Мікросферичні частинки для парентеральної ін’єкції фармацевтично активної речовини при її контрольованому виділенні в організмі після ін’єкції, спосіб їх одержання та суспензія на основі даних мікросфер

УКРАЇНА (19) У А (11) 27043 „„ CJ (51)6 А 61 К 9/16 ОПИС ДО ПАТЕНТУ ДЕРЖАВНЕ ПАТЕНТНЕ ВІДОМСТВО НА ВИНАХІД 5 : (54) МІКРОСФЕРИЧНІ ЧАСТИНКИ ДЛЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНОЇ ІН'ЄКЦІЇ ФАРМАЦЕВТИЧНО АКТИВНОЇ РЕЧОВИНИ ПРИ її КОНТРОЛЬОВАНОМУ ВИДІЛЕННІ В ОРГАНІЗМІ ПІСЛЯ ІН'ЄКЦІЇ, СПОСІБ IX ОДЕРЖАННЯ ТА СУСПЕНЗІЯ НА ОСНОВІ ДАНИХ МІКРОСФЕР 1 "* 1 2 1 (21) 93004686 (22) 12.06.91 (24) 28.02.2000 (31) 90074164 (32) 14,06.90 (33) FR (86) РСТ/ЕР91/01096 (12.06.91) (46) 28.02.2000. Бюл. № 1 (72) Гарца Флорес Жозе (MX), Лаісека Сото Лаура П. (MX), Пллен Пісардо Жозе (MX), Ангелес Урібе Хуан (MX) (73) Аллікасьонес фармацеутікас С.А. де С.В. (MX) (57) 1. Микросферические частицы для парентеральной инъекции фармацевтически активного вещества при его контролируемом выделении в организме после инъекции, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что указанные частицы являются твердыми непористыми микросферами, имеющими диаметр 1-300 мкм, и выполнены из одного или нескольких фармацевтически активных веществ с температурой плавления, превышающей 60°С. 2. Микросферические частицы по л.1, о л и ч а ю щ и е с я тем» что диаметр микросфер составляет 5-100 мкм. 3. Микросферические частицы по п. 1 или 2, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что они дополнительно содержат фармацевтически приемлемые целевые добавки. 4. Микросферические частицы по п. 3, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что фармацевтически приемлемые целевые добавки являются стабилизаторами или агентами структурирования активного вещества. 5. Микросферические частицы по п. 1 , о т л и ч а ю щ и е с я тем, что фармацевтически активное вещество выбирается из стероидов. 6. Микросферические частицы по п. 5, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что указанное фармацевтически активное вещество является прогестероном. 7. Микросферические частицы по п. 5, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что указанное фармацевтически активное вещество является 17-р-эстрадиолом. 8. Микросферические частицы по п. 1, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что фармацевтически активное вещество выбрано из болеутоляющих средств. 9. Микросферические частицы по п. 8, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что указанное фармацевтически активное вещество является напроксеном. ' 10. Микросферические частицы по п. 8, о т л и ч а ю щ и е с я тем, что указанное фармацевтически активное вещество является индометацином. 11. Способ получения микросферических частиц, включающий расплавление фармацевтически активного вещества, распыление расплава в виде тумана, состоящего из мельчайших капель, и замораживание капель, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что при получении твердых непористых микросфер по любому из пп. 1 10, фармацевтически активное вещество расплавляют в инертной атмосфере, расплав распыляют в замораживающей камере с температурой от -15 до -50°С под давлением инертной атмосферы и полученные микросферы разделяют на фракции по размерам. 12. Способ по п. 11, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что микросферы разделяют на фракции по размерам таким образом, что более 70% микросфер имеют диаметр от 70 до 130 % от заданного значения диаметра. о О 27043 13. Суспензия, предназначенная для парентерального введения путем инъекции, состоящая из микросфер, распределенных в фармацевтически приемлемой жидкой среде, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что она содержит эффективное количество микросфер по любому из пп. 1-10, а фармацевтически активное вещество микросферы нерастворимо в указанной жидкой среде. 14. Суспензия по п. 13, о т л и ч аю щ а я с я тем, что указанная жидкая среда представляет собой водные растворы солей, например, физиологический раствор, или масла. 15. Суспензия по п. 13, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что она содержит микросферы по п. 1, включающие з ка честве фармацевтически активного вещества прогестерон и 17-р-эстрадиол, причем полученная суспензия является контрацептивом. 16. Суспензия по п. 13, о т л и ч аю щ а я с я тем, что она содержит микросферы по п 1, включающие в качестве фармацевтически активного вещества прогестерон, причем полученная суспензия является контрацептивом "post partum". 17. Суспензия по п. 13, о т л и ч аю щ а я с я тем, что она содержит микросферы по п. 1, включающие в качестве фармацевтически активного веществе прогестерон, причем полученная суспензия используется для предупреждения остеопороза у женщин в менопаузе. Изобретение относится к способу улучшения контроля за фармакокинетическими и фармакологическими свойствами фармацевтически активных веществ. Оно относится также к частицам активных веществ и к их применению в рецептурах для инъекций с пролонгированным выделением. Известно использование биологически активных веществ, мало растворимых в физиологической среде, в виде суспензии частиц и введение ее путем внутримышечной инъекции для получения медленного растворения, т.е. пролонгированного действия в организме человека или животного. Например, известны в смеси норэтистерона и мэстранола в виде суспензии кристаллического порошка в воде для использования ее в качестве контрацептива при внутримышечной инъекции (Garza Flores et al. Contraception, май 1988, Том 35, № 5, 471 - 481). Однако в связи с отклонениями от гранулометрии и нерегулярностью формы частиц, эти суспензии обычно имеют следующие недостатки: - кривая выделения активных веществ показывает резкий пик сразу после инъекции, а затем снижение по наклонной, что свидетельствует об увеличении общей дозы, необходимой для получения достаточно длительного действия; - образование комков (сгустков) или корок в суспензии, - необходимость использовать подкожные иглы большого диа метра, чтобы избежать риска блокирования на выходе из шприца. Патент FR - 2070153 (DUPONT DE NEMOURS) описывает суспензии частиц активных компонентов, покрытых матрицами из полиактидных полимеров. Этот препарат уменьшает эффект первоначального медикаментозного шока и замедляет выделение активного начала. Однако нерегулярность формы и в этом случае создает риск осложнений в момент инъекции, а отклонения от формы, размера и композиции этих частиц приводят к нежелательной переменчивости скоростей растворения в организме реципиента, т.е. к дисперсии результатов, не позволяющей делать точный фармакокинетический прогноз. Патент ЕР № 257368 (AMERICAN CYANAMID СО) описывает композицию для парентерального введения, образованную микросферами из жиров и/или восков натурального или синтетического происхождения с низкой температурой плавления (40-60°С), содержащими частицы полипептида, например, гормона роста. Когда эти композиции инъектируются быкам, то гормон роста испытывает запаздывающее растворение из-за защитной оболочки из воска или жира, что приводит к пролонгированию его присутствия в организме животного, которое вызывает увеличение роста или лактации. 5 10 15 20 25 30 27043 Однако эти микросферы имеют скЦелью изобретения является создалонность деформироваться, склеиваться ние препарата с замедленным высвоили коалесцировать, когда температура бождением для введения путем парентеокружающей среды является повышенной, ральной инъекции, который позволил бы в частности, в тропических странах (40- 5 осуществить строгий контроль за выделе60°С), что может создать проблемы при нием активного компонента. хранении или складировании. Кроме того, Эта цель достигается благодаря припоскольку доля активного полипептида в менению твердых микросфер, непористых частице составляет практически 30 - 40 и калиброванных, состоящих в основном % , то при инъекции этих частиц в орга- 10 из фармацевтически активных веществ. низм вводится некоторое количество веСкорость растворения микросферы в щества-носителя, чужеродного и бесподанной растворяющей среде (предпочтилезного для этого организма, которое, по тельно во внутренней физиологической меньшей мере, примерно а 1,5-3 раза среде, в основном зависит от радиуса превышает количество активного начала. 15 сферы с учетом соотношений, связывающих объем, площадь и радиус сферы. Известны также другие способы нанесения защитного покрытия или микроВ соответствии с одним аспектом наскапсулирования, часть из которых описатоящего изобретения факт применения нена, например, "Encyclopedia of Chemtcal пористых твердых сфер дает точные знаTechnology, 3-е издание, том 15, стр. 470- 20 ния в соотношении масса-поверхность 493 (1981). Образованные таким образом частиц и, следовательно, благодаря под-' микрокапсулы часто содержат "центральбору калибра сфер, т.е. радиуса или распные" частицы очень разного размера или ределения радиусов, можно точно контросовсем не содержат центральных частиц. лировать степень выделения одного или Микросферы или микрокапсулы по из- 25 нескольких введенных активных компоненвестному уровню техники обеспечивают тов. Это устраняет риск передозировок замедленное растворение, т.е. запаздыили наоборот позволяет компенсировать вающее в целом выделение активных комнедостаток дозировки и уменьшить общее понентов. введение одного или несколько биологически активных веществ до минимального Однако, учитывая неоднородности фор- 30 количества, необходимого для получения мы и массы центральных частиц или ультжелаемого терапевтического эффекта и р ато н ко дисперсных частиц, которые моуменьшить, таким образом, риск возникгут находиться в капсулах с одинаковым новения у больного нежелательных повнешним размером, скорость выделения активного компонента не является равно- 35 бочных эффектов. мерной, поэтому строгий контроль за выИспользуемые в виде чистых активделением и даже точно прогнозируемое ных компонентов микросферы по настоявыделение в зависимости от времени не щему изобретению имеют преимущество возможны. перед частицами с защитным покрытием С другой стороны, недостаточно на- 40 или микрокапсулам по известному уровню техники, которое заключается в уменьдежная воспроизводимость и точность решении объема твердого вещества перед зультатов, полученных при помощи этих инъекцией в живой организм. Они имеют препаратов не позволяет их использовать также то преимущество, что не вводят например, как контрацептив в большом масштабе. В этой области применения 45 бесполезное твердое индифферентное вещество, более или менее разлагаемое в точное программированное выделение акорганизме. тивного начала является особенно желательным, поскольку действие биологичесОни имеют также то преимущество, ки активного вещества должно совпадать что не используют индифферентное вес естественным биологическим циклом ор- 50 щество с низкой температурой плавления ганизма человека или животного (напри(< 60°С), способное вызывать слипание мер, менструальным) или например, в слусфер друг с другом и вызывать инциденчае применения болеутоляющего средстты в момент инъекции. ва, алкалоида, сердечного тонизирующеНекоторые вещества могут быть асго средства и т.д., когда необходимо точ- 55 социированы с добавками, косвенно но контролировать выделение активного действующими на организм реципиента: начала для избежания всякого периода например, можно ввести различные целепередозировки или, наоборот, недостаточвые ферма це вти чески приемлемые добавки ной дозировки в момент инъекции, следля улучшения стабильности или химидующей за предыдущей инъекцией. ческой стойкости биологически активных 27043 веществ, подразумевая, что речь не идет об инертных веществах типа носителя. В частности, может оказаться полезным понизить температуру плавления или ингибировать реакцию разложения в ходе процесса приготовления (например, процесса в результате плавления-затвердевания) микросфер По сравнению с суспензиями чистых активных компонентов в виде частиц нерегулярной формы, известными уже в технике, микросферы по настоящему изобретению имеют то преимущество, что они менее склонны к слипанию и более легко проходят через подкожную иглу. С другой стороны, микросферы могут сортироваться и разделяться более строгим и более надежным образом в зависимости от их размера, чем частицы с нерегулярными формами. Препарат по настоящему изобретению может выпускаться в виде порошка из микросфер в ампулах, готового для перевода в суспензию, или в виде уже приготовленной суспензии в ампулах для инъекции, готовой для применения в медицине или ветеринарии. Суспензионной средой могут быть вода, солевой раствор, жидкое масло, содержащие буферные смеси, поверхностно-активные вещества, консерванты, обычно используемые в суспензиях для инъекции фармацевтами, или любое другое вещество или их смесь, которые не угрожают физической и химической целостности веществ в суспензии и которые подходят для принимающего их организма. С целью устранения начального резкого увеличения содержания активного компонента во внутренней среде организма реципиента, в суспензиях, которых к применению, используют жидкие носители, в которых указанные активные компоненты практически нерастворимы. Если активные вещества частично растворимы в теплом жидком носителе, но нерастворимы на холоду для устранения образования осадков (эффект "слеживания") предпочитают готовить раздельно микросферы в виде порошка и жидкий носитель, которые смешиваются только в момент инъекции. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 В ветеринарной области применения, 50 когда продолжительность желаемого эффекта может быть очень большой (например, период лактации взрослой самки), можно использовать диаметры величиной несколько сотен микрометров (микрон). С 55 целью ограничения диаметра игл в инъекционных шприцах целесообразно ограничить диаметр микросфер величиной 300 мкм, а более предпочтительно - величиной 100 мкм. Напротив, для очень малой 8 продолжительности желаемого эффекта (например, в течение суток) диаметр микросферы может уменьшаться до 1 мкм. Для большинства случаев медицинского применения (когда продолжительность действия активного компонента заключена между суточным циклом и месячным циклом (предпочтительно использовать микросферы, диаметр которых был бы заключен между 5 и 100 мкм в зависимости от активных веществ Активное вещество может быть, в частности, выбрано из стероидов. Существенное условие для получения галеновой формы согласно изобретению заключается в том, чтобы располагать партией калиброванных микросфер, т.е. однородных по диаметру. Если это необходимо, то выбор микросфер по их диаметру может быть осуществлен в ходе изготовления при помощи известных способов: например, при помощи циклонных сепараторов, путем просеивания (грохочения) с отсасыванием воздуха или путем просеивания (грохочения) в жидкой среде. На практике достаточно, чтобы более 70 % микросфер имели диаметры, заключенные в интервале от 70 до 130 % от номинального диаметра. В случае необходимости кривая идеального растворения, определенная в результате предусмотренного применения, может быть приближенной, если осуществить смешивание партий, имеющих различные соответствующие диаметры. Для перевода твердого продукта в форму микросфер можно использовать известный метод механического истирания. Можно также использовать, например, суспензирование продукта в расплавленном состоянии в виде микрокапель при перемешивании в жидком носителе, с которым указанный продукт не смешивается, с последующим отверждением указанного продукта. Патент WO 90/13285 описывает способ изготовления пористых микросфер, полученных в результате пульверизации, отвердения и лиофилизации в холодном газе веществ, предварительно растворенных в адекватном растворителе. Чтобы изготовить твердые и непористые микросферы по настоящему изобретению, предпочитают использовать способ, позволяющий сохранить микросферы в химически стабильном состоянии выше температуры плавления, который заключается в пульверизации под давлением и/или при помощи горячего газа вещества ( в случае необходимости с добавками) в расплавленном состоянии, с последующим 27043 быстрым затвердеванием образованного таким образом тумана в холодном газе. Кроме того, частицы, не соответствующие требованиям спецификации, могут быть рециклированы. Изобретение особенно подходит для веществ, температура плавления которых превышает 60°С и которые являются термостабильными выше их температуры плавления (или которые могут стать термостабильными при помощи добавок ). Добавка может также использоваться для устранения фазового перехода от одной фазы к другой твердой фазе, который способен придать хрупкость структуре сферы. Этот способ подходит также для смесей активных веществ в виде твердого раствора одного вещества в другом. Настоящее изобретение иллюстрируется при помощи чертежей и примеров, приведенных ниже. Одно, однако, ограничивается не этими формами исполнения, а только содержанием притязаний по формуле изобретения. На фиг. 1 показана схема изготовления микросфер по изобретению; на фиг. 2 - микросфера, прогестерона (средний диаметр 50-100 мкм); на фиг. 3 - микросфера 17-р-эстрадиола {средний диаметр 100 мкм); на фиг. 4 - гранулометрическое распределение одной фракции (средний диаметр 25 мкм) сфер холестерина; на фиг. 5 - экспериментальная установка для определения скорости растворения микросфер; на фиг. 6 - сравнительные профили растворения микросфер и кристаллов прогестерона (50-125 мкм); на фиг. 7 - сравнительные скорости растворения микросфер и кристаллов прогестерона в виде производных оптического поглощения в зависимости от времени; на фиг. 8 и 9 - сравнительные профили растворения микросфер и кристаллов 17Р -эстрадиола (50-100 мкм); на фиг. 10 и 11 - сравнительные профили растворения микросфер и кристаллов прогестерона (50-100 мкм); на фиг. 12 и 13 сравнительные профили растворения микросфер и кристаллов напроксена; на фиг. 14 - 16 - концентрации в плазме, полученные (у кролика) с прогестероном путем инъекции сответственно раствора масла, кристаллов со средним размером 44 мкм и микросфер со средним размером 44 мкм; на фиг. 17 - 18 - концентрации в плазме, полученные (у кролика) с 17(i -эстрадиолом путем инъекции соответственно раствора масла, кристаллов и микросфер; на фиг. 20 - концентрации в плазме, полученные (у кролика) с нап 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 10 роксеном соответственно для раствора (кривая 0), кристаллов (кривая 1) и микросфер (кривая 2); на фиг. 21 и 22 сравнительные профили растворения микросфер и кристаллов индометацина (50100 мкм). На фиг. 6-13 и 20-22 абсциссы указываются в часах; на фиг. 14-19 абсциссы указываются в днях (после инъекции). П р и м е р 1 Приготовление микросфер прогестеронов. Согласно фиг. 1 предварительно нагретый азот под давлением направляется по входной трубе А в пульверизационное устройство и проходит через терморегулируемую зону нагоева В, где доводится до температуры, заключенной между 125 и 130°С, перед допуском а пульверизатор D. Пульверизатор D соединен трубкой с нагретой камерой С, в которой прогестерон выдерживается в расплавленном состоянии (Т — 130°С) и под давлением азота (вход А2). Он увлекается потоком азота и смешивается с последним для пульверизации в виде тумана через выходное отверстие (сопло) пульверизатора D и проникает в камеру пульверизации-затвердевания F. Резервуар Е содержит жидкий азот, который испаряется и проникает через многочисленные трубопроводы в виде ультрахолодного газа с большой скоростью в камеру пульверизации-затвердевания F, где он контактирует с туманооб* разным прогестероном. Капельки сразу после их образования в результате пульверизации окружаются потоком ледяного газа, который их кристаллизует в микросферы и препятствует соприкосновению их со стенками перед их полным отверждением. Температура на выходе из камеры пульверизации-затвердевания заключена между -15 и -50°С. Все количество микросфер, полученное при помощи этой камеры F, имеет идеальную сферическую форму. На выходе из камеры F находятся два циклонных сепаратора G, и Gz (известной конструкции), установленные последовательно. Для более тонкого фракционирования число циклонов может быль увеличено. Микросферы улавливаются в коллекторах Н, и Н2; газы на выходе из циклонов проходят через обезвреживающий фильтр 1, в котором при помощи насоса поддерживается небольшое разряжение относительно давления, царящего в первом циклоне. Фиг. 2 показывает микрофотографию фракции (диаметр 50100 мкм) выделенных микросфер прогестерона (на электронном микроскопе). 11 27043 П р и м е р 2. Те же самые экспериментальные условия (кроме Т^ =185°С) применяются при изготовлении микросфер из 17-р-эстрадиола с теми же самыми результатами. Фиг.З показывает микрофотографию фракции микросфер со средними диаметром 100 мкм. П р и м е р 3. Гранулометрическое распределение.. Микросферы холестерина приготавливаются тем же самым экспериментальным способом, что и в примере 1. После распределения фракция со средним диаметром 25 мкм имеет гранулометрическое распределение, показанное на фиг. 4. П р и м е р 4. Изготовление микросфер напроксена. Используют способ из примера 1. Экспериментальные условия: - плавление: 160° в атмосфере азота; - орошение: через вентиль (клапан) с давлением воздуха 0,137 х 105Па (140 г/см г ); - затвердевание: воздухом при -20°С под давлением 3,9 х 10s Па (4 КГ/СМ ); - перекрывание: при помощи циклонов; - выделение: в водной среде и путем просеивания (грохочения) в зависимости от гранулометрии. П р и м е р 5. Микросферы прогестерона. Используют способ из примера 1. Экспериментальные условия: - плавление: 130°С в атмосфере азота; - орошение: через вентиль (клапан) с давлением воздуха 6900 Ra (70 г/см2); - затвердевание: воздухом при -20°С под давлением 3,9 х хЮ 5 Па (4 кг/см 2 ); - перекрывание: при помощи циклонов; - выделение: в водной среде и путем просеивания (грохочения) в зависимости от гранулометрии. П р и м е р 6. 17-р-эстрадиол. Используют способ из примера 1. Экспериментальные условия: - плавление : 185°С в атмосфере азота; - орошение: через вентиль (клапан) с давлением воздуха 0,137 х 105 Па (140 г/см2); - затвердевание: воздухом при -10°С под давлением 2,9 х 105 Па (3 кг/см 2 ); - перекрывание: при помощи циклонов; - выделение: в водной среде и путем просеивания (грохочения) в зависимости от гранулометрии. П р и м е р 7. Микросферы индометацина. Используют способ из примера 1. Экспериментальные условия: - плавление: 165°С в атмосфере азота; - орошение: через вентиль (клапан) с давлением воздуха 0,108 х 105 Па (110 г/см2); - затвердевание: воздухом при -10°С под давлением 3,9 х 105 Па (4 кг/см 2 ); - перекрывание: при помощи циклонов; - выделение: в водной среде и путем просеивания 5 10 15 20 2 25 30 35 40 45 50 55 12 (грохочения) в зависимости от гранулометрии. Сравнительные УФ= и ИК= спектрофотометрические анализы до и после образования микросфер. Осуществляют проверку на отсутствие химического разложения веществ в ходе процесса плавления-затвердевания, которое могло бы изменить их терапевтическое действие. Сравнение проводят между исходным веществом (кристаллами) и микросферами, полученными в результате плавления-затвердевания, путем УФ- и ИКспектрофотометрического анализа. Графики " до и после" должны всегда совмещаться для УФ-спектрофотометр и и и для ИК-спектрофотометрии. Если появляются различия в кривых инфракрасных спектров, следует проверить, не были ли они вызваны явлением полиморфизма, используя с этой целью высокоэффективную жидкостную хроматографию с установкой.диодов. Следует также провести термографический анализ, не только чтобы хорошо определить температуры плавления, но также чтобы определить, появляются ли при этом эндотермические или экзотермические эффекты, которые могут выражать как структурные модификации или полиморфизм, способные оказывать действие на процесс образования микросфер, так и химические процессы разложения, вызванные нагреванием. Прибор, используемый в ультрафиолетовой спектрографии: Hewlett Packard модель 8452А с установкой фотодиодов, с кварцевой ячейкой, имеющей пучок 0,1 см. Растворители: этанол для 17-^-эстрадиола, прогестерона и холестерина; 0,1 н НС1 для напроксена; 0,1 н NaOH для индометацина. Результаты не показывают следов изменения. Прибор, используемый в инфракрасной спектрофотометрии: Beckmann Acculab 10. Дисперсионная среда: бромид калия. Хроматограф: жидкостный высокого разрешения с детектированием за счет установки фотодиодов: Waters 990 и N.E.C. Powermate 2 Workstation. Результаты не показывают никакого изменения после перевода в микросферы для индометацина, прогестерона, 17-£-эстрадиола и напроксена. Термограф: Shimadzu DSC Calormeter и CR4A Workstation. Температуры плавления, отмеченные на дифференциальных термограммах, показывают, что не было химического изменения веществ (пример, Т кристаллов 13 27043 130°C, Tnn микросфер -129°С для прогестерона). Термограммы прогестерона и 17р -эстрадиола показывают только морфологическую модификацию твердых кристаллических фаз. П р и м е р 8. Кривые растворения микросфер прогестерона. Опыты проводят либо в чистой воде, либо в среде вода/по л ипропиленгликоль -1:1 для ускорения растворения. Экспериментальная установка показана на фиг. 5. Ячейка для перфузии 1, содержащая образец, снабжается через резервуар (перемещаемый со средой для растворения 2; оба устройства находятся в водяной бане 3. Оптическая плотность среды при 240 нм регистрируется спектрофотометром 4, и среда возвращается в резервуар. Пузырьковая ловушка 5 и перистальтический насос 6 дополняют контур. Фиг, 6 показывает сравнительные профили растворения микросфер (кривая 2) и кристаллов (кривая 1) с гранулометрией, заключенной между 50 и 125 мкм, которые измерены по изменению оптической плотности в зависимости от времени. Опыт осуществляется в среде вода/ ППГ - 50:50. Установлено, что растворение задерживается по мере формования микросфер. Фиг. 7 показывает скорости растворения (производные изменений оптической плотности в зависимости от времени) кристаллов (1) и микросфер (2) с одной и той же средней гранулометрией (примерно 150 мк). Гранулометрическое распределение кристаллов является более неоднородным, а их кривая растворения более нерегулярна, чем кривая растворения для микросфер. Последующие примеры показывают сравнительную воспроизводимость начальных частей кривых растворения кристаллов и микросфер со сравнимой гранулометрией для одного и того же соединения. Используемое устройство является устройством, изображенным на фиг. 5. Несколько (от 3 до 6) измерительных контуров (ячейки для растворения и трубопроводы), содержащих идентичные образцы, подсоединяются параллельно одним и тем же перистальтическим насосом, и измерения проводятся одновременно. П р и м е р 10. Растворение кристаллов прогестерона (фиг. 11 )/микросфер прогестерона (фиг.10). Используется среда для растворения: Н2О качества ВЭЖХ с 0,01% твина 80. Образец: 50 мг. Гранулометрия: 50-100 мкм. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 14 Интервалы измерения образцов: 0, 2, 4, 8, 14, 20 ч. j Длина волны для спектрофотометрии: 240 нм. П р и м е р 11. Растворение микросфер напроксена {фиг.12)/кристаллов напроксена (фиг.13). Используемое устройство является устройством, изображенным на фиг. 5. Среда, используемая для растворения: Н2О качества ВЭЖХ с 0,01% твина 80, Образец: 50 мг. Гранулометрия: 50-100 мкм. Интервалы измерения образцов: 0, 1, 3, 6, 9, 12, 24 ч. Длина волны для спектрофотометрии: 232 нм. П р и м е р 12. Растворение микросфер 17-р-эстрадиола (фиг. 9) / кристаллов. 17-р-эстрадиола (фиг. 6). Используемое устройство является устройством, изображенным на фиг. 5. Среда, используемая для растворения: НгО качества ВЭЖХ с 0,01% твина 80. Образец: 60 мг. Гранулометрия: 50-100 мкм Интервалы измерения образцов: 0, 2, 4, 18 ч. Длина волны для спектрофотометрии: 282 нм. Совокупность кривых показывает, что воспроизводимость результатов и регулярность профилей растворения являются лучше для партий микросфер, чем для партий кристаллов на начальной фазе растворения (которая является наиболее критическим периодом). П р и м е р 14. Рецептуры для инъекций. рецептура № 1 Микросферы прогестерона 75 мг Полиэтиленгликоль 800 20 мг Натриевая карбоксиметилцеллюлоза 1,66 мг Полисорбат 80 2,0 мг Пропилпарабен 0,14 мг NaCI 1,2 мг Н2О в количестве, j достаточном для I доведения до 1 мл Рецептура № 2 і Микросферы | 17-р-эстрадиола 2,5 мг Полиэтиленгликоль 800 20 мг Натриевая карбоксиметилцеллюлоза 1,66 мг Полисорбат 80 2,0 мг Пропилпарабен 0,14 мг NaCI 1,2 мг Н2О в количестве, доста-' точном для доведения до 1 мл 15 27043 Рецептура № З Микросферы напроксена 100 мг Натриевая карбоксиметилцеллюлоза 5,0 мг Полисорбат 80 4,0 мг NaCI 9,0 мг Бензиловый спирт 9,0 мг Н2О в количестве, достаточном для доведения до 1 мл П р и м е р 15. Изучение концентраций прогестерона в плазме у кролика (фиг. 14-16). Изучение включает сравнительную оценку влияния на концентрацию в плазме у кролика, вызванного парентеральным введением прогестерона в виде раствора масла (0), родной суспензии кристаллов (1) и водной суспензии микросфер (2) (рецептура № 1, средняя гранулометрия : 44 мкм). 10 Самцам кроликов Новозеландской породы со средним весом 3,5 кг вводят внутримышечно разовую дозу величиной 150 мг прогестерона (2 мл.) Интервал проведения измерений образцов составляет 1, 2, 4 и 24 ч. в течение 10 дн., потом каждые три дня до достижения 30 дн-. Пробы путем венопункции составляют 2 мл, они центрифугируются, потом хранятся при температуре -20°С до анализа методом радиоиммуноанализа. П р и м е р 16. Изучение концентраций эстрадиола в плазме у кролика. Изучение включает сравнительную оценку влияния на концентрацию в плазме у кролика, вызванного парентеральным введением эстрадиола в виде раствора масла (0), водной суспензии кристаллов (1) и водной суспензии микросфер эстрадиола (2) (рецептура №2, гранулометрия 50 -100 мкм). 8 Самцам кроликов Новозеландской породы со средним весом 3,5 кг вводят внутримышечно разовую дозу, содержащую 5 мг прогестерона (2мл). Интервал проведения измерений образцов составляет 1, 2, 4 и 24 ч. в течение 20 дн., потом каждые три дня до достижения 30 дн. Пробы путем венопункции составляют 2 мл, они центрифугируются, потом хранятся при температуре -2°С до анализа методом радиоиммуноанализа. П р и м е р 17. Сравнительная эволюция концентрации в плазме напроксена в виде раствора масла и в виде суспензии микросфер. Субъекты эксперимента - кролики Новозеландской породы в возрасте 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 16 примерно 5 мес. и весящие в среднем 3,7 кг. Проба для сравнивания составляет 5 мл крови, взятой путем сердечной пункции после внутримышечного введения 2 мл испытываемой рецептуры (рецептура № 3) в правую нижнюю конечность. Пробы для анализа были отобраны с интервалами 30 минут в течение 2 ч. и с интервалами 60 мин. до достижения 6 ч. В нескольких опытах в зависимости от кинетических характеристик лекарственного средства были взяты дополнительные пробы. Пробы для анализа величиной 2 мл, также отобранные путем сердечной пункции, были помещены в Vacutamer, к ним прибавили гепарин, центрифугировали со скоростью 3000 оборотов в минуту в течение 10 мин., затем плазма отделялась и замораживалась в криососудах при температуре -20°С до ее анализа. Фиг. 20 показывает, что изменение концентрации в плазме, достигнутой после инъекции микросфер, является намного более регулярным, чем изменение, полученное после инъекции частиц произвольной формы (50-100 мкм). Таким образом, совокупность приведенных выше результатов показывает, что на начальной фазе растворения фармацевтически активные вещества имеют более воспроизводимые численные значения и более регулярный профиль растворения, когда они представляют собой образец в виде калиброванных микросфер, чем в виде частиц нерегулярной формы. Это позволяет более точно рассчитать фармацевтически эффективную дозу. Кроме, того, исчезновение или, по крайней мере, сильное уменьшение начального пика растворения (по сравнению с кристаллами или какими-либо частицами), а также замедление и общее пролонгирование явления растворения позволяют рассчитать более значительные разовые дозы, предназначенные для введения с более широкими интервалами времени. С другой стороны, приведенные выше результаты показывают, что применение этого типа структуры подходит как для изготовления лекарственных средств, продолжительность действия которых является относительно короткой, т.е. от нескольких часов до нескольких дней (например, болеутоляющие средства), так и для веществ, для которых предусматриваемая продолжительность действия составляет несколько недель. Среди них можно указать, в частности, применение по 17 27043 18 ловых гормонов (таких, как прогестерон и мерах, а являются применимыми к любым 17-р-эстрадиол) для изготовления контрафармакологически активным веществам, цептивов, предназначенных для одной химически стабильным в ходе микронизамесячной инъекции, или контрацептивов, ции, при условии, что фармакокинетичеспредназначенных, в частности, для женкие изменения, которые допускаются микщин после родов, или еще для изготовросферами (короткая или большая проления лекарственных средств с большой должительность в зависимости от диаметпродолжительностью действия для инъекра, регуляризация профилей в плазме), ций, предназначенных для предупреждеимеет терапевтическое преимущество или ния остеопороза у женщин в период кли- 10 удобство и что вводимые дозы не превымакса. шают разумный объем. Можно выбрать вариант введения среди гиподермической Описанный выше способ изготовлеинъекции, подкожной инъекции, внутриния, сферические структуры и полученмышечной инъекции, внутрисуставной инные рецептуры и их применение парентеральным путем в результате инъекций, ра- 15 ъекции и внутриспиномозговой инъекции в зависимости от предусматриваемого зумеется, не ограничиваются веществаприменения. ми, указанными в приведенных выше при Н2 27043 Фиг. 2 20 мкм Фиг. 3 27043 120 100 80 CO 4C 20 мкм 0 26 36 46 66 Єб гранулометрический состав Фиг 4 л Y 5 Фиг 5 76 27043 ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ ЧАСТИЦ ПРОГЕСТЕРОНА D(nM)/1000 12.00 6.00 16,00 1 : кристаллы 2 : микросферы 24,00 Фиг. 6 СКОРОСТИ РАСТВОРЕНИЯ ЧАСТИЦ ПРОГЕСТЕРОНА 0,00 1.5 3.00 1 • кристаллы 2 : микросферы 6,00 10,00 14,00 16,00 Фиг 7 ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ кристаллов 17-р-эютрадиола % растворены 20 Фиг. 8 27043 ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ микросфер 17-р-э$страдиола Ю )2 Фиг. 9 14 ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ МИКРОСФЕР ПРОГЕСТЕРОНА °7о растворены S 10 Ъ 20 Фиг. 10 % ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ КРИСТАЛЛОВ ПРОГЕСТЕРОНА растворены 2S 27043 ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ МИКРОСФЕР НАПРОКСЕНА % растворены ДИАГРАММА РАСТВОРИМОСТИ КРИСТАЛЛОВ НАПРОКСЕНА 60 % растворены 50 1*0 30 -ZZ 20 10 час 0 Ю 15 20 25 Фиг. 13 Уровень прогестерона в плазме кролика после инъекции 150 мг раствора масла .г пг / мл х 1000 Фиг. 14 • і і і і день О 2 Ь 6 8 10 12 14 16 \Ь 20 22 24 26 2Б 30 ' 27043 Уровень прогестерона в плазме кролика после инъекции 150 мг водного раствора кристаллов пг/мл х 1000 Фиг. 15 день 0 2 U 6 8 Ю )2 V* 16 18 20 22 24 26 28 30 IS пг/ мл х 1000 Уровень прогестерона в плазме кролика после инъекции 150 мг микросфер (формула 1) П 10 О 2 U 6 8 Ю 12 Wi 16 18 20 22 2U 26 28 30 Фиг. 16 Уровень экстрадиола в плазме кролика после инъекции 5 мг раствора масла нг / мл день 15 20 Фиг. 17 25 ЗО 35 27043 Уровень экстрадиола в плазме кролика после инъекции 5 мг водного раствора кристаллов нг / мл день 10 15 20 25 30 35 фиг. 18 Уровень экстрадиола в плазме кролика после инъекции 5 мг микросфер {формула 2) нг / мл день 20 25 30 35 Фиг. 19 Уровень напроксена в плазме кролика после'инъекции 200 мг нг / мл о Кривая О раствор масла Кривая 1 кристаллы Кривая 2 микросферы (50-100 мкм] Фиг. 20 • 27043 Диаграмма растворимости кристаллов индометацина 80 60 40 20 час 0 Ю IS 20 25 Фиг. 21 Диаграмма растворимости микросфер индометацина 70 60 50 АО 30 20 10 0 о ю ъ час 20 Фиг. 22 Упорядник Техред М. Келемеш Коректор М. Куль Замовлення 549 Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, Київ-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101