грейнджер К Б (Granger Diabetes Care, 17 1007-1014 (1994)] С В) і ІНШІ, J Am Coll Cardiol , 21 (4) 920-5 (1993), При вливанні інсуліну також часто потрібне Грайнс К (Grmes С) і ІНШІ, N Engl J Med контролювання рівнів глюкози в крові для того, 328 673-679(1993)] щоб можна було виявити появу ознак гіпоглікемії і зняти їх якнайшвидше У пацієнтів, яким в ході Фактори, що зумовлюють несприятливий проздійснення вищезазначеного дослідження [Мальгноз серед пацієнтів-діабетиків з гострим інфаркмберг, 1994] проводили вливання інсуліну, рівні том міокарда, можуть діяти перед, у час і після глюкози в крові вимірювали, як мінімум, через когострого приступу До них відноситься розсіяний жну годину і, ВІДПОВІДНО до цього, коректували атеросклероз коронарних судин, з більш запущешвидкість вливання Таким чином, безпека і ефекною і обширною хворобою коронарної артерії, яка, тивність способу лікування пацієнтів з інфарктом разом з можливою діабетичною кардюмюпатією, міокарда за допомогою вливання інсуліну і глюкоможе сприяти високому переважанню застійної зи залежить від простоти і швидкості доступу до серцевої недостатності Значення може мати таданих, що стосуються рівня глюкози в крові Подікож і автономна невропатія з порушеним сприйбна настійна потреба контролювання рівня глюконяттям болю і підвищеними коливаннями частоти зи в крові покладає важкий тягар на медичний песерцевих скорочень в спокої Коронарний тромб є рсонал, а також підвищує незручності і вартість невід'ємною частиною інфаркту, що розвивається, лікування Як наслідок, відділення для хворих сері, що примітно, у пацієнтів-діабетиків було виявлецево-судинними захворюваннями часто не видіне порушення активності тромбоцитів, коагуляції і ляють ресурсів для оптимізацм рівнів вмісту глюкофібринолітичних функцій [Деві Г (Davi G ) і ІНШІ, зи в крові у діабетиків з гострим інфарктом New England J Med , 322 1769-1774 (1990)] міокарда, що могло б забезпечуватися за допомоВажливу роль у діабетиків можуть грати посигою внутрішньовенного введення інсуліну Врахолені порушення обміну речовин Наслідком інфарвуючи небезпеку і навантаження, характерні для кту міокарда є зниження рівня інсуліну в системі вливання інсуліну, необхідний альтернативний кровообігу, вельми істотне зниження адренергічноПІДХІД до регулювання рівня глюкози в крові під час го тонусу і виділення стресових гормонів, напригострого інфаркту міокарда у діабетиків клад, кортизону, катехоламшів і глюкагону, які разом посилюють гіперглікемію і стимулюють ЛІПОЛІЗ Гормон шкретин, глюкагоноподібний пептид-1, Виділені ВІЛЬНІ жирні кислоти через посередництво що скорочено позначається, як GLP-1, утвориться декількох механізмів додатково пошкоджують серз проглюкагона в шлунково-кишковому тракті і поцевий м'яз, в той час як надмірне окислення вільсилює виділення інсуліну, що індукується поживних жирних кислот, можливо, може викликати поними речовинами [Крциман Б (Krcymann В) і ІНШІ, шкодження не уражених ішемією частин серцевого Lancet 2 1300-1303 (1987)] Відомо, що різні пром'яза [Родрігес Б (Rodngues В) і ІНШІ, цесовані форми GLP-1 стимулюють секретування Cardiovascular Research, 26 (10) 913-922 (1992)] інсуліну (інсулінотропна дія) і утворення цАМФ [див, наприклад, Мойсов С (Mojsov S), Int J Необхідні паліативні заходи щодо нормалізації Peptide Protein Research, 40 333-343 (1992)] Був рівня глюкози в крові і контролювання метаболічвстановлений взаємозв'язок між результатами ного каскаду, який загострює у діабетиків ураженрізних лабораторних експериментів in vitro і інсуліня, викликані діабетом У недавньому дослідженні нотропними реакціями ссавців, особливо людей, поліпшена корекція метаболічних порушень у пана екзогенне введення GLP-1, GLP-1(7-36) аміду і цієнтів-діабетиків при гострому інфаркті міокарда, GLP-1(7-37) кислоти [дивись, наприклад, Наук М А включаючи вливання інсуліну, що ретельно конт(Nauck M А) і ІНШІ, Diabetologia, 36 741 -744 (1993), ролюється, і глюкози, а також жорстке регулюванГутняк М (Gutmak М) і ІНШІ, New England J of ня рівнів глюкози в крові після гострого приступу Medicine, 326 (20) 1316-1322 (1992), Наук MA і за допомогою підшкірного багаторазового введенІНШІ, J Clm Invest, 91 301-307 (1993), і Торенс Б ня інсуліну, дозволила знизити смертність протя(Thorens В) і ІНШІ, Diabetes, 42 1219-1225 (1993)] гом року після інфаркту міокарда на 30%, в порівGLP-1 (7-36) амід надає явно виражений антидіанянні з контрольною групою діабетиків, яким бетогенний вплив на інсулінозалежних діабетиків інсулін вводився лише у разі необхідності за КЛІНІза допомогою стимулювання чутливості до інсуліЧНИМИ показаннями [Мальмберг К і ІНШІ, J Am ну і підвищення виділення інсуліну, індукованого College Cardiology, 26 57-65 (1995)] глюкозою, в фізіологічних концентраціях [Гутняк М Вливання інсуліну, однак, створює потенційну і ІНШІ, New England J Med 326 1316-1322 (1992)] можливість виникнення гіпоглікемії, яка визначаGLP-1 (7-36) амід, у разі введення інсулінонезалеється як рівень глюкози в крові нижче за О.ЗмМ жним діабетикам, стимулює виділення інсуліну, Гіпоглікемія підвищує небезпеку шлуночкових ексзнижує секретування глюкагону, сповільнює випотрасистолій і являє собою небезпечний наслідок рожнення шлунка і посилює використання глюкози вливання інсуліну 3 метою запобігання гіпоглікемії 61923 [Наук М А , 1993, Гутняк М , 1992, Наук, 1993] Перешкодою для використання молекул типу GLP-1 для тривалого лікування є те, що період напіввиведення таких пептидів з системи кровообігу є вельми нетривалим Наприклад, період напіввиведення GLP-1(7-37) з системи кровообігу складає всього лише від 3 хвилин до 5 хвилин Період напіввиведення GLP-1(7-36) аміду, у разі його підшкірного введення, складає приблизно 50 хвилин Таким чином, для досягнення тривалого впливу згадані молекули GLP повинні вводитися за допомогою безперервного вливання [Гутняк М і ІНШІ, Diabetes Care 171039-1044 (1994)] Нетривалий період напіввиведення і подальша необхідність в постійному введенні GLP-1 не є недоліком в даному винаході, оскільки пацієнт, як правило, прикутий до постелі у відділенні для хворих серцевосудинними захворюваннями, де рідини постійно вводяться парентеральним шляхом Цей винахід надає спосіб зниження смертності і захворюваності після інфаркту міокарда, що включає введення пацієнту, що потребує цього, сполуки, обраної з групи, що включає GLP-1, GLP1 аналоги, GLP-1 ПОХІДНІ І їх фармацевтично прийнятні солі, в дозі, яка є ефективною для нормалізації вмісту глюкози в крові Цей винахід надає також ще один спосіб зниження смертності і захворюваності після інфаркту міокарда, що включає введення сполуки, що виявляє інсулінотропну активність через взаємодію з тим самим рецептором або тими самими рецепторами, з яким або якими взаємодіє GLP-1 при виявлені своєї інсулінотропної активності Зрештою, цей винахід надає також ще один спосіб зниження захворюваності і смертності після інфаркту міокарда, що включає введення сполуки, що посилює чутливість до інсуліну через взаємодію з тим самим рецептором або тими самими рецепторами, з яким або якими взаємодіє GLP-1 для посилення чутливості до інсуліну Цей винахід забезпечує переваги зниження смертності і захворюваності після інфаркту міокарда, що спостерігаються при комбінованому лікуванні глюкозою і інсуліном у діабетиків при гострому інфаркті міокарда, але без незручної потреби, що дорого коштує, в частому контролюванні рівня вмісту глюкози в крові, тлумачення результатів визначення рівня вмісту глюкози в крові і коректування швидкості введення інсуліну, а також без постійно присутньої небезпеки гіпоглікемії, якою супроводжується вливання інсуліну Фігура 1 - крива, що демонструє вплив безперервного вливання GLP-1(7-36) аміду на середню концентрацію глюкози в крові (мМ) {—•—) у п'ятьох інсулінонезалежних пацієнтів, хворих на цукровий діабет (NIDDM), на протязі ночі Згадана крива також показує вплив безперервного вливання інсуліну на середню концентрацію глюкози в крові (""О--) у т и х ж е с а м И х п'ятьох інсулінонезалежних пацієнтів-діабетиків, але на протязі іншої ночі Фігура 2 - крива, що показує вплив вливання GLP-1(7-36) аміду на середню концентрацію глюкози в крові (мМ) ( • ') у п'ятьох інсулінонезалежних пацієнтів-діабетиків, при вливанні його на протязі дня в продовженні трьох годин, починаючи з моменту початку кожного прийому їжі під час сніданку, обіду і вечері Згадана крива показує також вплив підшкірного введення інсуліну на середню концентрацію глюкози в крові ( " О - - ) утих же самих п'ятьох інсулінонезалежних пацієнтівдіабетиків, але на протязі іншого дня, і з впорскуванням незадовго до початку кожного прийому їжі "GLP-1" означає GLP-1(7-37) По традиції, прийнятій в даній галузі, амінокінцева область GLP-1(7-37) позначається номером 7, в той час, як карбоксикінцева - номером 37 Амінокислотна ПОСЛІДОВНІСТЬ GLP-1(7-37) добре відома в даній галузі, однак вона приведена далі для зручності читача Glu-Gly~Gln-Ala~Ala25'Ly8-Glu-Phe--Ile~Ala30Trp-Leu-Val-Lys-Gly^-Arg-Gly^-COOH (Послідовність № 1) "GLP-1 аналог" визначається як молекула, що має одну або декілька амінокислотних замін, делецій, інверсій або добавок, в порівнянні з GLP-1 До числа GLP-1 аналогів, відомих вданій галузі, відносяться, наприклад, GLP-1(7-34) і GLP-1(7-35), GLP-1 (7-36), Gln9-GLP-1 (7-37), D-Gln9-GLP-1 (737), Thr16-Lys18-GLP-1(7-37) і Lys18-GLP-1(7-37) Переважними GLP-1 аналогами є GLP-1 (7-34) і GLP-1 (7-35), які розкриваються в патенті США №5118666, включеному в даний опис як посилання, а також GLP-1 (7-36), які являють собою біологічно процесовані форми GLP-1, що мають інсулінотропні властивості Інші GLP-1 аналоги розкриваються в патенті США №5545618, який включений в даний опис як посилання "GLP-1 похідне" визначається, як молекула, що має амінокислотну ПОСЛІДОВНІСТЬ GLP-1 або GLP-1 аналога, але, додатково, що має хімічну модифікацію однієї або декількох своїх амінокислотних бічних груп, атомів а-вуглеводу, кінцевої аміногрупи або кінцевої карбокислотної групи Хімічна модифікація включає, але, однак, цим не обмежується, добавку ХІМІЧНИХ складових, утворення нових зв'язків І видалення ХІМІЧНИХ складових Модифікації амінокислотних бічних груп включають, без обмеження, ацилування лізинових sаміногруп, N-алкілування аргініну, гістидину або лізину, алкілування глутамшових або аспарагінових карбокислотних груп і деамідування глутамшу або аспарагіну До модифікацій кінцевих аминогрупп відносяться, без обмеження, модифікації дезамшогруп, N-нижчих алкілових, N-ди-нижчих алкілових і N-ацильних груп До модифікацій кінцевих карбоксильних груп відносяться, без обмеження, модифікації амідних, нижчих алкіламідних, діалкіламідних груп і нижчого алкилового ефіру Нижчим алкилом є С1-С4 алкіл Більш того одна або декілька бічних груп або кінцевих груп можуть захищатися за допомогою захисних груп, відомих середньому хіміку-фахівцеві з білків, а-вуглевод амінокислоти може бути моно- або диметилованим До складу переважної групи GLP-1 аналогів і 8 61923 похідних, призначених для використання в даному винаході- входять молекули приведеної далі формули Thr-Phe-Thr-ser-AsplS-Val-Ser-Ser^Tyr-Leu^OY -aiy-GXn-Al25 (Послідовність № 2) і їх фармацевтично прийнятні солі, де Ri вибирають з групи, до складу якої входить Lпстидин, D-пстидин, дезамшопстидин, 2амінопстидин, р-пдроксипстидин, гомопстидин, альфа-фторметилпстидин і альфа-метил гістидин, X вибирають з групи, до складу якої входить Ala, Gly, Val, Thr, He і альфа-метил-АІа, Y вибирають з групи, до складу якої входить Glu, Gin, Ala, Thr, Ser і Gly, Z вибирають з групи, до складу якої входить Glu, Gin, Ala, Thr, Ser і Gly, і R2 вибирають з групи, до складу якої входить Nbb і Gly-OH, при умові, що згадана сполука має ізоелектричну точку в межах від, приблизно, 6,0 до, приблизно, 9,0, а також, додатково, при умові, що коли R-I-HIS, X-Ala, Y-Glu, і Z-Glu, R2 повинен бути Nbb Численні GLP-1 аналоги і ПОХІДНІ, ЩО мають ізоелектричну точку в цьому діапазоні, були розкриті і включають, наприклад GLP-1 {?-36)NH2 Gly 8 -GLP-1 С7-365ЫН2 Gln 9 -GLP-1 (7-37) D-Gln 9 -GLP-1 (7-37) acetyl~Lys9-GLP-l (7-3?) -GL1?-1 E7-37! LP-1 Asn 9 -GLP-1 (7-37) (7-37) D-Asn s -GLP-1 (7-371 S e r 22_Arg23.Arg24.Gln2g.GLp.1 Thrls-Lysia-GLP-l Lys^-GLP-l (7-37) Arg23~GLP-l (7-37) Arg24_GbP~l (7-37) (7-37) (7-37) тощо [дивись, наприклад, WO 91/11457] Слідуюча переважна група активних сполук для використання в даному винаході розкривається в міжнародній заявці WO 91/11457 і включає, по суті, GLP-1(7-34), GLP-1 (7-35), GLP-1 (7-36) або GLP-1 (7-37), або ж їх амідну форму, а також їх фармацевтично прийнятні солі, що мають, як мінімум, одну модифікацію, вибрану з групи, що включає (a) заміну лізину гліцином, серином, цистеїном, треоніном, аспарагіном, глутаміном, тирозином, аланіном, валіном, ізолейцином, лейцином, метіоніном, фенілаланіном, аргініном або Dлізином в положенні 26 і/або в положенні 34, або ж заміну аргініну гліцином, серином, цистеїном, треоніном, аспарагіном, глутаміном, тирозином, аланіном, валіном, ізолейцином, лейцином, метіоніном, фенілаланіном, лізином або D-арпншом в положенні 36, (b) заміну триптофану стійкою до окислення амінокислотою в положенні 31, (з) заміну, як мінімум, одного з валіну тирозином в положенні 16, серину лізином в положенні 18, глутамшової кислоти аспарагіновою кислотою в положенні 21, гліцину серином в положенні 22, глутамшу аргініном в положенні 23, аланіну аргініном в положенні 24, і лізину глутаміном в положенні 26, і (d) заміну, як мінімум, одного з аланіну гліцином, серином або цистеїном в положенні 8, глутамшової кислоти аспарагіновою кислотою, гліцином, серином, цистеїном, треоніном, аспарагіном, глутаміном, тирозином, аланіном, валіном, ізолейцином, лейцином, метіоніном або фенілаланіном в положенні 9, гліцину серином, цистеїном, треоніном, аспарагіном, глутаміном, тирозином, аланіном, валіном, ізолейцином, лейцином, метіоніном або фенілаланіном в положенні 10, і аспарагінової кислоти глутамшовою кислотою в положенні 15, і (є) заміну гистидшу гліцином, серином, цистеїном, треоніном, аспарагіном, глутаміном, тирозином, аланіном, валіном, ізолейцином, лейцином, метіоніном або фенілаланіном, або D- або Nацилованою або алкілованою формою гістидину в положенні 7, де в замінах (a), (b), (d) і (є) згадані заміщені амінокислоти можуть, факультативно, бути в D-формі, а амінокислоти, заміщені в положенні 7, можуть, факультативно, бути в Nацилованій або N-алкілованій формі Оскільки фермент дипептидил-пептидаза VI (DPP IV) може нести відповідальність за прискорену інактивацію in vivo, що спостерігається, введеного GLP-1, [дивись, наприклад, Ментлайн Р (Mentlem R) і ІНШІ, Eur J Biochem , 214 829-835 (1993)], переважним є введення GLP-1 аналогів і похідних, захищених від впливу DPP IV, в той час як більш переважним є введення Gly8-GLP-1(736)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, a-Me™n-Ala8-GLP-1(736)NH2 і Gly8-Gln21-GLP-1(7-37)OH або їх фармацевтично прийнятних солей Переважним є використання в даному винаході молекули, заявленої в патенті США №5188666, який включений в даний опис як посилання Таку молекулу вибирають з групи, до складу якої входить пептид, що має представлену далі амінокислотну ПОСЛІДОВНІСТЬ i5 20 Thr-Phe-Thr~Ser-Asp -Val-Ser-Ser-Tyr-L,eu Glu~Gly-Gln-Ala-Ala25~Lys~Glu-Phe-Ile-Ala30_ Trp-Leu-Val-X (Послідовність Ш 3), де X вибирають з групи, до складу якої входить Lys і Lys-Gly, і похідне згаданого пептида, де згаданий пептид вибирають з групи, до складу якої входить фармацевтично прийнятна сіль згаданого пептида, отримана доданням кислоти, фармацевтично прийнятна карбоксилатна сіль згаданого пептида, фармацевтично прийнятний нижчий алкіловий ефір згаданого пептида, і фармацевтично прийнятний амід згаданого пептида, вибраний з групи, до складу якої входить амід, нижчий алкіламід і нижчий диалкіламід До складу іншої переважної групи молекул, призначених для використання в даному винаході, входять сполуки, заявлені в патенті США 9 61923 №5512549, який включений в даний опис як посилання, що мають загальну формулу 20 Thr-Phe-Thr-Ser-Asp^S-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu 25 Glu-Gly~Gln-Ala-Ala ~Xaa-Glu~Phe~Xl 3 Trp-Leu-Val~Lys-Gly 5-Arg-R3 (ПОСЛІДОВНІСТЬ № 4) 1 і їх фармацевтично прийнятні солі, де R вибирають з групи, що включає 4-імідазопропюніл, 4імідазоацетил або 4-імідазо-а,а-диметилацетил, 2 R вибирають з групи, що включає Сє-С-ю нерозга3 лужений ацил, або він відсутній, R вибирають з групи, що включає Gly-OH або Nbb, і Xaa-Lys або Arg Більш переважними з'єднаннями ПОСЛІДОВНОСТІ №4 для використання в даному винаході є сполуки, де Xaa-Arg і Р2-Сє-Сю нерозгалужений ацил Вельми переважними з'єднаннями ПОСЛІДОВНОСТІ №4 для використання в даному винаході є сполуки, де Xaa-Arg, R2-C6-Cio нерозгалужений ацил і R3-Gly-OH Більш переважними з'єднаннями ПОСЛІДОВНОСТІ №4 для використання в даному винаході є сполуки, де Xaa-Arg, R2-C6-Cio нерозгалужений ацил, R -Gly-OH і R1-4-iMifla3onpomoHin Найбільш переважним з'єднанням ПОСЛІДОВНОСТІ №4 для використання в даному винаході є сполуки, де Xaa-Arg, R2-Cs нерозгалужений ацил, R3-Gly-OH і R1-4-iMifla3onpomoHin Вельми переважним є використання в даному винаході молекули, заявленої в патенті США №5120712, який включений в даний опис як посилання Таку молекулу вибирають з групи, до складу якої входить пептид, що має представлену далі амінокислотну ПОСЛІДОВНІСТЬ NH2-Hxs 7 -Ala-Glu-Gly :l0 Thr-Phe-Thr-Ser-Asp ~Val-Ser-Ser-Tyr-Leu 2 0 15 Trp~beu-Val-by5-Gly3S-Arg-Gly37~c0QH (ПОСЛІДОВНІСТЬ № 1) і похідне згаданого пептида, де згаданий пептид вибирають з групи, що включає фармацевтично прийнятну сіль згаданого пептида, отриману доданням кислоти, фармацевтично прийнятну карбоксилатну сіль згаданого пептида, фармацевтично прийнятний нижчий алкіловии ефір згаданого пептида, і фармацевтично прийнятний амід згаданого пептида, вибраний з групи, що включає амід, нижчий алкіламід і нижчий диалкіламід Найбільш переважним є використання в даному винаході GLP-1(7-36) аміду або його фармацевтично прийнятної солі Амінокислотна ПОСЛІДОВНІСТЬ GLP-1(7-36) аміду виглядає таким чином 10 ?rp~Iieu-Val-Lys-Gly35~Arg-£ffl2 (Послідовність № 5) Способи отримання згаданої активної сполуки, використаної в даному винаході, а саме, GLP-1, GLP-1 аналога або GLP-1 похідного, використаного в даному винаході, добре ВІДОМІ І описані в патентах США №№5118666, 5120712 і 5523549, які включені в даний опис як посилання Амінокислотну частину згаданої активної сполуки, використаної в даному винаході, або її попередника, отримують 1) ХІМІЄЮ твердофазного синтезу, 2) очищенням GLP молекул з природних джерел, або 3) технологією рекомбінантних ДНК Твердофазний ХІМІЧНИЙ синтез поліпептидів добре відомий в даній галузі і його опис можна знайти в підручниках з даної галузі, дивись, наприклад, Дагес Г (Dugas Н) і Пенні К (Penney С), Bioorgamc Chemistry, видавництво Sprmger-Verlag, Нью-Йорк (1981), crop 54-92, Меріфілд Дж М (Mernfield J M ), Chem Soc, 85 2149 (1962), а також Стюарт (Stewart) і Янг (Young), Solid Phase Peptide Synthesis, видавництво Freeman, Сан-Франциско (1969), crop 24-66 Амінокислотна частина, наприклад, може бути синтезована за твердофазною методикою з використанням синтезатора пептидів 430А (компанія PE-Apphed Biosystems, Inc, 850 Lincoln Center Drive, Фостер СІТІ, Каліфорнія 94404) і синтетичних циклів, що поставляються компанією PE-Apphed Biosystems БІОХІМІЧНІ амінокислоти і ІНШІ реактиви комерційно доступні від компанії PE-Apphed Biosystems і інших компаній, що займається ХІМІЧНИМ постачанням До початкових рметилбензпдриламшових смол, з метою отримання С-кінцевих карбоксамідів, застосовують біохімічні методи секвенування з використанням протоколів подвійних пар Для отримання С-кінцевих кислот використовують ВІДПОВІДНІ поліакриламідні смоли Asn, Gin і Arg з'єднують, використовуючи заздалегідь отриманий пдроксибензотриазоловий ефір Можуть бути використані приведені далі захисні групи бічних ланцюгів Arg, тозил Asp, циклогексил Glu, циклогексил Ser, бензил Thr, бензил Туг, 4-бромкарбобензокси Позбавлення захисних властивостей біохімічними методами може здійснюватися за допомогою трифтороцтової кислоти в метиленхлориді Після завершення синтезу, згадані пептиди можуть позбавлятися захисних властивостей і відщеплюватися від смоли за допомогою безводного фтороводню (HF), що включає 10% метакрезолу Отщепление згаданої захисної групи (груп) бічних ланцюгів і згаданого пептида від смоли здійснюється при температурі від -5°С до 5°С, в переважному варіанті, на льоду, протягом 60 хвилин Після видалення фтороводню, згаданий пептид/смолу промивають ефіром, пептид екстрагують льодя 12 11 61923 ною оцтовою кислотою і люфілізують видавництво Cold Springs Harbor Laboratory Press, Для отримання активної сполуки, що викорисНью-Йорк, том 1-3 Сайта рестриктазного розщептовується в даному винаході, можуть застосовувалення вбудовуються в будь-який кінець ДНК, що тися способи, добре ВІДОМІ рядовому фахівцеві в кодує молекулу GLP-1, для полегшення виділення області технології рекомбінантних ДНК Фактично, з/включення в ампліфікуючі і експресуючі вектори, способам рекомбінантних ДНК може віддаватися добре ВІДОМІ в даній області Конкретні використаперевага внаслідок більш високого виходу Основні ендонуклеази будуть визначатися характером ними етапами отримання рекомбінантної продукції рестриктазного розщеплення вихідного використає такі ного експресуючого вектора Рестрикційні сайти a) виділення природної ПОСЛІДОВНОСТІ ДНК, ЩО вибираються для правильного орієнтування згакодує молекулу GLP-1, або конструювання синтеданої кодуючої ПОСЛІДОВНОСТІ відносно контрольтичної або напівсинтетичної кодуючої ПОСЛІДОВНОних послідовностей для забезпечення, тим самим, СТІ ДНК для молекули GLP-1, ВІДПОВІДНОГО внутрішньорамочного зчитування і b) введення згаданої кодуючої ПОСЛІДОВНОСТІ В експресії необхідного білка Згадана кодуюча ПОекспресуючий вектор за допомогою способу, приСЛІДОВНІСТЬ повинна позицюнуватися таким чином, датного для експресії білків або самостійно, або у щоб виявитися у ВІДПОВІДНІЙ рамці зчитування з вигляді злитих білків, промотором і сайтом скріплення рибосом згаданоc) трансформація відповідної еукарютичної го експресуючого вектора, які функціонують в згаабо прокарютичної клітини-господаря за допомоданій клітині-господареві, в якій повинен бути ексгою згаданого експресуючого вектора, пресований згаданий білок d) культивування згаданої трансформованої клітини-господаря в умовах, що забезпечують моДля забезпечення ефективної транскрипції жливість експресії молекули GLP-1, і згаданого синтетичного гена, його необхідно функціонально зв'язати з областю промоторає) виділення і очищення рекомбінантно продуоператора Таким чином, згадана область промокованої молекули GLP-1 тора-оператора згаданого синтетичного гена розЯк вказувалося раніше, згадані кодуючі ПОСЛІміщується з такою ж самої послідовною орієнтаціДОВНОСТІ можуть бути повністю синтетичними або єю відносно ІНІЦІЮЮЧОГО кодона ATG згаданого результатом модифікацій більш великої нативної синтетичного гена ДНК, що кодує глюкагон ПОСЛІДОВНІСТЬ ДНК, ЩО кодує предпроглюкагон, представлена в роботі У даній області ВІДОМІ різні експресуючі вектоПанда (Lund) і інших, Proc Natl Acad Sci U S A ри, придатні для трансформації прокарютичних і 79 345-349 (1982), і вона може бути використана еукарютичних клітин Дивись, наприклад, The як вихідний матеріал при напівсинтетичному проPromega Biological Research Products Catalogue дукуванні сполук, ВІДПОВІДНИХ даному винаходу, (1992) (компанія Promega Corp, 2800 Woods шляхом зміни нативної ПОСЛІДОВНОСТІ З метою доHollow Road, Медісон, Вісконсин, 53711-5399), і сягнення необхідних результатів The Stratagene Cloning Systems Catalogue (1992) (компанія Stratagene Corp , 11011 North Torrey Синтетичні гени, наслідком транскрипції і Pines Road, La Jolla, Каліфорнія, 92037) Крім того, трансляції яких in vitro або in vivo є продукування в патенті США №4710473 описуються вектори молекули GLP-1, можуть конструюватися спосотрансформації плазміди кільцевої ДНК, придатні бами, добре відомими в даній галузі Досвідченодля експресії екзогенних генів Е соїі на високих му фахівцеві зрозуміло, що, внаслідок природного рівнях Ці плазміди є придатними як трансформувиродження згаданого генетичного коду, може ючі вектори в методах рекомбінантних ДНК і бути отримане значна, але, проте, певна КІЛЬКІСТЬ послідовностей ДНК, всі з яких будуть кодувати (a) наділяють згадану плазміну здібністю до молекулу GLP-1 автономної реплікації в клітині-господареві, Методика конструювання синтетичного гена (b) контролюють автономну реплікацію плаздобре відома в даній області Дивись Браун міди в залежності від температури, при якій під(Brown) і ІНШІ, (1979) Methods in Enzymology, видатримуються культури клітини-господаря, вництво Academic Press, Нью-Йорк, 68109-151 (з) стабілізують забезпечення ЖИТТЄДІЯЛЬНОСТІ Згадана ПОСЛІДОВНІСТЬ ДНК програмується з необзгаданої плазміди в популяціях клітини-господаря, хідної амінокислотної ПОСЛІДОВНОСТІ за допомогою (d) направляють синтез білкового продукту, що генетичного коду, який легко встановлюється рясвідчить про ЖИТТЄДІЯЛЬНІСТЬ плазміди в популяції довим біологом Після завершення програмуванклітини-господаря, ня, сама згадана ПОСЛІДОВНІСТЬ може продукувати(є) забезпечують ПОСЛІДОВНІ сайти розпізнася за допомогою традиційного пристрою для вання рестриктаз, характерні для згаданої плазмісинтезування ДНК, наприклад, синтезаторів ДНК ди, і моделі 380А або 380В (компанія PE-Apphed (f) завершують транскрипцію мРНК Biosystems, Inc , 850 Lincoln Center Drive, Фостер Згадані плазміди кільцевої ДНК придатні для СІТІ, Каліфорнія 94404) використання як вектори в методах рекомбінантних ДНК для забезпечення високих рівнів експресії Для експресії згаданої амінокислотної частини екзогенних генів сполуки, що використовується в даному винаході, ПОСЛІДОВНІСТЬ синтетичної ДНК, отриманої метоНаступним етапом після завершення конструдами генной інженери, вбудовується в один з баювання експресуючого вектора для амінокислотної гатьох ВІДПОВІДНИХ експресуючих векторів на осночастини сполуки, що використовується в даному ві рекомбінантних ДНК за допомогою ВІДПОВІДНИХ винаході, є введення згаданого вектора у відповірестриктаз Дивись, загалом, Маніатіс (Mamatis) і дну клітину і, тим самим, конструювання рекомбіІ Н Ш І ( 1 9 8 9 ) M o l e c u l a r C l o n i n g , A L a b o r a t o r y M a n u a l , 14 13 61923 нантної клітини-господаря, придатної для експреФакультативно, можуть захищатися аміно і касування згаданого поліпептиду Способи трансфорбоксильні кінцеві амінокислотні залишки GLP-1 рмації клітин векторами на основі рекомбінантних похідних або, факультативно, захищається тільки ДНК добре ВІДОМІ в даній галузі і їх опис може бути одна з кінцевих областей Опис реакцій утворення знайдено в таких загальних довідкових посібниках, і видалення таких захисних груп приведений в як Маніатіс і ІНШІ, ДИВИСЬ раніше Клітини-господарі стандартних роботах, в тому числі, наприклад, в можуть конструюватися як з еукарютичних, так і з "Protective Groups in Organic Chemistry", видавницпрокарютичних клітин тво Plenum Press, Лондон і Нью-Йорк (1973), Грін T Г (Green T H), "Protective Groups in Organic Прокарютичні клітини-господарі, загалом, проSynthesis", видавництво Wiley, Нью-Йорк (1981), і дукують згаданий білок з більш високою швидкістю "The Peptides", том I, Schroder і Lubke, видавницті легше культивуються Білки, експресовані висово Academic Press, Лондон і Нью-Йорк (1965) До корівневими бактерійними експресуючими систечисла репрезентативних амінозахисних груп відмами, агрегуються, що є їх характерною особливіносяться, наприклад, форміл, ацетил, ізопропіл, стю, у вигляді гранул або внутрішньоклітинних бутоксикарбоніл, флуоренілметоксикарбоніл, картелець, які містять високі рівні надпродукованого бобензилокси тощо До числа репрезентативних білка Подібні білкові-скупчення, як правило, повикарбоксизахисних груп відносяться, наприклад, нні виділятися, розчинятися, денатуруватися і побензиловий ефір, метиловий ефір, етиловий ефір, вторно укладатися за допомогою способів, добре t-бутиловий ефір, р-нітрофеніловий ефір тощо відомих в даній області Дивись Крюгер (Kreuger) і ІНШІ (1990) в Protein Folding, під редакцією Праш Карбоксикінцеві, нижчі алкілоефірні GLP-1 ПО(Gierasch) і Кінг (King), crop 136-142, American ХІДНІ, що використовуються в даному винаході, Association for the Advancement of Science отримують внаслідок реакції необхідного (С1-С4) Publication №89-18S, Вашингтон, округ Колумбія, і алканолуз необхідним поліпептидом в присутності патент США №4923967 каталітичної кислоти, наприклад, хлористоводневої кислоти ВІДПОВІДНИМИ умовами для згаданого Зміни амінокислотної ПОСЛІДОВНОСТІотримання алкілового ефіру є наступні темперапопередника GLP-1 або GLP-1 аналога для отритура реакції, приблизно, 50°С і тривалість реакції мання необхідного GLP-1 аналога або GLP-1 похівід, приблизно, 1 години до, приблизно, 3 годин дного, здійснюються за допомогою добре відомих Подібним же чином можуть бути отримані алкілеспособів хімічна модифікація, ферментативна фірні ПОХІДНІ Asp і/або Glu залишків модифікація або поєднання хімічної і ферментативної модифікації попередників GLP-1 Класичні Отримання карбоксамідного похідного сполуспособи рідиннофазного синтезу і напівсинтетичні ки, що використовується в даному винаході, здійсспособи також можуть бути придатними для отринюється, наприклад, як описано у Стюарта Дж М мання молекул GLP-1, що використовуються в (Stewart J М) і інших, Solid Phase Peptide даному винаході Способи отримання молекул Synthesis, видавництво Pierce Chemical Company GLP-1, ВІДПОВІДНИХ даному винаходу, добре ВІДОМІ Press, 1984 рядовому хіміку-фахівцеві з білків У даному дослідженні може використовуватися фармацевтично прийнятна сольова форма Добавка ацильної групи до епсилонGLP-1, GLP-1 аналога або GLP-1 похідного Кисаміногрупи Lys34 може здійснюватися за допомолотами, що традиційно використовуються для гою будь-якого з численних способів, відомих в отримання солей, що отримуються доданням кисданій галузі Дивись Bioconjugate Chem "Chemical лоти, є неорганічні кислоти, наприклад, хлористоModifications of Proteins History and Applications", воднева кислота, бромистоводнева кислота, йодисторінки 1, 2-12 (1990) і Хашімото (Hashimoto) і стоводнева кислота, сірчана кислота, фосфорна кислота тощо, і органічні кислоти, наприклад, рНаприклад, до лізил-епсилон-амшу, за допотолуолсульфонова кислота, метансульфонова могою 50% ацетонітрила в боратному буфері, мокислота, щавлева кислота, рже додаватися N-пдроксисукцинімідний ефір октанової кислоти Згаданий пептид може ацилуватися бромфенілсульфонова кислота, вугільна кислота, перед або після добавки згаданої імідазольної бурштинова кислота, лимонна кислота, бензойна групи Більш ТОГО, ЯКЩО згаданий пептид отримукислота, оцтова кислота тощо Прикладами таких ють методами рекомбінантних ДНК, ацилування солей є сульфат, піросульфат, бісульфат, сульфіт, може бути здійснено перед ферментативним розбісульфіт, фосфат, монопдрогенфосфат, дипдрощепленням Крім того, лизин в GLP-1 похідному генфосфат, метафосфат, пірофосфат, хлорид, може бути ацилований, як описано в міжнародній бромід, йодид, ацетат, пропюнат, деканоат, капзаявці WO 96-29342, яка включена в даний опис як рилат, акрилат, форміат, ізобутират, капроат, геппосилання таноат, пропюлат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацат, фумарат, малеат, бутин-1,4У даній області описано існування і отримання дюат, гексин-1,6-дюат, бензоат, хлорбензоат, мебезлічі захищених, незахищених і частково захитилбензоат, динітробензоат, гідрокс и бензоат, мещених, природних і штучних функціональних анатоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфологів і похідних GLP-1(7-36) аміду і молекул GLPнат, фенілацетат, фенілпропюнат, фенілбутират, 1 (7-37) [дивись, наприклад, патенти США цитрат, лактат, гама-пдроксибутират, гліколят, №№5120712 і 5118666, які включені в даний опис тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафяк посилання, і Орсков К (Orskov С) і ІНШІ, J ВІОІ талін-1-сульфонат, нафталш-2-сульфонат, мандеChem , 264 (22) 12826-12829 (1989), а також WO лат тощо Переважними солями, отриманими до91/11457 (Баклі Д І (Buckley D I ) і ІНШІ, опублікоданням кислоти, є солі, отримані за допомогою вані 8 серпня 1991 року)] І Н Ш І , P h a r m a c e u t i c a l R e s 6 ( 2 ) 1 7 1 1 7 6 ( 1 9 8 9 ) 16 15 61923 мінеральних кислот, наприклад, хлористоводневої можуть бути отримані за допомогою використання кислоти і бромистоводневої кислоти, і, особливо, полімерів для утворення комплексних сполук або хлористоводневої кислоти абсорбування згаданої активної сполуки, що використовується в даному винаході Продовжений До числа солей, отриманих доданням основ, терапевтичний вплив може забезпечуватися за відносяться солі, отримані з неорганічних основ, допомогою вибору ВІДПОВІДНИХ макромолекул, нанаприклад, амонію або гідроксидів, карбонатів, приклад, поліефірів, поліамшокислот, ПОЛІВІНИЛПІбікарбонатів лужних або лужноземельних металів ролідона, етиленвшілацетату, метилцелюлози, тощо Таким чином, до числа таких основ, придаткарбоксиметилцелюлози або протамінсульфата, а них для отримання солей, ВІДПОВІДНИХ даному витакож за допомогою підбору концентрації макронаходу, відносяться гідроксид натрію, гідроксид молекул і способів включення з метою пролонгукалію, гідроксид амонію, карбонат калію тощо вання виділення Іншим можливим способом збіОсобливо переважними є сольові форми льшення тривалості дії препаратів виділення, що GLP-1, GLP-1 аналог або GLP-1 похідне, що контролюється, є включення активної сполуки, що використовуються в даному винаході, перед виковикористовується в даному винаході, в частки пористанням в даному винаході можуть вводитися лімерного матеріалу, наприклад, поліефірів, полідо складу лікарської форми з одним або декількоамшокислот, пдрогелів, полімеру молочної кислома наповнювачами Наприклад, згадана активна ти або співполімерів етилену і вінілацетату У сполука, що використовується в даному винаході, альтернативному варіанті, замість включення споможе утворювати комплексну сполуку з двоваленлуки в згадані полімерні частки, можливий затним катіоном металу за допомогою добре відомих мкнення сполуки, що використовується в даному способів До подібних катіонам металів відносятьвинаході, в мікрокапсули, отримані, наприклад, ся, наприклад, Zn ++ , Mn ++ , Fe++, Co++, Cd ++ , Ni ++ консервативними способами або міжфазною політощо меризацією, наприклад, пдроксиметилцелюлози, Факультативно, згадана активна сполука, що або в желатинові мікрокапсули, ВІДПОВІДНО, або в використовується в даному винаході, може поєдколоїдні системи доставки лікарського препарата, нуватися з фармацевтично прийнятним буфером з наприклад, ліпосоми, альбумінові мікросфери, регулюванням рН для забезпечення прийнятної мікроемульсм, наночастинки і нанокапсули, або в СТІЙКОСТІ і його придатності для парентерального макроемульсм Подібні способи розкриваються в введення Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) Факультативно, може додаватися одне або декілька фармацевтично прийнятних антимікробДіагноз "інфаркт міокарда" ставиться за мединих засобів Переважними фармацевтично прийнчним свідченням на основі, як правило, виявлення, ятними антимікробними засобами є метакрезол і як мінімум, двох з представлених далі симптомів і фенол Може додаватися одна або декілька фарсвідчення мацевтично прийнятних солей для регулювання 1) біль в грудній КЛІТИНІ, що триває як мінімум іонної сили або ТОНІЧНОСТІ ДЛЯ додаткового регу15 хвилин, лювання ІЗОТОНІЧНОСТІ згаданої лікарської форми 2) наявність як мінімум двох стандартних знаможе додаватися один або декілька наповнювачів чень вмісту креатинкінази і креатинкінази В в сиПрикладом наповнювача, регулюючого ІЗОТОНІЧроватці, які мають як мінімум два стандартних відність, є гліцерин хилення від нормального діапазону протягом 10Введення може здійснюватися будь-яким 1 6 ГОДИН ПІСЛЯ ПОЯВИ СИМПТОМІВ, шляхом, ефективність якого відома рядовому лі3) наявність двох або більш стандартних рівнів кареві Перевага віддається парентеральному вмісту лактатдегідрогенази в сироватці, що мають введенню Під парентеральним введенням в меяк мінімум два стандартних відхилення від нормадичній літературі традиційно розуміється уприскульного діапазону протягом 48-72 годин після появи вання дозованої лікарської форми в організм за симптомів, включаючи ізоензиматичну картину, допомогою стерильного шприца або якого-небудь типову для інфаркту міокарда, і іншого механічного пристосування, наприклад, 4) розвиток нових зубців Q і/або збільшення інфузійного насосу Парентеральними шляхами вихідних зубців ST після інверсії зубця Т в, як мінівведення є внутрішньовенний, внутрішньом'язомум, двох з дванадцяти стандартних відведень вий, підшкірний, внутрішньочеревний, інтраспінаЕКГ льний, підоболонковий, штрацеребровентрикулярГостра фаза інфаркту міокарда доводиться на ний, внутрішньоартеріальний, субарахноідальний і перші 72 години після появи симптомів або свідепідуральний Більш переважними шляхами ввечення, опис яких був приведений раніше Спосіб дення згаданих сполук, що використовуються в лікування, який є предметом справжнього винаходаному винаході, є внутрішньовенний, внутріду, застосовується протягом гострої фази інфаркту шньом'язовий і підшкірний Ще більш переважниміокарда, тобто при гострому інфаркті міокарда ми шляхами введення сполук, що використовуПацієнтом, потребуючим сполук, що викорисються в даному винаході, є внутрішньовенний і товуються в даному винаході, є пацієнт, що знахопідшкірний Для парентерального введення, актидиться в гострій фазі інфаркту міокарда, і який вна сполука, що використовується в даному винатакож нездібний до саморегулювання рівня вмісту ході, в переважному варіанті, поєднується з дисглюкози в крові Пацієнт нездібний до саморегутильованою водою з ВІДПОВІДНИМ рН лювання, якщо у нього 1) раніше був діагностований інсулінозалежний діабет (IDDM) або інсуліноДодаткові фармацевтичні способи можуть винезалежний діабет (NIDDM), згідно з визначенням користовуватися для контролювання тривалості Національної групи по збору даних, що стосуються дії Препарати з виділенням, що контролюється 18 17 61923 діабету [Diabetes, 28 1039-1057 (1979)], 2) рівень КЛІНІЧНОГО результату знаходиться в межах можвмісту глюкози в крові перевищує 11 ммоль/літр, ливостей рядового лікаря навіть без попереднього діагностування діабету, Даний винахід буде більш зрозумілим з посиабо 3) спостерігається аномальна толерантність ланням на конкретні приклади, які приведені для до глюкози ілюстрування, а не для обмеження даного винахоДоза GLP-1, GLP-1 аналога або GLP-1 похідДУ ного, ефективна відносно нормалізації рівня глюПриклад 1 кози в крові пацієнта, буде залежати від ряду чинGLP-1(7-36) амід вводили шляхом підшкірного ників, до яких відносяться, без обмеження, стать, вливання з швидкістю 1,2пмоль/кг/годину протягом маса і вік пацієнта, міра нездатності регулювати десяти нічних годин п'яти пацієнтам, страждаючим рівень глюкози в крові, першопричини будь-якої інсулінонезалежним діабетом (NIDDM) Як контнездатності регулювати рівень глюкози в крові, у роль інсулін безперервно вливали тим же самим разі одночасного введення глюкози або іншого п'яти пацієнтам, однак не в ті дні, в які проводилоджерела вуглеводу, шлях введення і бюдоступся вливання GLP-1(7-36) аміду Швидкість вливанність, персистування в організмі, лікарська форма і ня інсуліну коректували кожні дві години для заефективність введеної сполуки У разі безперервбезпечення оптимального контролю і щоб ного введення, відповідна швидкість введення уникнути гіпоглікемії Як показують дані, представскладає, приблизно, від 0,25пмоль/кг маси тілені в Таблиці 1 і на Фігурі 1, підшкірне вливання ла/хвилину до 6пмоль/кг маси тіла/хвилину, в пеGLP-1(7-36) аміду майже нормалізувало рівень реважному варіанті, приблизно, від 0,5пмоль/кг/хв глюкози в крові, не викликавши гіпоглікемії ні у до 1,2пмоль/кг/хв У разі періодичного введення, одного з пацієнтів Контролювання обміну речопри визначенні дози, призначеної для введення, вин, що здійснювалося за допомогою GLP-1(7-36) необхідно враховувати проміжок часу між дозами, аміду, давало кращі результати, ніж у разі застобюдоступність GLP-1, GLP-1 аналога або GLP-1 сування інсуліну, і середній рівень глюкози в крові похідного і КІЛЬКІСТЬ необхідна для забезпечення був нижче у разі обробки GLP-1(7-36) амідом, в нормального рівня глюкози в крові Визначення порівнянні з контролем статистично значущою дози і швидкості введення GLP-1, GLP-1 аналога КІЛЬКІСТЮ інсуліну в 23 00, 0 00 і 1 00 або GLP-1 похідного для досягнення необхідного Таблиця 1 Середні рівні глюкози в крові у п'яти NIDDM пацієнтів, яким протягом десяти нічних годин безперервно вливали GLP-1 (7-36) амід У ході здійснення контрольного дослідження з тими ж самими пацієнтами в інший день, шляхом безперервного вливання вводили інсулін Години 21 00 22 00 23 00 0 00 1 00 2 00 3 00 4 00 5 00 6 00 7 00 Вливання GLP-1 Середній рівень глюко- Стандартна пози в крові (мМ) грішність (мМ) 7,5 0,45 5,4 0,76 4,1 0,16 4,4 0,23 4,4 0,29 4,8 0,34 5,2 0,41 5,4 0,41 5,8 0,41 6,0 0,45 6,2 0,45 Приклад 2 Протягом дня GLP-1(7-36) амід вливали п'яти NIDDM пацієнтам протягом трьох годин під час сніданку, обіду і вечері Час вливання (як указано на Фігурі 2) 7 30-10 ЗО (сніданок), 10 30-1 ЗО (обід) і 4 30-7 ЗО (вечеря) У ході здійснення контрольного експерименту в інший день, тим же самим п'яти NIDDM пацієнтам підшкірно вводили інсулін безпосередньо перед початком прийому їжі, як показано на Фігурі 2 При вливанні GLP-1 зникали коливання рівня глюкози, що виникають після прийняття їжі і що спостерігаються у разі введення Вливання інсуліну (контроль) Середній рівень Стандартна погрішглюкози в крові (мМ) ність (мМ) 6,9 0,68 6,6 0,55 5,9 0,98 5,6 0,90 0,58 5,1 5,2 0,58 5,4 0,30 5,7 0,25 6,0 0,30 6,1 0,38 6,1 0,33 інсуліну Вливання GLP-1 забезпечувало підтримку нормальних рівнів вмісту глюкози в крові Відразу ж після завершення кожного вливання GLP-1(736) аміду, рівень вмісту глюкози в крові істотно підвищувався При введенні GLP-1(7-36) аміду не спостерігалося небажаних побічних явищ Ці дані свідчать про те, що вливання GLP-1(7-36) аміду забезпечує більш ефективний контроль рівнів глюкози після прийому їжі, ніж уприскування інсуліну, і що згаданий контроль залишається ефективним протягом періоду, коли продовжується вливання GLP-1 (7-36) аміду 19 20 61923 Таблиця 2 Середні рівні вмісту глюкози в кров п'яти NIDDM пацієнтів, яким протягом трьох годин, починаючи з моменту початку прийму їжі, вливали GLP-1 (7-36) амід У контрольному дослідженні, що проводилося в інший день з тими ж самими пацієнтами, безпосередньо перед кожним прийомом їжі шляхом підшкірного уприскування вводили інсулін Час початку прийому їжі 7 30, 10 ЗО і 4 ЗО Години 7 00 8 00 9 00 10 00 11 00 12 00 13 00 14 00 15 00 16 00 17 00 18 00 19 00 10 00 21 00 Вливання GLP-1 Подкожне уприскування інсуліну Середній рівень глюко- Стандартна погріСередній рівень Стандартна погрішзи в крові (мМ) шність (мМ) глюкози в крові (мМ) ність (мМ) 5,4 0,35 6,1 0,41 4,9 0,38 7,0 0,51 5,7 0,59 9,1 0,74 5,8 1,06 9,9 0,78 8,1 0,94 8,2 0,76 9,4 0,59 6,5 0,74 7,2 1,18 9,1 0,90 5,3 1,21 8,1 0,91 7,2 0,71 7,0 0,87 10,4 0,26 7,2 0,57 9,2 1,06 6,5 0,59 5,7 1,59 7,3 0,65 6,6 0,94 6,1 0,59 8,3 0,71 6,0 0,41 9,3 0,71 6,4 0,44 ФІГ. 1 2:0 00 00 :0 (ОДИНИ 40 :0 8:00 61923 21 2 2 ФІГ. 2 6 - 6:00 10:00 14:00 18:00 22:00 ГОЛИНИ Комп'ютерна верстка А Крулевський Підписне Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119