Спосіб лікування очних захворювань, які пов’язані з фактором васкулярного ендотеліального росту

1 Способ лечения глазных сосудистых расстройств, состоящих из дегенерации желтого пятна, отека желтого пятна, сосудистой ретинопатии, неоваскуляризации радужной оболочки, окклюзии вен сетчатки, гистоплазмоза и ишемической болезни сетчатки, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора р-изофермента протеинкиназы С следующей формулы (I) ВАСКУЛЯРНОГО выбранных из галогена, С1-С4 алкила, гидрокси, С1-С4 алкокси, галогеналкила, нитро, NR4R или NHCO(d-C 4 алкила), R2 представляет водород, СН3СО-, NH2 или гидрокси, R3 представляет водород, (СН 2 ) т арил, С1-С4 алкил, -COO(Ci-C4 алкил), -CONR4R5, -(C=NH)NH2, SO(d-C 4 алкил), -SO2(NR4R5) или -SO2(Ci-C4 алкил), R4 и R5 представляют независимо водород, СгС 4 алкил, фенил, бензил или скомбинированы с азотом, с которым они связаны, образуя насыщенное или ненасыщенное 5- или 6-членное кольцо, АА представляет аминокислотный остаток, m представляет независимо 0, 1, 2 или 3, а п представляет независимо 2, 3, 4 или 5, или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства или сложного эфира 2 Способ по п 1, в котором ингибитор ризофермента протеинкиназы С представляет собой бис-индолилмалеимид или макроциклический бис-индолилмалеимид 3 Способ по п 1 , в котором ингибитор является изофермент-селективным, и изофермент выбирают из группы, состоящей из изоферментов бета-1 и бета-2 4 Способ по п 3, в котором ингибитор протеинкиназы С представляет соединение, имеющее следующую формулу f N. О (I) в которой W представляет -О-, -S-, -SO-, -SO2-, -СО-, -С2-С6 алкилен, замещенный алкилен, С2-Сє алкенилен, арил-, -арил-(СН2)тО-, -гетероцикл-, -гетероцикл(СН2)тО-, бицикл-, -конденсированный конденсированный бицикл-(СН2)тО-, -NR3-, -NOR3, -CONH- или -NHCO-, X и Y представляют независимо С1-С4 алкилен, замещенный алкилен или X, Y и W скомбинированы вместе, образуя -(СН2)ПАА-, R1 радикалы представляют водород или до четырех необязательных заместителей, независимо в которой W представляет -О-, -S-, -SO-, -SO2-, -СО-, -С2-С6 алкилен, замещенный алкилен, С2-Сє алкенилен, арил-, -арил-(СН2)тО-, -гетероцикл-, -гетероциклбицикл-, (СН2)тО-, -конденсированный :онденси|: конденсированный бицикл-(СН2)тО-, -NR3-, -NOR3-CONH- или -NHCO-, О ю 54427 X и Y представляют независимо С1-С4 алкилен, замещенный алкилен или X, Y и W скомбинированы вместе, образуя -(СН2)ПАА-, R1 радикалы представляют водород или до четырех необязательных заместителей, независимо выбранных из галогена, С1-С4 алкила, гидрокси, С1-С4 алкокси, галогеналкила, нитро, NR4R или NHCO(d-C 4 алкила), R2 представляет водород, СН3СО-, NH2 или гидрокси, R3 представляет водород, (СН 2 ) т арил, С1-С4 алкил, -COO(Ci-C4 алкил), -CONR4R5, -(C=NH)NH2, SO(C r C 4 алкил), -SO2(NR4R5) или -SO2(Ci-C4 алкил), R4 и R5 представляют независимо водород, СгС 4 алкил, фенил, бензил или скомбинированы с азотом, с которым они связаны, образуя насыщенное или ненасыщенное 5- или 6-членное кольцо, АА представляет аминокислотный остаток, m представляет независимо 0, 1, 2 или 3, а п представляет независимо 2, 3, 4 или 5, или его фармацевтически приемлемую соль, пролекарство или сложный эфир 5 Способ по п 4, в котором ингибитор протеинкиназы С имеет следующую формулу m представляет независимо 2 или 3, или его фармацевтически приемлемую соль, пролекарство или сложный эфир 7 Способ по п 4, в котором ингибитор протеинкиназы С представляет (S)-3,4-[N,N'-1,1'-((2"этокси)-3"'(О)-4'"-(г\|,М-диметиламино)-бутан)-бис(3,3'-индолил)]-1(Н)-пиррол-2,5-дион или его фармацевтически приемлемую кислотную соль 8 Способ по п 1 , в котором глазное сосудистое расстройство выбрано из группы, состоящей из дегенерации желтого пятна, отека желтого пятна, сосудистой ретинопатии, неоваскуляризации радужной оболочки, окклюзии вен сетчатки, гистоплазмоза и ишемической болезни сетчатки 9 Способ по п 1 , в котором глазное сосудистое расстройство выбрано из группы, состоящей из дегенерации желтого пятна, отека желтого пятна и окклюзии вен сетчатки 10 Способ по п 8, в котором указанная сосудистая ретинопатия представляет собой ретинопатию недоношенности или преждевременного развития 11 Способ ингибирования роста клеток эндотелия, стимулированного фактором роста сосудистого эндотелия, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора [3-изофермента протеинкиназы С общей формулы la) (I) в которой Z представляет -(СН 2 )Р или -(СН 2 )Р-О(СН 2 )Р-, R4 представляет гидрокси, -SH, СгС 4 алкил, (СН 2 ) т арил, -NH(apnn), -N(CH3)(CF3), -NH(CF3) или NR5R6, R5 представляет водород или Ci-C4 алкил, R6 представляет водород, СгС 4 алкил или бензил, р представляет 0, 1 или 2, а m представляет независимо 2 или 3, или представляет его фармацевтически приемлемую соль, пролекарство или сложный эфир 6 Способ по п 4, в котором ингибитор протеинкиназы С представляет собой соединение следующей формулы 0Ь) в которой Z представляет -(СН 2 )Р-, R4 представляет -NR 5 R 6 , -NH(CF3) или N(CH3)(CF3), R и R6 представляют независимо Н или С1-С4 алкил, р представляет 0, 1 или 2, а в которой W представляет -О-, -S-, -SO-, -SO2-, -СО-, -С2-С6 алкилен, замещенный алкилен, С2-Сє алкенилен, арил-, -арил-(СН2)тО-, -гетероцикл-, -гетероцикл(СН2)тО-, бицикл-, -конденсированный конденсированный бицикл-(СН2)тО-, -NR3-, -NOR3, -CONH- или -NHCO-, X и Y представляют независимо СгС 4 алкилен, замещенный алкилен или X, Y и W скомбинированы вместе, образуя -(СН2)ПАА-, R1 радикалы представляют водород или до четырех необязательных заместителей, независимо выбранных из галогена, СгС 4 алкила, гидрокси, Ci-C4 алкокси, галогеналкила, нитро, NR4R или NHCO(C r C 4 алкила), R2 представляет водород, СН3СО-, NH2 или гидрокси, R3 представляет водород, (СН 2 ) т арил, С г С 4 алкил, -COO(Ci-C4 алкил), -CONR4R5, -(C=NH)NH2, SO(C r C 4 алкил), -SO2(NR4R5) или -SO 2 (C r C 4 алкил), R4 и R5 представляют независимо водород, СгС 4 алкил, фенил, бензил или скомбинированы с азотом, с которым они связаны, образуя насыщенное или ненасыщенное 5-или 6-членное кольцо, АА представляет аминокислотный остаток, m представляет независимо 0, 1, 2 или 3, а п представляет независимо 2, 3, 4 или 5, 54427 или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства или сложного эфира 12 Способ подавления связанной с отеком капиллярной проницаемости, стимулированной фактором роста сосудистого эндотелия, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора р-изофермента протеинкиназы С общей формулы R2 (I) в которой W представляет -О-, -S-, -SO-, -SO2-, -СО-, -С2-С6 алкилен, замещенный алкилен, С2-Сє алкенилен, арил-, -арил-(СН2)тО-, -гетероцикл-, -гетероцикл(СН2)тО-, бицикл-, -конденсированный конденсированный бицикл-(СН2)тО-, -NR3-, -NOR3, -CONH- или -NHCO-, По данной заявке заявляется приоритет на основании предварительной заявки США №60/016 658 на патент США, поданной 1 мая 1996г Предпосылки изобретения 1 Область изобретения Настоящее изобретение в широком смысле направлено на способ ингибирования роста эндотелиальных клеток и капиллярной проницаемости, связанных с фактором роста сосудистого эндотелия (ФРСЭ), например, увеличенного клеточного роста и проницаемости, вызванных ФРСЭ, с использованием ингибитора изофермента р протеин киназы С (ПКС) Эти состояния, вызванные ФРСЭ, тесно связаны с разнообразными глазными сосудистыми расстройствами Настоящее изобретение направлено особенно на применение ингибитора изофермента р протеин киназы С (ПКС) для лечения глазных сосудистых расстройств, включая дегенерацию желтого пятна, отек желтого пятна, сосудистую ретинопатию, окклюзию вен сетчатки, неоваскуляризацмю радужной оболочки, гистоплазмоз и ишемические заболевания сетчатки 2 Описание предшествующего уровня техники ФСП/ФРСЭ представляет собой гликозилированный, многофункциональный цитокин Избыточная экспрессия ФСП/ФРСЭ связана с разнообразными глазными сосудистыми расстройствами ОСП/ФРСЭ вызывает пролиферацию эндотелиальных клеток, избыточную проницаемость посредством активации транспорта, опосредованного через пузырьково-вакуолярные органеллы, миграции и реорганизации актина с изменениями формы и индуляцией Он изменяет экспрессию гена эндотелиальных клеток, вызывая повышенную выработку тканевого фактора и нескольких X и Y представляют независимо С1-С4 алкилен, замещенный алкилен или X, Y и W скомбинированы вместе, образуя -(СН2)ПАА-, R1 радикалы представляют водород или до четырех необязательных заместителей, независимо выбранных из галогена, С1-С4 алкила, гидрокси, С1-С4 алкокси, галогеналкила, нитро, NR4R или NHCO(d-C 4 алкила), R2 представляет водород, СН3СО-, NH2 или гидрокси, R3 представляет водород, (СН 2 ) т арил, С1-С4 алкил, -COO(Ci-C4 алкил), -CONR4R5, -(C=NH)NH2, SO(d-C 4 алкил), -SO2(NR4R5) или -SO2(Ci-C4 алкил), R4 и R5 представляют независимо водород, СгС 4 алкил, фенил, бензил или скомбинированы с азотом, с которым они связаны, образуя насыщенное или ненасыщенное 5-или 6-членное кольцо, АА представляет аминокислотный остаток, m представляет независимо 0, 1, 2 или 3, а п представляет независимо 2, 3, 4 или 5, или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства или сложного эфира протеаз, включая интерстициальную коллагеназу и как урокиназо-подобного активатора, так и активатора тканевого плазминогена Большинство из этих самых генов индуцируются активацией ПКС, стимулированной форбол миристатацетатом (ФМА) Считается, что фактор роста сосудистого эндотелия (ФРСЭ), наряду как с факторами роста фибробластов (ФРФ), так и с трансформирующим фактором роста (ТФРР) играют главную роль в опосредовании активной внутриглазной неоваскуляризации у пациентов с ишемическими заболеваниями сетчатки (Aiello et al , New England Jour Medicine, 331(22) 1480-1487 (1994), Amm et al , Invest Ophthalmol Vis Sei , 35 3179-3188 (1994)) Одним из глазных сосудистых расстройств, связанных с повышенной экспрессией ФРСЭ, является дегенерация желтого пятна Связанная с возрастом дегенерация является ведущей причиной слепоты у пожилых людей По данным оценки, дегенерация желтого пятна поражает более, чем 16% людей в возрасте 85 лет и старше и 6% людей в возрасте между 65 и 74 годами Более, чем у 20% пациентов в возрасте старше 75 лет имеется дегенерация желтого пятна Болезнь чаще встречается у женщин (Liebowitz HM, Krueer DE, Maunder LE et al , "The Frammgham Eye Sudy VI Macular Degeneration", Surv Ophthalmol 24 (supp 10 428-457, 1980), Klein et al , "Prevalence of Age Related Maculopathy The Beaver Dam Study", Ophthalmology, 99(6)933-943, 1992) Дегенерацию желтого пятна можно разделить на сухой или влажный тип, причем сухой тип встречается в 10 раз чаще, но в общем по своим клиническим проявлениям протекает менее тяжело Более тяжелая влажная или эксудативная дегенерация жел 54427 того пятна связана с патологическим ростом хориоидальных сосудов (хориоидальная неоваскуляризация) в подсетчаточный пигментный эпителий или подсетчаточное пространство и часто приводит к тяжелому ухудшению зрения Дегенерация желтого пятна имеет первоначальное патологическое поражение, заключающееся в появлении друз, что представляет патологическое отложение ткани внутри слоя пигментного эпителия сетчатки (ПЭС) и, как считается, является вторичным по отношению к сосудистой недостаточности Затем через оболочку Бруха, расположенную между ПЭС и хориокапиллярами, прорастают новые кровеносные сосуды, внедряясь в сетчатку Это внедрение в сетчатку вызывает разрушение фото рецепторов и может привести к кровоизлиянию со снижением зрения Одним из наиболее обычных видов лечения дегенерации желтого пятна является лазерная терапия Лазерная терапия применяется для лечения зон неоваскуляризации, которые не распространяются на центральную область желтого пятна (центральная ямка) Однако, после лазерной терапии часто происходит рецидив заболевания (MPS Group, Arch Ophthalmol , Vol 109, pp 12321241 (1991)) Кроме того, лазерная терапия может привести к возникновению остаточных скотом и поэтому не является оптимальным способом лечения неоваскуляризации в центральной области желтого пятна Лишь ограниченное число пациентов отвечают критериям показаний для данного способа лечения, главным образом ввиду недостаточно выявленной или скрытой природы обычно наблюдаемой хориоидальной неоваскуляризации (Freund et al , Amer Jour Ophthalmol , 115 786-791 (1993)) В качестве терапевтического средства испытывался также интерферон на основе известной активности факторов роста, таких как фактор роста фибробластов, в отношении стимуляции патологического ангиогенеза Однако, стойкий эффект не наблюдался (Kirk-patnk et al , Br J Ophthalmol, 77 766-770 (1993), Chan et al , Ophthalmology, 101 289-300 (1994)) Совсем недавно безуспешно завершились испытания по использованию трансформирующего фактора роста (ТФР) бета-2 для лечения дегенерации желтого пятна (Biotechnology Newswatch, January 1, 1996) С быстрым старением населения дегенерация желтого пятна становится существенной проблемой общественного здравоохранения В настоящее время нет способов излечения этого заболевания, и единственным принятым способом лечения, дающим менее чем удовлетворительные результаты, является лазерное лечение, хотя FDA недавно одобрила талидомид для применения в клинических исследованиях на людях ("Researches Focus on Macular Degeneration Common Eye Problems, Causes and Treatment Get New Attention" by Steven Sternberg, Washington Post Health, October 31, 1995) Сохраняется настоятельная потребность в способе эффективной медикаментозной терапии дегенерации желтого пятна Отек желтого пятна связан со многими видами глазных сосудистых заболеваний, таких как пигментный ретинит, диабетическая ретинопатия, 8 воспаление ресничного кружка, обструкция вен сетчатки, старческий гиалит, и с внутриглазными хирургическими вмешательствами (Henkmd, Surv Ophthalmol, 28 431-2 (1984), Bird, Surv Ophthalmol, 28 433-6 (1984), Cunha-Vaz, Surv Ophthalmol, 28 485-92 (1984)) Кистоидный отек желтого пятна является самым часто встречающимся осложнением после операций по поводу катаракты (Yanuzzi, Surv Ophthalmol, 28 540-53 (1984)) и, возможно, самой частой причиной потери зрения у пациентов, подвергающихся экстракции хрусталика (Jampol et al , Surv Ophthalmol , 28 535-9 (1984)) Кистоидный отек желтого пятна обычно самоограничивается, и даже в хронических случаях может произойти спонтанное улучшение (Yanuzzi, Surv Ophthalmol , 28 540-53 (1984)) Однако, у небольшой части пациентов (от 1 до 15%) может развиться необратимое повреждение и постоянная утрата зрительной функции (Yanuzzi et al , Ophthalmology, 88 847-54 (1981)) Отек желтого пятна является также причиной поздней потери зрения у пациентов с синдромом Vogt-Koyanagi-Harada (VKH) (Rutzen et al , J Ret and Vit Dis, 15(6) 475-479 (1995)) Отек желтого пятна тесно связан с микроаневризмами при диабетической ретинопатии, а у лиц, не страдающих диабетом - с серповидноклеточной анемией, окклюзией ответвляющихся вен, поражением сонных артерий или с тяжелой гипертонией (Klein, Med Clm N Am 72 1415-1437(1989)) При микроаневризмах часто происходит утечка липопротеинового материала, что приводит к образованию твердых эксудатов Эти эксудаты появляются в виде рассеянной, агрегированной или кольцеподобной конфигурации Когда эксудаты и жидкость накапливаются в задней части сетчатки, может развиться отек желтого пятна, который может вызвать значительное затуманивание зрения и привести к потере остроты зрения Для лечения областей отечной сетчатки, примыкающих к микроаневризмам, применяется лазерная процедура, называемая очаговой фотокоагуляцией Было показано, что очаговая фотокоагуляция снижает частоту ухудшения остроты зрения на 60% у пациентов с клинически выраженным отеком желтого пятна, но у пациентов с отеком желтого пятна от средней до умеренной степени не наблюдался благоприятный эффект фотокоагуляции (Raskin et al, Ann Int Med , 117(3) 226-233 (1992)) Операции на стекловидном теле могут улучшить прогноз для зрения только в случаях диабетического отека желтого пятна, связанного с патологической поверхностью раздела между стекловидным телом и желтым пятном (Vaneffenterre et al , J Francais D Ophthalmol, 16(11) 602-610(1993)) Проводилась оценка медикаментозных способов лечения отека желтого пятна, таких как оральное и местное применение индометацина (Miwa, Drag Intell Clm Farm , 20 548-550 (1986)), а также эритропоетина (Friedman et al , Amer J Kidney Dis , 26(1) 202-208 (1995)), но существенный эффект не наблюдался Существует потребность в способе эффективной медикаментозной терапии отека желтого пятна Хотя известно, что ФРСЭ играет некоторую роль в патологии некоторых глазных сосудистых 54427 расстройств, остается необходимость определить, обеспечит ли благоприятный терапевтический эффект при лечении таких глазных сосудистых расстройств ингибирование функции, вызываемое ФРСЭ Настоящее изобретение показывает, что с помощью ингибирования активности ФРСЭ можно снизить патологический потенциал множества из этих глазных сосудистых расстройств Сущность изобретения Целью изобретения является предоставление способов лечения глазных сосудистых расстройств Еще одной целью изобретения является предоставление способа ингибирования капиллярной проницаемости, связанной с отеком желтого пятна у млекопитающих Еще одной целью изобретения является предоставление способа ингибирования неоваскуляризации, вызванной фактором роста сосудистого эндотелия (ФРСЭ) Эти и другие цели изобретения достигаются с помощью одного или более вариантов реализации, описанных ниже Согласно одному воплощению изобретения предоставляется способ лечения глазных сосудистых расстройств, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора изофермента р протеин киназы С Согласно другому воплощению изобретения предоставляется способ печения дегенерации желтого пятна у млекопитающих, который включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора изофермента р протеин киназы С Согласно еще одному варианту воплощения изобретения предоставляется способ ингибирования капиллярной проницаемости, связанной с отеком желтого пятна у млекопитающих, который включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора изофермента р протеин киназы С Согласно еще одному воплощению изобретения предоставляется способ ингибирования фактора роста сосудистого эндотелия (ФРСЭ), который включает введение млекопитающему подавляющего ФРСЭ количества ингибитора изофермента р протеин киназы С Настоящее изобретение обеспечивает технику соединениями, которые дают профилактический и лечебный эффект при различных глазных сосудистых расстройствах Краткое описание чертежей На фиг 1 показано подавляющее действие ингибитора ПКС, (S)-3,4-[N,Nl-1,1'-((2"-3TOKCH-3l"(0)4"'-(М,г\І-диметиламино)-бутан)-бис-(3, З'-индолил) 1-1 (Н)-пиррол-2, 5-диона, на рост эндотелиальных клеток, стимулированный рекомбинантным ФРСЭ человека На фиг 2 дополнительно показано подавляющее действие ингибитора ПКС, (S) -3,4- [N, N'-1,1' ( (2" -этокси-3'" (О) -4'"- (N, N-диметиламино) бутан) -бис- (3,З'-индолил)] -1 (Н) -пиррол-2, 5диона, на рост эндотелиальныл клеток, стимулированный рекомбинантным ФРСЭ человека На фиг 3 показано воздействие ингибитора 10 ПКС на активность эндогенного ФРСЭ, зкспрессируемого после культивирования перицитов сетчатки в условиях гипоксии На фиг 4 дополнительно показано подавляющее влияние ингибитора ПКС на рост эндотелиальных клеток, стимулированный рекомбинантным ФРСЭ человека На фиг5А, 5В показана динамика проницаемости сетчатки, вызванной ФРСЭ На фиг 6 показана реакция проницаемости сетчатки для флюоресцеина на ФРСЭ На фиг 7 показано действие ингибирования и стимуляции ПКС в стекловидном теле на проницаемость сетчатки На фиг 8А, 8В показано ингибирование проницаемости сетчатки в ответ на ФРСЭ с помощью орально вводимого ингибитора протеин киназы С Р Подробное описание изобретения Находкой согласно настоящему изобретению является то, что терапевтическое применение особого класса ингибиторов протеин киназы С, а именно, ингибиторов изофермента р протеин киназы С, и особенно, избирательных ингибиторов изофермента р протеин киназы С, противодействует воздействиям ФРСЭ В частности, открытием настоящего изобретения является то, что применение этого особого класса ингибиторов протеин киназы С противодействует росту клеток эндотелия и капиллярной проницаемости, особенно, росту клеток эндотелия и капиллярной проницаемости, стимулированным фактором роста ФРСЭ Следовательно, такие соединения могут применяться терапевтически для лечения заболеваний, связанных с ФРСЭ, в частности, множества глазных сосудистых расстройств В способе данного изобретения предпочтительно используются те ингибиторы протеин киназы С, которые эффективно ингибируют или подавляют изофермент р Одна подходящая группа соединений в общем описана в предшествующем уровне техники как бис-индолилмалеимиды или макроциклические бис-индолилмалеимиды Бисиндолилмалеимиды, хорошо известные в предшествующем уровне техники, включают соединения, которые описаны в патентах США 5621098, 5552396, 5545636, 5481003, 5491242 и 5057614, и все они приведены здесь для сведения Макроциклические бис-индолилмалеимиды, в частности, представлены соединениями формулы I Эти соединения и способы их получения были раскрыты в патенте США 5 552 396, который здесь - для сведения Эти соединения вводятся в терапевтически эффективном количестве млекопитающему для ингибирования роста клеток эндотелия или капиллярной проницаемости, связанных с ФРСЭ, и для подавления воздействий ФРСЭ, связанных с глазными заболеваниями Эти соединения можно также вводить пациентам, подверженным риску упомянутых выше патологических состояний в качестве профилактических средств Один предпочтительный класс соединений для применения в способе изобретения представляет соединения формулы 54427 11 12 (I) la) в которой W представляет -О-, -S-, -SO-, -SO2-, -CO-, C2Сє алкилен, замещенный алкилен, Сг-Сє алкенилен, -арил-, -арил (СН2)тО-, -гетероцикл-, гетероцикл- (СН2)тО- -сконденсированный бициклический-, -сконцентрированный бициклический(СН2)тО-, -NR3-, -NOR-, -CONH- или -NHCO-, X и Y представляют независимо С1-С4 алкилен, замещенный алкилен, или X, Y и W скомбинированы имеете с образованием -(CbbJnAA-, R1 радикалы представляют водород или до четырех необязательных заместителей, независимо выбранных из галогена, С1-С4 алкила, гидрокси, С1-С4 алкокси, галогеналкила, нитро, NR R5 или -NHCO(Ci-C4 алкил), R2 представляет водород, СН3СО-, NH2 или гидрокси, R3 представляет водород, арил С4алкил, -COO(Ci-C4 алкил), -CONR4R , (C=NH)NH2, -SO(C r C 4 алкил), -SO2(NR4R5) или SO2 (Ci-C4 алкил), R4 и R5 представляют независимо водород, Ci-C4 алкил, фенил, бензил или комбинируются с азотом, с которым они связаны, образуя насыщенное или ненасыщенное 5 или 6-членное кольцо, АА представляет аминокислотный остаток, m представляет независимо 0,1, 2 или 3, и п представляет независимо 2, 3, 4 или 5, или их фармацевтически приемлемые соли, пролекарства или сложные эфиры Более предпочтительный класс соединений для применения в данном изобретении представлен формулой І, в которой фрагменты -X-W-Yсодержат от 4 до 8 атомов, которые могут быть замещенными или не замещенными Более предпочтительно, фрагменты -X-W-Y-coдержат 6 атомов Другие предпочтительные соединения для применения в способе данного изобретения являются соединениями формулы І, в которой R1 и R2 представляют независимо водород, и W представляет замещенный алкилен, -О-, S-, -CONH-, NHCO- или -NR 3 Особенно предпочтительными соединениями для применения в изобретении являются соединения формулы la в которой Z представляет -(Cbbjp - или (СН2)р-О-(СН2)р, R4 представляет гидрокси, -SH, Ci-C4 алкил, (СН2)тарил, -І\ІН(арил), -N(CH3) (CF3), - NH(CF3) или NR5R6, R представляет водород или С1-С4 алкил, R6 представляет водород, Ci-C4 алкил или бензил, р представляет 0,1 или 2, и m представляет независимо 2 или 3, или их фармацевтически приемлемые соли, пролекарства или сложные эфиры Наиболее предпочтительными соединениями формулы 1а являются те, в которых Z представляет СЬЬ а R4 представляет -NH 2 , NH(CF3), или -N(CH3)2, или их фармацевтически приемлемые соли, пролекарства или сложные эфиры Другие предпочтительные соединения для применения в способе настоящего изобретения представляют соединения, в которых W в формуле I представляет -О-, Y представляет замещенный алкилен, а X представляет алкилен Эти предпочтительные соединения представлены формулой Ib la) в которой z представляет -(Cbbjp-, R представляет NR5R6, -NH(CF3) или -N(CH3) (CF3), R5 и R6 представляют независимо Н или СгС 4 алкил, р представляет 0,1 или 2, a m представляет независимо 2 или 3, или их фармацевтически приемлемые соли, пролекарства или сложные эфиры Наиболее предпочтительными соединениями формулы 1Ь являются соединения, в которых р представляет 1, a R5 и R6 представляют метил Соединения формул I, la и Ib ввиду того, что они содержат основную часть или фрагмент, могут 14 13 54427 также существовать в виде фармацевтически лее ферментных или других процессов in vivo с приемлемых кислотно-аддитивных солей Кислообразованием исходной родительской или биоакты, обычно используемые для образования таких тивной формы Вероятно, это пролекарство может солей, включают неорганические кислоты, такие иметь фармакокинетический профиль, отличный как хлористоводородная, бромистоводородная, от родительского, обеспечивая облегчение всасыиодистоводородная, серная и фосфорная кислования через эпителий слизистой оболочки, лучта, а также органические кислоты, такие как парашее образование соли или лучшую растворимость толуолсульфоновая, метан-сульфоновая, щавеи/или улучшенную системную устойчивость (налевая, пара-бромфенилсульфоновая, карбоновая, пример, увеличение периода полувыведения из янтарная, лимонная, бензойная, уксусная кислота плазмы) Обычно такие химические модификации и родственные неорганические и органические включают следующие кислоты Такие фармацевтически приемлемые 1) сложноэфирные или амидные производсоли, таким образом, включают сульфат, пироные, которые могут расщепляться эстеразами или сульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фослипазами, фат, моногидрофосфат, дигидрофосфат, мета2) пептиды, которые могут распознаваться фосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иод ид, специфичными или неспецифичными протеазами, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, или формат, изобутират, гептаноат, пропиолат, окса3) производные, которые накапливаются в лат, малонат, сукцинат, суберинат, себацинат, участке действия посредством мембранной сефумарат, малеат, 2-бутин-1,4-диоат, З-гексин-2,5лекции пролекарственной формы или модифицидиоат, бензоат, хлорбензоат, гидроксибензоат, рованной пролекарственной формы, или любую метоксибензоат, фталат, ксилол сул ьфонат, фекомбинацию приведенных выше модификаций 1-3 нилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитОбычные способы отбора и получения подходярат, лактат, гиппурат, р-гидроксибутират, гликощих производных пролекарств описаны, наприлят, малеат, тартрат, метансул ьфонат, мер, в работе К Bungaarci, Design of Prodrugs, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафта(1985) лин-2-сульфонат, манделат и аналогичные ОсоСинтез различных бис-индол-Ы-малеимидных бенно применяются хлористоводородная соль и производных описан в патенте США 5 057 614, мезилат выданном Davis et al , а синтез предпочтительных соединений, подходящих для использования в В дополнение к фармацевтически приемлеэтом изобретении, описан в ранее указанном памым солям могут также существовать другие сотенте США 5 552 396 и в описании ЕР 0 657 ли Они могут служить в качестве промежуточных 411А1, выданного Faul et al , все из которых припродуктов при очистке соединений, при получении ведены здесь для сведения других солей или при идентификации и характеристике соединений или промежуточных продукОдним особенно предпочтительным ингибитов тором протеин киназы- р для использования в способе данного изобретения является соединеФармацевтически приемлемые соли соединение, описанное в примере 5д (хлористоводородний формул I, la и Ib могут также существовать в ная соль (S)-3,4-[N, N'-1,1'- ((2"-этокси) -З1" (О) -4'"виде различных сольватов, таких как с водой, ме(N, N-диметиламино) -бутан) -бис-(3, З'-индолил)]танолом, этанолом, диметилформамидом, этил1(Н)-пиррол-2,5-диона) упомянутого выше патента ацетатом и аналогичными Могут также получатьСША 5 552 396 Это соединение является мощся смеси таких сольватов Источником такого ным ингибитором протеин киназы С Оно является сольвата может быть растворитель кристаллизаселективным по отношению к протеин киназе С, в ции/ присущий растворителю получения или крисравнении с другими киназами и является высоко сталлизации, или дополнительный к такому расизофермент-селективным, т е оно является сетворителю лективным в отношении бета-1 и бета-2 изоферПризнано, что могут существовать различные ментов Благоприятны также другие соли данного стереоизомерные формы соединений формул I, la соединения, особенно мезилатные соли и Ib, например, W может содержать хиральный атом углерода в замещенной алкиленовой части Соединения обычно получаются в виде рацематов и могут удобно использоваться в этом виде Альтернативно, по желанию, с помощью обычных методик могут выделяться или синтезироваться индивидуальные энантиомеры Такие рацематы и индивидуальные энантиомеры и их смеси образуют часть соединений, используемых в способах настоящего изобретения Соединения, используемые в данном изобретении, также охватывают фармацевтически приемлемые пролекарства соединений формул I, la и Ib Пролекарство представляет собой лекарство, которое подвергнуто химической модификации и может быть биологически неактивным в участке его действия, но которое может разрушаться или модифицироваться под влиянием одного или бо Предпочтительная мезилатная соль может быть получена с помощью реакции соединения формулы II la) с метансульфоновой кислотой в не реакцион 16 15 54427 носпособном органическом растворителе, предпо данным отсутствия ингибирования роста эндопочтительно смеси органического растворителя к телиальных клеток без стимуляции ФРСЭ в норводы, и наиболее предпочтительно вода-ацетон моксических кондиционированных средах В гиМогут применялся и другие растворители, такие поксических кондиционированных средах скорость как метанол, ацетон, этил-ацетат и их смеси Соклеточного роста возрастает вследствие увеличеотношение растворителя и воды не имеет принния содержания эндогенного фактора роста, ципиального значения и обычно определяется ФРСЭ, вырабатываемого гипоксическими клеткарастворимостью реагентов Предпочтительные ми И снова ингибитор протеин киназы С, кислотсоотношения растворителя и воды обычно соная соль (S) -3,4- [N,N'-1,1'- ((2"-зтокси)-3'" (О) -4'"ставляют в интервале от 0,1 1 до 100 1 по объему (N.N-диметиламино) -бутан) -бис- (3,3'-индолил)]-1 Предпочтительно, соотношение составляет от 1 1 (Н)-пиррол-2,5-диона, нормализует клеточный до 20 1, и наиболее предпочтительно от 5 1 до рост, вызванный такими гипоксическими условия10 1 Оптимальное соотношение зависит от выми бранного растворителя, и предпочтительным явЭксперименты, предоставленные в настояляется ацетон при соотношении растворителя и щем изобретении, показывают, что факторы росводы 9 1 та, такие как ФРСЭ, также воздействуют на капиллярную проницаемость Исследования показали, В реакции обычно участвуют эквимолярные что в экспериментальной модели ФРСЭ значиколичества двух реагентов, хотя могут применятьтельно увеличивает капиллярную проницаемость, ся другие соотношения, особенно такие, при котовплоть до трехкратного уровня Это зависимое от рых имеется избыток метансульфоновои кислоты ФРСЭ увеличение капиллярной проницаемости Скорость добавления метансульфоновои кислоты также является дозозависимым В соответствии с не имеет принципиального значения для реакции, исследованиями на животных in vivo, введение и она может добавляться быстро (