Синтез стирилпіридину, міченого радіоізотопом 18f, з тозилатного прекурсора та стабільна фармацевтична композиція на його основі

Реферат: 18 Цей винахід належить до методів синтезу міченого радіоізотопом F стирилпіридину та його 18 тозилатного прекурсора, зокрема ((E)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[ F]фтороетоксі)етоксі)етокси)піридин-3іл)вініл)-N-метилбензенаміну). Цей винахід також належить до стабільних фармацевтичних 18 композицій, що містять мічений радіоізотопом F стирилпіридин та 10 % (за об'ємом) етилового спирту і 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію. UA 105914 C2 (12) UA 105914 C2 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Передумови створення винаходу [0001] Цим заявляється пріоритет згідно з п. 35 § 119(е) Кодексу Законів США стосовно попередньої заявки на патент № 61/141885, поданої 31 грудня 2008 p., текст якого включений в дану заявку в повному обсязі шляхом посилання. 1. Галузь винаходу [0002] Винахід загалом відноситься до методів синтезу препаратів для візуалізації головного 18 мозку, мічених радіоізотопом F, і, більш конкретно, до методів синтезу стирилпіридину, 18 міченого радіоізотопом F, і його тозилатного прекурсору та до стабільних фармацевтичних 18 композицій, що містять препарати для візуалізації головного мозку, мічені радіоізотопом F. 2. Опис відомого рівня техніки [0003] Хвороба Альцгеймера (XA) є прогресивним нейродегенеративним розладом, який характеризуються зниженням когнітивних здібностей, незворотною втратою пам'яті, дезорієнтацією і мовними порушеннями. XA уражає 10 % населення у віці понад 65 і не менше 50 % населення у віці понад 85 років. Повідомляється про наявність XA у пацієнтів віком 40-50 років, але оскільки наявність хвороби важко виявити без гістопатологічної експертизи мозкової тканини, момент початку хвороби у живих суб'єктів невідомий. [0004] Нині єдиним засобом переконливої діагностики XA є вивчення мозкової тканини, яке зазвичай виконується при посмертному розтині. Під час розтину медичні експерти оглядають мозкові тканини на наявність надлишкових нейритичних бляшок (НБ), що складаються з βамілоїдних пептидних відкладень і нейрофібрилярних клубків (НФК), сформованих з ниток високофосфорильованих тау-білків, оскільки ці особливості відрізняють патогенез XA. Амілоїдні відкладення утворюються шляхом агрегації амілоїдних пептидів з подальшим сполученням з іншими агрегатами та/або амілоїдними пептидами. Фібрилярні агрегати амілоїдних пептидів, Αβ1-40 і Αβ1-42, є основними пептидними метаболітами амілоїдного білка-прекурсору, що знаходяться в НБ та цереброваскулярних амілоїдних відкладеннях у пацієнтів з XA. [0005] Хвороба Паркінсона (ХП) є прогресивним нейродегенеративним захворюванням, яке характеризується треморами спокою, брадикінезією, м'язовою ригідністю і постуральною нестабільністю. ХП зазвичай розвивається після 60 років, хоча 15 % діагностованих пацієнтів мають вік до 50 років. Сімейний анамнез ХП є етіологічним чинником для 5-10 % пацієнтів, яким діагностовано цю хворобу, однак лише у 1 % випадків було підтверджено, що хвороба сімейно успадкована. За оцінкою, 1,5 мільйона американців в даний час живуть з ХП. [0006] Деменція з тільцями Леві (ДТЛ) є прогресуючим захворюванням мозку, яке має симптоми різного ступеня вираження. Ці симптоми включають в себе прогресивну деменцію, труднощі руху, характерні для ХП, галюцинації і підвищену чутливість до нейролептиків. Як і при XA, літній вік вважається найбільшим фактором ризику ДТЛ, причому зазвичай хвороба починається в середньому у віці 50-85 років. Крім того, 20 % всіх випадків деменції викликані ДТЛ, і у більше 50 % пацієнтів з ХП розвивається "деменція при хворобі Паркінсона" (ДХП), різновид ДТЛ. ДТЛ може розвиватися самостійно або в поєднанні з іншими аномаліями головного мозку, у тому числі тими, що характерні для XA і ХП, як згадувалося вище. В даний час остаточний діагноз ДТЛ можливий тільки після посмертного розтину. [0007] У ХП і ДТЛ спільна етіологія дефіциту допаміну, що корелює із загибеллю допамінергічних нейронів чорної субстанції. Причину загибелі допамінергічних нейронів при ХП не визначено, хоча є підстави вважати, що агрегати α-синуклеїну в мозку можуть бути пов'язані з втратою допамінергічних нейронів в смугастому тілі. Також визнається, що при ДТЛ ненормальні білкові відкладення, що містять а-синуклеїн та іменуються "тільцями Леві", є причиною загибелі допамінергічних нейронів. Тільця Леві трапляються переважно у чорній субстанції мозку і тих відділах стовбура мозку, які мають назву "блакитна пляма", а також у підкоркових і коркових відділах мозку. Через цю особливість локалізації в головному мозку, тільця Леві можуть втручатися у виробництво ацетилхоліну, спричиняючи порушення сприйняття та розумового процесу і впливаючи на поведінку. Тільця Леві вважаються типом нейритичних бляшок (НБ), оскільки вони складаються з агрегатів відкладень білка α-синуклеїну. [0008] Етіологія нейродегенерації може також включати суміш патологій, й зокрема компоненти мікросудинних, або перфузійних, дефіцитів у мозку. Наприклад, розлад, який зазвичай називають "змішаною деменцією", часто включає в себе як перфузійні дефіцити, так і патології амілоїдних бляшок. Термін "змішана деменція" має різні значення, але звичайно використовується для позначення співіснування XA і судинної деменції (СД), зокрема тоді, коли СД спричинена численними мікротромбами в судинній системі мозку. Хоча на даний момент мало відомо про справжню поширеність змішаної деменції, ця форма нейродегенерації клінічно важлива, тому що поєднання XA і СД може мати більший вплив на мозок, ніж будь-який стан 1 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 окремо. Змішану деменцію звичайно дуже важко діагностувати. Симптоми схожі на АД або СД, або поєднання обох. [0009] Виникнення відкладень амілоїду в головному мозку може бути характерним для багатьох інших станів, включаючи, серед іншого, середземноморську лихоманку, синдром Макла - Уеллса, ідіопатичну мієлому, амілоїдну полінейропатію, амілоїдну кардіоміопатію, системний нейритичний амілоїдоз, спадковий крововилив у мозок з амілоїдозом, синдром Дауна, скрепі, хворобу Крейтцфельдта - Якоба, куру, синдром Герстмана - Штраусслера Шейнкера, медулярний рак щитовидної залози, ізольований амілоїдоз передсердя, амілоїд з  2мікроглобуліном у хворих, які знаходяться на діалізі, міозит з включеними тільцями, відкладення 2-амілоїду при м'язовій атрофії і інсуліному острівців Лангерганса при діабеті II типу. [0010] Через ту роль, яку відіграє наявність нейритичних бляшок (НБ) у діагностиці нейродегенеративних захворювань, спостерігається зацікавленість у розробці мічених лігандів, які зв'язуються з такими аномаліями і дозволяють робити їхню візуалізацію з використанням 11 11 існуючих методологій. Деякі звичайні радіопрепарати для візуалізації включають [ C]PIB, [ C] 18 123 4-N-метиламіно-4'-гідрокси-стильбен (SB-13), [ F]FDDNP та [ I]IMPY. 18 18 18 [0011] [ F]AV-45 (" F-AV-45"), ((E)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[ F]фтороетокси)етокси)етокси) піридин-3іл)вініл)-N-метилбензенамін, є радіофармпрепаратом для позитронно-емісійної томографії (ПЕТ) амілоїдних агрегатів у мозку (див., наприклад, Choi, SR, et al., J Nucl Med, 50(11), 188718 1894, 2009). F-AV-45 містить радіоізотоп F-18, який, завдяки періоду напіврозпаду 110 хвилин, може бути виготовлений у централізованому місці і відправлений у межах тривалості доставки від 4 до 8 год. до діагностичних центрів, які виконують ПЕТ головного мозку. Така схема 18 виробництва і розподілу F-AV-45 та інших сполук для візуалізації амілоїду, мічених радіоізотопом F-18, вимагає, щоб радіофармпрепарат був зроблений у той же день, коли здійснюється ПЕТ, через радіоактивний розпад ізотопу F-18. Таким чином, виникає кілька вимог. 18 По-перше, радіоактивний препарат F-AV-45 повинен бути виготовлений протягом короткого періоду часу зі стабільної проміжної сполуки (іменованої "прекурсором"). По-друге, 18 радіофармпрепарат F-AV-45 повинен бути зроблений з розумною (наприклад, >10 %) часткою 18 радіохімічного виходу, починаючи з реакції прекурсору з фторид-іоном F-18. По-третє, F -AV45 має бути у розчинному середовищі, яке забезпечує адекватну розчинність як 19 радіофармпрепарату, так і його нерадіоактивної частини ( F-AV-45, який завжди присутній в дещо нижчій концентрації у виробничому середовищі за рахунок стабільного F-19), а також стабілізаційні властивості, щоб інгібувати радіолітичний розпад сполуки. [0012] Етанол, як правило, визнається як підходящий допоміжний засіб для солюбілізаціі ліпофільних препаратів, в тому числі радіофармацевтичних (див., наприклад, Lemaire C, et al., J Label Compd and Radiopharm, 42, 63-75, 1999). Аскорбінова кислота або солі-аскорбати були використані раніше як допоміжні засоби для інгібування радіолізу радіофармпрепаратів (див., наприклад, Tofe AJ, et al., J. Nucl Med, 17, 820-825, 1976; Knapp FF, et al., Anticancer Res 17, 1783-1795, 1997; Liu S, et al., Bioconj Chem, 14, 1052-1056, 2003), у тому числі радіо фармпрепаратів з F-18 (див., наприклад, Firnau G, et al., J Nucl Med, 25, 1228-1233, 1984). Однак використання солей-аскорбатів у водно-етанольному розчині в якості кращого середовища для 18 солюбілізаціі і стабілізації радіофармпрепаратів з F-18 для візуалізації мозку, таких як F-AV-45, є новітнім. [0013] Використання прекурсорів із вмістом тозилатної групи для реакції з фторидом F-18 у виробництві радіофармпрепаратів, що містять F-18, було описано раніше (див., наприклад, Zhang W, et al., Nucl Med Biol 34, 89-97, 2007). Проте ефективний процес синтезу для отримання більших (тобто, >10 г) кількостей тозилатного прекурсору (в цьому документі називається "AV105") не був описаний раніше. Кожна із згаданих тут публікацій наводиться як посилання в повному обсязі в тій мірі, в якій такі посилання не є несумісними з явними ідеями даної специфікації. Реферат винаходу [0014] Варіанти здійснення винаходу спрямовані на отримання радіофармацевтичної композиції для позитронно-емісійної томографії (ПЕТ) нейродегенеративних захворювань 18 мозку, яка включає ефективну кількість сполуки, міченої радіоізотопом F, від 1,0 % до 20 % (за об'ємом) етилового спирту, і принаймні близько 0,1 % (маса/об'єм) аскорбінової кислоти або її 18 солі. У різних варіантах сполука, мічена радіоізотопом F, здатна зв'язуватися з патологічною мішенню в мозку пацієнта. Патологічна мішень може містити ненормальну концентрацію нативного чи патологічно зміненого білка, пептиду чи олігонуклеотиду, β-амілоїд, α-синуклеїн або везикулярний моноаміновий транспортер 2 (VMAT2). 18 [0015] За деякими аспектами винаходу сполука, мічена радіоізотопом F, є похідним 18 стирилпіридину. У різних аспектах сполукою, міченою радіоізотопом F, є ((E)-4-(2-(6-(2-(2-(2 2 UA 105914 C2 18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 18 [ F]фтороетокси)етокси)етокси) піридин-3-іл)вініл)-N-метилбензенамін ( F -AV-45). У деяких 18 варіантах F -AV-45 виробляється з тозилатного прекурсору. В інших аспектах сполукою, 18 міченою радіоізотопом F, в радіофармацевтичній композиції є (2R,3R,11bR)-9-(318 [ F]фторопропокси)-3-ізопропіл-10-метокси-11b-метил-2,3,4,6,7,11b-гексагідро-1Н-піридо[2,118 18 а]ізохінолін-2-ол (" F-AV-133"). А ще в деяких аспектах сполука, мічена радіоізотопом F, є похідним від дигідротетрабеназину (DTBZ). [0016] Радіофармацевтична композиція деяких варіантів здійснення винаходу включає в себе етиловий спирт у діапазоні концентрацій приблизно від 1,0 % до 15,0 % (за об'ємом). Інші варіанти включають в себе аскорбінову кислоту або її сіль в діапазоні концентрацій приблизно від 0,1 % до 1,0 % (маса/об'єм). рН радіофармацевтичної композиції може коливатися приблизно від 4,5 до 8,0. Перевага надається тим варіантам здійснення винаходу, в яких чистота радіофармацевтичної композиції більша або дорівнює близько 90 % при вимірюванні принаймні приблизно через 4 години після кінця синтезу (ПКС). [0017] Радіофармацевтична композиція може бути використана у діагностиці нейродегенеративних захворювань, таких як деменція, когнітивні порушення, хвороба Альцгеймера (XA), хвороба Паркінсона (ХП), деменція з тільцями Леві (ДТЛ), судинна деменція (CД) та їхні комбінації. [0018] Інші варіанти винаходу спрямовані на отримання радіофармацевтичної композиції для позигронно-емісійної томографії (ПЕТ) головного мозку, яка включає ефективну кількість 18 сполуки, міченої радіоізотопом F, принаймні близько 1,0 % (за об'ємом) етилового спирту і щонайменше близько 0,1 % (маса/об'єм) солі-аскорбату, причому сполука, мічена радіоізотопом 18 F, розпадається менш ніж приблизно на 10 % через 12 годин після кінця синтезу. [0019] В іншому аспекті винаходу описано метод для діагностики нейродегенеративних захворювань пацієнта, що включає в себе стадії: введення радіофармацевтичної композиції, здатної зв'язуватися з мішенню, пов'язаною з нейродегенеративним захворюванням пацієнта, в якій до складу згаданого радіофармпрепарату входить ефективна кількість сполуки, міченої 18 радіоізотопом F, принаймні близько 1,0 % (за об'ємом) етилового спирту і принаймні близько 0,1 % (маса/об'єм) аскорбату натрію; візуалізації принаймні частини мозку пацієнта, включаючи область, в якій, як очікується, повинна бути розташована мішень; і виявлення мішені. Стадія візуалізації може бути виконана з використанням позитронно-емісійної томографії (ПЕТ), ПЕТ з одночасною комп'ютерною томографією (ПЕТ/КТ), ПЕТ з одночасною магнітно-резонансною томографією (ПЕТ/MPT) або їхніх комбінацій. [0020] У ще одному варіанті винаходу описано метод для виробництва композиції, міченої 18 радіоізотопом F, здатної зв'язуватися з β-амілоїдом, в тому числі стадії: синтезу тозилатного 18 прекурсору; виконання нуклеофільного F-фторування тозилатного прекурсору у розчині 18 диметилсульфоксиду (ДМСО) для отримання F-радіофармпрепарату; а також технології 18 виготовлення F-радіофармпрепарату у розчині води та етилового спирту, що містить аскорбінову кислоту або її сіль, де етиловий спирт присутній у мінімальній концентрації близько 1,0 % (за об'ємом) і мінімальна концентрація аскорбінової кислоти або її солі становить близько 18 0,1 % (маса/об'єм) в кінцевій фармацевтичній композиції, міченій радіоізотопом F. [0021] Для іншого варіанта винаходу описано метод отримання тозилатного прекурсору для 18 F-AV-45, (E)-2-(2-(2-(5-(4-(трет-бутоксикарбоніл(метил)аміно)стирил)піридин-2ілокси)етокси)етокси)етил 4-метилбензенсульфонату ("AV-105"). Цей метод включає в себе стадії: (і) підготовки сполуки вініланіліну з моно-Вос-захистом; (іі) перетворення сполуки вініланіліну на похідне метил, t-бутилкарбамату; (ііі) взаємодії 2-гало 5-йодопіридину з триетиленгліколем; (iv) взаємодії похідного метил, t-бутилкарбамату стадії (іі) зі сполукою, отриманою в результаті стадії (ііі), для виробництва (Е)-трет-бутил 4-(2-(6-(2-(2-(2гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3-іл)вініл)феніл(метил)карбамату і (ν) взаємодії (Е)-третбутил 4-(2-(6-(2-(2-(2-гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3-іл)вініл)феніл(метил)карбамату з тозилхлоридом для утворення AV-105. [0022] У ще одному аспекті винаходу описано спосіб отримання радіофармацевтичної 18 композиції, в тому числі: взаємодію тозилатного прекурсору AV-105 з F-фторид-іоном в розчині диметилсульфоксиду (ДМСО) або іншому апротонному розчиннику з високою 18 температурою кипіння для виробництва ((E)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[ F]фтороетокси)етокси)етокси) 18 18 18 піридин-3-іл)вініл)-N-метилбензенаміну) ( F-AV-45); ізоляції F-AV-45; очищення F-AV-45. Метод отримання радіофармацевтичної композиції може також включати в себе технологічний 18 етап виготовлення F-AV-45 в розчині, що містить від близько 1,0 % до близько 15 % (за об'ємом) етилового спирту і від близько 0,1 % до близько 1,0 % (маса/об'єм) солі-аскорбату. В окремих варіантах винаходу сіль-аскорбат - це аскорбат натрію, концентрація якого складає близько 0,5 % (маса/об'єм). 3 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 [0023] Наведений вище реферат не призначений для опису кожного показаного варіанта або кожного впровадження цього винаходу. Короткий опис рисунків [0024] Для кращого розуміння суті винаходу слід зробити посилання на такі рисунки, в яких: [0025] на РИС.1 показана схема синтезу тозилатного прекурсору AV-105 і нерадіоактивного 19 F-AV-45 з р-толуолсульфонату відповідно до одного з варіантів винаходу; [0026] на РИС.2 показаний альтернативний метод синтезу тозилатного прекурсору AV-105 відповідно до іншого варіанта винаходу; [0027] на РИС.3 показаний метод радіохімічного синтезу одного з аспектів винаходу з 18 використанням тозилатного прекурсору для виробництва радіофармпрепарату F-AV-45, який зв'язує β-амілоїд. Пояснювальний опис варіантів здійснення винаходу [0028] Цей винахід не обмежується окремими описаними композиціями або методологіями, тому що вони можуть варіюватися. Крім того, термінологія, використана в описі, описує окремі версії або тільки варіанти винаходу і не призначена для обмеження його обсягу. Якщо не вказано інше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються тут, мають ті ж значення, як їх розуміє звичайний фахівець у даній області. У випадку конфлікту опис винаходу, включаючи визначення, буде мати переважну силу. [0029] Використані тут форми однини включають в себе посилання на множину, якщо з контексту не очевидно інше. [0030] Використаний тут термін "близько" означає плюс або мінус 10 % від числової величини числа, якщо не вказано інше. [0031] Термін "введення" при використанні спільно з діагностичним препаратом, таким як, наприклад, радіофармпрепарат, означає введення безпосередньо в або на тканину-мішень або введення пацієнту радіофармпрепарату системно, щоб використовувати діагностичний препарат для візуалізації тканини або патології, пов'язаної з тканиною, для якої він призначений. "Введення" композиції може бути досягнуто шляхом ін'єкції, інфузії або будь-яким з цих методів у поєднанні з іншими відомими методами. [0032] Терміни "складатися", "містити", "мати" і "включати" і їхні однокореневі слова, використовувані тут, означають "включати, але не обов'язково обмежуватися". [0033] Терміни "ефективна кількість" або "терапевтично ефективна кількість", що використовуються тут, відносяться до кількості позитронно-випромінюючого радіофармпрепарату, що приводить до досить сильного сигналу гамма-випромінювання для адекватного зображення біологічної мішені, яка представляє інтерес, в мозку осіб з підозрою на нейродегенеративне захворювання. [0034] Термін "кінець синтезу" або "КС", що використовується тут, означає кінець радіохімічного синтезу. Це момент часу, на який процес радіохімічного синтезу, в тому числі будь-які стадії очищення, необхідні для ізоляції радіофармпрепарату, завершені. [0035] Термін "апротонний розчинник з високою температурою кипіння", що використовується тут, визначається як апротонний розчинник з температурою кипіння щонайменше близько 140 °C при одній (1) атм. [0036]Терміни "патологія" чи "патологічний", використовувані тут, відносяться до змінених біологічних процесів, які можуть бути, наприклад, пов'язані з аномальним виробництвом білків, пептидів, РНК та інших речовин, пов'язаних з механізмом захворювання. [0037] Використані тут терміни "пацієнт" і "суб'єкт" відносяться до будь-якого живого організму, в який вводяться описані тут сполуки і чию мозкову діяльність належить виміряти спільно з виконанням методів аналізу з цього винаходу. Пацієнти та/або суб'єкти можуть означати, серед іншого, будь-яких ссавців (які не є людиною), приматів та людину. Такі пацієнти та/або суб'єкти можуть виявляти або не виявляти ознаки, симптоми або патології одного або декількох конкретних хворобливих станів. [0038] Термін "мішень" при використанні спільно з діагностичним препаратом, таким як радіофармацевтичний препарат цього винаходу, відноситься до тканини або іншого матеріалу, які пов'язані з патологією та на яких бажана локалізація радіофармацевтичного або діагностичного препарату. Ці мішені можуть включати, серед іншого, хворі клітини, хвороботворні мікроорганізми, інших потенційних збудників інфекції або інший небажаний матеріал у пацієнта, такий як ненормальні білки, пептиди, PHK або ДНК або нормально експресовані рецептори, які змінилися через патологічний процес. [0039] Взагалі кажучи, використовуваний тут термін "тканина" відноситься до будь-якої агрегації клітин подібної спеціалізації, які об'єднані у виконанні певної функції. 4 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 [0040] Різні варіанти винаходу передбачають спосіб синтезу препарату для візуалізації, 18 міченого радіоізотопом F, з тозилатного прекурсору, а також композиції стабільних фармацевтичних продуктів, яка містить такий препарат для візуалізації, мічений радіоізотопом 18 F. [0041] Деякі варіанти винаходу спрямовані на отримання радіофармацевтичної композиції, 18 18 що включає ефективну кількість сполуки, міченої радіоізотопом F, такої як мічений F 18 стирилпіридин або мічене F похідне дигідротетрабеназину (DTBZ), в розчині, що містить від близько 1,0 % до близько 30 % (маса/об'єм) етилового спирту і принаймні близько 0,1 % (маса/об'єм) аскорбату натрію. Інші варіанти винаходу спрямовані на отримання радіофармацевтичної композиції, що включає ефективну кількість сполуки, міченої 18 радіоізотопом F, в розчині для внутрішньовенного введення, що містить від близько 1,0 % до близько 20 % (за об'ємом) етилового спирту і принаймні близько 0,1 % (маса/об'єм) аскорбату натрію, з рН між приблизно 4,5 і 8,0. Ця радіофармацевтична композиція - прозорий розчин без нерозчинної речовини, який є стабільним принаймні 6 годин після виробництва і містить мічений F-18 радіофармпрепарат в концентраціях до 100 мКі/мл (від 37 до 3700 МБк/мл) або більше. [0042] Парентеральна радіофармацевтична композиція деяких варіантів винаходу може містити сполуки, мічені радіоізотопом F-18 та здатні зв'язуватися з патологічною мішенню у мозку пацієнта, такою як, наприклад, ненормальні концентрації нативного чи патологічно зміненого білка, пептиду або олігонуклеотиду, β-амілоїд, α-синуклеїн, або з нормально експресованою ендогенною мішенню, яка порушується за наявності деяких дегенеративних розладів, наприклад, з везикулярним моноаміновим транспортером (VMAT2) при хворобі Паркінсона (ХП), деменції з тільцями Леві (ДТЛ) або діабеті. [0043] Різні варіанти винаходу забезпечують радіофармацевтичні композиції, що мають характеристики, включаючи такі: високу спорідненість і вибірковість до мішені, низьку молекулярну масу (90 % протягом принаймні 4 годин після радіохімічного синтезу, а більш бажано - протягом періоду до 8 годин після радіохімічного синтезу. [0047] Радіофармацевтична композиція в деяких варіантах винаходу містить етиловий спирт у концентрації від близько 1,0 % до близько 15,0 % (за об'ємом) та сіль-аскорбат (наприклад, аскорбат натрію або іншу сіль аскорбінової кислоти) у діапазоні концентрацій від близько 0,1 % до близько 1,0 % (маса/об'єм). У деяких варіантах здійснення винаходу аскорбат натрію використовується в концентрації 0,5 % (маса/об'єм). рН композиції може коливатися від близько 4,5 до близько 8,0. У деяких варіантах чистота радіофармпрепарату становить принаймні 90 % при вимірюванні принаймні через 2 години після кінця синтезу (KC). Перевага надається тим 5 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 варіантам, у яких чистота радіофармацевтичної композиції становить не менше 90 % при вимірюванні принаймні приблизно через 4 години після кінця синтезу. 18 [0048] У ще одному варіанті винаходу описано метод виробництва міченої радіоізотопом F композиції, здатної зв'язуватися з β-амілоїдом. Метод включає в тому числі: синтез тозилатного 18 прекурсору; нуклеофільне фторування F тозилатного прекурсору; технологію виготовлення 18 фторованого F тозилатного прекурсору у водному розчині; додавання етилового спирту для досягнення мінімальної концентрації близько 1,0 % (маса/об'єм) в кінцевій міченій радіоізотопом 18 F стирилпіридиновій композиції; а також додавання аскорбату натрію для досягнення 18 мінімальної концентрації близько 0,1 % (маса/об'єм) в кінцевій міченій радіоізотопом F стирилпіридиновій композиції. 18 [0049] В іншому варіанті описано спосіб отримання тозилатного прекурсору для F-AV-45, (Е)-2-(2-(2-(5-(4-(трет-бутоксикарбоніл(метил)аміно)стирил)піридин-2-ілокси)етокси)етокси)етил 4-метилбензенсульфонату ("AV-105"). Цей метод включає в себе стадії: (і) підготовки сполуки вініланіліну з моно-Вос-захистом; (іі) перетворення сполуки вініланіліну з (і) на похідне N-метил, t-бутилкарбамату (тобто, N-метил, N-Boc); (ііі) взаємодії 2-гало 5-йодопіридину (у деяких варіантах гало = хлоро або бромо) з триетиленгліколем; (iv) взаємодії похідного N-метил, N-Boc стадії (іі) з результуючою сполукою стадії (ііі) для виробництва (Е)-трет-бутил 4-(2-(6-(2-(2-(2гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3-іл)вініл)феніл(метил)карбамату і (ν) взаємодії (Е)-третбутил 4-(2-(6-(2-(2-(2-гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3-іл)вініл)феніл(метил)карбамату з тозилхлоридом для утворення AV-105. [0050] У ще одному аспекті винаходу описано спосіб отримання радіофармацевтичної 18 композиції, в тому числі: взаємодію тозилатного прекурсору AV-105 з F -фторид-іоном в розчині ДМСО або іншому апротонному розчиннику з високою температурою кипіння для 18 виробництва ((E)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[ F]фтороетокси)етокси)етокси) піридин-3-іл)вініл)-N18 18 18 метилбензенамін) (" F-AV-45"); ізоляції F -AV-45; очищення F -AV-45. Спосіб отримання 18 радіофармацевтичної композиції може також включати технологічний етап виготовлення F-AV45 в розчині, що містить від близько 1,0 % до близько 15 % (за об'ємом) етилового спирту і від близько 0,1 % до близько 1,0 % або більше (маса/об'єм) аскорбату натрію або іншої соліаскорбату. В окремих варіантах винаходу концентрація аскорбату натрію складає 0,5 % (маса/об'єм). [0051] У ще одному варіанті здійснення винаходу передбачається отримання 18 радіофармацевтичної композиції, яка включає ефективну кількість міченої радіоізотопом F сполуки, принаймні близько 1,0 % (за об'ємом) етилового спирту і принаймні близько 0,1 % (маса/об'єм) аскорбату натрію, де швидкість розпаду радіофармацевтичної композиції, вимірювана in vitro, значною мірою відповідає таким показникам: (а) від близько 0,01 % до близько 5 % від загального розпаду приблизно через 2 години вимірювань; (b) від близько 0,01 % до близько 10 % від загального розпаду приблизно через 10 годин вимірювань; (с) від близько 0,01 % до близько 20 % від загального розпаду приблизно через 15 годин вимірювань та (d) не більше ніж близько 25 % від загального розпаду приблизно через 24 години вимірювань. [0052] У деяких варіантах винахід включає методи синтезу тозилатного прекурсору для 18 міченого радіоізотопом F стирилпіридину, AV-105 (показано на РИС.1). Метод синтезу AV-105 використовує первинний тозилат замість первинного мезилату як активну групу покидання. Використання тозилатного прекурсору для радіофторування вигідно принаймні з тієї причини, що тозилат, утворюваний при реакції радіофторування, легко видаляється за допомогою 18 хроматографічних засобів з міченого радіоізотопом F препарату для візуалізації. На РИС.1 представлено початковий синтез AV-105 і синтез холодного AV-45 в одному з варіантів винаходу. Використання p-толуолсульфонату (тозилату) в якості активної групи покидання усуває необхідність використання метансульфонату (мезилату), який не є кращим у зв'язку з генотоксичними властивостями метансульфокислоти - побічного продукту при використанні мезилату. Крім того, р-толуолсульфокислоту легше виявити, ніж метансульфокислоту і, отже, її легше очистити за допомогою рідинної хроматографії з УФ-детектуванням. Як далі показано на РИС.1, 4-диметиламінопіридин (ДМАП) задіяно на стадіях захисту за допомогою Вос (6-7) і стадії тозилації (8) для отримання AV-105. Залучення ДМАП на стадії тозилації приводить до скорочення часу, необхідного для повного перетворення вихідного матеріалу. Наявність ДМАП також інгібує розпад після тривалого часу реакції. З цього синтетичного матеріалу можна отримати малу (наприклад, грам) кількість AV-105, однак нелегко нарощувати масштаби виробництва до 50 г або більшої кількості AV-105. [0053] Альтернативний метод синтезу AV-105 представлений на РИС. 2.В цьому конвергентному методі синтезу використано р-толуолсульфонілхлорид замість типового 6 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 метансульфонілхлориду для створення псевдо-галощу. Використання реакції Хека, як показано на РИС.2, збільшує конвергенцію синтезу, тим самим роблячи синтез більш ефективним і підвищуючи вихід продукту. Однак наведені на РИС.1 і 2 значення виходу продукту призначені тільки для ілюстрації і не відображають максимальні можливі значення. За можливою оцінкою фахівця в даній області, описані тут синтетичні методи отримання AV-105 можуть бути додатково оптимізовані шляхом використання методів очищення, застосовуваних для проміжних реагентів або самого AV-105. Такі методи можуть включати, наприклад, рекристалізацію, екстракцію розчинниками або хроматографічне розділення в колонці, здатні видаляти невеликі кількості домішок реагенту або побічні продукти реакції. Тим не менш, за допомогою описаних тут методів можливо виробляти AV-105 із загальним виходом 40 % або більше та з чистотою вище, ніж близько 95 %. [0054] Радіохімічний синтез в одному з варіантів винаходу з використанням первинного 18 алкілтозилату для вироблення радіофармпрепарату F-AV-45, здатного зв'язувати β-амілоїд, показано на РИС.3. Дотримуючись процесу введення радіоактивної мітки в аспектах винаходу, 18 F-AV-45 (позначений як Формула II на РИС.3) розроблений для сольового розчину. У деяких варіантах сольовий розчин містить, щонайменше, близько 1,0 % (за об'ємом) етилового спирту і щонайменше близько 0,1 % (маса/об'єм) аскорбату натрію і має рН від 4,5 до 8,0. В інших варіантах концентрація етилового спирту знаходиться в діапазоні від близько 1,0 % до близько 10,0 % (за об'ємом), а концентрація аскорбату натрію знаходиться в діапазоні від близько 0,1 % до близько 1,0 % (маса/об'єм). Не вдаючись у подробиці теорії, зазначимо, що присутність 18 аскорбату натрію мінімізує радіоліз під час очищення сировини F-AV-45 і в кінцевому розріджувачі для підвищення стабільності та терміну придатності. В одному з варіантів винаходу номінальна концентрація аскорбату натрію становить 0,5 % (маса/об'єм). [0055] В іншому аспекті винаходу описано метод виявлення нейродегенеративних захворювань у пацієнта, у тому числі введення пацієнту радіофармацевтичної композиції, здатної зв'язуватися з мішенню, пов'язаною з нейродегенеративним захворюванням. Згадана 18 композиція включає ефективну кількість міченої радіоізотопом F сполуки для візуалізації 18 амілоїду, такої як F-AV-45, або альтернативного міченого F-18 радіофармпрепарату, здатного зв'язуватися з амілоїдом, які містять приблизно від 1,0 % до 15 % (за об'ємом) етилового спирту і приблизно від 0,1 % до 1 % (маса/об'єм) аскорбату натрію; зображення частини організму пацієнта, де, як очікується, розташована мішень; виявлення мішені. Частина організму пацієнта може включати принаймні частину мозку. [0056] Радіофармацевтична композиція може бути використана у діагностиці нейродегенеративних захворювань, таких як, наприклад, деменція, когнітивні порушення, хвороба Альцгеймера (XA), хвороба Паркінсона (ХП), деменція з тільцями Леві (ДТЛ), судинна деменція (СД) та їхні комбінації. 18 [0057] Фармацевтична композиція, мічена радіоізотопом F, у варіантах здійснення винаходу може бути введена будь-яким методом, відомим в даній області. Наприклад, у конкретному аспекті радіофармацевтична композиція може вводитися за допомогою ін'єкцій. Методи введення можуть включати, серед іншого, внутрішньосудинні, внутрішньовенні, 18 внутрішньочеревні, підшкірні, внутрішньом'язові ін'єкції. Мічена радіоізотопом F радіофармацевтична композиція може також вводитися в дозованій лікарській формі, наприклад, як внутрішньовенне введення. У деяких варіантах радіофармацевтична композиція може бути підготовлена у шприці-тюбику, який містить відповідну кількість радіофармпрепарату. 18 [0058] Мічені F радіофармпрепарати у різних варіантах винаходу можуть бути відображені за допомогою будь-якого відповідного методу, відомого у даній області, в тому числі позитронно-емісійної томографії (ПЕТ), однофотонної емісійної комп'ютерної томографії (ОФЕКТ), ПЕТ з одночасною комп'ютерною томографією (ПЕТ/КТ), ПЕТ з одночасною магнітнорезонансною томографією (ПЕТ/MPT) або їхніх комбінацій. 18 [0059] Мічені F радіофармацевтичні композиції у варіантах винаходу мають як високу радіохімічну чистоту, так і високий вихід продукту радіохімічного синтезу. Терміни зберігання 18 мічених F радіофармпрепаратів можуть відрізнятися для різних варіантів і можуть залежати 18 від різних аспектів процедури. Звичайно термін зберігання міченого F радіофармпрепарату більше 8 годин після виробництва, якщо він вироблений за технологією, описаною в цьому 18 документі. Деякі варіанти винаходу також визначають технологію виготовлення F-міченої сполуки, яка є одночасно безпечною при введенні людині і стійкою до радіолізу або іншої хімічної деградації за час (наприклад, до 8-10 годин) відвантаження до лікарні або іншого 18 діагностичного центра. Наприклад, в одному з варіантів радіофармацевтична композиція FAV-45, що містить етиловий спирт і аскорбат натрію, зберігає стабільність (більше 90 %) до 20 годин після виробництва. 7 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Приклади [0060] Для того, щоб описаний тут винахід був більш зрозумілим, надаються такі приклади. Ці приклади тільки для ілюстрації і не повинні тлумачитися як ті, що обмежують винахід в будьякій формі. 18 Приклад 1.0. Синтез тозилатного прекурсору AV-105 для F-AV-45. [0061] Метод синтезу для розширення об'ємів виробництва тозилатного прекурсору (E)-2-(2(2-(5-(4-трет-бутоксикарбоніл(метил)аміно)стирил)піридин-2-ілокси)етокси)етокси)етил 418 метилбензенсульфонату ("AV-105") для ((E)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[ F]фтороетокси)етокси)етокси) 18 піридин-3-іл)вініл)-N-метилбензенаміну) (" F-AV-45"), відповідно до одного з варіантів винаходу, показано на РИС.2. Захищений моно-Вос вініланілін 10 був підготовлений шляхом енергійного перемішування вініланіліну з ди-трет-бутилдикарбонатом у воді при кімнатній температурі протягом 2 годин. Захищений моно-Вос вініланілін 10 був осаджений і відфільтрований, щоб забезпечити вихід 98 %, та був використаний без додаткового очищення. Метилювання проміжного продукту за допомогою гідриду натрію та метилйодиду в диметилформаміді (ДМФ) дало сировину трет-бутил метил(4-вінілфеніл)карбамат 11 (88 % виходу), яка також була використана без додаткового очищення. 2-бром-5-йодопіридин був алкілований триетиленгліколем за допомогою трет-бутоксиду калію. Принаймні 4-разовий надлишок триетиленгліколю по відношенню до йодопіридину був використаний для забезпечення того, щоб моноалкілований продукт 2-(2-(2-(5-йодопіридин-2-ілокси)етокси)етокси)етанол 13 був основним продуктом. Моноалкілований продукт 13 (88 % виходу) не був очищений і був використаний безпосередньо на стадії (г) реакції. Реакція Хека між сировиною 11 і моноалкілованим продуктом 13 була проведена з використанням ацетату паладію, броміду тетрабутиламонію і карбонату калію в ДМФ, щоб створити стирилпіридин 14, який очищали з використанням технології флеш-хроматографії середнього тиску фірми Biotage (55 % виходу). Тозилацію стирилпіридину 14 проводили з використанням тозилхлориду, триетиламіну і ДМАП в DCM (дихлорметані?) для отримання AV-105, який очищали з використанням згаданої технології фірми Biotage. Загальний вихід, починаючи з 2-бром-5-йодопіридину, склав 40 % (3 стадії). Приклад 1.1. Трет-бутил 4-вінілфенілкарбамат. [0062] Вініланілін (3,75 г; 31,4 ммоль) і ди-трет-бутилдикарбонат (7,55 г; 34,6ммоль) енергійно перемішували у воді (23 мл) при кімнатній температурі протягом двох годин. Осад відфільтрували, і решту осаду на фільтрі повторно розчинили в етилацетаті (50 мл). Органічний шар промивали водою (50 мл) і сольовим розчином (50 мл), сушили над безводним сульфатом натрію, фільтрували і концентрували при зниженому тиску для отримання сировини вініланіліну, захищеного моно-Вос, 5 (6,75 г; 98 %) у вигляді рожевуватої твердої речовини, що може бути використана на наступній стадії без додаткового очищення. Приклад 1.2. Трет-бутил метил(4-вінілфеніл)карбамат. [0063] В атмосфері азоту додали гідрид натрію (1,11 г; 46,2 ммоль) до безводного ДМФ (80 мл), і суспензію охолодили до 0 °C за допомогою крижаної ванни. Вініланілін із моно-Восзахистом 10 (6,75 г; 30,8 ммоль), розчинений у безводному ДМФ (30 мл), додавався протягом 30 хвилин через краплинну воронку. Реакційна суміш самостійно нагрівалася до кімнатної температури, і метилйодид (8,75 г; 61,6 ммоль) додавався протягом 30 хвилин за допомогою шприца. Після перемішування при кімнатній температурі протягом ще 1,5 годин суміш вилили на лід (200 г) і екстрагували етилацетатом (200 мл). Органічний шар відокремили від водного шару, промили водою (100 мл) і сольовим розчином (50 мл), висушили над безводним сульфатом натрію, відфільтрували і сконцентрували при зниженому тиску, отримавши сировину 11 (6,3 г; 88 %) у вигляді червонуватої маслянистої рідини. Приклад 1.3. 2-(2-(2-(5-йодопіридин-2-ілокси)етокси)етокси)етанол. [0064] Трет-бутоксид калію (869 мг; 7,7 ммоль) додавався частинами до розчину 2-бром-5йодопіридину (2 г; 7,04 ммоль) і триетиленгліколю (4.23 г; 28,1 ммоль) у тетрагідрофурані (ТГФ) (40 мл). Потім реакційну суміш доводять до кипіння у пристрої зі зворотним холодильником протягом 20 год. Реакційну суміш сконцентрували при зниженому тиску для видалення розчинника ТГФ. Концентрат розбавили водою (100 мл) і екстрагували етилацетатом (50 мл ×2). Об'єднані органічні шари промили водою (50 мл), потім сольовим розчином (50 мл), висушили над безводним сульфатом натрію, відфільтрували і сконцентрували при зниженому тиску, отримавши моноалкілований продукт 2-(2-(2-(5-йодопіридин-2-ілокси)етокси)етокси)етанол 13 (2,2 г; 88 %) у вигляді світло-жовтуватої олії, яка затверділа після відстоювання протягом ночі при кімнатній температурі. Приклад 1.4. (Е)-трет-бутил 4-(2-(6-(2-(2-(2гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3іл)вініл)феніл(метил)карбамат. 8 UA 105914 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 [0065] Сполучні реагенти трет-бутил метил(4-вінілфеніл)карбамат 11 (1,29 г; 5,55 ммоль) і 2(2-(2-(5-йодопіридин-2-ілокси)етокси)етокси)етанол 13 (1,96 г; і 5,55 ммоль) разом з ацетатом паладію (62,3 мг; 0,278 ммоль), бромідом тетрабутиламонію (5,53 г; 16,65 ммоль) і карбонатом калію (3,83 г; 27,75 ммоль) було додано у безводний ДМФ (80 мл). Реакційну суміш дегазували у N2 протягом 5 хвилин і нагрівали при 100 °C протягом ночі. Об'єм реакційної суміші знизився на 50 % у вакуумі, і суміш розподілили між етилацетатом (200 мл) і водою (400 мл). Водний шар відокремили і проекстрагували додатковою кількістю етилацетату (150 мл). Органічні шари об'єднали, промили водою (100 мл) і сольовим розчином (100 мл), висушили над безводним сульфатом натрію і сконцентрували при зниженому тиску. Залишок очистили за технологією фірми Biotage (хроматографії у випарній колонці середнього тиску) (45 % етилацетату в гексанах, 65 % етилацетату в гексанах), отримавши (E)-трет-бутил 4-(2-(6-(2-(2-(2гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3-іл)вініл)феніл(метил)карбамат 14 (1,4 г; 55 %). Приклад 1.5. (Е)-2-(2-(2-(5-(4-(трет-бутоксикарбоніл(метил)аміно)стирил)піридин-2ілокси)етокси)етокси)етил 4-метилбензенсульфонат (AV-105). [0066] (Е)-трет-бутил 4-(2-(6-(2-(2-(2-гідроксиетокси)етокси)етокси)піридин-3іл)вініл)феніл(метил)карбамат 14 (1,3 г; 2,83 ммоль) розчинили в DCM (50 мл) з наступним додаванням толуолсульфонілхлориду (1,08 г; 5,68 ммоль), триетиламіну (0,86 г; 8,49 ммоль) і ДМАП (24 мг; 0,2 ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 6 годин. Додали води (50 мл). Органічний шар відокремили, промили сольовим розчином, висушили над безводним сульфатом натрію, сконцентрували при зниженому тиску і очистили за технологією фірми Biotage (хроматографії у випарній колонці середнього тиску) (почали з 30 % етилацетату в гексані і довели до 40 % етилацетату в гексані), отримавши сполуку AV-105 (1,5 г; 86 %) у вигляді прозорої, світло-жовтої олії, яка зрештою затверділа після декількох днів під вакуумом. 18 Приклад 2.0. Радіохімічний синтез F -AV-45 із AV-105. 18 [0067] Радіоактивний препарат [ F]-фториду був уловлений на картриджі аніонного обміну і елюйований (вимитий з адсорбенту) до реакційної посудини з використанням водного розчину К.2.2.2-К2СОз (карбонату калію і Kryptofix) і CH3CN. Елюйований радіоактивний препарат 18 висушили під вакуумом. [ F]-фторид далі був висушений шляхом додавання CH3CN до хімічного реактора, і азеотроп води з CH3CN було випаровано з підігрівом. AV-105 (1,5 мг в 2,0 мл ДМСО) було додано до хімічного реактора. Суміш у реакторі нагріли до 110-120 °C для 18 реакції введення радіоактивної мітки F. ЗМ розчин HCl було додано в посудину, і отриману суміш нагріли до 120 °C протягом 5 хвилин, щоб видалити N-Boc-групу. Після охолодження 1M розчин NaOH було додано для нейтралізації. Розчин було завантажено на картридж зворотної 18 фази. Ізольовану сировину F-AV-45 на картриджі промили приблизно 4 мл води для ін'єкцій з 18 5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію. F-AV-45 далі був елюйований 1,5 мл CH3CN в резервуар, що містить 2 мл води для ін'єкцій з 5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію і 1 мл розчинника для 18 високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ). F-AV-45 далі був завантажений на 18 напівпрепаративну колонку для ВЕРХ і підданий очищенню. Фракція ВЕРХ з очищеним F-AV45 була зібрана в резервуар, що містить 20 мл води для ін'єкцій з 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату 18 натрію. Розведений розчин пропустили через картридж SEP-PАК® C-18, і уловлений F-AV-45 18 промили 15 мл води для ін'єкцій з 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію. F-AV-45 елюювали з картриджа SEP-PАК® Light C-18 за допомогою розчину 1 мл етанолу (USP) в 9 мл 0,9 % хлориду натрію для ін'єкцій (стерильного, USP), що містить 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію (USP). Цей розчин потім перекачали через 0,22-мкм стерилізаційний фільтр в 10- або 30-мл 18 стерильний гофрований герметичний контейнер з перегородками. Фармацевтичний продукт FAV-45 може бути розведений хлоридом натрію для ін'єкцій (0,9 %, USP, стерильним), що містить не більше 10 % (за об'ємом) етанолу (USP) і 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію (USP). 19 18 Приклад 3.0. Технологія для солюбілізаціі F-AV-45 і стабілізації F-AV-45. 18 [0068] Радіофармацевтичну технологію та композицію F-AV-45 було оцінено с точки зору 19 розчинності нерадіоактивного F-AV-45, який також утворюється в кількості 1-5 мкг/мл під час 18 19 радіохімічного синтезу F-AV-45 через наявність невеликої кількості F-фториду з пробірок, клапанів та інших джерел в системі радіохімічного синтезу. При відсутності етанолу в композиції 19 через низьку розчинність F-AV-45 можуть спостерігатися тверді частинки. Тому додавши 10 % 19 етанолу до радіофармацевтичної композиції, визначали, чи достатня розчинність F-AV-45, щоб уникнути можливості утворення осаду. Межа розчинності AV-45 в композиції фармацевтичного продукту (10 % (за об'ємом) етанолу та 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію в 0,9 % водному розчині хлориду натрію) склала 17 мкг/мл при кімнатній температурі. Видимий осад був наявним в розчинах з концентрацією 22 мкг/мл. Зразки, приготовлені з концентраціями 20 мкг/мл, були оцінені методом ВЕРХ після центрифугування. Зразки з концентраціями 20 мкг/мл були також перевірені після зберігання протягом одного тижня при 9 UA 105914 C2 5 10 15 кімнатній температурі. Жодних змін у концентрації не відбулося після одного тижня зберігання при кімнатній температурі. 18 [0069] Радіофармацевтичні композиції F-AV-45 у варіантах здійснення винаходу незвичайно стійкі до радіолізу або хімічної деградації. Аскорбат натрію застосовується для 18 мінімізації радіолізу під час очищення F-AV-45 та в кінцевому розчині фармацевтичного продукту для підвищення стабільності та терміну придатності. Етанол в концентраціях 1-10 % 18 (за об'ємом) у водному розчині сприяє солюбілізаціі F-AV-45. Щоб продемонструвати 18 стабілізацію F-AV-45 в кінцевому фармацевтичному продукті, були виготовлені дослідні композиції з аскорбатом натрію та без нього. Композиції були проаналізовані в кінці синтезу (KC) методом зворотної ВЕРХ із застосуванням ультрафіолетового (УФ) та радіохімічного 18 детекторів. Радіохімічну чистоту F-AV-45 контролювали за допомогою ВЕРХ з радіометричним 19 детектуванням, а чистоту F-AV-45 контролювали за допомогою ВЕРХ з УФ-детектуванням у фармацевтичному продукті за методом нормалізації відсотка площі. Значення відсотка площі як для радіохімічного, так і для ультрафіолетового аналізу представлені в таблицях 1 і 2. 18 [0070] В KC радіохімічна чистота композиції F-AV-45, приготовленої без аскорбату натрію, становила 84 %, і композиція продовжувала розпадатися. Таким чином, через 2 години чистота 18 становила вже 80 %. Чистота композиції F-AV-45, виготовленої з аскорбатом натрію, була значно вище. В KC чистота склала 96 % з незначним розпадом через 2 години після KC (чистота 95 %). 20 Таблиця 1 Аналіз відсодка радіохімічної чистоти ін’єкції Радіоактивний компонент, що аналізується Час 18 % чистоти F AV-45 Невідомої (ВЧУ = 0,25) Невідомо 2 (ВЧУ = 0,31) Невідомо 3 (ВЧУ = 0,36) Невідомо 4 (ВЧУ = 0,40) 18 F-AV-45 після кінця синтезу (КС) AV4520080304 Виготовлено без аскорбату натрію (444 МБк/мл) через 2 години KC після KC 84 % 80 % HB HB 2% 4% HB HB 14 % 16 % АУ4520080603 Виготовлено з аскорбатом натрію (1036 МБк/мл) через 2 години KC після KC 96 % 95 % 2% 3% HB HB 2% 2% HB HB 19 [0071] Аскорбат натрію мав подібний стабілізуючий вплив на F-AV-45 і мінімізував утворення нерадіоактивних домішок, виявлених за допомогою УФ-випромінювання, як показано у Таблиці 2. 25 Таблиця 2 Аналіз УФ-чистоти 19 18 F-AV-45 у ін’єкції F-AV-45 за відсотком області після кінця синтезу (КС) та через 2 години після (КС)* Ультрафіолетовий компонент, що аналізується При 350 нм Час 19F-AV-45 (ВЧУ =1,00) Невідомо 1 (ВЧУ = 0,37) Невідомо 2 (ВЧУ = 0,36) Невідомо 3 (ВЧУ = 0,81) Невідомо 4 (ВЧУ = 0,92) Невідомо 5 (ВЧУ = 0,95) Невідомо 6 (ВЧУ =1,11) AV4520080304 Виготовлено без аскорбату натрію (444 МБк/мл) через 2 години KC після KC 83 % 76 % 6% 8% 1% 1% 4% 4% 1% 5% 5% HB 2% AV4520080603 Виготовлено з аскорбатом натрію (1036 МБк/мл) через 2 години KC після KC 100 % 100 % HB HB HB HB HB HB HB HB HB HB HB HB У таблицю включені лише домішки, які дорівнюють або перевищують 1 % 10 UA 105914 C2 18 [0072] У Таблиці 3 показано підвищену стабільність радіофармацевтичного препарату FAV-45 при додаванні приблизно 10 % (за об'ємом) етанолу у звичайний соляний розчин з вмістом 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію. Як зазначалося, радіохімічна чистота композиції, 18 міченої F, підтримується приблизно до 20 годин після виробництва. 5 Таблиця 3 18 Підвищена стабільність ін'єкції F-AV-45, яку виготовлено, і рецептуру якої розроблено з додаванням аскорбату натрію у концентрації 0,5 %. Номер партії AV4520071217J AV4520071220_1 AV4520080114_1 10 15 20 Умови зберігання Температура навколишнього середовища Температура навколишнього середовища Температура навколишнього eenerrnmmia %РХЧ KC %РХЧ (після KC) 99 % 99 % (21 година) 99 % 100 % (17 годин) 100 % 100 % (20 годин) [0073] Було проведено додаткове дослідження з метою визначення стабільності 18 радіофармацевтичного препарату F-AV-45 з додаванням 10 % (за об'ємом) етанолу у звичайний соляний розчин із вмістом 0,5 % (маса/об'єм) аскорбату натрію, при зберіганні у FLUROTEC®. Стабільність отриманого препарату оцінювалася на трьох окремих партіях 18 виробництва F-AV-45. Пробірки зберігалися вертикально та переверталися при температурі навколишнього середовища та температурі 40 °C, а також зберігалися вертикально при температурі 50 °C. Зразки отриманого препарату бралися через визначені інтервали впродовж 12 годин періоду тестування і оцінювалися на радіохімічну чистоту та стабільність. Постійна РХЧ протягом 12 годин і