Антисептичний засіб на основі бензалконію хлориду

Реферат: Винахід належить до медицини та хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема, до створення, виробництва та використання антисептичних лікарських засобів широкої спрямованості дії для застосування в хірургії та травматології, комбустіології, акушерстві та гінекології, дерматології та венерології, урології, стоматології, отоларингології. Антисептичний засіб містить бензалконію хлорид (0,01-0,06 %), консервант (0,1-0,9 %), комплексоутворювач (0,1-0,9 %), модифікатор рН до рН 6,0-7,0 (6,5±0,5), воду очищену (решта). UA 98322 C2 (12) UA 98322 C2 UA 98322 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до медицини та хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема, до створення, виробництва та використання антисептичних лікарських засобів широкої спрямованості дії для застосування в хірургії та травматології, комбустіології, акушерстві та гінекології, дерматології та венерології, урології, стоматології, отоларингології. Боротьба з інфекційними ускладненнями є важливою проблемою в різних областях сучасної медицини: хірургії, комбустіології, дерматології і венерології, акушерстві і гінекології, урології, отоларингології і стоматології. Профілактика і терапія інфекційних запальних процесів внаслідок зміни видового складу гноєродної мікрофлори, інфікування мікробними асоціаціями і госпітальними штамами з полірезистентністю до антибіотиків і сульфаніламідів, ослаблення імунологічної реактивності організму і збільшення частоти виникнення алергічних реакцій приводять до пошуку нових лікарських препаратів для місцевого застосування. Провідними антисептиками у світовій практиці є катіонні антисептики. Механізм їх дії пов'язаний з порушенням цілісності мембран мікробних клітин. До найбільш поширених катіонних антисептиків належить бензалконію хлорид (алкілдиметилбензиламоній хлорид), що поєднує високі поверхнево-активні властивості з ефективною антисептичною дією. В світі бензалконію хлорид має добре вивчене медичне застосування; дана субстанція включена до всіх провідних фармакопей. Бензалконію хлорид - антисептик, дезінфікуюча речовина, антимікробний консервант, солюбілізуючий агент, поверхнево-активна речовина (ПАР). Слід зазначити, що бензалконію хлориду властиві недоліки: він не дуже активний відносно видів Pseudomonas i Proteus, а в концентраціях понад 0,1 % має подразнюючу дію. У зв'язку з вказаним, антибактеріальну дію бензалконію хлориду відносно грамнегативних бактерій можна підвищити шляхом додавання деяких допоміжних речовин і певних консервантів. Концентрації бензалконію хлориду в препаратах для різного медичного застосування визначені. Проте більшість препаратів бензалконію хлориду у формі розчинів для місцевого застосування випускають у вигляді концентрованих розчинів, що вимагає різних розведень водою перед застосуванням; прикладом може служити препарат Роккал. Внаслідок цього підвищити ефективність антимікробної дії бензалконію хлориду за рахунок включення до складу таких препаратів певних допоміжних речовин стає проблематичним. Терапевтичній дії таких препаратів властиві недоліки, які властиві розчинам бензалконію хлориду щодо ефективності і спектру антимікробної дії. До недоліків відомих антисептиків слід віднести також їх вузьке призначення, тобто можливість використання тільки в дерматології, хірургії, травматології, комбустіології або тільки в акушерстві, гінекології, венерології, урології, або стоматології та отоларингології. Наведені дані переконливо свідчать про перспективність розробки препаратів бензалконію хлориду у формі розчинів, у яких концентрації бензалконію хлориду фіксовані для конкретних галузей застосування, а ефективність антимікробної дії посилена додаванням необхідних допоміжних речовин. Саме це визначило завдання, що поставлене у винаході. Відомий антисептичний засіб Бактосин ("Synmedic Laboratories", Індія). 100 мл розчину препарату містять: розчину хлоргексидину глюконату - 0,3 г, цетриміду - 0,6 г та допоміжні речовини: полісорбат 80, ізопропіловий спирт, барвник тартразин, барвник жовтий "сонячний захід", вода очищена. Засіб застосовують для обробки невеликих поранень, саден, мікротріщин, опікових ділянок шкіри, місць укусів комах. Бактосин застосовують з розбавленням: 1 частину (за об'ємом) препарату розводять у 3-х частинах (за об'ємом) води. Інструкція по застосуванню препарату "Бактосин". Затверджена наказом МОЗ України від 04.10.2004 р. № 482, реєстраційне посвідчення № UA/1974/01/01. Відомий антисептичний засіб Бетадин („Egis" Pharmaceuticals Рlс). 1 мл розчину препарату містить: повідону-йоду (відповідає 10 мг/мл активного йоду) 100 мг та допоміжні речовини: гліцерин, ноноксинол 9, кислота лимонна безводна, динатрію гідрофосфат, натрію гідроксид, вода очищена. Засіб застосовують для дезінфекції поверхні шкіри перед ін'єкцією, взяттям проб крові, пункцією, біопсією, трансфузією або інфузією; асептичного лікування ран; передопераційної обробки шкіри та слизових оболонок. Нерозведений розчин застосовують для обробки рук і шкіри перед хірургічною операцією, катетеризацією сечового міхура ін'єкціями, пункціями худе. При операціях, а також при антисептичній обробці ран та опіків засіб розводять фізіологічним розчином чи розчином Рінгера. Рекомендуються такі розведення: вологий компрес (1:5-1:10), занурення та сидячі ванни (1:25), передопераційна ванна (1:100), гігієнічна ванна (1:1000), спринцювання піхви, введення внутрішньоматкової системи, зрошення проміжності, зрошення в урології (1:25), зрошення хронічних і післяопераційних ран (1:2-1:20), зрошення в ортопедії і травматології, зрошення при операціях у порожнині рота (1:10). Розчин слід розводити безпосередньо перед застосуванням. 1 UA 98322 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Інструкція по застосуванню препарату "Бетадин". Затверджена наказом МОЗ Україні від 06.08.2007 р. № 454, реєстраційне посвідчення № UA/6807/03/01. Відомий антисептичний засіб для зовнішнього застосування, що містить розчин борної кислоти спиртовий 3 %. Засіб застосовують при дерматиті, піодермії, мокнучій екземі, попрілості, гострому та хронічному середньому отиті при наявності різко потовщеної слизової оболонки з ознаками запалення. Машковський М. Д. Лікарські засоби. Т. 2. - М.: "Медицина", 1997. - С. 407. Відомий антисептичний засіб Декасан ("Юрія-Фарм", Україна) у формі водного розчину, що містить 0,02 % декаметоксину. Засіб застосовують при абсцесах, карбункулах, флегмонах, фурункулах, нагноєннях ран, панариціях; стоматитах, виразково-некротичних гінгівітах; абсцесі легенів, бронхоектатичній хворобі, хронічному бронхіті, тонзиліті, ангіні; виразковому коліті, парапроктиті; кандидозі слизової піхви. Інструкція по застосуванню препарату "Декасан". Затверджена наказом МОЗ Україні від 10.11.2006 р. № 743, реєстраційне посвідчення № Р.12.01/04161. Відомий антисептичний засіб Роккал, що містить 1 % або 10 % суміші алкілдиметилбензиламонію хлоридів. Засіб застосовують для обробки рук хірурга (0,025 %), операційного поля і ранових поверхонь (0,025 %), для дезінфекції хірургічних інструментів, предметів догляду за хворими, приміщень. Розчини необхідної концентрації одержують шляхом розведення початкового 1 % або 10 % розчину у відповідній кількості дистильованої води. Машковський М. Д. Лікарські засоби. Т. 2. - М.: "Медицина", 1997. - С. 423. Відомий дезінфекційний засіб Бонадерм ("Новодез", Російська Федерація). 100 мл розчину препарату містять: 2-пропанолу - 60,0 г, комплексу амонійних четвертинних сполук - 0,11 г, в тому числі алкілдиметилбензиламонію хлориду - 0,044 г, октилдецилдиметиламонію хлориду 0,033 г, діоктилдиметиламонію хлориду - 0,014 г, додецилдиметиламонію хлориду - 0,019 г та допоміжні речовини: гліцерин дистильований; ароматизатор; пантенол; вода дистильована. Препарат застосовується без розведення. Засіб застосовують для хірургічної та гігієнічної дезінфекції шкіри рук. Інструкція по застосуванню препарату "Бонадерм". Затверджена наказом МОЗ Україні від 06.08.2004 р. № 402, реєстраційне посвідчення № UА/1692/01/01. Відомі контрацептивні засоби для місцевого застосування Еротекс („Сперко Україна", Україна) у вигляді вагінальних супозиторіїв, що містять як діючу речовину бензалконію хлорид та допоміжні речовини: олія ефірна рози або лаванди або лимона, ліпофільна основа. Недоліком цих контрацептивів є великий ризик виникнення контактних дерматитів, інфекції сечовивідної системи, кандидозу, вульвовагініту, алергічного вагініту. Все це слідство високої концентрації діючої речовини. Інструкція по застосуванню препарату "Еротекс". Затверджена наказом МОЗ Україні від 15.12.2005 р. № 717, реєстраційне посвідчення № UA/4027/01/01. Відома дозована галенова композиція у вигляді м'якої капсули, що містить бензалконію хлорид (50 % розчин) 0,265-2,65 г, діоксид кремнію 5-7 г, гідроксипропілцелюлоза 6-8 г, 7гліцерилкокоат поліоксіетиленгліколю 9-11 г, поліоксіетиленгліколь 400 4-6 г, силіконова олія решта. Препарат застосовують як місцевий контрацептивний засіб та/або засіб для боротьби із захворюваннями, які передаються статевим шляхом, і/або ВІЛ. Патент України № 45379, кл. А61К9/48, А61К9/00, А61Р15/18. Опубл. 15.04.2002, бюл. "Промислова власність", 2002, № 4. ЛАБОРАТУАР ІННОТЕРА (FR). Відомий антисептичний засіб Кутасепт Г ("Bode Chemie GMBH & Co", Німеччина) у вигляді готового розчину для зовнішнього застосування. 100 мл розчину містять: 2-пропанолу - 63,0 г, бензалконію хлориду - 0,025 г та допоміжні речовини: барвники жовтий SY (E110), хіноліновий жовтий (Е104), брильянтовий чорний BN (E151), вода очищена. Засіб застосовують для передта післяопераційної обробки шкіри та швів, антисептики шкіри перед ін'єкціями, забиранням крові, пункціями, дрібними хірургічними втручаннями, обробці шкіри рук. Засіб не застосовують для антисептики слизових оболонок. Інструкція по застосуванню препарату "Кутасепт Г". Затверджена наказом МОЗ Україні від 14.06.2006 р. № 387, реєстраційне посвідчення № UА/4602/01/01. Відомий антисептичний засіб Інцидін екстра Н ("Ecolab GMBH & Co OHG", Німеччина) у формі розчину для зовнішнього застосування. 100 мл розчину містять: глюкопротаміну – 12,4 г, бензалконію хлориду - 15,0 г та допоміжні речовини ефір діетиленглікольмонобутил, алкілполіглюкозид С8-С14, комплексоутворювачі інгібітори корозії, ароматизатор, барвники (Dyestuff C.I. Direct Blue 86, Dyestuff C.I. 47005), вода димінералізована. Інцидін екстра Н застосовують для дезінфекції з розбавленням. Рекомендовані концентрації робочого розчину 0,25 %, 0,5 %, 1,0 %, 2,0 %. Засіб застосовують для швидкої дезінфекції у лікарській, 2 UA 98322 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 стоматологічній практиці (обробки операційного поля, операційних столів, оглядових крісел, стоматологічних крісел, операційного інвентарю між операціями, мобільних та оглядових лежаків, медичних виробів, поверхонь медичних приладів, апаратів, обладнання, поверхонь у приміщеннях). Інструкція по застосуванню препарату "Інцидін екстра Н". Затверджена наказом МОЗ Україні від 07.07.2004 р. № 340, реєстраційне посвідчення № UA/1423/01/01. Відомий антисептичний засіб Скінман Софтвер ("Ecolab GMBH & Co OHG", Німеччина) у формі розчину для зовнішнього застосування. 100 мл розчину містять: 2-пропанолу - 60,0 г, кислоти ундециленової - 0,1 г, бензалконіуму хлориду - 0,15 г та допоміжні речовини: спирт міристиловий, гліцерин, ароматизатор, барвник блакитний Е 131 або барвник С.І. 42051, вода демінералізована. Засіб застосовують для хірургічної та гігієнічної дезінфекції рук. Засіб не застосовують для дезінфекції слизових оболонок. Інструкція по застосуванню препарату "Скінман Софтвер". Затверджена наказом МОЗ Україні від 02.08.2004 р. № 384, реєстраційне посвідчення № UА/1641/01/01. Відомий дезінфікуючо-миючий засіб, що містить полігексаметиленгуанідінгідрохлорид 1,53,0 %, алкілдиметилбензиламонію хлорид 0,5-1,5 %; добавка - феноксіетанол і/або фенилетиловий спирт і/або бензиловий спирт і/або 1,2-пропіленгліколь і/або полі(діалілдиметиламоній-хлорид) 0,1-10 %; неонол 0,3-25 %; фарбник 0,001-0,01 %; ароматизатор 0,5-2,5 %; вода - решта. Засіб використовують для чищення і дезінфекції посуду, обладнання, рук, медичних інструментів і ін. Патент Російської Федерації № 2208048, кл. C11D3/48, C11D1/835, C11D3/44, A61L2/18. Опубл. офиц. бюл. "Изобретения. Полезные модели" від 10.07.2003. Відомий дезінфікуючий миючий засіб, що містить алкілдиметилбензиламоній хлорид в поєднанні з полігексаметиленгуандинхлоридом у співвідношенні 5:1 2-3,00 %, неонол 5-20 %, ялицеве масло 2,75-3,0 %, фарбник водорозчинний 0,001-0,2 %, вода - решта. Засіб використовують для миття і дезінфекції приміщень різного призначення, санвузлів, обладнання, одягу і взуття інструменту, рук персоналу. Патент Російської Федерації № 2263708, кл. C11D3/48, C11D1/835, A61L2/18. Опубл. офиц. бюл. "Изобретения. Полезные модели" від 10.11.2005. Відомий антисептичний препарат, що містить спирт етиловий 77,0-81,0 %; гліцерин 0,2-0,5 %; масло касторове 0,15-0,25 %; алкілдиметилбензиламоній хлорид 0,08-0,12 %; вода - решта. Препарат застосовують як шкірний антисептик для обробки рук хірурга і гігієнічної обробки рук медичного персоналу. Патент Російської Федерації № 2113862, кл. A61L2/18. Опубл. офиц. бюл. "Изобретения" від 27.06.1998. Відомий антисептичний препарат, що містить спирт етиловий 75-80 %, алкілдиметилбензиламоній хлорид 0,05-0,15 %, пропіленгліколь 0,01-0,3 %, гліцерин 0,01-0,3 %, масло з виноградних кісточок 0,1-0,3 %, Токоферол ацетат 0,005-0,1 %, вода - решта. Засіб застосовують як шкірний антисептик для обробки рук ін'єкційного поля, ліктьових згинів донорів. Патент Російської Федерації № 2235558, кл. A61L2/18, А61L2/16. Опубл. офиц. бюл. "Изобретения. Полезные модели" від 27.08.2004. Відомий антисептичний засіб "Септустин-антисепт" для обробки шкіри, що містить етиловий і/або ізопропіловий спирт 68,0-72,0 %, N,N-біс(3-амінопропил) додециламін 0,10-0,20 %, алкілдиметилбензиламоній хлорид 0,10-0,20 %, трилон Б 0,09-0,11 %, ПЕГ-7 гліцерилкокоат і екстракт зеленого чаю 0,56-0,64 %, ароматизатор 0,28-0,32 %, вода - решта. Засіб застосовують як антисептик для обробки шкіри рук медичного персоналу. Патент Російської Федерації № 2317110, кл. A61L2/18, A61Q17/00, А61К8/34. Опубл. офиц. бюл. "Изобретения. Полезные модели" від 20.02.2008. Відомий антисептичний засіб у формі водного розчину, що містить 0,05 % хлоргексидину (Фаргомед, Україна). Препарат застосовують при лікуванні мікротравм, з метою профілактики венеричних захворювань (сифіліс, гонорея, трихомоніаз). Компендіум 2006 - лікарські препарати / Під ред. В. Н. Коваленко, А. П. Вікторова. - К.: Моріон, 2006. - 2270 с Враховуючи те, що засіб, що заявляється, не має на ринку повного аналога за складом діючих та допоміжних речовин, найбільш близьким до заявлюваного був вибраний прототип за спектром фармакологічної дії - антисептичний засіб у формі розчину, що містить 0,01 % мірамістину ("Інфамед", Російська Федерація). Засіб застосовують у хірургії, комбустіології, дерматології, для профілактики ускладнень ранової інфекції. Показаннями для застосування розчину мірамістину є інфіковані рани різної локалізації і генезу, профілактика рецидивуючих 3 UA 98322 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 гранулюючих ран; опіки II-IIIА ступенів; стрепто- і стафілодермія, кандидомікоз шкіри і слизових оболонок, оніхомікоз, кератомікоз, висівкоподібний лишай. Регістр лікарських засобів Росії. Енциклопедія ліків. / Під ред. Г. Л. Вишковського. - М.: РЛС 2001, 2000. - С. 561. До причин, що перешкоджають у прототипі та аналогах одержанню технічного результату, якого досягають у заявлюваному засобі, слід віднести вузьку спрямованість застосування (тільки у дерматології або тільки у гінекології) або дуже багатокомпонентний склад, що може викликати алергічні реакції організму та місцево подразнювальну дію (особливо при великих концентраціях етанолу або ізопропанолу), або недостатню ефективність і обмежений спектр лікувально-профілактичної дії, необхідність приготування робочого розчину препарату перед застосуванням. В основу винаходу поставлена задача створення антисептичного засобу з таким якісним і кількісним складом компонентів, який би забезпечив широку спрямованість дії і високу ефективність при низьких концентраціях діючої речовини, що гарантує зниження або виключення негативних побічних ефектів, а також зручність застосування. Поставлена задача вирішується тим, що в антисептичному засобі, що містить активну речовину, допоміжні речовини, згідно з винаходом, як активну речовину використовують бензалконію хлорид, а як допоміжні речовини використовують феноксіетанол або фенілетиловий спирт або їхні суміші як консервант, едетову кислоту або сіль едетової кислоти, переважно динатрію едетат, як комплексоутворювач, натрію гідроксид як модифікатор рН, воду очищену при такому співвідношенні компонентів, мас. %: бензалконію хлорид 0,01-0,06 феноксіетанол або фенілетиловий спирт (консервант) 0,10-0,90 едетова кислота або сіль едетової кислоти, переважно динатрію едетат (комплексоутворювач) 0,10-0,90 натрію гідроксид до рН 6,0-7,0 (модифікатор рН) (6,5±0,5) вода очищена решта. Поставлена задача вирішується тим, що в антисептичному засобі, згідно з винаходом, як консервант використовують феноксіетанол або фенилетиловий спирт, або їх суміші. Поставлена задача вирішується тим, що в антисептичному засобі, згідно з винаходом, як комплексоутворювач використовують едетову кислоту або сіль едетової кислоти, переважно динатрію едетат. Поставлена задача вирішується тим, що в антисептичному засобі, згідно з винаходом, як модифікатор рН використовують натрію гідроксид. Технічний результат, якого досягають при здійсненні винаходу, полягає у створенні антисептичного засобу з таким якісним і кількісним складом компонентів, який би забезпечив широку спрямованість дії і високу ефективність при низьких концентраціях діючої речовини, що гарантує зниження або виключення побічних ефектів, а також зручність застосування. Наводимо конкретні приклади здійснення винаходу. Приклад 1. У реактор послідовно завантажують 2/3 необхідної води очищеної, бензалконію хлорид, феноксіетанол, динатрію едетат і перемішують до повного розчинення компонентів. Додають 10 % розчин натрію гідроксиду до досягнення рН близько 6,5 (від 6,0 до 7,0). Потім в реактор додають залишок води очищеної і перемішують. Отриманий розчин фільтрують і упаковують. Заявлюваний лікарський засіб має таке співвідношення компонентів, мас. %: бензалконію хлорид 0,01 феноксіетанол 0,50 динатрію едетат 0,50 натрію гідроксид до рН 6,0-7,0 (6,5±0,5) вода очищена решта. Приклад 2. Засіб, що заявляється, отримують аналогічно прикладу 1 з таким співвідношенням компонентів, мас. %: бензалконію хлорид 0,02 феноксіетанол 0,50 4 UA 98322 C2 5 10 15 20 динатрію едетат 0,50 натрію гідроксид до рН 6,0-7,0 (6,5±0,5) вода очищена решта. Приклад 3. Засіб, що заявляється, отримують аналогічно прикладу 1 з таким співвідношенням компонентів, мас. %: бензалконію хлорид 0,06 феноксіетанол 0,50 динатрію едетат 0,50 натрію гідроксид до рН 6,0-7,0 (6,5±0,5) вода очищена решта. Автори винаходу розглянули великий перелік допоміжних речовин. Враховуючи спектр і ефективність антимікробної дії бензалконію хлориду, зокрема, його низьку активність відносно грамнегативних бактерій і дріжджоподібних грибів роду Candida, до складу препарату були включені допоміжні речовини, що потенціюють антибактеріальну і протигрибкову дію бензалконію хлориду: консервант (феноксіетанол або фенілетиловий спирт, або їх суміші) і комплексоутворювач (едетова кислота або сіль едетової кислоти, переважно динатрію едетат). Були визначені оптимальні концентрації бензалконію хлориду та раціональна комбінація допоміжних речовин. У таблиці 1 наведені дані щодо антибактеріальної активності розчинів з різними концентраціями бензалконію хлориду та різними комбінаціями допоміжних речовин. Як видно з таблиці 1, з підвищенням концентрації бензалконію хлориду у розчинах зони затримки росту бактерій і грибів зростають. Бензалконію хлорид у концентрації 0,01 % виявляє досить низьку але достатню активність відносно грамнегативних бактерій; при підвищенні концентрації бензалконію хлориду вище 0,05 % антимікробна активність змінюється дуже мало. Тому оптимальними є концентрації бензалконію хлориду від 0,02 % до 0,06 %. Як видно з таблиці 1, прототип - розчин мірамістину 0,01 % не виявив антимікробної дії відносно грамнегативної палички Е. соlі АТСС 25922 та дріжджоподібного гриба С. albicans ATCC 885-653. Що стосується його антибактеріальної активності відносно грампозитивних коків S. aureus 1925, то вона значно нижче активності розчинів бензалконію хлориду. Таблиця 1 Зони затримки росту бактерій водними розчинами з різними концентраціями бензалконію хлориду та комбінаціями допоміжних речовин Номер і склад розчину №1 №2 №3 №4 №5 №6 №7 №8 №9 № 10 № 11 № 12 № 13 № 14 № 15 БХ 0,01 % БХ 0,02 % БХ 0,06 % БХ 0,1 % Трилон Б 0,5 % БХ 0,01 % + трилон Б 0,5 % БХ 0,02 % + трилон Б 0,5 % БХ 0,06 % + трилон Б 0,5 % БХ 0,01% + трилон Б 0,5 % ФЕ 0,5 % БХ 0,01 % + трилон Б 0,5 % + ФЕ 0,5 % БХ 0,02 % + трилон Б 0,5 % + ФЕ 0,5 % БХ 0,05 % + трилон Б 0,5 % + ФЕ 0,5 % БХ 0,1 % + трилон Б 0,5 % + ФЕ 0,5 % Мірамістин 0,01 % S. aureus 1925 13,58±0,05 22,55±0,25 24,35±0,15 25,77±0,26 н/з 14,28±0,05 22,82±0,19 24,70±0,14 25,65±0,18 н/з Діаметри зон затримки росту, мм С. albicans АТСС 885Е. соlі АТСС 25922 653 н/з 12,05±0,09 11,93±0,13 19,95±0,54 15,77±0,32 23,27±0,29 16,80±0,38 25,07±0,30 н/з н/з 11,68±0,13 13,58±0,05 14,30±0,15 20,57±0,32 16,40±0,20 23,82±0,32 17,63±0,21 25,68±0,22 н/з н/з 15,37±0,16 12,88±0,07 13,58±0,05 23,55±0,12 15,17±0,28 21,53±0,35 25,53±0,28 16,90±0,21 24,32±0,59 25,57±0,26 17,32±0,15 25,90±0,60 11,93±0,07* н/з н/з Примітка: БХ - бензалконію хлорид, ФЕ - феноксіетанол; н/з - зони затримки росту відсутні; * - Р < 0,05 щодо досліджуваного препарату. 5 UA 98322 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Якщо у розчинах присутні тільки трилон Б (динатрію едетат) або тільки феноксіетанол, зони затримки росту бактерій і грибів відсутні. Додавання трилону Б підсилює антимікробну активність бензалконію хлориду особливо відносно грамнегативних бактерій, зокрема Е. coli ATCC 25922. Подальше додавання феноксіетанолу також сприяє підвищенню зон затримок росту бактерій і грибів. Як видно з таблиці 1, потенціювання антимікробної дії сумішшю трилону Б та феноксіетанолу найбільш ефективне відносно грамнегативної бактерії Е. coli ATCC 25922 і виявляється при концентраціях бензалконію хлориду від 0,01 % до 0,05 %. При концентрації бензалконію хлориду 0,1 % ефект потенціювання трилоном Б та феноксіетанолом антимікробної дії бензалконію хлориду втрачається. Але трилон Б з феноксіетанолом підвищують антимікробну активність 0,02-0,05 % розчинів бензалконію хлориду майже до рівня антимікробної активності 0,1 % розчину бензалконію хлориду. Було досліджено місцевоподразнювальну дію розчинів бензалконію хлориду. Дослідження можливої місцевоподразнювальної дії на шкіру розчинів бензалконію хлориду 0,05 % і 0,1 % проведені згідно з методичними рекомендаціями [Доклінічне вивчення місцевоподразнювальної дії лікарських засобів / Методичні рекомендації, Київ, 2007. - 58 с]. Досліди проведені на кроликах породи шиншила. У кроликів на дослідних ділянках шкіри через 25, 48 і 72 години після аплікацій розчину з концентрацією бензалконію хлориду 0,05 % не було візуалізовано ніяких відхилень; шкіра звичного кольору, без ознак лущення. Після нанесення на шкіру кроликів 0,1 % розчину бензалконію хлориду через 25 годин у одного кролика виникло незначне почервоніння місця аплікації. Через 48 годин на місці аплікації у всіх кроликів виникли чітка еритема і незначний набряк. На 3-ю добу нагляду у тварин реєструвалася більш виражена реакція шкіри у вигляді сильної еритеми і набряку середнього ступеня. Ступінь подразнювальної дії склав більше 2,5 балів (середній ступінь подразнення). Вказана реакція шкіри зберігалася протягом 7 діб, з подальшим поступовим зниженням до 11-ї доби. Таким чином, було досягнута мета винаходу, згідно з якою розроблено препарати з концентрацією бензалконію хлориду, зокрема, 0,02 та 0,05 %, що мають більш високу антимікробну активність, але не виказують місцево-подразнювальної дії на шкіру та слизові оболонки. Кількісний вміст модифікатора рН (натрію гідроксиду) у засобі, що заявляється, обумовлений необхідним рівнем антимікробної активності препарату та показниками безпеки. Як показали дані досліджень на здорових добровольцях (авторах розробки) болючі відчуття при введенні заявлюваного препарату відсутні при рН від 6,0 до 7,0. Відхилення у більш лужну або кислішу сторону рН розчину викликає при його введенні в уретру болючі відчуття. Також встановлено (таблиці 2 та 3), що із збільшенням рН від 5,7 до 9,5 у разі грамнегативних бактерій є тенденція до збільшення зон затримки їх росту. У разі грампозитивних бактерій діаметри зон затримок росту практично не змінюються із збільшенням рН. Одержані дані свідчать про те, що рН заявлюваного препарату Віротек можна регулювати за допомогою натрію гідроксиду без втрати антимікробної активності і що у встановлених межах рН (від 6,0 до 7,0) антибактеріальна активність препарату не зазнає істотних змін. Таким чином, за допомогою натрію гідроксиду рН препарату був доведений до (6,5±0,5), що дозволило усунути місцевоподразнювальну дію на слизові оболонки без зменшення або втрати антибактеріальної активності (таблиці 2 та 3). Таблиця 2 Зони затримки росту бактерій препаратом Віротек розчин 0,02 % при різних величинах його рН (n = 6) Штам бактерій Proteus mirabilis 73 P. aeruginosa 9027 S. aureus 6538 P S. faecalis № 6783 Зони затримки росту бактерій (мм) препаратом Віротек розчин 0,02 % при рН: 6,63 7,21 8,08 9,52 5,66 9,42±0,05 9,58±0,10 9,78±0,07 10,20±0,09 10,52±0,09 10,68±0,04 10,70±0,08 10,92±0,06 10,88±0,11 11,15±0,06 16,43±0,04 16,67±0,03 16,65±0,15 16,97±0,05 16,72±0,04 12,58±0,06 12,72±0,04 12,72±0,04 12,82±0,15 12,87±0,10 6 UA 98322 C2 Таблиця 3 Зони затримки росту бактерій препаратом Віротек розчин 0,05 % при різних величинах його рН (n = 6) Штам бактерій Proteus mirabilis 73 P. aeruginosa 9027 S. aureus 6538 P S. faecalis № 6783 5 10 15 20 Зони затримки росту бактерій (мм) препаратом Віротек розчин 0,05 % при рН: 6,40 7,06 8,00 9,42 5,70 10,44±0,07 10,58±0,08 10,50±0,10 10,97±0,15 11,00±0,09 10,98±0,09 11,20±0,10 10,98±0,11 11,27±0,07 11,22±0,03 18,03±0,10 18,03±0,05 17,82±0,10 18,10±0,12 18,05±0,10 13,97±0,10 13,92±0,09 13,83±0,04 13,93±0,07 14,78±0,05 Перевагою засобу, що заявляється, є зручність застосування, оскільки розроблено склад препарату, що має фіксовані концентрації бензалконію хлориду і що не вимагає розведення водою перед застосуванням. Препарат, що заявляється, має широку спрямованість дії, його застосовують як антисептик в різних галузях медицини: урології і венерології (Віротек, розчин 0,02 %), хірургії, комбустіології, травматології, отоларингології, акушерстві і гінекології (Віротек, розчин 0,05 %). Раціональний підбір діючих та допоміжних речовин заявлюваного препарату і експериментально знайдені оптимальні концентрації у зазначених межах забезпечують високий терапевтичний ефект при низьких концентраціях діючої речовини, що перевершує за дією препарат порівняння. Ефективність композиції, що заявляється, була доведена експериментальними доклінічними дослідженнями. Як об'єкти досліджень використовували засіб, що заявляється, Віротек, розчин для місцевого застосування 0,02 % і 0,05 % і його аналог Мірамістин, розчин для місцевого застосування 0,01 % (ЗАТ «Інфамед», Росія). У таблиці 4 представлені дані про антибактеріальну і протигрибкову активності препарату Віротек, розчин 0,02 % і 0,05 %. Встановлено, що препарат, що заявляється, має широкий спектр вираженої антибактеріальної і протигрибкової дії. За антибактеріальною дією препарат, що заявляється, перевершує дію препарату-аналогу Мірамістин, розчин для місцевого застосування 0,01 %, який в експерименті in vitro не виявляв антибактеріальної дії на грамнегативні бактерії, і істотно перевершує його за ефективністю дії відносно грампозитивних бактерій і грибів. Таблиця 4 Антибактеріальна та протигрибкова активність препарату Віротек і прототипу - препарату Мірамістин розчин 0,01 % Тест-мікроорганізм S. aureus ATCC 6538 Р S. aureus 1925 S. aureus 47 S. saprophyticus ATCC 15305 S. epidermidis MB S. faecalis № 4163 M. luteus ATCC 9341 B. cereus ATCC 10702 C. xerosis 1911 E. coli ATCC 25922 P. vulgaris HX 19 № 222 P. mirabilis 73 E. cloaceae A-186 К. pneumoniae К-7 NCTC 9127 Діаметр зон затримки росту (мм) Віротек Розчин Віротек розчин Мірамістин розчин 0,02 % 0,05 % 0,01 % 19,42±0,07 21,30±0,04 11,72±0,07* 20,30±0,11 21,92±0,06 11,93±0,07* 20,30±0,05 22,53±0,05 11,37±0,04* 21,02±0,10 22,53±0,05 11,45±0,04* 16,60±0,06 19,83±0,10 10,62±0,06* 13,78±0,05 16,50±0,08 10,17±0,06* 22,58±0,10 25,12±0,09 13,58±0,08* 16,93±0,08 19,28±0,05 9,58±0,05* 21,45±0,13 24,63±0,08 11,68±0,11* 16,07±0,08 16,65±0,06 н/з 10,27±0,04 12,52±0,10 н/з 11,23±0,06 13,55±0,04 н/з 11,07±0,05 11,88±0,05 н/з 22,22±0,08 22,72±0,07 н/з 25 7 UA 98322 C2 Продовження таблиці 4 Діаметр зон затримки росту (мм) Віротек Розчин Віротек розчин Мірамістин розчин 0,02 % 0,05 % 0,01 % 11,33±0,04 12,08±0,06 н/з 12,07±0,08 13,37±0,06 н/з 15,90±0,06 18,15±0,06 10,28±0,07* 14,88+0,06 17,20±0,08 10,20+0,03* 17,80±0,09 21,57+0,08 11,03±0,08* 36,80±0,12 44,67±0,10 18,02±0,05* Тест-мікроорганізм P. aeruginosa ATCC 9027 P. aeruginosa «Тесаков» С. albicans ATCC 885-653 С. tropicalis ВКПГ-547/Y-1003 С. parapsilosis ВКПГу-488/10 С. neoformans ВКПГ-881/BKMY-753 Примітки: н/з - зони затримки росту відсутні; * - Р