Спосіб центральної локорегіонарної анестезії фармацевтичним водним розчином хлоропрокаїну

Реферат: Винахід стосується способу центральної локорегіонарної анестезії, який включає повторюване інтратекальне введення ін'єкційного фармацевтичного водного розчину хлоропрокаїну або його солей, який не містить консервантів та/або антиоксиданта і який має рН від 3 до 4, причому хлоропрокаїн вводять у дозі, яка становить 15-80 мг на добу, і при цьому згадане інтратекальне введення повторюють протягом пepioду часу тpивaлістю від 2 до 10 днів. UA 115078 C2 (12) UA 115078 C2 UA 115078 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Галузь техніки Цей винахід стосується фармацевтичної композиції на основі хлоропрокаїну для повторюваного інтратекального введення. Цей винахід стосується ін'єкційних фармацевтичних препаратів, придатних для спінальної або інтратекальної анестезії. Конкретніше, цей винахід стосується застосування ін'єкційних розчинів на основі хлоропрокаїну для інтратекальної анестезії. Рівень техніки Спінальна анестезія являє собою різновид центральної локорегіонарної анестезії, за яким ін'єкційний розчин, що містить місцевий анестетик як активну речовину, вводять у тверду мозкову оболонку, тобто зовнішню менінгеальну мембрану, яка захищає спинний мозок. Цю ін'єкцію, зазвичай, виконують із застосуванням спеціальних тонких голок між остистими відростками двох хребців. Після впорскування розчин, що містить місцевий анестетик, змішується зі спинномозковою рідиною, яка омиває спинний мозок і розташована між спинним мозком і твердою мозковою оболонкою, блокуючи провідність нервових імпульсів до головного мозку і спричинюючи оборотну втрату чутливості, яка може супроводжуватись або може не супроводжуватись руховим паралічем. Спинний мозок в усіх випадах залишається захищеним м'якою мозковою оболонкою, тобто найглибшою менінгеальною мембраною. Завдяки змішуванню зі спинномозковою рідиною згаданий розчин, який містить місцевий анестетик, спричинює анестезію передньої і задньої частин спинного мозку, тобто ділянок, з яких беруть початок як рухові, так і чутливі нерви. Таким чином, введення розчину анестетика спричинює зникнення чутливості на ділянках, інервованих відповідними нервовими корінцями, і, водночас з цим, пригнічує м'язову активність. Як правило, спінальну анестезію використовують для проведення операцій на органах нижньої частини черевної порожнини та нижніх кінцівках. Типовими прикладами застосування спінальної анестезії є апендектомія, герніопластика, кесарів розтин, артроскопія колінного суглоба, корекція бурситу великого пальця стопи тощо. Якщо анестетик, застосовуваний для спінальної анестезії, є ізобаричним, тобто має таку саму питому масу, що і спинномозкова рідина, або ліквор, його дія розповсюджується, як правило, на всі сегменти зі спричиненням реакції, яка є пропорційною кількості введеного лікарського препарату. Дія спінальної анестезії може тривати від однієї години до приблизно трьох годин, залежно від типу застосованого місцевого анестетика. Метод місцевої спінальної анестезії може бути розділений на епідуральну ін'єкцію та інтратекальну ін'єкцію. В останньому випадку розчин, який містить місцевий анестетик, вводять місцево у так званий субарахноїдальний простір. Незважаючи на те, що інтратекальний метод є більш інвазивним, ніж епідуральний метод, оскільки ін'єкцію здійснюють у найглибшу зону спинного мозку, він має перевагу, яка полягає в тому, що цей метод потребує значно менших доз місцевого анестетика, які є меншими у приблизно десять разів. Цьому аспекту в більшості випадків віддають перевагу, оскільки місцеві анестетики мають певну нейротоксичність. Незважаючи на це, інтратекальне введення місцевих анестетиків може також супроводжуватися нейротоксичністю і не є позбавленим недоліків. Ці побічні ефекти стають ще більш явними у випадку повторюваного введення доз місцевого анестетика. Крім того, не всі місцеві анестетики забезпечують адекватну відповідь у випадку спінального або інтратекального введення. Наприклад, Hodgson P.S., Liu S.S., Batra M.S. et al. [Procaine compared with lidocaine for incidence of transient neurologic symptoms, Reg. Anesth. Pain Med., 2000; 25: 218-22] повідомили про відсоток випадків несприятливості до місцевої анестезії 17 % розчином прокаїну. Інші місцеві анестетики, такі як лідокаїн, забезпечують більш адекватні реакції на спінальне введення. Тим не менш, його використання в анестезії спинного мозку допускає наявність певних ризиків для здоров'я пацієнта у всіх випадках. Наприклад, з публікації Pollock J.E. [Transient neurologic symptoms: etiology, risk factors, and managements, Reg. Anesth. Pain Med. 2002; 27: 581-6] відомо, що використання лідокаїну в практиці спінальної анестезіології пов'язане з виникненням транзиторного неврологічного синдрому (TNS). Клінічні дослідження, таким чином, були спрямовані на використання альтернативних місцевих анестетиків, таких як бупівакаїн. З посиланням на in vivo пацючі моделі, Sakura et al. в Anesth. Analg. 2005; 101:541-7 спостерігали, що бупівакаїн спричинює менш тяжке морфологічне 1 UA 115078 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 пошкодження та функціональне погіршення, ніж лідокаїн, у випадку інтратекального введення обох анестетиків в еквіпотентних концентраціях. Тим не менш, бупівакаїн являє собою місцевий анестетик тривалої дії, і з цієї причини його використання в спінальній анестезії часто асоціюється з явищами затримки сечі. Його використання, таким чином, обмежується випадками, в яких потрібна тривала спінальна анестезія. Серед місцевих анестетиків також відомим є використання хлоропрокаїну. Однак використання цього місцевого анестетика обмежено на сьогоднішній день інтратекальним введенням. Справді, більшість композицій на основі хлоропрокаїну, наявних на ринку на цей час (хлоропрокаїну гідрохлорид для ін'єкцій, USP (Фармакопея США), що виготовляється Bedford Laboratories та Boehringer Ingelheim, і Nesacain-MPF, що виготовляється AstraZeneca), є дозволеними для епідурального, але не для інтратекального введення. Отже, хлоропрокаїн на цей час лише подеколи використовується для інтратекального введення. Застосування разової дози водного розчину хлоропрокаїну без консервантів для інтратекального введення є відомим з італійського патенту № 1366154 на ім'я Заявника. Передбачувана нейротоксичність хлоропрокаїну становила до сьогоднішнього дня серйозний стримувальний фактор для повторюваного інтратекального введення доз цього препарату. Дійсно, відповідно до сучасної анестезіологічної практики, повторюване спінальне або інтратекальне введення хлоропрокаїну не тільки не рекомендується, але його слід уникати з метою обмеження ризиків, пов'язаних з нейротоксичністю цього препарату. З цієї причини сучасна медична практика вимагає використовувати інший місцевий анестетик для доз, які вводять після першої дози, у випадках, в яких має бути повторене спінальне або інтратекальне введення хлоропрокаїну. Тим не менш в галузі анестезіології повторюване застосування спінальної та інтратекальної анестезії протягом одноденного (амбулаторного) хірургічного втручання підвищило попит на лікарські засоби з місцевою анестетичною дією, придатні для повторюваного інтратекального введення без значного підвищення ризику нейротоксичності. Суть винаходу Заявник цього винаходу несподівано виявив, що 2-хлоропрокаїн може бути повторювано введений спінально/інтратекально без виявлення нейротоксичності, приписуваної цьому лікарському препарату. Відповідно до першого аспекту цей винахід стосується 2-хлоропрокаїну і його солей, та/або похідних, та/або складних ефірів для використання в центральній локорегіонарній анестезії шляхом повторюваного інтратекального введення доз. Хлоропрокаїн, або 2-(діетиламіноетил)-4-аміно-2-хлорбензоат (CAS 3858-89-7), у вигляді гідрохлориду (хлоропрокаїну гідрохлорид) є наркотичною речовиною. Фармацевтичний профіль хлоропрокаїну, зокрема у вигляді гідрохлориду, є подібним до профілю лідокаїну, зазвичай зі швидким початком дії (5-15 хв) і, як правило, короткочасною дією тривалістю 30-60 хв. В описі цього винаходу "хлоропрокаїн" означає речовину без попередньої обробки або у вигляді солі, наприклад, хлоропрокаїну гідрохлорид або похідні хлоропрокаїну. Виведення хлоропрокаїну є швидким; період його напіввиведення з плазми знаходиться в діапазоні від 45 с до 60 с, що робить його анестетиком з найбільш швидким виведенням зпосеред відомих клінічно застосовуваних на сьогоднішній день анестетиків. Відповідно до інших аспектів цей винахід охоплює ін'єкційний водний розчин хлоропрокаїну гідрохлориду без консервантів для центральної локорегіонарної анестезії шляхом повторюваного інтратекального введення доз. Відповідно до іншого варіанта здійснення цього винаходу хлоропрокаїну гідрохлорид для повторюваного інтратекального введення доз являє собою ін'єкційний водний розчин, який має рН від 3 до 4. В деяких варіантах здійснення цього винаходу хлоропрокаїн, що повторювано вводиться в дозах за цим винаходом, має концентрацію від 0,5 % (мас.) до 1,5 % (мас). В описі цього винаходу термін "повторюване введення доз" означає інтратекальне введення щонайменше однієї дози хлоропрокаїну після початкової дози. В деяких варіантах здійснення цього винаходу повторюване введення доз хлоропрокаїну нараховує від 2 до 10, наприклад, від 3 до 7, послідовних доз, кожну з яких можна, як правило, вводити один раз на добу. В деяких варіантах здійснення цього винаходу повторюване введення доз хлоропрокаїну включає щоденне інтратекальне введення протягом семи послідовних днів. 2 UA 115078 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Термін "доза хлоропрокаїну" означає кількість хлоропрокаїну та/або його солей чи похідних, ефективну для викликання центральної локорегіонарної анестезії у випадку інтратекального введення. Короткий опис фігур Цей винахід буде докладно описаний нижче з посиланням на фігури, на яких: Фіг. 1 являє собою графік, який показує оцінку рухової функції для групи пацюків, яким впродовж семи послідовних днів інтратекально вводили добову дозу носія, 0,5 % розчину хлоропрокаїну, 1 % розчину хлоропрокаїну, 2 % розчину хлоропрокаїну і 0,5 % розчину бупівакаїну за протоколом, поясненим в наведеному нижче Прикладі 1; Фіг. 2 являє собою графік, який показує зміну маси пацюків, яких впродовж семи послідовних днів піддавали обробці шляхом повторюваного інтратекального введення добових доз носія, 0,5 % розчину хлоропрокаїну, 1 % розчину хлоропрокаїну, 2 % розчину хлоропрокаїну і 0,5 % розчину бупівакаїну за випробуванням, наведеним у Прикладі 1. Дані виражені у вигляді середнього ± SEM (середня квадратична помилка середнього) для 6 пацюків; Фіг. 3 являє собою графік, який показує латентний період різкого руху хвоста пацюків, яким впродовж 7 послідовних днів інтратекально вводили добову дозу носія, 0,5 % розчину хлоропрокаїну, 1 % розчину хлоропрокаїну, 2 % розчину хлоропрокаїну і 0,5 % розчину бупівакаїну за випробуванням, наведеним у Прикладі 1. Дані виражені у вигляді середнього ± SEM для 6 пацюків; Фіг. 4 являє собою графік, який показує оцінку пошкодження нервів в зрізах, одержаних з 10 мм каудальної частини conus medullaris (мозковий конус спинного мозку) (cauda equina ("кінський хвіст")) пацюків, яких впродовж 7 послідовних днів піддавали обробці шляхом повторюваного інтратекального введення доз носія, 0,5 % розчину хлоропрокаїну, 1 % розчину хлоропрокаїну, 2 % розчину хлоропрокаїну і 0,5 % розчину бупівакаїну за випробуванням, наведеним у Прикладі 1. Кожен зріз одержував оцінку пошкодження від 0 балів до 3 балів. Цю оцінку пошкодження для кожного зрізу обчислювали як середню оцінку всіх кластерів кожного зрізу. Дані виражені у вигляді середнього ± SEM для 6 пацюків. Цей винахід буде описаний з посиланням на наведені нижче приклади, які є лише ілюстративними і не обмежують обсяг цього винаходу будь-яким чином. Докладний опис винаходу Деякі варіанти здійснення цього винаходу включають використання ін'єкційного водного розчину хлоропрокаїну або його похідних/солей, зокрема хлоропрокаїну гідрохлориду, при цьому цей водний розчин по суті не містить консервантів, антиоксидантів, і рН цього розчину становить від 3 до 4. Зокрема, заявник виявив, що, всупереч очікуванням, повторюване інтратекальне введення хлоропрокаїну гідрохлориду не викликає виявлюваної нейротоксичності і значного збільшення типових побічних ефектів повторюваного спінального та інтратекального введення місцевого анестетика. Це відкриття є несподіваним, оскільки відомості, що містяться в науковій літературі, змушували анестезіологів до здійснення місцевої анестезії іншого типу у випадку необхідності введення другої дози хлоропрокаїну невдовзі після першої. Також несподіваною є практична відсутність нейротоксичності у разі повторюваного інтратекального введення хлоропрокаїну гідрохлориду у водному розчині, наприклад, з рН 3-4. Дійсно, можна було б очікувати, що повторюване введення в хребетний стовп потенційно нейротоксичної активної речовини, такої як хлоропрокаїн, у дуже кислому розчині, продемонструє явні ознаки клітинної токсичності. Навпаки, при застосуванні повторюваного введення доз хлоропрокаїну за варіантами здійснення цього винаходу клінічних ознак такої токсичності не спостерігали. Зокрема, винахідники виявили, що всупереч очікуванням на основі загальновідомих знань, через 12 год. після першого інтратекального введення хлоропрокаїну гідрохлориду дози цього лікарського засобу можна вводити навіть повторювано без статистично значущого збільшення нейротоксичності. Відповідно до деяких варіантів здійснення цей винахід стосується інтратекального введення людині протягом 24 год. щонайменше однієї дози ін'єкційного водного розчину вищеописаного типу на основі хлоропрокаїну, повторюваного щоденно протягом періоду часу від двох до десяти днів. Відповідно до певних варіантів здійснення цей винахід пропонує ін'єкційну фармакологічну композицію, яка містить хлоропрокаїн або його солі та/або похідні, для здійснення центральної локорегіонарної анестезії шляхом повторюваного інтратекального введення добової дози, яка становить 5-150 мг, хлоропрокаїну або його солі та/або похідних протягом періоду часу від 2 3 UA 115078 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 днів до 10 днів, зазвичай від 3 днів до 7 днів. За деякими з цих варіантів здійснення добова доза може бути разовою або поділеною на дві-три дози. В деяких варіантах здійснення цього винаходу доза хлоропрокаїну, яка може бути введена інтратекально, становить від 10 мг/доба до 100 мг/доба, від 15 мг/доба до 80 мг/доба, від 30 мг/доба до 60 мг/доба, може повторювано вводитись протягом періоду часу від 2 днів до 10 днів, зазвичай від 3 днів до 7 днів. Відповідно до деяких варіантів здійснення цього винаходу розчин хлоропрокаїну гідрохлориду в низьких дозах, зазвичай 5-15 мг/мл, повторювано вводять інтратекально, наприклад, 1-3 рази на добу, протягом 2-10 днів або 3-7 днів. Повторюване інтратекальне введення доз хлоропрокаїну гідрохлориду, наприклад, однієї дози протягом 24 год. впродовж трьох-семи днів має такі переваги: і) швидке відновлення органічних функцій пацієнта після застосування анестетика. Сприятливий фармакологічний профіль хлоропрокаїну, який поєднує швидкий початок дії зі швидким виведенням, дозволяє пацієнту ходити невдовзі після лікування, а також обмежує ризики затримки сечі, яка спостерігається після повторюваного використання поширених місцевих анестетиків, які мають довший період напіввиведення; іі) високий ступінь зручності для пацієнтів навіть після повторюваного введення доз, наприклад, однієї ін'єкції/доба протягом 7 днів; ііі) низьку системну токсичність, оскільки період напіввиведення хлоропрокаїну гідрохлориду є меншим за одну хвилину. Ця перевага є наслідком швидкого виведення хлоропрокаїну завдяки псевдохолінестеразам плазми; iv) зменшену кількість типових побічних ефектів місцевих анестетиків. Зокрема, одночасне введення місцевих анестетиків середньо-довготривалої дії з опіоїдами, зазвичай здійснюване для завершення анальгетичної дії, визначає початок колатеральних побічних ефектів, таких як свербіж та шкірні висипання. У разі повторюваного інтратекального введення хлоропрокаїну гідрохлориду, початок цих побічних ефектів, які спостерігаються при використанні звичайних місцевих анестетиків, значно обмежується. Відповідно до одного з варіантів здійснення цей винахід включає повторюване інтратекальне введення доз ін'єкційного водного розчину, який містить 5,0-15 мг хлоропрокаїну гідрохлориду, 4-12 мг NaCl на 1 мл води і НСl в кількості, достатній для надання розчину значення рН від 3,0 до 4,0. Один з варіантів здійснення цього винаходу включає повторюване інтратекальне застосування ін'єкційного водного розчину на основі хлоропрокаїну, який має осмолярність від 270 мОсм/кг до 300 мОсм/кг. Відповідно до іншого варіанта здійснення цього винаходу водний розчин хлоропрокаїну гідрохлориду, який використовують для повторюваного інтратекального введення, має відносну густину від 1,0003 г/мл до 1,0020 г/мл при температурі 37 °C. Відповідно до деяких варіантів здійснення цього винаходу ін'єкційний водний розчин для повторюваного інтратекального введення містить хлоропрокаїну гідрохлорид в кількості від 0,5 % (мас.) до 1,5 % (мас), переважно приблизно 1 % (мас). Наприклад, анестезія поперекового лімфатичного стовбура для нетривалого хірургічного втручання може бути забезпечена шляхом інтратекального введення змінної кількості хлоропрокаїну гідрохлориду, яка змінюється від 30 мг до 50 мг, і введення такої самої кількості лікарського засобу може бути повторене наступного дня практично без будь-яких побічних ефектів. В деяких варіантах здійснення цей винахід стосується фармацевтичної композиції, яка містить хлоропрокаїн або його солі та/або похідні для застосування в центральній локорегіонарній анестезії шляхом повторюваного інтратекального введення доз роздільно, послідовно або одночасно з анальгетичним лікарським засобом та/або з адреналіном. Зазвичай введення дози можна повторювати кожні 2-10 днів, за варіантом, якому віддають перевагу, кожні 3-7 днів. Як правило, повторюване введення доз хлоропрокаїну може знадобитися при виникненні терапевтичної необхідності, наприклад, у випадку повторного хірургічного втручання, ендоскопії, лікування локалізованого стійкого болю та інших клінічних показань, або як паліативне лікування. Відповідно до іншого аспекту цей винахід стосується методу центральної локорегіонарної анестезії, який включає повторюване інтратекальне введення доз ін'єкційної фармацевтичної композиції на основі хлоропрокаїну за будь-яким одним з описаних або наведених як приклад варіантів здійснення. 4 UA 115078 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У певних варіантах здійснення цього винаходу спосіб включає інтратекальне введення хлоропрокаїну гідрохлориду у дозі щонайменше 5-150 мг/доба кожні 1-10 днів або 3-7 днів. Як приклад, ін'єкційний водний розчин з рН від 3 до 4, який містить від 5 мг/мл до 15 мг/мл хлоропрокаїну гідрохлориду, за варіантом, якому віддають перевагу, практично вільний від консервантів і/або стабілізаторів, можна вливати шляхом інтратекального введення з повторенням протягом 2-10 днів або 3-7 днів. В деяких варіантах здійснення цього винаходу дози фармацевтичної композиції, яка містить хлоропрокаїн або його солі, повторювано вводять або вливають із застосуванням спінального катетера. Вливання композиції або розчину хлоропрокаїну або його солі здійснюють у відповідності з традиційними анестезіологічними методами, відомими фахівцям у цій галузі. Приклади Приклад 1 Передклінічне випробування проводили з метою оцінювання нейротоксичності 2хлоропрокаїну шляхом повторюваного інтратекального введення доз з використанням фізіологічного розчину як контроль. Результати Група була оброблена фізіологічним розчином (носієм). Перша група з шести пацюків була повторювано оброблена 20 мкл ін'єкційного фізіологічного розчину шляхом інтратекального введення один раз на день. В поведінці пацюків після семи послідовних днів обробки істотних змін не спостерігалось. У пацюків, повторювано оброблених дозами носія, не спостерігалось ознак сонливості, схильності до кусання або дряпання, зригування або блювання, зміни дефекації або ненормального слиновиділення. Рухові функції залишились повністю без змін. Лише на сьомий день у двох із шести пацюків з'явились ознаки часткового однобічного паралічу, який лише злегка вплинув на нормальну поставу. На масу тіла не вплинуло повторюване введення доз, і вона демонструвала фізіологічну тенденцію до збільшення. Латентний період різкого руху хвоста перед впорскуванням носія співпадав з лабораторними даними, одержаними в минулому, і відповідав тест-системі. Основний латентний період демонструє тенденцію до скорочення протягом семи днів випробування, хоча і незначущим чином. На каудальних ділянках, стимульованих нагріванням, явних ознак запалення або подразнення знайдено не було. Частина conus medullaris {cauda equina) довжиною 10 мм була піддана аналізу через сім днів після інтратекальної ін'єкції. Гістологічна оцінка становила 0,809±0,067. Результати підсумовані на діаграмі, показаній на Фіг. 4. Група, яка одержувала 0,5 % розчин 2-хлоропрокаїну (С0,5) Помітних змін у поведінці після введення 20 мкл 0,5 % розчину 2-хлоропрокаїну до сьомого дня випробування не спостерігалось. Пацюки, повторювано оброблені одною дозою 0,5 % розчину 2-хлоропрокаїну на добу шляхом інтратекального введення, не демонстрували ознак сонливості, схильності до кусання або дряпання, зригування або блювання, зміни дефекації або ненормального слиновиділення. Рухові функції залишились без змін. Ознаки часткового однобічного паралічу (1 бал), який лише частково вплинув на нормальну поставу, з'явились на шостий день у одного пацюка і на сьомий день у двох пацюків. Введення 20 мкл 0,5 % розчину хлоропрокаїну не змінило масу тіла, і вона демонструвала фізіологічну тенденцію до збільшення. При порівнянні групи, якій вводили 20 мкл 0,5 % розчину 2-хлоропрокаїну, з групою, обробленою носієм, статистично значущої різниці не спостерігали (DFn=l при F=0,12, значення Р=0,7337 при DFd=70). Латентний період різкого руху хвоста перед впорскуванням 20 мкл 0,5 % розчину 2хлоропрокаїну був порівнянним зі значеннями у пацюків, оброблених носієм. Основний латентний період демонстрував тенденцію до скорочення протягом семи днів випробування, хоча і незначущим чином. На каудальних ділянках, підданих стимулюванню нагріванням, явних ознак запалення або подразнення знайдено не було. Введення 20 мкл 0,5 % розчину 2-хлоропрокаїну спричинило незначне збільшення латентного періоду різкого руху хвоста після 20 хв експозиції, хоча це збільшення не було значущим зі статистичної точки зору. Гістологічна оцінка не показала статистичних відмінностей при порівнянні групи, якій вводили 0,5 % розчин 2-хлоропрокаїну, з контрольною групою (0,764±0,083). Група, яка одержувала 1 % розчин 2-хлоропрокаїну (СІ) 5 UA 115078 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Помітних змін у поведінці після введення 20 мкл 1 % розчину 2-хлоропрокаїну до сьомого дня випробування не спостерігали. Пацюки, повторювано оброблені однією дозою 1 % розчину 2-хлоропрокаїну на добу шляхом інтратекального введення, не демонстрували ознак сонливості, схильності до кусання або дряпання, зригування або блювання, зміни дефекації або ненормального слиновиділення. Рухові функції: ознаки часткового однобічного паралічу (1 бал), який лише частково вплинув на нормальну поставу, з'явились на п'ятий день у одного пацюка і на шостий та сьомий день у двох пацюків. Введення 20 мкл 1 % розчину хлоропрокаїну не змінило маси тіла. При порівнянні групи, якій вводили 20 мкл 1 % розчину 2-хлоропрокаїну, з групою, обробленою носієм, статистично значущої різниці не спостерігалось (значення Р=0,8353 при F=0,05). Латентний період різкого руху хвоста перед впорскуванням 20 мкл 1 % розчину 2хлоропрокаїну був порівнянним зі значеннями у пацюків, оброблених носієм. Значне збільшення латентного періоду різкого руху хвоста спостерігалось через 20 хв після ін'єкції 20 мкл 1 % розчину 2-хлоропрокаїну, і в даному випробуванні це збільшення було статистично значущим (Р