Готовий до споживання, стерильний, апірогенний розчин антрациклінового глікозиду для ін`єкцій, який призначений для використання при лікуванні пухлин

29383 Данное изобретение относится к стабильному готовому использованию раствора, который может вводиться внутривенной инъекцией и содержит противоопухолевый антрациклиновый гликозид, например, доксорубицин, а также к получению этого раствора в герметизированном контейнере и к способу лечения опухолей с использованием указанного готового к употреблению раствора. Антрациклиновые гликозидные соединения являются хорошо известным классом соединений в антинеопластической группе агентов, и их типичным и наиболее широко используемым представителем является доксорубицин. см. Doxorubicin Anticancer Antibiotics, Federico Arcamone, 1981, Publ.: Academic Press, New Jork, N.J.; Adriamycin Review, EROTC International Symposium, Brussels,May, 1974, edited by M. Staguet, Publ. Eur. Press, Medicon, Ghent, Belg.; Results of Adriamycin Therapy, Adriamycin Symposium at Frankfurt Main 1974, edited by M. Ghione, J. Fetger and H. Maier, publ.: Springer, New Jork, N.J. В настоящее время антрациклиновые гликозидные противоопухолевые лекарства, в частности, например, доксорубицин, доступны только в форме лиофилизованных препаратов, которые нужно разводить перед введением. Как производство, так и разбавление таких препаратов подвергают участвующий в этих операциях персонал (рабочих, фармацевтов, медицинский персонал, медсестер) риску отравления, который особенно серьезен из-за токсичности противоопухолевых соединений. Действительно, в левой колонке на стр. 175 в Martindale, Extra Pharmacopoeia 28th edition, описаны вредные эффекты антинеопластических лекарств и рекомендуется "Обращаться с ними с большой осторожностью, избегая контакта с кожей и глазами; их не следует вдыхать. Следует принять меры предосторожности для того, чтобы избежать экстравазации, так как может возникнуть боль и повреждение ткани". Аналогичным образом в Scand. J.Work Environ Health, vol. 10(2), p. 71–74 (1984) и в статьях в Chemistry Industry, Issue July 4, 1983, p. 488 и в Drug-Topics-Medical-Economics-Co, Issue Feb-ruary 7, 1983, п. 99, описаны тяжелые поражения, наблюдавшиеся у медицинского персонала, подвергшегося использованию цитостатических агентов, включая доксорубицин. Для введения лиофилизованного препарата требуется двойная операция с лекарством, а именно лиофилизованный материал сначала нужно развести, а затем ввести и, кроме того, в некоторых случаях полное растворение порошка может потребовать длительного встряхивания из-за трудности растворения. Риск, связанный с производством и разведением лиофилизованного препарата мог бы быть значительно снижен, если бы был доступен готовый к употреблению раствор лекарства. Мы разработали стабильный, терапевтически приемлемый раствор антрациклинового гликозида, например, доксорубицина, который может вводиться внутривенно инъекцией и его получение и введение не требуют ни лиофилизации, ни разбавления. В соответствии с данным изобретением предлагается стерильный, непирогенный раствор антрациклинового гликозида, содержащий в основном физиологически приемлемую соль антрациклинового гликозида, растворенную в физиологически приемлемом растворителе, и который следовательно не должен получаться разбавлением лиофилизата и имеет рН = 2,5–6,5. Раствор по данному изобретению предпочтительно получают в герметизированных контейнерах. Антрациклиновый гликозид предпочтительно выбирают из группы, включающей в себя доксорубицин, 4'-эпи-доксорубицин (т.е. эпирубицин), 4'-дезоксидоксорубицин (т.е. эзорубицин), 4'-дезокси-4'-иододоксорубицин, даунорубицин и 4-диметоксидаунорубицина (т.е. идарубицин). Особенно предпочтительным антрациклиновым гликозидом является доксорубицин. Любая физиологически приемлемая соль антрациклинового гликозида может быть использована для получения раствора по данному изобретению. Примерами подходящих солей могут быть, например, соли с минеральными неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, фосфорная, азотная и т.п., и соли с некоторыми органическими кислотами, такими как уксусная, янтарная, винная, аскорбиновая, лимонная, глутаминовая, бензойная кислоты, метансульфокислота, этансульфокислота и т.п. Соль, образованная с хлористоводородной кислотой, является особенно предпочтительной солью, особенно если антрациклиновый гликозид представляет собой доксорубицин. Можно использовать любой растворитель, который физиологически приемлем и способен растворять соль антрациклинового гликозида. Раствор по данному изобретению может также содержать один или больше дополнительных компонент, такой как ко-солюбилизирующий агент (который может быть таким же, как растворитель), регулирующий тоничность агент и консервант. Примеры растворителей, ко-солюбилизирующих агентов, агентов регулирующих тоничность и консервантов, которые могут быть использованы для получения растворов антрациклинового гликозида по данному изобретению, описываются ниже. Подходящие растворители и ко-солюбилизирующие агенты могут быть, например, следующими: вода; физиологический солевой раствор; алифатические амиды, например, N,N-диметилацетамид, N-окси-2этиллактамид и т. п.; спирты, например, этанол, бензиловый спирт и т. п.; гликоли и полиспирты, например, пропиленгликоль, глицерин и т. п.; сложные эфиры полиспиртов, например, диацетин, триацетин и т. п.; полигликоли и простые полиэфиры, например, полиэтиленгликоль 400, простые метиловые эфиры пропиленгликоля и т. п.; диоксоланы, например, изопропилиденглицерин и т. п.; диметилизосорбит; пирролидоновые производные, например, 2- пирролидон, N-метил-2-пирролидон, поливинилпирролидон (только косолюбилизирующий агент) и т. п.; полиоксиэтиленированные жирные спирты, например, BrijR и т. п.; сложные эфиры полиоксиэтиленированных жирных кислот, например, CremophorR, MyrjR и т. п.; полисорбиты, например, TweensR; полиоксиэтиленовые производные полипропиленгликолей, например, PluronicsR. Особенно предпочтительным ко-солюбилизирующим агентом является поливинилпирролидон. Подходящие регулирующие тоничность агенты могут представлять собой, например, физиологически приемлемые неорганические хлориды, например, хлорид натрия, декстрозу, лактозу, маннит и т.п. 1 29383 Пригодные для физиологического введения консерванты могут представлять собой, например, сложные эфиры пара-оксибензойной кислоты (например, метиловый, этиловый, пропиловый, бутиловый эфиры или их смеси), хлоркрезол и т.п. Вышеупомянутые растворители и ко-солюбилизирующие агенты, агенты, регулирующие тоничность и консерванты могут использоваться либо индивидуально, либо в виде смеси двух и более компонентов. Примерами предпочтительных растворителей являются вода, этанол, полиэтиленгликоль и диметилацетамид, а также смеси этих растворителей, взятых в различных соотношениях. Особенно предпочтительным растворителем является вода. Для доведения рН в интервале от 2,5 до приблизительно 5,0 при желании может быть добавлена физиологически приемлемая кислота. Кислота может представлять собой физиологически приемлемую кислоту, например, неорганическую минеральную кислоту, такую как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, фосфорная, азотная кислоты и т. п., либо органическую кислоту, такую как уксусная, янтарная, винная, аскорбиновая, лимонная, глутаминовая, бензойная кислоты, метансульфокислота, этансульфокислота и т. п., а также кислотный физиологически приемлемый буферный раствор, например, хлоридный буфер, ацетатный буфер, фосфатный буфер и т.п. Для получения рН в интервале приблизительно 5–5,5 как правило нет необходимости прибавлять кислоту, а при необходимости может потребоваться прибавление лишь физиологически приемлемого буферного раствора, например, одного из указанных выше. Для получения рН в интервале приблизительно 5,5–6,5 необходимо прибавлять физиологически приемлемый подщелачивающий агент, такой как гидроокись натрия, моно-, ди- или триэтаноламин и т. п.; либо, предпочтительно буферный раствор, такой как фосфатный буфер, Трис-буфер и т. п. Предпочтительный интервал рН готового к использованию раствора по данному изобретению равен 2,5–5,5, в частности, приблизительно 3–5,2, причем особенно предпочтительными значениями рН являются рН приблизительно 3 и 5. В растворах по данному изобретению концентрация антрациклинового гликозида может варьироваться в широких пределах, предпочтительно в интервале 0,1–100 мг/мл, особенно 0,1–50 кг/мл, наиболее предпочтительно 1–20 мг/мл. Предпочтительные интервалы концентрации могут слабо различаться для различных антрациклиновых гликозидов. Так, например, предпочтительные концентрации для доксорубицина лежат в интервале приблизительно 2–50 мг/мл, предпочтительно 2–20 мг/мл, а особенно подходящие значения равны 2 мг/мл и 5 мг/мл. Аналогичные концентрации предпочтительны также для 4'-эпи-доксорубицина 4'- дезоксидоксорубицина и 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина. Предпочтительные интервалы концентрации для даунорубицина и 4- диметоксидаунорубицина равны 0,1–50 мг/мл, предпочтительно 1–20 мг/мл, а особенно подходящими являются концентрации 1 мг/мл и 5 мг/мл. Подходящей упаковкой для раствора антрациклинового гликозида могут быть любые известные контейнеры, предназначенные для парэнтерального использования, такие как пластиковые и стеклянные контейнеры, готовые к использованию шприцы и т. п. Предпочтительным контейнером является герметизированный стеклянный контейнер, например, пузырек или ампула. В соответствии с особенно предпочтительным вариантом данного изобретения предлагается стерильный, непирогенный раствор доксорубицина, состоящий в основном из физиологически приемлемой соли доксорубицина, растворенной в физиологически приемлемом растворе, который не получен из лиофилизата и имеет рН = 2,5–6,5. В вышеуказанном предпочтительном варианте данного изобретения физиологически приемлемая соль доксорубицина может представлять собой, например, соль минеральной неорганической кислоты, такой как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, фосфорная, азотная кислоты и т. п., или соли органической кислоты, такой как уксусная, янтарная, винная, аскорбиновая, лимонная, глутаминовая, бензойная кислоты, метансульфокислота, этансульфокислота и т.п. Особенно предпочтительной солью является хлористоводородная соль. В указанном выше растворе, представляющем собой предпочтительный вариант данного изобретения, подходящие растворители, ко-солюбилизирующие агенты, агенты регулирующие тоничность и консерванты могут быть такими же, как описано выше в данном описании. Особенно предпочтительным является вода. Кроме того, при необходимости можно добавить одну из вышеперечисленных физиологически приемлемых кислот для доведения рН приблизительно до 2,5–5 или один из указанных выше подщелачивающих агентов для доведения рН приблизительно до 5,5–6,5. Если желательно довести рН вышеуказанного предпочтительного раствора до значения от 2,5 до приблизительно 5, то особенно предпочтительной кислотой является хлористоводородная кислота. Предпочтительные значения рН вышеуказанных предпочтительных растворов по данному изобретению лежат в интервале 2,5–5,5, в частности, в интервале приблизительно 3–5,2, а особенно предпочтительны значения рН, равные 3 и 5. Хотя концентрация доксорубицина в вышеуказанном предпочтительном варианте может варьироваться в широких пределах 0,1–100 мг/мл, однако предпочтительные концентрации лежат в интервале 2– 50 мг/мл, наиболее предпочтительно 2–20 мг/мл; примерами особенно предпочтительных концентраций доксорубицина являются 2 мг/мл и 5 мг/мл. В изобретении предлагается также способ получения стерильного, непирогенного раствора антрациклинового гликозида с рН = 2,5–6,5, включающий в себя растворение физиологически приемлемой соли антрациклинового гликозида, не имеющей формы лиофилизата, в физиологически приемлемом растворителе; необязательное добавление физиологически приемлемых кислот или буферов для доведения рН до 2 29383 значения, лежащего в указанном желательном интервале; и пропускание результирующего раствора через стерилизующий фильтр. Перед пропусканием раствора через стерилизующий фильтр к раствору может быть прибавлен один или больше дополнительный компонент, такой как ко-солюбилизирующий агент, агент, регулирующий тоничность и консервант, например, относящийся к описанному выше типу. В растворах по данному изобретению можно получать композиции, имеющие очень высокую концентрацию антрациклинового гликозидного активного соединения, даже до 50 мг/мл и выше. Это является значительным преимуществом по сравнению с имеющимися в настоящее время препаратами, где высокие концентрации антрациклинового гликозида могут быть получены лишь с значительными трудностями, обусловленными трудностью солюбилизации при разведении, которое проводится в основном с помощью солевого раствора. Присутствие в лиофилизованном порошке фармацевтического инертного носителя, например, лактозы, и то, что его содержание, как правило, превышает содержание активного соединения и равно до 5 частей носителя на 1 часть активного соединения, оказывает отрицательное влияние на растворимость, в результате чего могут возникать затруднения при растворении лиофилизованного препарата, особенно при получении концентраций антрациклинового гликозида, превышающих 2 мг/мл. Растворы по данному изобретению отличаются хорошей стабильностью. Было установлено, что растворы, полученные с различными растворителями, имеющие различные рН и концентрации стабильны в течение значительного времени при температурах, используемых для хранения фармацевтических препаратов. Это иллюстрируется в представленных ниже примерах. Благодаря хорошо известной противоопухолевой активности антрациклиновых гликозидных активных лекарственных соединений фармацевтические композиции по данному изобретению пригодны для лечения опухолей как у людей, так и у животных. Примерами опухолей которые могут быть подвергнуты лечению, являются саркомы, включая остеогенные саркомы и саркомы мягких тканей, карциномы, например, карцинома молочной железы, карцинома легких, карцинома мочевого пузыря, карцинома щитовидной железы, карцинома простаты и яичниковая карцинома, лимфомы, включая годкинсовскую и негодкинсовскую лимфомы, нейробластомы, меланомы, миеломы, опухоль Вилмса и лейкемии, включая лимфобластическую острую лейкемию и острую миелобластическую лейкемию. Примерами конкретных опухолей, которые могут быть подвергнуты обработке, являются вирус саркомы Молони, асциты саркомы 180, твердая саркома 180, большая трансплантируемая лейкемия, лейкемия L 1210 и лимфоцитарная лейкемия Р 388. Таким образом, в данном изобретении предлагается также способ ингибирования роста опухоли, в частности, одной из перечисленных выше опухолей, включающий в себя введение пациенту, страдающему указанным опухолевым заболеванием, инъекционного раствора по данному изобретению, содержащего активное лекарственное соединение в количестве, достаточном для ингибирования роста указанной опухоли. Инъекционные растворы по данному изобретению вводятся быстрой внутривенной инъекцией или инфузией в соответствии с различными возможными графиками ввода доз. Подходящим графиком дозирования для доксорубицина может быть, например, введение 60–75 мг активного лекарственного соединения на м2 поверхности тела, одной быстрой инфузией, повторяемой через 21 день; по другой схеме каждые 28 дней в течение 3 дней внутривенно вводится доза 30 мг/м2 в день. Подходящим графиком дозирования для 4'-эпидоксорубицина и 4'-дезокси-доксорубицина может являться, например, введение 75–90 мг/м2 в виде единичной инфузии, повторяемой через 21 день и аналогичное дозирование может применяться для 4'-дезокси-4'-иодо-доксорубицина. Идарубицин, т.е. диметоксидаунорубицин может вводиться, например, внутривенно при единичной дозе 13–15 мг/м2 каждый 21 день при лечении твердых опухолей, а при лечении лейкемий предпочтительное дозирование включает в себя, например, введение через каждые 15–21 день внутривенно в течение 3 дней 10–12 мг/м2 в день; аналогичное дозирование может быть использовано, например, для даунорубицина. Представленные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают данное изобретение. В примерах контроль стабильности готовых к употреблению растворов проводят с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) при следующих экспериментальных условиях. Жидкостной хроматограф: Varian, Спектрофотометрический детектор: Knauer, Интегрирующий самописец: Varian, Клапан ввода образца: Rheodyne, модель 5010. модель 8700. модель С 401. модель 7125, снабжен ный петлей для ввода образца объемом 10 мкл. Хроматографическая колонка: Waters M. Bondapak С18 (длина 300 мм, внутренний диаметр 3,9 мм, средний размер частиц 10 мкм). Температура колонки: комнатная (около 22 ± 2оС). Подвижная фаза: вода : ацетонитрил (69:31 по объему), доведена до рН = 2 фосфорной кислотой, отфильтрована (стеклянный фильтр, пористость 1 мкм и меньше) и деаэрирована. Скорость потока подвижной фазы: 1,5 мл/мин. 3 29383 Аналитическая длина волны: 254±1 нм. Чувствительность интегрирующего самописца: 512. Скорость диаграммной бумаги: 1 см/мин. При этих условиях пик антрациклинового гликозида наблюдается при времени удерживания около 6 мин. Полученные результаты представлены в примерах в виде таблиц. Экстраполяцию аналитических данных для определения времени, при котором можно ожидать 90% первоначального определения (значение t90), проводят по зависимости Аррениуса. Эта методика обработки аналитических данных хорошо известна и широко применяется и описана в литературе, см., например Chemical Stability of Pharmaceuticals, Kennet A. Connors, Gordon L. Amidon, Loyd Kennon, Publ. John Wiley & Sons. New York, N. Y. 1979. Термин "тефлон" означает "Teflon ТМ". Пример 1. Состав: пузырек) Доксорубицин × HCl (10 мг) Вода для инъекций, доведение до: (5 мл) На 80 пузырьков (На 1 0,8 г 0,4 л Моногидрохлорид доксорубицина (0,80 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций деаэрированной барботированием азота. рН раствора не изменяют. Затем добавляют остальное количество воды для инъекций, из которой удален воздух, и доводят раствор до его конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют по бесцветным стеклянным пузырькам типа 1, имеющим объем 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 12 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления для определения пригодности, представлены в таблице 1. Сходные данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо 4'-эпи-доксорубицин, 4'-дезоксидоксорубицин, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицин, даунорубицин или 4-диметоксидаунорубицин в форме гидрохлоридных солей в концентрации 2 мг/мл и 5 мг/мл. Пример 2. Состав: Доксорубицин × HCl На 80 пузырьков (На 1 пузырек) 0,8 г (10 мг) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды, нужное для доведения до: 0,4 л (5 мл) Доксорубицин × HCl (0,8г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, деаэрированной барботированием азота. рН раствора доводят до 3, по каплям прибавляя хлористоводородную кислоту. Затем добавляют добавочное количество деаэрированной воды для инъекций и доводят раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл переносят в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС в течение 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 12 недель (4оС). 4 29383 Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены в таблице 2. Схожие данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо хлористоводородные соли 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезоксидоксорубицина, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации 2 мг/мл и 5 мг/мл. Пример 3. Состав: На 80 пузырьков (На 1 пузырек) Доксорубицин × HCl 8,0 г (100 мг) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 рН = 3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: 0,4 л (5 мл) Доксорубицин × HCl (8,0 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха барботированием азота. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной от воздуха воды для инъекций и доводят раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл переносят в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль на стабильность) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 12 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены в таблице 3. Схожие данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих хлористоводородную соль 4'-эпи-доксорубицина или 4'-дезоксидоксорубицина в той же концентрации 20 мг/мл. Пример 4. Состав: Доксорубицин × HCl На 80 пузырьков (На 1 пузырек) 0,80 г (10,0 мг) Поливинилпирролидон: 20,00 г (250,0 мг) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: 0,40 л (5,0 мл) Доксорубицин×HCl (0,80 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций и дегазируют от воздуха пропусканием азота. рН раствора не доводят. Прибавляют поливинилпирролидон и растворяют его при перемешивании и пропускании азота. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций и доводят раствор до его конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл переносят в бесцветные стеклянные пузырьки емкостью 5–7 мл. Пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона тефлоном к пузырьку и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль на стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 4. Схожие данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4'-эпи-доксорубицина, 4'дезоксидоксорубицина, 4'-дезоксин-4'-иододоксирубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл и 5 мг/мл. Пример 5. 5 29383 Состав: Доксорубицин × HCl На 80 пузырьков (На 1 пузырек) 0,800 г (10,00 мг) N,N-Диметилацетамид: 0,060 л (0,75 мл) Пропиленгликоль: 0,048 л (0,60 мл) Этанол: 0,012 л (0,15 мл) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения объема до: (5,00 мл) 0,400 л Доксорубицин HCl (0,800 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют затем 11,11-диметилацетамид, пропиленгликоль и этанол. После этого по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций и доводят раствор до его конечного объема (0,400 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор распределяют объемами по 5 мл в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми пробками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС); 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные для определения эффективности с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) представлены ниже в таблице 5. Такие же данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлориды 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезоксидоксорубицина, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл и 5 мг/мл. Пример 6. Состав: пузырьков Доксорубицин × HCl На 80 (На 1 пузырек) 0,8 г (10,0 мг) Поливинилпирролидон: 20,0 г (250,0 мг) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 Количество воды для инъекций, нужное для доведения объема до: (5,0 мл) (рН = 3) 0,4 л Доксорубицин × HCl (0,8 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют и растворяют поливинилпирролидон. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 6. 6 29383 Такие же данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлориды 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезоксидоксорубицина, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 7. Состав: Доксорубицин × HCl На 80 пузырьков (На 1 пузырек) 8,00 г (100,0 мг) N,N-Диметилацетамид 0,12 л (1,5 мл) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, необходимое для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды для инъекций, необходимое для доведения до: (5,0 мл) 0,40 л Доксорубицин × HCl (8,00 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют N,N-диметилацетамид. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. Прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми пробками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 7. Аналогичные результаты по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих хлористоводородную соль 4'-эпи-доксорубицина или 4'-дезоксидоксорубицина в такой же концентрации, равной 2 мг/мл. Пример 8. Состав: На 80 пузырьков (На 1 пузырек) Доксорубицин × HCl 0,80 г (10,0 мг) Этанол: 0,12 л (1,5 мл) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: 0,40 л (5,0 мл) Доксорубицин × HCl (0,80 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют этанол. Затем по каплям прибавляют 0,1 N хлористоводородную кислоту и доводят рН раствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 12 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены в таблице 8 ниже. 7 29383 Схожие данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезоксидоксорубицина, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 9. Состав: пузырьков Доксорубицин × HCl На 80 (На 1 пузырек) 8,000 г (100,00 мг) N,N-Диметилацетамид 0,060 л (0,75 л) Пропиленгликоль: 0,048 л (0,60 мл) Этанол: 0,012 л Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения рН до: рН = 3 Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: (5,00 мл) (0,15 мл) (рН = 3) 0,400 л Доксорубицин × HCl (8,000 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. Затем при перемешивании и пропускании азота прибавляют N,N-диметилацетамид, пропиленгликоль и этанол. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. После этого прибавляют дополнительное количество дегазированной от воздуха воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,400 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35оС (экспрессконтроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 9. Сходные данные по стабильности могут быть получены для аналогичных растворов гидрохлорида 4'эпи-доксорубицина или 4'-дезоксидоксорубицина при той же концентрации 20 мг/мл. Пример 10. Состав: пузырьков Доксорубицин × HCl На 80 (На 1 пузырек) 8,0 г (100,0 мг) Поливинилпирролидон: 20,0 г (250,0 мг) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 Количество воды для инъекций, нужное для доведения объема до: (5,0 мл) (рН = 3) 0,4 л Доксорубицин × HCl (0,8 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют и растворяют поливинилпирролидон. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту и доводят рН раствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной от воздуха воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют по бесцветным стеклянным пузырькам типа 1 емкостью 5– 7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35оС (экспрессконтроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). 8 29383 Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 10. Сходные данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих гидрохлорид 4'-эпи-доксорубицин или 4'-дезоксидоксорубицина при такой же концентрации 20 мг/мл. Пример 11. Состав: пузырьков Доксорубицин × HCl На 80 (На 1 пузырек) 0,80 г (10,0 мг) N,N-Диметилацетамид 0,12 л (1,5 мл) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: (рН = 3) 0,40 л (5,0 мл) Доксорубицин HCl (0,80 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют N,N-диметилацетамид. Затем по каплям прибавляют 0,1 N хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают хлорбутил-тефлоновыми резиновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35оС (экспресс-контроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 8 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 11. Сходные данные по стабильности могут быть получены для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезоксидоксорубицина, 4'-эпи-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 12. Состав: Доксорубицин × HCl На 80 пузырьков (На 1 пузырек) 0,80 г (10,0 мг) Пропиленгликоль: 0,12 л (1,5 мл) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: (5,0 мл) 0,40 л Доксорубицин × HCl (0,80 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют пропиленгликоль. Затем по каплям прибавляют 0,1 N хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35оС (экспрессконтроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 4 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления для определения эффективности, представлены ниже в таблице 12. Сходные данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезокси 9 29383 доксорубицина, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 13. Состав: пузырьков Доксорубицин × HCl На 80 (На 1 пузырек) 0,80 г 0,12 г (10,0 мг) Полиэтиленгликоль: (1,5 мл) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до: (5,0 мл) 0,40 л Доксорубицин × HCl (0,80 г) растворяют в 90% количества дегазированной от воздуха пропусканием азота воды для инъекций. При перемешивании и пропускании азота прибавляют полиэтиленгликоль. Затем по каплям прибавляют 0,1 N хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35оС (экспрессконтроль стабильности) и при 4оС до 3 недель (55оС), 4 недель (45оС и 35оС) и 4 недель (4оС). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 13. Сходные данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4'-эпи-доксорубицина, 4'-дезоксидоксорубицина, 4'-дезокси-4'-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-диметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 14. Состав: пузырьков Доксорубицин × HCl На 80 (На 1 пузырек) 0,8 г (10 мг) Количество 0,1 N хлористоводородной кислоты (0,1 N), нужное для доведения до: рН = 3 (рН = 3) Количество воды для инъекций, нужное для доведение до: 0,4 л (5 мл) Доксорубицин × HCl (0,8 г) растворяют в 90% количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводя рН раствора до 3. Затем прибавляют деаэрированную от воздуха воду для инъекций, доводя до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5–7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 4 и 8оС до 6 месяцев. Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) для определения эффективности представлены ниже в таблице 14. В тех же условиях сходные данные по стабильности могут быть получены для других растворов, указанных в предыдущих примерах. 10 29383 Таблица 1 Первоначальные значения: концентрация: 1,994 мг/мл; содержание, остальные %: 100,0; pH=5,2. Температура Время (недели) о о 4С о 35 С о 45 С 55 С Конц., мг/мл Конц., мг/мл Отн. % Конц., мг/мл Отн. % Конц., мг/мл Отн. % 1,992 1 2 3 Отн. % 99,9 1,917 1,843 1,774 96,1 92,4 89,0 1,768 1,618 1,506 88,7 81,1 75,5 1,493 1,166 0,830 75,0 58,5 41,6 Продолжение табл. 1 Время (недели) Температура о о 4С Конц., мг/мл о 35 С Отн. % Конц., мг/мл о 45 С Отн. % 4 1,974 99,0 1,720 86,3 8 12 1,980 99,3 t90 (дней), экстраполяции по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 815 дней t90 при 8оС = 480 дней 55 С Конц., мг/мл Отн. % 1,393 Конц., мг/мл Отн. % 69,9 Таблица 2 Первоначальные значения: концентрация: 1,992 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,0 Время (недели) Температура о о 4С Конц., мг/мл о 35 С Отн. % Конц., мг/мл о 45 С Отн. % 1,995 100,2 1,952 98,0 1 1,889 94,8 2 1,876 94,2 3 99,4 1,979 1,808 90,8 4 99,0 1,972 12 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 3970 дней t90 при 8оС = 2000 дней 55 С Конц., мг/мл Отн. % Конц., мг/мл Отн. % 1,919 1,851 1,565 1,393 96,3 92,9 78,6 69,9 1,493 1,036 0,730 75,0 51,9 36,7 Таблица 3 Первоначальные значения: концентрация: 20,06 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 2,95 Время (недели) Температура о о 4С Конц., мг/мл о 35 С Отн. % Конц., мг/мл о 45 С Отн. % 19,56 97,5 100,0 20,06 1 18,87 94,1 2 18,24 90,0 3 87,3 17,51 99,2 4 19,91 8 98,7 19,80 12 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 3700 дней t90 при 8оС = 1780 дней 55 С Конц., мг/мл Отн. % Конц., мг/мл Отн. % 17,84 15,61 13,41 11,07 88,9 77,8 66,8 55,2 12,31 7,09 3,13 61,4 35,3 15,6 Таблица 4 Первоначальные значения: концентрация: 1,986 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 4,6 Время (недели) Температура о о 4С о 35 С о 45 С 55 С Конц., мг/мл 1 Отн. % Конц., мг/мл Отн. % Конц., мг/мл Отн. % Конц., мг/мл Отн. % 1,984 99,9 1,928 97,1 1,797 90,5 1,605 80,8 11 29383 2 1,847 93,0 3 1,828 92,0 4 1,928 97,1 1,797 90,5 8 1,989 100,1 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 1460 дней t90 при 8оС = 835 дней 1,616 1,527 1,403 81,4 76,9 70,7 1,293 1,018 65,1 51,3 Таблица 5 Первоначальные значения: концентрация: 2,00 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,03 Температура Время (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 1,892 99,7 1,993 2 3 100,0 2,00 4 94,6 1,735 86,7 1,495 74,7 1,927 96,4 1,624 81,2 1,212 60,6 1,908 1 95,4 1,432 71,6 1,032 51,6 1,863 93,2 1,266 63,3 98,0 1,960 8 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 4360 дней о t90 при 8 С = 2200 дней Таблица 6 Первоначальные значения: концентрация: 1,973 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 2,71 Температура Время (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 3 4 1,913 97,0 98,5 1,791 90,8 1,477 74,9 95,5 1,582 80,2 0,972 49,3 1,840 102,8 2 1,944 1,885 2,028 1 93,2 1,402 71,0 0,632 32,0 1,853 93,9 1,273 64,5 8 1,972 99,9 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 5560 дней t90 при 8оС = 2670 дней Таблица 7 Первоначальные значения: концентрация: 19,32 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 2,96 Время Температура (недели) о о 4С Конц., Отн. % мг/мл 1 Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 3 20,03 103,7 99,1 17,34 89,8 15,57 80,6 99,4 15,77 81,6 12,94 67,0 18,06 103,5 19,14 19,20 20,1 2 4 о 35 С 93,5 14,85 76,9 11,61 60,1 17,81 92,2 13,78 71,3 8 19,99 103,5 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 1310 дней t90 при 8оС = 770 дней 12 29383 Таблица 8 Первоначальные значения: концентрация: 1,979 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,11 Время Температура (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 1,965 99,3 1,947 98,4 1,750 88,4 2 1,957 98,9 1,910 96,5 1,645 83,1 3 1,895 95,8 1,737 87,8 1,356 68,5 1,818 91,9 1,678 84,8 2,010 1 4 101,6 1,927 97,3 12 1,939 97,9 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 1270 дней t90 при 8оС = 780 дней Таблица 9 Первоначальные значения: концентрация: 20,07 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 2,99 Время Температура (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 19,14 99,5 19,97 2 3 99,9 20,06 4 95,4 17,81 88,7 14,84 73,9 19,07 95,0 16,27 81,1 12,26 61,6 18,08 1 90,1 14,62 72,9 10,04 50,0 18,03 89,8 13,20 65,8 98,1 19,69 8 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 846 дней t90 при 8оС = 505 дней Таблица 10 Первоначальные значения: концентрация: 19,57 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 2,62 Время Температура (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 19,11 97,6 16,88 86,2 12,48 63,8 2 18,43 94,2 14,13 72,2 6,00 30,7 3 18,02 92,1 11,57 59,1 2,61 13,3 17,36 88,7 9,23 47,2 1 4 19,54 19,58 99,9 100,1 98,8 19,34 8 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 2540 дней t90 при 8оС = 1290 дней . Таблица 11 Первоначальные значения: концентрация: 1,826 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,14 Время Температура 13 29383 (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 1 1,830 100,2 1,812 99,2 1,784 97,7 1,605 87,9 2 1,818 99,6 1,781 97,5 1,554 85,1 1,292 70,8 1,743 95,4 1,409 77,2 1,018 55,7 1,823 99,8 1,734 95,0 1,369 75,0 3 4 8 1,792 98,2 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 5815 дней t90 при 8оС = 2920 дней Таблица 12 Первоначальные значения: концентрация: 1,982 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,11 Температура Время (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 1,934 97,6 1,889 95,3 1,705 86,0 1,952 98,5 1,795 90,6 1,483 74,8 1,788 90,2 1,460 73,7 97,6 1,935 4 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 1794 дней t90 при 8оС = 1025 дней 1,699 85,7 1,153 58,2 1,972 99,5 2,056 1 103,7 2 3 Таблица 13 Первоначальные значения: концентрация: 1,907 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,07 Время Температура (недели) о о 4С Конц., о 35 С Отн. % мг/мл Конц., о 45 С Отн. % мг/мл Конц., 55 С Отн. % мг/мл Конц., Отн. % мг/мл 1,797 94,2 1,668 87,5 1,484 77,8 1,710 89,7 1,608 84,3 1,237 64,9 1,739 91,2 1,551 81,3 1,007 52,8 88,8 1,693 4 1,873 98,2 t90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса: t90 при 4оС = 1130 дней t90 при 8оС = 680 дней 1,453 76,2 1,871 1 98,1 2 Таблица 14 Первоначальные значения: концентрация: 2,039 мг/мл; содержание, отн.%: 100,0; рН = 3,06 Температура Время (месяцы) o 8oC 4C Конц., Отн. % мг/мл 1 3 6 1,983 1,984 2,012 Конц., Отн. % мг/мл 97,3 97,3 98,7 14 1,959 1,983 2,002 96,1 97,3 98,2