Застосування інгібіторів ikb кінази для лікування болю

1. Застосування сполуки формули (Іа) C2 2 (19) 1 3 Винахід відноситься до застосування інгібіторів ІkВ-кінази для лікування болів. У Міжнародних заявках [WO 01/00610, WO 01/30774 і WO 01/68648] описуються сполуки, які можуть модулювати NFkВ. NFkВ являє собою гетеродимерний фактор транскрипції, який може активувати множину генів, що кодують, зокрема, прозапальні цитокіни, такі як інтерлейкін-1 (IL-1), інтерлейкін-2 (IL-2), a-фактор некрозу нухлини (TNFa) або інтерлейкін-6 (IL-6). NFkВ знаходиться в цитозолі клітин у вигляді комплексу зі своїм інгібітором ІkВ, що зустрічається в природі. Стимуляція клітин, наприклад, за допомогою цитокінів, приводить до фосфорилювання і подальшої протеолітичної деструкції ІkВ. Ця протеолітична деструкція приводить до активації NFkВ, який потім мігрує в ядро клітини і там активує множину прозапальних генів. У випадку захворювань, таких як ревматоїдний артрит (при запаленні), остеоартрит, астма, інфаркт серця, хвороба Альцгеймера або атеросклероз, NFkВ активується понад норму. Інгібування NFkВ також є корисним при лікуванні раку, оскільки в цьому випадку воно використовується для посилення лікування за допомогою цитостатиків. Показано, що лікарські засоби, такі як глюкокортикоїди, саліцилати або солі золота, які використовуються при лікуванні ревматичних захворювань, в різних місцях інгібуюче втручаються в активуючий NFkВ сигнальний ланцюг або інтерферують безпосередньо з транскрипцією генів. Першою стадією у вказаному сигнальному каскаді є деструкція ІkВ. Це фосфорилювання регулюється специфічною ІkВ-кіназою. При лікуванні гострих і хронічних белів використовують лікарські препарати з множини різних груп речовин. Незважаючи на це, в цей час знеболювальне лікування ще є не задовільним. Це пов'язано, передусім, з недостатньою силою дії анальгетиків, що є в продажу. При одержанні ефективних сполук для лікування болів було тільки встановлено, що для цього можна використати інгібітори ІkВ-кінази. Особливо на моделях, що використовуються, змогли продемонструвати силу дії, яка чітко перевершує ефективність класичних нестероїдальних протизапальних засобів. Винахід відноситься тому до застосування інгібіторів ІkВ-кінази для одержання лікарських засобів для лікування болів. Під поняттям "болі" розуміють гострі і хронічні болі. Прикладами хронічних болів є хронічні м'язово-скелетні захворювання, такі як болі в хребті, болі при менструаціях, болі при остеоартрозі або ревматоїдному артриті, болі при запаленні кишечнику, болю при запаленні серцевого м'яза, болю при розсіяному склерозі, болі при невриті, болі у випадку карцином і 80837 4 сарком, болі при синдромі набутого імунодефіциту (СНІД), болі при хіміотерапії, фантомний біль, невралгія трійчастого нерва, головні болі, такі як мігрень, або невропатичні болі, така як постгерпетична невралгія після оперізувального лишаю. Прикладами гострих болів є болі після поранень, післяопераційні болі, болі при гострому приступі подагри або гострі болі після щелепнохірургічних втручань. Інгібіторами ІkВ-кінази є, наприклад, похідні індолу або бензімідазолу, які описуються в [Міжнародних заявках WO 01/00610 і WO 01/30774]. Винахід відноситься, далі, до застосування сполук формули (І): і/або стереоізомерної форми сполуки формули (І) і/або фізіологічно прийнятної солі сполуки формули (І), для одержання лікарських засобів для лікування болів, причому Ε означає атом азоту або залишок -C(R19)-, де R19 означає атом водню або залишок R9; один із замісників R1, R2, R3 і R4 означає залишок формули (II): , де D означає -С(О)-, -S(O)- або -S(O)2-; R8 означає атом водню або -(С1-С4)-алкіл; R9 означає 1. характерний залишок амінокислоти, 2. арил, де арил незаміщений або заміщений, 3. гетероарил з 5-14 членами циклу, де гетероарил незаміщений або заміщений; 4. гетероцикл з 5-12 членами циклу, де гетероцикл незаміщений або заміщений; 5. (С1-С6)-алкіл, де алкіл є лінійним або розгалуженим і незаміщений або одно-, дво- або трикратно, незалежно один від одного, заміщений за допомогою 5.1 арилу, де арил незаміщений або заміщений, 5.2 гетероарилу з 5-14 членами циклу, де гетероарил незаміщений або заміщений, 5.3 гетероциклу з 5-12 членами циклу, де гетероцикл незаміщений або заміщений, 5.4 -O-R11, 5.5 =О, 5.6 галогену, 5.7 -CN, 5.8 -CF3, 5 80837 6 5.9 -S(O)x-R11, де x означає ціле число нуль, 1 X і Υ разом утворюють фенільний 1,2або 2, діазиновий, 1,3-діазиновий або 1,4-діазиновий 5.10 -C(O)-O-R11, залишок; 5.11 -C(O)-N(R11)2, причому утворена за допомогою Ν, Α, Χ, Υ, В і 5.12 -C(O)-R11, атома вуглецю циклічна система містить не більше 5.13 -N(R11)2, одного атому кисню; X не означає атом кисню, 5.14 -(С3-С6)-циклоалкілу, атом сірки або атом азоту, коли А означає атом 5.15 залишку формули азоту; містить не більше одного атому сірки, містить 1,2, 3 або 4 атоми азоту і причому одночасно не містить атом азоту і атом сірки; причому утворена за допомогою Ν, Α, Χ, Υ, В і атома вуглецю циклічна система незаміщена або одно-, дво- або трикратно, незалежно один від одного, заміщена (С1-С8)-алкілом, де алкіл незаміщений або одно- або двократно заміщений або за допомогою 5.16 залишку формули , 1.1. -ОН, де R11 означає 1.2. -(С1-С8)-алкокси, a) атом водню; 1.3. галогену, b) (С1-С6)-алкіл, де алкіл незаміщений або 1.4. -ΝΟ2, одно-, дво- або трикратно заміщений за 1.5. -ΝN2, допомогою 1.6. -CF3, 1. арилу, де арил незаміщений або заміщений, 1.7. метилендіоксилу, 2. гетероарилу з 5-14 членами циклу, 1.8. -С(О), 3. гетероциклу з 5-12 членами циклу, 1.9. -С(О)-СН3, 4. галогену, 1.10. -(С1-С4)-алкоксикарбонілу, 5. -N-(С1-С6)n-алкілу, де n означає ціле число 1.11. CN, нуль, 1 або 2 і алкіл незаміщений або одно-, дво1.12.-С(О)-ОН, або трикратно, незалежно один від одного, 1.13. -C(O)-NH2, заміщений галогеном або групою -С(О)-ОН, 1.14. тетразолілу, 6. -О-(С1-С6)-алкілу або 1.15. фенілу, 7. -С(О)-ОН; 1.16. феноксигрупи, c) арил, де арил незаміщений або заміщений; 1.17. бензилу або d) гетероарил з 5-14 членами циклу; або 1.18. бензилоксигрупи; або e) гетероцикл з 5-12 членами циклу; і R8 і Ζ разом з атомом вуглецю, з яким вони, у випадку (R11)2 залишок R11, незалежно один відповідно, пов'язані, утворюють гетероцикл від одного, має значення а)-e); формули (llс) Ζ означає 1. арил, де арил незаміщений або заміщений, 2. гетероарил з 5-14 членами циклу, де гетероарил незаміщений або заміщений, 3. гетероцикл з 5-12 членами циклу, де гетероцикл незаміщений або заміщений, 4. -(С1-С6)-алкіл, де алкіл заміщений або , незаміщений, 11 5. -C(O)-R , де D, R8 і R11 мають вказане в формулі (II) 6. -C(O)-O-R11 або значення; 7.-C(O)-N(R11)2; або Τ означає атом кисню, атом сірки, атом азоту 8 9 R і R разом з атомом азоту і атомом або залишок -СН2 -; вуглецю, з яким вони, відповідно, пов'язані, W означає атом кисню, атом сірки, атом азоту утворюють гетероцикл формули (llа) або залишок -СН2 -; V відсутній або означає атом кисню, атом сірки, атом азоту або залишок -СН2-; або Τ і V або V і W разом утворюють фенільний, 1,2-діазиновий, 1,3-діазиновий або 1,4-діазиновий залишок; причому утворена за допомогою Ν, Τ, V, W і де D і Ζ мають вказане у формулі (II) значення; двох атомів вуглецю циклічна система містить не А означає атом азоту або залишок -СН2-; більше одного атому кисню, не більше одного В означає атом кисню, атом сірки, атом азоту атому сірки і 1, 2, 3 або 4 атоми азоту і причому або залишок -СН2 -; одночасно не містить атом азоту і атом сірки; і X означає атом кисню, атом сірки, атом азоту утворена за допомогою Ν, Τ, V, W і двох або залишок -СН2 -; атомів вуглецю циклічна система незаміщена або Υ відсутній або означає атом кисню, атом одно-, дво- або трикратно, незалежно один від сірки, атом азоту або залишок -СН2-; або одного, заміщена замісниками, вказаними вище в пп.1.1-1.18; і 7 80837 8 норлейцин, N-метилвалін, норвалін, орнітин, аловідповідно, інші замісники R1, R2, R3 і R4, ізолейцин, 4-гідроксипролін, ало-гідроксилізин, незалежно один від одного, означають ало-треонін, 3-гідроксипролін, 3-(2-нафтил)аланін, 1. атом водню, 3-(1-нафтил)аланін, гомоцистеїн, 2. галоген, гомофенілаланін, гомоцистеїнова кислота, 23. -(С1-С6)-алкіл, аміно-3-феніламіноетилпропіонова кислота, 24. гетероарил з 5-14 членами циклу, де аміно-3-феніламінопропіонова кислота, гетероарил незаміщений або заміщений, гомотриптофан, цистеїнова кислота, 3-(25. гетероцикл з 5-12 членами циклу, де піридил)аланін, 3-(3-піридил)аланін, 3-(4гетероцикл незаміщений або заміщений, піридил)аланін, фосфінотрицин, 46. -NO2, фторфенілаланін, 3-фторфенілаланін, 27. -CN, фторфенілаланін, 4-хлорфенілаланін, 48. -О-(С0-С4)-алкіларил, нітрофенілаланін, циклогексилаланін, 49. -О-(С1-С4)-алкіл, амінофенілаланін, цитрулін, 5-фтортриптофан, 510. -OR11, H.-N(R11)2, метокситриптофан, метіонінсульфон, 12. -S(O)r-R11, де r означає ціле число нуль, 1 метіонінсульфоксид або -NH-NR11-CON(R11)2, де або 2, або R11 має нижчевказане значення; 13. CF3; 5 3. арил, що вибирається з групи, яка R означає складається з антрилу, біфенілілу, 2-біфенілілу, 31. атом водню, біфенілілу, 4-біфенілілу, флуоренілу, нафтилу, 12. -ОН, або нафтилу, 2-нафтилу або фенілу, де арил 3. =О; і R6 означає незаміщений або однократно, двократно або 1. арил, де арил незаміщений або заміщений; трикратно заміщений однаковими або різними 2. феніл, одно- або двократно заміщений за залишками з ряду: -С(О)-(С1-С4)-алкіл, -С(О), =О, допомогою NH-(C1-С4)-алкіл, -NH-((С1-С4)-алкіл)2, -(С1-С8)2.1 -CN, алкіл, -(С1-С8)-алкокси, галоген, нітрогрупа, 2.2 -NO2, аміногрупа, трифторметил, гідроксил, -CF3, 2.3 -О-(С1-С4)-алкілу, гідроксi-(С1-С4)-алкіл, як гідроксиметил або12.4 -N(R11)2, гідроксіетил або 2-гідроксіетил, 2.5-NH-C(O)-R11, метилендіоксигрупа, етилендіоксигрупа, форміл, 2.6 -S(O)s-R11, де s означає ціле число нуль, 1 ацетил, ціаногрупа, гідроксикарбоніл, або 2, амінокарбоніл, -(С1-С4)-алкоксикарбоніл, феніл, 2.7 -C(O)-R11, або феноксигрупа, бензил, бензилоксигрупа, -S(O)x2.8 -(С1-С4)-алкіл-NH2; R11, де x означає ціле число нуль, 1 або 2, -О-(С13. гетероарил з 5-14 членами циклу, який С4)-алкіл, -С(О)-ОН, -С(O)-О-(С1-С4)-алкіл, -NНнезаміщений або одно-, дво- або трикратно С(О)-(С1-С4)-алкіл або тетразоліл; заміщений; або. 4. гетероарил з 5-14 членами циклу, де 4. гетероцикл з 5-12 членами циклу, який гетероарил незаміщений або заміщений, і незаміщений або одно-, дво- або трикратно утворюється у вигляді залишку з групи, що заміщений. складається з азепіну, азетидину, бензімідазолу, Винахід відноситься, далі, до застосування бензодіоксолану, 2-бензофурану, бензотіазолу, сполуки формули (І), що пропонується, причому Ε означає атом азоту або залишок -C(R19)-, бензотіофену, 2-бензотіофену, 2-бензоксазолу, bде R19 означає атом водню або залишок R9; карболіну, хіноксаліну, хіназоліну, хіноліну, 2один із замісників R1, R2, R3 і R4 означає хіноксаліну, циклогепта[b]-5-піролу, діазепіну, залишок формули (II), де дигідропіридину, 3-гідроксипіро-2,4-діону, D означає -С(О)-, -S(O)- або -S(O)2-; імідазолу, 4-імідазолу, імідазолідину, імідазоліну, R8 означає атом водню або (С1-С4)-алкіл; індазолу, індолу, ізохіноліну, ізоіндолу, ізотіазолу, R9 означає ізотіазолідину, ізоксазолу, 2-ізоксазолідину, 1. характерний залишок амінокислоти, ізоксазолідину, ізоксазолону, метилімідазолу, 3-(Nметилпіролідину), морфоліну, оксазолу, 1,3,4утворений з a-амінокислот, що зустрічаються в оксадіазолу, оксадіазолідиндіону, оксадіазолону, природі, з групи, що складається з аланіну, валіну, 5-оксо-4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазолу, 5-оксо-1,2,4лейцину, ізолейцину, фенілаланіну, тирозину, тіадіазолу, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2-оксиду, 1-оксотриптофану, серину, треоніну, цистеїну, метіоніну, 1,2-дигідро-3-ізохінолу, фенілпіролу, 5-феніл-2аспарагіну, глутаміну, лізину, гістидину, аргініну, піролу, фталазину, піперазину, піперидину, глутамінової кислоти і аспарагінової кислоти; піразину, піразолу, піразоліну, піразолідину, 2. характерний залишок амінокислоти, піридазину, піримідину, піридину, піридил-Nутворений з амінокислот, що не зустрічаються в оксиду, 2-піролу, 3-піролу, піролідину, піроліну, природі, таких як 2-аміноадипінова кислота, 24,5,6,7-тетрагідро-2-індолу, тетрагідротієнілу, аміномасляна кислота, 2-аміноізомасляна кислота, тетразолу, тіадіазолу, тіазолу, тіоморфоліну, 2,4-діаміномасляна кислота, 2,3-діамінопропіонова тіофену, триазолону або триазолу, кислота, 1,2,3,4-тетрагідроізохінолін-1-карбонова де гетероарил незаміщений або однократно, кислота, 1,2,3,4-тетрагідроізохінолін-3-карбонова двократно або трикратно заміщений однаковими кислота, 2-амінопімелінова кислота, 3-(2або різними залишками з ряду що включає -С(О)тієніл)аланін, 3-(3-тієніл)аланін, саркозин, (С1-С4)-алкіл, -С(О), =О, -NН-(С1-С4)-алкіл, -NНпіпеколінова кислота, 2-аміногептанова кислота, ((С1-С4)-алкіл)2, -(С1-С8)-алкіл, -(С1-С8)-алкоксил, гідроксилізин, N-метилізолейцин, 6-N-метиллізин, 9 80837 10 галоген, нітрогрупа, аміногрупа, трифторметил, 4. -C(O)-R11, або гідроксил, -CF3, гідроксі-(С1-С4)-алкіл, як 5. -C(O)-N(R11)2;i гідроксиметил або 1-гідроксіетил або 2відповідно, інші замісники R1, R2, R3 і R4, гідроксіетил, метилендіоксигрупа, незалежно один від одного, означають етилендіоксигрупа, форміл, ацетил, ціаногрупа, 1. атом водню, гідроксикарбоніл, амінокарбоніл, -(С1-С4)2. галоген, алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, бензил, 3. -(С1-С4)-алкіл, бензилоксигрупа, -S(O)x-R11, де х означає ціле 4. гетероарил з 5-14 членами циклу, де число нуль, 1 або 2, -О-(С1-С4)-алкіл, -С(О)-ОН, гетероарил має вищезгадане значення, С(О)-О-(С1-С4)-алкіл, -NН-С(О)-(С1-С4)-алкіл або 5. -(С1-С6)-алкіл, тетразоліл; 6. -NO2, 5. -(С1-С6)-алкіл, де алкіл є лінійним або 7. -CN, розгалуженим і незаміщений або однократно, 8. -О-(С0-С4)-алкіларил, де арил має двократно або трикратно, незалежно один від вищезгадане значення, одного, заміщений за допомогою 9. -О-(С1-С4)-алкіл, 5.1 арилу, де арил має вищезгадане значення, 10. -OR11, 5.2 гетероарилу з 5-14 членами циклу, де 11. -N(R11)2, гетероарил має вищезгадане значення, 12. -S(O)x-R11, де x означає ціле число нуль, 1 5.3 -(С3-С6)-циклоалкілу, або 2, або 5.4 -O-R11, 13. -CF3; 5.5 =О, R5 означає 5.6 галогену, 1. атом водню, 5.7 -CN, 2. -ОН, або 5.8 -CF3, 3. =О; і 5.9 -S(O)x-R11, де x означає ціле число нуль, 1 R6 означає або 2, 1. арил, вибираний з групи, що складається з 5.10 -C(O)-O-R11, нафтилу, 1-нафтилу, 2-нафтилу, фенілу, 5.11 -C(O)-N(R11)2, біфенілілу, 2-біфенілілу, 3-біфенілілу, 45.12 -C(O)-R11, біфенілілу, антрилу або флуоренілу, 5.13 -N(R11)2, де арил незаміщений або однократно, 5.14 залишку формули двократно або трикратно заміщений однаковими або різними залишками з ряду: -С(О)-(С1-С4)-алкіл, -С(О), =О, -NH-(С1-С4)-алкіл, -NH-((С1-С4)-алкіл)2 ,(С1-С8)-алкіл, -(С1-С8)-алкокси, галоген, нітрогрупа, аміногрупа, трифторметил, гідроксил, -CF3, гідроксі-(С1-С4)-алкіл, як гідроксиметил або 1гідроксіетил або 2-гідроксіетил, метилендіоксигрупа, етилендіоксигрупа, форміл, або ацетил, ціаногрупа, гідроксикарбоніл, 5.16 залишку формули , амінокарбоніл, -(С1-С4)-алкоксикарбоніл, феніл, де R11 означає феноксигрупа, бензил, бензилоксигрупа, -S(O)xa) атом водню; R11, де x означає ціле число нуль, 1 або 2, -О-(С1b) (С1-С6)-алкіл, де алкіл незаміщений або С4)-алкіл, -С(О)-ОН, -С(О)-О-(С1-С4)-алкіл, -NНодно-, дво- або трикратно заміщений за С(О)-(С1-С4)-алкіл або тетразоліл; або допомогою 2. гетероарил з 5-14 членами циклу, де 1. арилу, де арил має вищезгадане значення, гетероарил має вищезгадане значення і де 2. гетероарилу з 5-14 членами циклу, де гетероарил незаміщений або однократно, гетероарил має вищезгадане значення, двократно або трикратно заміщений однаковими 3. галогену, або різними залишками з ряду: -С(О)-(С1-С4)-алкіл, 4. -N-(С1-С6)n-алкілу, де n означає ціле число -С(О), =О, -NH-(С1-С4)-алкіл, -NН-((С1-С4)-алкіл)2, нуль, 1 або 2 і алкіл незаміщений або одно-, дво(С1-С8)-алкіл, -(С1-С8)-алкокси, галоген, нітрогрупа, або трикратно, незалежно один від одного, аміногрупа, трифторметил, гідроксил, -CF3, заміщений галогеном або групою -С(О)-ОН, гідроксі-(С1-С4)-алкіл, як гідроксиметил або 15. -О-(С1-С6)-алкілу або гідроксіетил або 2-гідроксіетил, метил 6. -С(О)-ОН; ендіоксигрупа, етилендіоксигрупа, форміл, ацетил, c) арил, де арил має вищезгадане значення; ціаногрупа, гідроксикарбоніл, амінокарбоніл, -(С1d) гетероарил з 5-14 членами циклу, де С4)-алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, бензил, гетероарил має вищезгадане значення; і у випадку бензилоксигрупа, -S(O)x-R11, де x означає ціле (R11)2 залишок R11, незалежно один від одного, число нуль, 1 або 2, -О-(С1-С4)-алкіл, -С(О)-ОН, має значення а)-d); С(О)-О-(С1-С4)-алкіл, -NН-С(О)-(С1-С4)-алкіл або Ζ означає тетразоліл. 1. арил, де арил має вищезгадане значення, Винахід, далі, відноситься до застосування 2. гетероарил з 5-14 членами циклу, де сполуки формули (І), що пропонується згідно з гетероарил має вищезгадане значення, винаходом, причому 3. -(С1-С6)-алкіл, де алкіл є лінійним або Ε означає атом азоту або залишок -C(R19)-, розгалуженим і однократно або двократно де R19 означає атом водню; заміщений фенілом або групою -ОН, 11 80837 12 один із замісників R1, R2, R3 і R4 означає 4. -C(O)-N(R15)-R16, де R15 і R16, незалежно залишок формули (II), де R8 означає атом водню; один від одного, означають атом водню або -(С1R9 означає С4)-алкіл; 1. характерний залишок амінокислоти з групи, R11 означає що складається з гістидину, серину, триптофану, 1. -(С1-С4)-алкіл, треоніну, цистеїну, метіоніну, аспарагіну, 2. R13 або глутаміну, лізину, аргініну, глутамінової кислоти і 3. -N(R13)2, де R13, незалежно один від одного, аспарагінової кислоти; або означають 2. -(С1-С6)-алкіл, де алкіл є лінійним або a) атом водню, розгалуженим і незаміщений або однократно або b) -(С1-С6)-алкіл, двократно заміщений за допомогою c) -(С1-С4)-алкіл-О-(С1-С4)-алкіл, a) фенілу, d) -(С1-С6)-алкіл-N(R15)2, де R15 має b) залишку з групи, що складається з азепіну, вищезгадане значення, або азетидину, бензімідазолу, бензотіазолу, e) -(С0-С4)-алкіл, однократно або двократно бензотіофену, бензоксазолу, діазепіну, імідазолу, заміщений імідазолілом, морфолінілом або індолу, ізотіазолу, ізоксазолу, морфоліну, 1,3,4фенілом; або оксадіазолу, 5-оксо-4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазолу, R8 і R9 разом з атомом азоту і атомом оксазолу, піперидину, піразину, піразолу, піридину, вуглецю, з яким вони в кожному випадку пов'язані, піримідину, піролу, піролідину, піроліну, тіазолу, утворюють цикл формули (llа) з групи, що тіоморфоліну, тіофену або триазолу, складається з піролу, піроліну, піролідину, c) -NH(R11), піридину, піперидину, піперилену, піридазину, d) -C(O)-R12, де піримідину, піразину, піперазину, піразолу, R12 означає нафтил, феніл, морфолініл або імідазолу, піразоліну, імідазоліну, піразолідину, піримідиніл, імідазолідину, оксазолу, ізоксазолу, 2e)-O-R11, ізоксазолідину, ізоксазолідину, морфоліну, f) -N(R12)-фeнiлy, де R12 має вищезгадане ізотіазолу, тіазолу, тетразолу, 1,2,3,5значення, оксатіадіазол-2-оксиду, оксадіазолону, g) -S(O)x-R12, де x означає нуль, 1 або 2, і ізоксазолону, триазолону, оксадіазолідиндіону, h) -CN, або триазолу, які заміщені за допомогою F, CN, CF3 або СОО-(С1-С4)-алкілу; 3-гідроксипіро-2,4-діону, і) -(С3-С6)-циклоалкілу, 5-оксо-1,2,4-тіадіазолу, 1,3,4-оксадіазолу, і вказані вище в a), b), d) і і) залишки і R12 ізотіазолідину, тіоморфоліну, індазолу, тіадіазолу, незаміщені або однократно або двократно бензімідазолу, хіноліну, триазолу, фталазину, заміщені за допомогою -ОН, -(С1-С4)-алкілу, -CF3, хіназоліну, хіноксаліну, пурину, птеридину, індолу, галогену, -О-(С1-С4)-алкілу, ,-СООН, -С(О)-О-(С1тетрагідрохіноліну, тетрагідроізохіноліну і С4)-алкілу, -NH2 або -NН-С(О)-(С1-С4)-алкілу; ізохіноліну; або Ζ означає R9 і Ζ разом з атомами вуглецю, з якими вони 1. гетероарильний залишок з групи, що в кожному випадку пов'язані, утворюють цикл складається з 3-гідроксипіро-2,4-діону, імідазолу, формули (llс) з групи, що складається з піролу, імідазолідину, імідазоліну, індазолу, ізотіазолу, піроліну, піролідину, піридину, піперидину, ізотіазолідину, ізоксазолу, ізоксазолідину, 2піперилену, піридазину, піримідину, піразину, ізоксазолідину, ізоксазолону, морфоліну, 1,3,4піперазину, піразолу, імідазолу, піразоліну, оксадіазолу, оксадіазолідиндіону, оксадіазолон, імідазоліну, піразолідину, імідазолідину, оксазолу, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2-оксиду, оксазолу, 5-оксоізоксазолу, 2-ізоксазолідину, ізоксазолідину, 4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазолу, 5-оксо-1,2,4морфоліну, ізотіазолу, тіазолу, ізотіазолідину, тіадіазолу, піперазину, піразину, піразолу, тіоморфоліну, індазолу, тіадіазолу, бензімідазолу, піразолідину, піразоліну, піридазину, піримідину, хіноліну, триазолу, фталазину, хіназоліну, тетразолу, тіадіазолу, тіазолу, тіоморфоліну, хіноксаліну, пурину, птеридину, індолу, триазолу або триазолону, і тетрагідрохіноліну, тетрагідроізохіноліну, гетероарильний залишок незаміщений або ізохіноліну, тетразолу, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2однократно, двократно або трикратно, незалежно оксиду, оксадіазолону, ізоксазолону, триазолону, один від одного, заміщений за допомогою оксадіазолідиндіону, триазолу, які заміщені за 1.1. -C(O)-R15, де R15 означає атом водню або допомогою F, CN, CF3 або СОО-(С1-С4)-алкілу; 3(С1-С4)-алкіл, гідроксипіро-2,4-діону, 1,3,4-оксадіазолу і 5-оксо1.2 -(С1-С4)-алкілу, 1,2,4-тіадіазолу; і 1.3 -O-R15, де R15 означає атом водню або відповідно, інші замісники R1, R2, R3 і R4, (С1-С4)-алкіл, 15 16 15 16 незалежно один від одного, означають 1.4 -N(R )-R , де R і R , незалежно один 1. атом водню, від одного, означають атом водню або -(С1-С4)2. галоген, алкіл, 3. -(С1-С4)-алкіл, 1.5 галогену, 4. -CN, 1.6 кето-залишку, 5. -NO2, 2. -C(O)-R15, де R15 означає атом водню або 6. -О-(С0-С4)-алкілфетл, (С1-С4)-алкіл, 7. -О-(С1-С4)-алкіл, 3. -C(O)-OR15, де R15 означає атом водню або 8. -N-(С0-С4)-алкілфеніл, (С1-С4)-алкіл, або 9. -N-(С1-С4)-алкіл або 13 80837 14 або однократно, двократно або трикратно 10. -CF3; заміщені однаковими або різними залишками з R5 означає ряду: -С(О)-(С1-С4)-алкіл, -С(О), =О, -NН-(С1-С4)1. атом водню, алкіл, -NH-((С1-С4)-алкіл)2, -(С1-С8)-алкіл, -(С1-С8)2. -ОН або алкокси, галоген, нітрогрупа, аміногрупа, 3. =О; і R6 означає трифторметил, гідроксил, -CF3, гідроксі-(С1-С4)1. феніл, одно- або двократно заміщений за алісіл, як гідроксиметил або 1-гідроксіетил або 2допомогою. гідроксіетил, метилендіоксигрупа, 1.1 -CN, етилендіоксигрупа, форміл, ацетил, ціаногрупа, 1.2 -NO2, гідроксикарбоніл, амінокарбоніл, -(С1-С4)1.3 -О-(С1-С4)-алкілу, або алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, бензил, 1.4 -NH2,a6o бензилоксигрупа, -S(O)x-R11, де x означає ціле 2. піридин або піримідин, причому піридин або число нуль, 1 або 2, -О-(С1-С4)-алкіл, -С(О)-ОН, піримідин незаміщений або однократно, двократно С(О)-О-(С1-С4)-алкіл, -NH-C(O)-( С1-С4), -алкіл або або трикратно заміщений однаковими або різними тетразоліл. залишками з ряду: -С(О)-(С1-С4)-алкіл, -С(О), =О, Винахід, далі, відноситься до застосування NН-(С1-С4)-алкіл, -NH-((С1-С4)-алкіл)2, -(С1-С8)сполуки формули, що пропонується згідно з алкіл, -(С1-С8)-алкокси, галоген, нітрогрупа, винаходом (Іа): аміногрупа, трифторметил, гідроксил, -CF3, гідроксі-(С1-С4)-алкіл, як гідроксиметил або 1гідроксіетил або 2-гідроксіетил, метилендіоксигрупа, етилендіоксигрупа, форміл, ацетил, ціаногрупа, гідроксикарбоніл, амінокарбоніл, -(С1-С4)-алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, бензил, бензилоксигрупа, -S(O)xR11, де x означає ціле число нуль, 1 або 2, -О-(С1С4)-алкіл, -С(О)-ОН, -С(О)-О-(С1-С4)-алкіл, -NНС(О)-(С1-С4)-алкіл або тетразоліл. Винахід відноситься, далі, до застосування сполуки формули (І), що пропонується згідно з винаходом, причому Ε означає залишок -C(R19)-, де і/або стереоізомерної форми сполуки формули R19 означає атом водню або R9, (Іа) і/або фізіологічно прийнятної солі сполуки один із замісників R1, R2, R3 і R4 означає формули (Іа), причому Ε і Μ є однаковими або різними і, незалежно залишок формули (II), де D означає -С(О)-; один від одного, означають атом азоту або СН; R8 означає атом водню; R21 і R31 є однаковими або різними і, Ζ означає 5-оксо-4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазол, незалежно один від одного, означають -С(О)-ОН або -C(O)-NH2 ; 1. атом водню, R9 означає 2. галоген, 1. -(С1-С4)-алкіл, де алкіл є лінійним або 3. -(С1-С4)-алкіл, розгалуженим і однократно або двократно, 4. -CN, незалежно один від одного, заміщений за 5. -CF3, допомогою 6. -OR15, де R15 означає атом водню або -(С11.1 -S(O)-R11, причому R11 має нижчевказане С4)-алкіл, значення, 7. -N(R15)-R16, де R15 і R16, незалежно один від 1.2 -N(R11)2, причому R11 має нижчевказане одного, означають атом водню або -(С1-С4)-алкіл, значення, або 8. -C(O)-R15, де R15 означає атом водню або 1.3 піролу, або (С1-С4)-алкіл, або 2. характерний залишок амінокислоти з групи, 9. -S(O)x-R15, де x означає ціле число нуль, 1 або 2 і R15 означає атом водню або -(С1-С4)-алкіл; що складається з гістидину, триптофану, серину, треоніну, цистеїну, метіоніну, аспарагіну, R22 означає глутаміну, лізину, аргініну, глутамінової кислоти і 1. гетероарильний залишок з групи, що аспарагінової кислоти; складається з 3-гідроксипіро-2,4-діону, імідазолу, R11 означає імідазолідину, імідазоліну, індазолу, ізотіазолу, a) атом, водню, ізотіазолідину, ізоксазолу, 2-ізоксазолідину, b) -(С1-С6)-алкіл, де алкіл незаміщений або від ізоксазолідину, ізоксазолону, морфоліну, оксазолу, однократно до трикратно, незалежно один від 1,3,4-оксадіазолу, оксадіазолідиндіону, одного, заміщений галогеном, або оксадіазолону, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2-оксиду, 5c) феніл, де феніл незаміщений або від оксо-4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазолу, 5-оксо-1,2,4однократно до трикратно, незалежно один від тіадіазолу, піперазину, піразину, піразолу, одного, заміщений галогеном або -(С1-С4)-алкілом; піразоліну, піразолідину, піридазину, піримідину, відповідно, інші замісники R1, R2, R3 і R4 тетразолу, тіадіазолу, тіазолу, тіоморфоліну, означають атом водню; триазолу або триазолону, і R5 означає атом водню; і гетероарильний залишок незаміщений або R6 означає феніл, піридин або піримідин, однократно, двократно або трикратно, незалежно причому феніл, піридин або піримідин незаміщені один від одного, заміщений за допомогою 15 80837 16 [1,3,4]оксадіазолу, тетразолу, тіадіазолу, тіазолу, 1.1. -C(O)-R15, де R15 означає атом водню або триазолу або триазолону, і (С1-С4)-алкіл, гетероарильний залишок незаміщений або 1.2 -(С1-С4)-алкілу, однократно, двократно або трикратно, незалежно 1.3 -O-R15, де R15 означає атом водню або один від одного, заміщений за допомогою 1.1. (С1-С4)-алкіл, кето-залишку, 1.4 -N(R15)-R16, де R15 і R16, незалежно один 1.2 галогену, від одного, означають атом водню або -(С1-С4)1.3 -(С1-С2)-алкілу, або алкіл, 2. -C(O)-N(R17)-R18, де R17 і R18, незалежно 1.5 галогену, або один від одного, означають атом водню, -(С1-С2)1.6 кето-залишку, алкіл-ОН, -О-(С1-С2)-алкіл або -(С1-С4)-алкіл; 2. -C(O)-R15, де R15 означає атом водню або R23 означає атом водню, метил або етил; (С1-С4)-алкіл, 15 15 R24 означає 3. -C(O)-OR , де R означає атом водню або 1. гетероарильний залишок з групи (С1-С4)-алкіл, або ненасичених, частково насичених або повністю 4. -C(O)-N(R17)-R18, де R17 і R18, незалежно насичених циклів, які виробляються від піридину, один від одного, означають атом водню, -(С1-С4)піразину, піримідину, піридазину, піролу, фурану, алкіл-ОН, -О-(С1-С4)-алкіл або -(С1-С4)-алкіл; тіофену, імідазолу, піразолу, оксазолу, ізоксазолу, R23 означає атом водню або (С1-С4)-алкіл; R24 тіазолу, триазолу або ізотіазолу, причому означає гетероарильний залишок незаміщений або 1. гетероарильний залишок з групи, що однократно, двократно або трикратно, незалежно складається з піролу, фурану, тіофену, імідазолу, один від одного, заміщений за допомогою -(С1-С4)піразолу, оксазолу, ізоксазолу, тіазолу, ізотіазолу, алкілу, -(С1-С4)-алкокси, F, СІ, J, Br, нітрогрупи, тетразолу, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2-оксиду, аміногрупи, трифторметилу, гідроксилу, гідроксітриазолону, оксадіазолону, ізоксазолону, (С1-С4)-алкілу, метилендіоксигрупи, оксадіазолідиндіону, триазолу, 3-гідроксипіро-2,4етилендіоксигрупи, формілу, ацетилу, ціаногрупи, діону, 5-оксо-1,2,4-тіадіазолу, піридину, піразину, гідроксикарбонілу, амінокарбонілу або -(С1-С4)піримідину, індолу, ізоіндолу, індазолу, фталазину, алкоксикарбонілу, або хіноліну, ізохіноліну, хіноксаліну, хіназоліну, 2. феніл, і феніл незаміщений або однократно, циноліну, b-карболіну і бензанельованих, двократно або трикратно, незалежно один від циклопентаабо циклогексапохідних цих одного, заміщений за допомогою F, СІ, J, Br, CF3, гетероарильних залишків, причому ОМ, -(С1-С4)-алкілу або -(С1-С4)-алкоксилу. гетероарильний залишок незаміщений або Винахід відноситься, далі, до запропонованого однократно, двократно або трикратно, незалежно згідно з винаходом застосування сполуки [(S)-2один від одного, заміщений за допомогою -(С1-С5)дифеніламіно-1-(5-оксо-4,5-дигідроалкілу, -(С1-С5)-алкоксилу, галогену, нітрогрупи, [1,3,4]оксадіазол-2-іл)етил]аміду; 2-(2аміногрупи, трифторметилу, гідроксилу, гідроксіметиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5-карбонової (С1-С4)-алкілу, метилендіоксигрупи, кислоти або ((S)-і-карбамоїл-2етилендіоксигрупи, формілу, ацетилу, ціаногрупи, дифеніламіноетил)аміду; 2-(2гідроксикарбонілу, амінокарбонілу або -(С1-С4)метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-бензімідазол-5алкоксикарбонілу, або карбонової кислоти. 2. арильний залишок з групи, що складається з Під поняттям "галоген" розуміють фтор, хлор, фенілу, нафтилу, 1-нафтилу, 2-нафтилу, бром або йод. Під поняттями "-(С1-С8)-алкіл", "-(С1біфенілілу, 2-біфенілілу, 3-біфенілілу і 4С6)-алкіл" або "-(С1-С4)-алкіл" розуміють біфенілілу, антрилу або флуоренілу, і арильний вуглеводневі залишки, вуглецевий фрагмент яких залишок незаміщений або однократно, двократно є лінійним або розгалуженим і містить 1-8, 1-6, або трикратно, незалежно один від одного, відповідно, 1-4 атомів вуглецю, такі як метил, етил, заміщений за допомогою -(С1-С5)-алкілу, -(С1-С5)пропіл, бутил, трет-бутил, пентил, гексил, гептил алкокси, галогену, нітрогрупи, аміногрупи, або октил. Під поняттям "-(С0)-алкіл" розуміють трифторметилу, гідроксилу, гідроксі-(С1-С4)-алкілу, ковалентний зв'язок. Циклічні алкільні залишки метилендіоксигрупи, етилендіоксигрупи, формілу, являють собою, наприклад, 3-6-членні моноцикли, ацетилу, ціаногрупи, гідроксикарбонілу, такі як циклопропіл, циклобутил, циклопентил або амінокарбонілу або -(С1-С4)-алкоксикарбонілу. циклогексил. Винахід відноситься, далі, до застосування Під поняттям "R8 і R9 разом з атомом азоту і сполуки формули (Іа), що пропонується згідно з атомом вуглецю, з яким вони, в кожному випадку, винаходом, причому пов'язані, утворюють гетероцикл формули (IIа)" Ε і Μ є однаковими або різними і, незалежно розуміють залишки, які утворюються від піролу, один від одного, означають атом азоту або СН; піроліну, піролідину, імідазолу, піразолу, оксазолу, R21 і R31 є однаковими або різними і, ізоксазолу, тетразолу, ізоксазоліну, ізоксазолідину, незалежно один від одного, мають значення, як морфоліну, тіазолу, ізотіазолу, ізотіазоліну, вказане вище в пп.1-9; пурину, ізотіазолідину, тіоморфоліну, піридину, R22 означає піперидину, піразину, піперазину, піримідину, 1. гетероарильний залишок з групи, що піридазину, індолу, ізоіндолу, індазолу, складається з імідазолу, ізотіазолу, ізоксазолу, 2бензімідазолу, фталазину, хіноліну, ізохіноліну, ізоксазолідину, ізоксазолідину, ізоксазолону, 1,3,4хіноксаліну, хіназоліну, циноліну, птеридину, оксадіазолу, оксадіазолідиндіону, 1,2,3,5триазолону, тетразолу, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2оксадіазолону, оксазолу, 5-оксо-4,5-дигідро 17 80837 18 залишками, особливо -(С1-С4)-алкільними оксиду, оксадіазолону, ізоксазолону, залишками, бензильні залишки і нафтилметильні оксадіазолідиндіону, триазолу, які заміщені за залишки, наприклад, 2-, 3- і 4- метилбензил, 4допомогою F, -CN, -CF3 або -С(О)-О-(С1-С4)-алкілу; ізобутилбензил, 4-трет-бутилбензил, 43-гідроксипіро-2,4-діону, 5-оксо-1,2,4-тіадіазолу, октилбензил, 3,5диметилбензил, імідазолідину, b-карболіну і бензанельованих пентаметилбензил, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- і 8-метил-1похідних цих гетероциклів. нафтилметил, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- і 8-метил-2Під поняттям "R9 і Ζ разом з атомом вуглецю, з нафтилметил; заміщені в арильній частині одним яким вони, в кожному випадку, пов'язані, або декількома -(С1-С8)-алкоксильними утворюють гетероцикл формули (IIс)" розуміють залишками, особливо -(С1-С4)-алкоксильними залишки, які виробляються від групи, що залишками, бензильні залишки і нафтилметильні складається з піролу, піроліну, піролідину, залишки, наприклад, 4-метоксибензил, 4піридину, піперидину, піперилену, піридазину, неопентилоксибензил, 3,5-диметоксибензил, 3,4піримідину, піразину, піперазину, піразолу, метилендіоксибензил, 2,3,4-триметоксибензил, імідазолу, піразоліну, імідазоліну, піразолідину, нітробензильні залишки, наприклад, 2-, 3- і 4імідазолідину, оксазолу, ізоксазолу, 2нітробензил, галогенбензильні залишки, ізоксазолідину, ізоксазолідину, морфоліну, наприклад, 2-, 3- і 4-хлорбензил і 2-, 3- і 4ізотіазолу, тіазолу, ізотіазолідину, тіоморфоліну, фторбензил, 3,4-дихлорбензил, пентафторбензил, індазолу, тіадіазолу, бензімідазолу, хіноліну, трифторметилбензильні залишки, наприклад, 3- і триазолу, фталазину, хіназоліну, хіноксаліну, 4-трифторметилбензил або 3,5пурину, птеридину, індолу, тетрагідрохіноліну, біс(трифторметил)бензил. тетрагідроізохіноліну, ізохіноліну, тетразолу, У монозаміщених фенільних залишках 1,2,3,5-оксатіадіазол-2-оксиду, оксадіазолону, замісник може знаходитись у положенні 2, ізоксазолону, триазолону, 3-гідроксипіро-2,4-діону, положенні 3 або положенні 4. Двократно 1,3,4-оксадіазолу і 5-оксо-1,2,4-тіадіазолу, заміщений феніл може бути заміщений у оксадіазолідиндіону, триазолу, які незаміщені або положеннях 2,3, положеннях 2,4, положеннях 2,5, заміщені за допомогою F, CN, CF3 або -С(О)-О-(С1положеннях 2,6, положеннях 3,4 або положеннях С4)-алкілу. 3,5. У трикратно заміщених фенільних залишках Під поняттям "гетероарильний залишок з групи замісники можуть знаходитись у положеннях 2,3,4, ненасичених, частково насичених або повністю положеннях 2,3,5, положеннях 2,4,5, положеннях насичених циклів, які проводяться від піридин, 2,4,6, положеннях 2,3,6 або положеннях 3,4,5. піразину, піримідину, піридазину, піролу, фурану, Пояснення до арильних залишків мають тіофену, імідазолу, піразолу, оксазолу, ізоксазолу, значення, відповідно, для двовалентних тіазолу, ізотіазолу" розуміють, наприклад, сполуки, ариленових залишків, наприклад, для такі як піперазин, піразолін, імідазолін, феніленових залишків, які, наприклад, можуть піразолідин, імідазолідин, тетрагідропіридин, бути у вигляді 1,4-фенілену або у вигляді 1,3ізоксазолін, ізоксазолідин, морфолін, ізотіазолін, фенілену. Фенілен-(С1-С6)-алкілом є особливо ізотіазолідин, тетрагідро-1,4-тіазин або піперидин. феніленметил (-С6Н4 -СН2-) і феніленетил, (С1-С6)Під поняттям "арил" розуміють ароматичні алкіленфеніл, особливо метиленфеніл (-СН2 -С6H4вуглецеві залишки з 6-14 атомами вуглецю в циклі. ). Фенілен-(С2-С6)-алкенілом є особливо -(С6-С14)-арильними залишками є, наприклад, феніленетенил і феніленпропеніл. феніл, нафтил, наприклад, 1-нафтил, 2-нафтил, Поняття "гетероарил з 5-14 членами циклу" біфеніліл, наприклад, 2-біфеніліл, 3-біфеніліл і 4означає залишок моноциклічної або поліциклічної біфеніліл, антрил або флуореніл. Біфенілільні ароматичної системи з 5-14 членами циклу, яка залишки, нафтильні залишки і. особливо фенільні містить 1, 2, 3, 4 або 5 гетероатомів як члени залишки являють собою переважні арильні циклу. Прикладами гетероатомів є Ν, Ο і S. Якщо залишки. Арильні залишки, особливо фенільні містяться декілька гетероатомів, то вони можуть залишки, однократно або багато разів, переважно бути однаковими або різними. Гетероарильні однократно, двократно або трикратно, можуть залишки також однократно або багато разів, бути заміщені однаковими або різними залишками, переважно однократно, двократно або трикратно, переважно залишками з ряду: - (С1-С8)-алкіл, можуть бути заміщені однаковими або різними особливо -(С1-С4)-алкіл, -(С1-С8)-алкокси, особливо залишками з ряду: -(С1-С8)-алкіл, особливо -(С1-(С1-С4)-алкокси, галоген, нітрогрупа, аміногрупа, С4)-алкіл, -(С1-С6)-алкокси, особливо -(С1-С4)трифторметил, гідрокси, гідроксі-(С1-С4)-алкіл, як алкокси, галоген, нітрогрупа, -N(R10)2, гідроксиметил або 1-гідроксіетил або 2трифторметил, гідрокси, гідроксі-(С1-С4)-алкіл, як гідроксіетил, метилендіоксигрупа, гідроксиметил або 1-гідроксіетил або 2етилендіоксигрупа, форміл, ацетил, ціаногрупа, гідроксіетил, метилендіоксигрупа, форміл, ацетил, гідроксикарбоніл, амінокарбоніл, -(С1-С4)ціаногрупа, гідроксикарбоніл, амінокарбоніл, -(С1алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, бензил, С4)-алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, бензил, бензилоксигрупа, тетразоліл. бензилоксигрупа, тетразоліл. Переважно Відповідне відноситься, наприклад, до гетероарил з 5-14 членами циклу означає залишків, таких як арилалкіл або арилкарбоніл. моноциклічний або біциклічний ароматичний Арилалкільними залишками особливо є бензил, а залишок, який містить 1, 2, 3 або 4, особливо 1, 2 також 1- і 2-нафтилметил, 2-, 3- і 4-біфенілілметил або 3, однакових або різних гетероатомів з ряду: і 9-флуоренілметил. Заміщеними арилалкільними N, О і S, і який може бути заміщений 1, 2, 3 або 4, залишками є, наприклад, заміщені в арильній особливо 1-3, однаковими або різними частині одним або декількома -(С1-С8)-алкільними 19 80837 20 циклогепта[b]-5-піроліл, 2-, 3- або 4-хіноліл, 1-, 3замісниками з ряду: -(С1-С6)-алкіл, -(С1-С6)або 4-ізохіноліл, 1-оксо-1,2-дигідро-3-ізохіноліл, 2алкокси, фтор, хлор, нітрогрупа, -N(R10)2, хіноксалініл, 2-бензофураніл, 2-бензотієніл, 2трифторметил, гідрокси, гідрокс-(С1-С4)-алкіл, -(С1бензоксазоліл або бензотіазоліл або С4)-алкоксикарбоніл, феніл, феноксигрупа, дигідропіридиніл, піролідиніл, наприклад, 2- або 3бензилоксигрупа і бензил. Особливо переважно (N-метилпіролідиніл), піперазиніл, морфолініл, гетероарил означає моноциклічний або тіоморфолініл, тетрагідротієніл або біциклічний ароматичний залишок з 5-10 членами бензодіоксоланіл. циклу, особливо від 5-членного до 6-членного моноциклічний ароматичний залишок, який містить Загальна структурна формула a-амінокислот 1, 2 або 3, особливо 1 або 2, однакових або різних являє собою наступну: гетероатомів з ряду: Ν, Ο і S, і може бути заміщений 1 або 2 однаковими або різними замісниками з.ряду: -(С1-С4)-алкіл, галоген, гідрокси, -N(R10)2, -(С1-С4)-алкокси, феніл, феноксигрупа, бензилоксигрупа і бензил. Поняття "гетероцикл з 5-12 членами циклу" a-Амінокислоти розрізнюються між собою означає моноциклічний або біциклічний, від 5залишком R, який в рамках даної заявки членного до 12-членного гетероцикл, який позначають як "характерний залишок" частково насичений або повністю насичений. амінокислоти. У випадку, коли R9 означає Прикладами гетероатомів є N, О і S. Гетероцикл характерний залишок амінокислоти, переважно незаміщений або за одним або декількома використовують характерні залишки наступних αатомами вуглецю або одним або декількома амінокислот, що зустрічаються в природі: гліцин, гетероатомами заміщений однаковими або аланін, валін, лейцин, ізолейцин, фенілаланін, різними замісниками. Ці замісники вказані вище у тирозин, триптофан, серії, треонін, цистеїн, випадку гетероарильного залишку. Особливо метіонін, аспарагін, глутамін, лізин, гістидин, гетероцикл однократно або багато разів, аргінін, глутамінова кислота і аспарагінова наприклад, однократно, двократно, трикратно або кислота. Особливо переважні гістидин, триптофан, чотирикратно, за атомами вуглецю заміщений серії, треонін, цистеїн, метіонін, аспарагін, однаковими або різними залишками з ряду: -(С1глутамін, лізин, аргінін, глутамінова кислота і С8)-алкіл, наприклад, -(С1-С4)-алкіл, -(С1-С8)аспарагінова кислота. Далі, переважними алкокси, наприклад, -(С1-С4)-алкокси, як характерними залишками амінокислоти, які метоксигрупа, феніл-(С1-С4)-алкокси, наприклад, використовують як залишок R9, є залишки також бензилоксигрупа, гідрокси, оксогрупа, галоген, амінокислот, що не зустрічаються в природі, як 2нітрогрупа, аміногрупа або трифторметил, і/або він аміноадипінова кислота, 2-аміномасляна кислота, заміщений за атомом азоту (атомами азоту) в 2-аміноізомасляна кислота, 2,3-діамінопропіонова гетероциклі за допомогою -(С1-С8)-алкілу, кислота, 2,4-діаміномасляна кислота, 1,2,3,4наприклад, -(С1-С4)-алкілу, такого як метил або тетрагідроізохінолін-1-карбонова кислота, 1,2,3,4етил, за допомогою незаміщеного або заміщеного тетрагідроізохінолін-3-карбонова кислота, 2фенілу або феніл-(С1-С4)-алкілу, наприклад, амінопімелінова кислота, фенілгліцин, 3-(2бензилу. Азотовмісні гетероцикли також можуть тієніл)аланін, 3-(3-тієніл)аланін, 2-(2-тієніл)гліцин, знаходитись у вигляді N-оксидів або у вигляді 2-аміногептанова кислота, піпеколінова кислота, четвертинних солей. Прикладами понять гідроксилізин, саркозин, N-метилізолейцин, 6-N"гетероарил з 5-14 членами циклу" або метиллізин, N-метилвалін, норвалін, норлейцин, "гетероцикл з 5-12 членами циклу" є залишки, які орнітин, ало-ізолейцин, ало-треонін, аловиробляються від піролу, фурану, тіофену, гідроксилізин, 4-гідоксипролін, 3-гідроксипролін, 3імідазолу, піразолу, оксазолу, ізоксазолу, тіазолу, (2-нафтил)аланін, 3-(1-нафтил)аланін, ізотіазолу, тетразолу, 1,2,3,5-оксатіадіазол-2гомофенілаланін, гомоцистеїн, гомоцистеїнова оксиду, триазолону, оксадіазолону, ізоксазолону, кислота, гомотриптофан, цистеїнова кислота, 3-(2оксадіазолідиндіону, триазолу, які заміщені за піридил)аланін, 3-(3-піридил)аланін, 3-(4допомогою F, -CN, -CF3 або -С(О)-О-(С1-С4)-алкілу; піридил)аланін, 2-аміно-3-феніламінопропіонова 3-гідроксипіро-2,4-діону, 5-оксо-1,2,4-тіадіазолу, кислота, 2-аміно-3-феніламіноетилпропіонова піридину, піразину, піримідину, індолу, ізоіндолу, кислота, фосфінотрицин, 4-фторфенілаланін, 3індазолу, фталазину, хіноліну, ізохіноліну, фторфенілаланін, 2-фторфенілаланін, 4хіноксаліну, хіназоліну, циноліну, b-карболіну і хлорфенілаланін, 4-нітрофенілаланін, 4бензанельованих, циклопента-, циклогекса- або амінофенілаланін, циклогексилаланін, цитрулін, 5циклогептаанельованих похідних цих гетероциклів. фтортриптофан, 5-метокситриптофан, Особливо переважні залишки: 2- або 3-піроліл, метіонінсульфон, метіонінсульфоксид або -NHфенілпіроліл, як 4- або 5-феніл-2-піроліл, 2-фурил, NR11-C(O)N(R11)2, які, у випадку необхідності, 2-тієніл, 4-імідазоліл, метилімідазоліл, наприклад, також заміщені. У випадку амінокислот, що 1-метил-2-, -4- або -5-імідазоліл, 1,3-тіазол-2-іл, 2зустрічаються в природі, однак також амінокислот, піридил, 3-піридил, 4-піридил, 2-, 3- або 4-піридилщо не зустрічаються в природі, які містять N-оксид, 2-піразиніл, 2-, 4- або 5-піримідиніл, 2-, 3функціональну групу, таку як аміногрупа, гідрокси, або 5-індоліл, заміщений 2-індоліл, наприклад, 1карбокси, меркаптогрупа, гуанідил, імідазоліл або метил-, 5-метил-, 5-метокси-, 5-бензилокси-, 5індоліл, ця група також може бути захищена. хлор- або 4,5-диметил-2-індоліл, 1-бензил-2-або Як придатні захисні групи для цього 3-індоліл, 4,5,6,7-тетрагідро-2-індоліл, переважно використовують звичайні в хімії 21 80837 22 причому кожна разова лікарська форма як пептидів N-захисні групи, наприклад, захисні групи активний компонент містить певну дозу сполуки уретанового типу, бензилоксикарбоніл. (Z), третформули, що пропонується згідно з винаходом (І). бутилоксикарбоніл (Вос), 9-флуоренілоксикарбоніл У випадку твердих разових лікарських форм, таких (Fmoc), алілоксикарбоніл (Aloс) або тину аміду як таблетки, капсули, драже або супозиторії, ця кислоти, особливо форміл, ацетил або доза може складати аж до приблизно 1000мг, трифторацетил, а також алкільного типу, переважно приблизно від 50мг до 300мг, а у наприклад, бензил. У випадку імідазольного випадку розчинів для ін'єкції в ампульній формі аж залишку в R8 служить, наприклад, похідне до приблизно 300мг, переважно від приблизно сульфокислоти формули (IV), що 10мг до 100мг. Для лікування дорослих пацієнтів використовується для утворення сульфонаміду, як масою приблизно 70кг, в залежності від захисна група імідазольного азоту, яку можна ефективності сполуки згідно з формулою (І) або знову відщеплювати особливо у присутності формулою (Іа), показані добові дози від приблизно основ, як розчин гідроксиду натрію. 20мг до 1000мг біологічно активної речовини, Сполуки формул (І) і (Іа) одержують як переважно від приблизно 100мг до 500мг. При описується у [міжнародних заявках WO 01/00610 і відомих умовах, однак, можуть знаходити WO 01/30774]. Вихідні речовини для хімічних застосування також більш високі або більш низькі перетворень відомі і їх можна легко одержувати добові дози. Введення добової дози можна відомими з літератури способами. здійснювати як шляхом одноразового введення у На основі фармакологічних властивостей вигляді окремої разової лікарської форми або, інгібіторів ІkВ-кіназ, що використовуються згідно з однак, у вигляді декількох маленьких разових винаходом, які виявляються у випадку моделей, лікарських форм, так і шляхом багаторазового що використовуються, вказані інгібітори придатні введення розділених доз в певні інтервали часу. для застосування у випадку всіх форм болю, Кінцеві продукти, як правило, визначають особливо у випадку болів, при яких грають роль методами мас-спектрометрії (мас-спектрометрія з запальні процеси. іонізацією шляхом бомбардування швидкими Лікарські засоби, що пропонуються згідно з атомами (MC-FAB), мас-спектрометрія з іонізацією винаходом, можна застосовувати шляхом електронним розпиленням (MC-ESI)). перорального, інгаляційного, ректального або Температурні дані вказуються в градусах Цельсія транедермального введення або шляхом (°С), RT означає кімнатну температуру (від 22°С підшкірної, внутрішньосуглобної, до 26°С). Скорочення, що використовуються, або інтраперитонеальної або внутрішньовенної ін'єкції. пояснюються, або відповідають звичайно Переважним є пероральне або прийнятим позначенням. внутрішньосуглобне введення. Нижче винахід пояснюється детальніше за Винахід також відноситься до способу допомогою прикладів. Приклади одержання одержання лікарського засобу, який відрізняється А.1.) Синтез амінокислоти (метиловий ефір тим, що щонайменше одну сполуку формули (І) (S)-2-аміно-3-дифеніламінопропіонової кислоти або формули (Іа) разом з фармацевтично (5)) придатним і фізіологічно прийнятним носієм і, у випадку необхідності, іншими придатними біологічно активними речовинами, домішками і допоміжними засобами доводять до придатної форми застосування. Придатними твердими або галеновими готовими лікарськими формами є, наприклад, грануляти, порошки, драже, таблетки, (мікро)капсули, супозиторії, сиропи, соки, суспензії, емульсії, краплі або розчини для ін'єкції, а також препарати з пролонгованим вивільненням біологічно активної речовини, при одержанні яких знаходять застосування звичайні допоміжні засоби, такі як носії, порофори, зв'язувальні, засоби для покриттів, засоби, що сприяють N-Бензилоксикарбоніл-L-серин-b-лактон (2) набуханню, речовини або змазки, що додають 54,8г (0,209моль) трифенілфосфіну слизькість (таблеткам), смакові речовини, суспендують в 600мл ацетонітрилу і при підсолоджувальні засоби і речовини, що сприяють виключенні вологи охолоджують до температури розчиненню. Як допоміжні речовини, що часто від -35°С до -45°С. При цій температурі протягом використовуються, потрібно назвати карбонат 50 хвилин краплями додають 36,4г (0,209моль) магнію, діоксид титану, лактозу, маніт та інший діетилового ефіру азодикарбонової кислоти. цукор, тальк, молочний білок, желатин, крохмаль, Додатково перемішують протягом 15 хвилин при целюлозу і їх похідні, тваринні і рослинні олії, такі температурі -35°С. До цієї суміші потім повільно як риб'ячий жир, соняшникова олія, арахісова олія прикапують розчин 50г (0,209моль) Nі кунжутна олія, поліетиленгліколь і розчинники, бензилоксикарбоніл-L-серину (1) в 500мл такі як, наприклад, стерильна вода або одно- або ацетонітрилу, так, щоб температура не багатоатомні спирти, такі як гліцерин. піднімалась вище -35°С. Потім перемішують Фармацевтичні препарати переважно готують і протягом 12 годин при температурі 5°С. Для вводять у вигляді разових лікарських форм, припинення реакції з реакційного розчину при 23 80837 24 Сумарна формула C16H18N2O2; молекулярна зниженому тиску видаляють розчинник і сирий маса=270,32; МС (М+Н): 271,2; продукт очищають хроматографією середнього 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,45 (с, 3Н); 3,58 (м, 1Н); тиску на силікагелі 3,8 (м, 1Н); 3,95 (м, 1Н); 6,9 (м, 6Н); 7,3 (м, 4Н). (дихлорметан/ацетонітрил=25:1). Після видалення А.2.) Синтез основної гетероциклічної сполуки розчинника одержують 20,8г N(2-(2-метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5бензилоксикарбоніл-L-серин-b-лактону (2); вихід: карбонова кислота (10)) 45%; [див. також Org. Synth., 1991 (70), 1 і на наступних сторінках]; у вигляді тонких голок. Сумарна формула C11H11 NO4; молекулярна маса=221,2; МС (М+Н): 222,1; 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,30 (м, 1Н), 4,45 (м, 1Н), 5,10 (с, 2Н), 5,22 (м, 2Н), 7,45 (м, 5Н), 8,20 (д, J=9,8Гц, 1Н). (S)-2-Бензилоксикарбоніламіно-3дифеніламінопропіонова кислота (3) 5,0г (22,6ммоль) серинлактону (2) перемішують з 20г (118,2ммоль) дифеніламіну і протягом 2 годин нагрівають при температурі 100°С. Сирий продукт очищають хроматографією 1-Диметиламіно-4,4-диметоксипент-1-ен-3-он середнього тиску на силікагелі (8) (дихлорметан/метанол=9:1, потім етилацетат/н100г (0,76моль) 3,3-диметокси-2-бутанону гептан=4:1). Після видалення розчинника разом з 90,2г (0,76моль) Ν,Νодержують 3,65г (вихід: 42%) чистої (S)-2диметилформаміддиметилацеталю перемішують бензилоксикарбоніламіно-3протягом 48 годин при температурі 120°С. дифеніламінопропіонової кислоти (3). Метанол, що утворюється під час реакції, Сумарна формула C23H22N2O4; молекулярна безперервно видаляють з реакційного розчину маса=390,44; МС (М+Н): 391,2; 1 шляхом відганяння. При охолоджуванні розчину H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,85 (м, 1Н); 4,18 (м, 1Н); відбувається спонтанна кристалізація, яку 4,3 (м, 1Н); 4,9 (м, 2Н); 6,9 (м, 5Н); 7,25 (м, 10Н). доводять до повноти шляхом додавання невеликої Метиловий ефір (S)-2кількості гептану. Таким чином одержують 128,24г бензилоксикарбоніламіно-3сирого продукту 8 (вихід: 90%), який піддають дифеніламінопропіонової кислоти (4) взаємодії без подальшого очищення. До 75мл метанолу при температурі -5°С Сумарна формула C19H17 NO3; молекулярна прикапують 6,5мл (89,1ммоль) тіонілхлориду і маса=187,24; МС (М+Н): 188,2; перемішують протягом 15 хвилин. Потім додають 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 1,22 (с, 3Н); 2,80 (с, 3Н); розчин 3,6г (9,22ммоль) 23,10 (с, 9Н); 5,39 (д, J=15Гц, 1Н); 7,59 (д, J=15Гц, бензилоксикарбоніламіно-31Н). дифеніламінопропіонової кислоти (3) в 75мл [4-(1,1-Диметоксіетил)піримідин-2-іл]метиламін метанолу і перемішують протягом наступних 3 (9) годин при кімнатній температурі. Після 1,22г (53ммоль) натрію розчиняють в 100мл випаровування розчинника залишок обробляють абсолютного етанолу. До одержаного розчину при етилацетатом і екстрагують розчином карбонату перемішуванні додають 5,8г (53ммоль) натрію. Очищенням флеш-хроматографією (нметилгуанідингідрохлориду і 10г (53ммоль) 1гептан/етилацетат=7:3) одержують 2,76г (вихід: диметиламіно-4,4-диметоксипент-1-ен-3-ону (8) і 50%) метилового ефіру (S)-2кип'ятять протягом 4 годин. Для припинення бензилоксикарбоніламіно-3реакції етанол випаровують. Таким чином дифеніламінопропіонової кислоти (4). одержаний продукт 9 без подальшого очищення Сумарна формула C24H24N2O4; молекулярна використовують в наступній реакції. Вихід: 11,5г маса=404,47; МС (М+Н): 405,2; 1 (58ммоль; кількісний). H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,58 (с, ЗН); 3,95 (м, 1Н); Сумарна формула С9Н15 Н3О2; молекулярна 4,18 (м, 1Н); 4,4 (м, 1Н); 4,95 (м, 2Н); 6,9 (м, 6Н); маса=197,24; МС (М+Н): 198,2; 7,3 (м, 9Н); 7,85 (д, J=9,8 Гц, 1Н). 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 1,45 (с, 3Н); 2,78 (с, 3Н); Метиловий ефір (S)-2-аміно-33,10 (с, 6Н); 6,75 (д, J=3Гц, 1Н); 7,0-7,1 (ушир.с, дифеніламінопропіонової кислоти (5) 1Н); 8,30 (д, J=3Гц, 1Н). Для відщеплення захисної групи Ζ 2,7г 2-(2-Метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5(6,68ммоль) Z-захищеного похідного (4) карбонова кислота (10) розчиняють в 500мл метанолу і в атмосфері азоту До 150мл 50%-ї сірчаної кислоти при кімнатній додають 100 г каталізатора (10%-й Pd(OH)2-C). температурі і при перемішуванні додають 5г Потім інертний газ витісняють великим надлишком (25ммоль) [4-(1,1-диметоксіетил)піримідин-2водню і струшують протягом 2 годин в атмосфері іл]метиламіну (9) і 3,85г 4-гідразинбензойної водню. Для припинення реакції каталізатор кислоти і нагрівають протягом 4 годин при відфільтровують і фільтрат концентрують. температурі 130°С. Метанол, що утворюється під Одержують 1,65г (вихід: 91%) метилового ефіру час реакції, безперервно видаляють з реакційного (S)-2-аміно-3-дифеніламінопропіонової кислоти розчину шляхом відганяння. Після охолоджування (5). до температури 10°С реакційну суміш виливають 25 80837 26 на 200мл льоду і за допомогою концентрованого ((S)-2-Дифеніламін-1розчину гідроксиду натрію встановлюють значення гідразинкарбонілетил)амід 2-(2рН приблизно 5,5. Осад сульфату натрію, що метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5-карбонової утворюється при цьому, і суміш, що містить кислоти (12) продукт, відфільтровують і залишок на фільтрі 1,0г (1,92ммоль) 3-дифеніламіно-2-{[2-(2багато разів екстрагують метанолом. Об'єднані метиламінопіримідин-4-іл)-1H-індол-5-карбоніл]метанольні екстракти концентрують і продукт (S)-аміно}пропіонової кислоти (11) розчиняють в очищають флеш-хроматографією 10мл метанолу, змішують з 0,48г (9,95ммоль) (дихлорметан/метанол=9:1). Вихід: 0,76г (11%). гідразингідрату і перемішують протягом 15 годин Сумарна формула: C14H13N4O2; молекулярна при кімнатній температурі. Осад продукту (0,3г) маса=268,28; МС (М+Н): 405,2; відділяють шляхом відфільтровування від 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (с, 3Н), 6,90-7,10 маточного розчину. З концентрованого маточного (ушир.с, 1Н), 7,18 (д, J=3Гц, 1Н), 7,4 (с, 1Н), 7,58 розчину флеш-хроматографією на силікагелі (д, J=4,5Гц, 1Н), 7,80 (д, J=4,5Гц, 1Н), 8,30 (с, 1Н), (дихлорметан/метанол=19:1) виділяють подальшу 7,80 (д, J=4,5Гц, 1Н), 8,38 (д, J=3Гц, 1Н), 11,85 (с, кількість гідразону 12 (0,1г). Вихід: 0,4г (40%). 1Н), 12,40-12,60 (ушир.с, 1Н). Сумарна формула: C29H28 N8O2; молекулярна A.3.) Об'єднання структурних елементів і маса=520,6; МС (М+Н): 521,4; 1 синтез [(S)-2-дифеніламіно-1-(5-оксо-4,5-дигідроH-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (ушир.с, 3Н), 4,02[1,3,4]оксадіазол-2-іл)етил]аміду 2-(24,58 (м, 2Н), 4,4 (с, 2Н), 4,85 (кв, 1Н), 6,90-7,10 (м, метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5-карбонової 7Н), 7,18 (д, J=3Гц, 1Н), 7,20-7,45 (м, 5Н), 7,50 (д, кислоти (13) J=4,5Гц, 1Н), 7,62 (д, J=4,5Гц, 1Н), 7,99 (с, 1Н), 8,25 (д, J=3Гц, 1Н), 8,35 (ушир.с, 1Н), 9,30 (с, 1Н), 11,70 (с, 1Н). [(S)-2-дифеніламіно-1-(5-оксо-4,5-дигідро[1,3,4]оксадіазол-2-іл)етил]амід 2-(2метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5-карбонової кислоти (13) 200мг (0,384ммоль) ((S)-2-дифеніламін-1гідразинкарбонілетил)аміду 2-(2метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5-карбонової кислоти (12) суспендують в 20мл дихлорметану і при температурі 0°С і при перемішуванні прикапують 20%-й розчин фосгену в толуолі (0,398ммоль). Перемішують наступні 15 годин при кімнатній температурі і розчинник видаляють. Оксадіазолон 13 потім виділяють флеш3-Дифеніламіно-2-{[2-(2-метиламінопіримідинхроматографією на силікагелі 4-іл)-1H-індол-5-карбоніл]-(S)-аміноіпропіонова (дихлорметан/метанол=9:1). Вихід: 160мг (76%). кислота (11) Сумарна формула: С30Н36 N8О3; молекулярна 5,0г (18,64ммоль) 2-(2-металамінопіримідин-4маса=546,6; МС (М+Н): 547,3; 1 іл)-1Н-індол-5-карбонової кислоти (10) розчиняють H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (ушир.с, 3Н), 4,02в 1,2л диметилформаміду і послідовно змішують з 4,58 (м, 2Н), 4,85 (кв, 1Н), 6,90-7,10 (м, 7Н), 7,15 (д, 7,9г (24,08ммоль) TOTU і 7,9мл (46,45ммоль) J=3Гц, 1Н), 7,20-7,40 (м, 6Н), 7,52 (д, J=4,5Гц, 1Н), етилдіізопропіламіну. Перемішують протягом 20 7,68 (д, J=4,5Гц, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 8,92 (д, J=3Гц, хвилин при температурі 5°С і до розчину додають 1Н), 11,78 (с, 1Н), 12,15-12,40 (ушир.с, 1Н). 0,73г (3,28ммоль) (S)-2-бензилоксикарбоніламіноВ.) Приклад бензімідазолу. інгібітору ІkВ-кінази 3-дифеніламінопропіонової кислоти (5). Після B.1.) Синтез амінокислоти (метиловий ефір перемішування протягом 15 годин концентрують (S)-2-аміно-3-дифеніламінопропіонової кислоти при зниженому тиску, залишок обробляють н(5)) бутанолом і органічну фазу екстрагують за Здійснюють як описується в А.1. допомогою насиченого розчину гідрокарбонату В.2.) Синтез основної гетероциклічної сполуки натрію для відділення побічних продуктів. Після (2-(2-метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-бензімідазол-5висушування над сульфатом магнію і карбонова кислота (19)) концентрування органічної фази метиловий ефір вказаної в заголовку сполуки виділяють флешхроматографією на силікагелі (дихлорметан/метанол=19:1). Вихід: 4,3г (98%). Сумарна формула: С30Н28 N6О3; молекулярна маса=520,22; МС (М+Н): 521,3; 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (ушир.с, 3Н), 3,60 (с, 3Н), 4,19-4,58 (м, 2Н), 4,85 (кв, 1Н), 6,90-7,10 (м, 7Н), 7,18 (д, J=3Гц, 1Н), 7,25-7,40 (м, 5Н), 7,50 (д, J=4,5Гц, 1Н), 7,65 (д, J=4,5Гц, 1Н), 8,05 (с, 1Н), 8,35 (д, J=3Гц, 1Н), 8,70 (д, J=3,75Гц, 1Н), 11,85 (с, 1Н). 27 4-Диметиламін-1,1 80837 28 8,35 (с, 1Н), 8,55 (д, J=3Гц, 1Н), 8,70-9,05 (ушир.с, 1Н). (16) В.3.) Об'єднання структурних елементів і 300г (307мл, 2,54моль) синтез ((S)-1-карбамоїл-2-дифеніламіноетил)аміду метилгліоксальдиметилацеталю разом з 303г 2-(2-метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-бензімідазол-5(337мл, 2,54моль) Ν,Νкарбонової кислоти (22) диметилформамідциметилацеталю перемішують при температурі 110°С протягом 4 годин. Метанол, що утворюється під час реакції, безперервно видаляють з реакційного розчину шляхом відганяння. Після охолоджування розчин екстрагують гептаном і розчинник випаровують. Таким чином одержують 303г сирого продукту 16 (вихід: 70%), який піддають взаємодії без подальшого очищення. Сумарна формула: C8H15NO3; молекулярна маса=173,21; МС (М+Н): 174, 1; 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,10 (с, 1Н), 2,80 (с, 3Н), 3,10 (с, 3Н), 3,25 (с, 3Н), 3,3 (с, 3Н), 4,42 (с, 1Н), 5,19 (ушир.д, J=12,8Гц, 1Н), 7,60 (д, J=15Гц, 1Н). (4-Диметоксиметилпіримідин-2-іл)метиламін (17) 3-Дифеніламіно-2-{[2-(2-метиламінопіримідин0,33г (14,4ммоль) натрію розчиняють в 50мл 4-іл)-1Н-бензімідазол-5-карбоніл]-(S)абсолютного етанолу. До одержаного розчину при аміно}пропіонова кислота (21) перемішуванні додають 1,57г (14,4ммоль) 2,6г (9,6ммоль) 2-(2-метиламінопіримідин-4метилгуанідингідрохлориду і 2,48г (14,4ммоль) 4іл)-1Н-бензімідазол-5-карбонової кислоти (20) диметиламін-1,1-диметоксибут-3-ен-2-ону(16) і розчиняють в 300мл диметилформаміду і кип'ятять протягом 3 годин. Для припинення послідовно змішують з 3,17г (9,6ммоль) TOTU і реакції етанол випаровують. Таким чином 1,6мл (11,6ммоль) етилдіізопропіламіну. одержаний продукт 17 використовують без Перемішують протягом 20 хвилин при температурі подальшого очищення. Вихід: 2,6г (кількісний). 5°С і до розчину додають 2,6г (9,6ммоль) (S)-2Сумарна формула: C8H13N3O2; молекулярна бензилоксикарбоніламін-3маса=183,21; МС (М+Н): 184,1; 1 дифеніламінопропіонової кислоти (5). Після H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,78 (с, 6Н), 3,10 (с, 3Н), 5, перемішування протягом 16 годин концентрують О2 (с, 1Н), 6,62 (д, J=3 Гц, 1Н), 8,30 (д, J=3 Гц, 1Н). при зниженому тиску, потім складний метиловий 2-Метиламінопіримідин-4-карбальдегід (18) ефір 21 виділяють флеш-хроматографією на 10г (54ммоль) (4-диметоксиметилпіримідин-2силікагелі (дихлорметан/метанол=9:1). Вихід: 1,61г іл)метиламіну (17) розчиняють в 54мл 2н сірчаної (32%). кислоти і при перемішуванні протягом 3 годин Сумарна формула: C29H27 N7O3; молекулярна нагрівають при температурі 80°С. Після маса=521,58; МС (М+Н): 522,3; охолоджування реакційної суміші реакційний 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (ушир.с, 3Н), 3,60 (с, розчин за допомогою твердого Na2CO3 обережно 3Н), 4,19-4,40 (м, 2Н), 4,90 (кв, 1Н), 6,90-7,10 (м, доводять до значення рН приблизно 9 і 3 рази 6Н), 7,25-7,35 (м, 6Н), 7,40 (д, J=4,5Гц, 1Н), 7,60екстрагують етанолом. Об'єднані висушені 7,80 (ушир.д, 1Н), 8,05-8,25 (ушир.д, 1Н), 8,45 (д, екстракти після випаровування розчинника дають J=3Гц, 1Н), 8,90 (ушир.с, 1Н), 11,85 (ушир.с, 1Н). вказаний в заголовку альдегід 18 з виходом 60% ((S)-1-Карбамоїл-2-дифеніламіноетил)амід 2(4,47г). (2-метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-бензімідазол-5Сумарна формула: C6N7 Ν3Ο; молекулярна карбонової кислоти (22) маса=137,12; МС (М+Н): 138,2; 1 50мл метанолу (абсолютного) насичують H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,60-2,80 (ушир, с, 3Н), аміаком при температурі 0°С. До одержаного 6,95 (д, J=3Гц, 1Н), 7,40-7,60 (ушир, с, 1Н), 8,55 (д, розчину додають 0,5г (0,959ммоль) 3J=3Гц, 1Н). дифеніламіно-2-{[2-(2-метиламінопіримідин-4-іл)2-(2-Метиламінопіримідин-4-іл)-1Н1Н-бензімідазол-5-карбоніл]-(S)-аміно}пропіонової бензімідазол-5-карбонова кислота (19) кислоти (21) і перемішують протягом 24 годин при 4,3г (31,3ммоль) 2-метиламінопіримідин-4кімнатній температурі. Після випаровування карбальдегіду (18) і 4,8г (31,1ммоль) 3,4розчинника і надмірного аміаку флешдіамінобензойної кислоти в 300мл нітробензолу хроматографією на силікагелі нагрівають протягом 2 годин при температурі (дихлорметан/метанол=19:1) виділяють амід 22. 150°С. Після охолоджування до температури 0°С Вихід: 0,43г (89%). осад бензімідазолу відділяють від нітробензолу Сумарна формула: С29Н28 N8О2; молекулярна шляхом відфільтровування і продукт очищають маса=506,57; МС (М+Н): 507,2; флеш-хроматографією 1 H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (ушир.с, 3Н), 4,02(дихлорметан/метанол=4:1). Вихід: 2,66г (32%). 4,35 (м, 2Н), 4,85 (кв, 1Н), 6,80-7,10 (м, 6Н), 7,15Сумарна формула: C13H11 N5O2; молекулярна 7,25 (м, 5Н), 7,40 (д, J=4,5Гц, 1Н), 7,58 (ушир.с, маса=269,28; МС (М+Н): 270,2; 1 1Н), 7,68 (ушир.с, 1Н), 8,06-8,19 (ушир.д, 1Н), 8,40H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,95 (с, ЗН), 7,50 (д, J=3Гц, 8,58 (м, 2-Н), 13,10 (с, 1Н). 1Н), 7,75 (д, J=4,5Гц, 1Н), 7,90 (д, J=4,5Гц, 1Н), диметоксибут-3-ен-2-он 29 80837 30 забуференого фосфатом фізіологічного розчину Фармакологічні приклади (PBS) протягом 30 хвилин додавали 100мкл Твердофазний імуноферментний аналіз ІkВ0,5мкг/мл кон'югату стрептавідин-HRP кінази (перооксидаза хрону звичайного) (розведений в Активність ІkВ-кінази визначали за допомогою 50мМ HEPES/0,1% бичачого сироваткового твердофазного імуноферментного аналізу (ELISA), альбуміну). Після 5 стадій промивання за що полягає у використанні біотинільованого допомогою PBS, додавали 100мкл ТМВ-субстрату субстратного пептиду, який містить амінокислотну (Kirkegaard & Perry Laboratories, Gaithersburg, MD, послідовність в протеїні ІkВ серину 32-36, і США) і вияв забарвлення припиняли шляхом специфічне полі- або моноклональне антитіло додавання 100мкл 0,18Μ сірчаної кислоти. (наприклад, від New Egland Biolabs, Beverly, MA, Абсорбцію вимірювали при 450нм. Стандартну США; номер по каталогу: 9240), що зв'язує тільки криву будували шляхом лінійної регресії фосфорильовану форму пептиду ІkВ. Комплекс відповідно співвідношенню доза-дія за 4 іммобілізували на антитілозв'язувальному параметрами. На основі цієї стандартної кривої планшеті (покритому протеїном А) і детектували за кількісно визначали ферментну активність, допомогою кон'югату з біотинзв'язувального відповідно, її інгібування речовинами, що протеїну і пероксидази хрону (HRP) (наприклад, тестуються. стрептавідин-HRP). Активність кількісно визначали ІС50 (напівмаксимальна інгібуюча на основі стандартної кривої з субстратним концентрація) для [(S)-2-дифеніламіно-1-(5-оксофосфопептидом. 4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазол-2-іл)етил]аміду 2-(2Здійснення: метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5-карбонової Для одержання комплексу кінази 10мл кислоти становить 0,050мкМ. екстракту з клітин HeLa S3 S100 розводили за ІС50 для ((S)-1-карбамоїл-2допомогою 40мл 50мМ HEPES, рН 7,5, вводили до дифеніламіноетил)аміду 2-(240% сульфату амонію та інкубували на льоду метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-бензімідазол-5протягом 30 хвилин. Осад, що випав, розчиняли в карбонової кислоти становить 0,045мкМ. 5мл буферу SEC (50мМ HEPES, рН 7,5, 1мМ Тест на біль дитіотреїтолу, 0,5мМ ЕДТО Анальгетичну і антиноцицептивну (етилендіамінтетраоцтова кислота), 10мМ 2ефективність сполуки [(S)-2-дифеніламіно-1-(5гліцерофосфату), центрифугували протягом 15 оксо-4,5-дигідро-[1,3,4]оксадіазол-2-іл)етил] аміду хвилин з прискоренням 20000g і фільтрували 2-(2-метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-індол-5через фільтр 0,22мкм. Пробу наносили на колонку карбонової кислоти (що в подальшому для FPLC (рідинна експрес-хроматографія білків) з називається як сполука 13) доводили на двох 320мл суперози-6 (Amersham Pharmacia Biotech наступних моделях: AB, Uppsala, Швеція), яка була урівноважена за Модель 1: індуковане зимозаном запалення допомогою буфера SEC і функціонувала з лап у щура; параметр: час відсмикування лап або об'ємною швидкістю потоку 2мл/хв. при межа відсмикування лап при термічній або температурі 4°С. Фракції, які відповідали часу механічній стимуляції задньої лапи. закінчення стандарту молекулярної маси 670кДа, Модель 2: індуковане каоліном/карагенаном об'єднували для активування. Активування запалення колінного суглобу у щура; досягали шляхом інкубації протягом 45 хвилин при параметр: реакція спінальних нейронів при температурі 37°С разом з 100нМ ΜΕΚΚ1D, 250мкМ подразненні за рахунок натиснення на колінний магнієвої солі аденозин-5'-трифосфату (MgATP), суглоб. 10мМ MgCl2, 5мМ дитіотреїтолу (DTT), 10мМ 2Модель 1 гліцерофосфату, 2,5мкМ мікроцистину-LR. Здійснення тесту: Активований фермент зберігали при температурі Під короткочасним наркозом за допомогою 80°С. Розчинені в диметилсульфоксиді (ДМСО) ізофлурану піддослідній тварині шляхом речовини (2мкл), що тестуються, заздалегідь підшкірної ін'єкції вводили 1мг зимозану (у вигляді інкубували протягом 30 хвилин при температурі суспензії в 100мкл забуференого фосфатом 25°С разом з 43мкл активованого ферменту фізіологічного розчину (PBS)) в середину (розведений у співвідношенні 1:25 в буфері для підошовної сторони задньої лапи. Відразу ж після реакції: 50мМ HEPES, рН 7,5, 10мМ MgCl2, 5мМ цього за допомогою двох різних тестів на DTT, 10мМ b-гліцерофосфату, 2,5мкМ поведінку кількісно визначали розвиток мікроцистину-LR). Потім туди додавали 5мкл гіпералгезії. субстратного пептиду (біотин-(CH2 )6a) Визначення часу відсмикування лап при DRHDSGLDSMKD-CONH2) (200мкМ), інкубували термічній стимуляції (тест Hargreaves) Піддослідну протягом однієї години і реакцію припиняли за тварину вміщували в прозору пластикову камеру зі допомогою 150мкл 50мМ HEPES, рН 7,5, 0,1% скляним дном. бичачого сироваткового альбуміну, 50мМ ЕДТО, Як тільки піддослідна тварина після фази антитілами [1:200]. 100мкл одержаної після освоєння (приблизно 5 хвилин) більш не рухалась, припинення реакції реакційної суміші, відповідно, прямо під задньою лапою, що стимулюється, ряду розведень стандартного фосфопептиду позиціонували і включали інфрачервоне джерело (біотин-(CH2)6-DRHDS[PO3]GLDSMKD-CONH2) світла. Лампа випромінювала фокусоване потім переносили на планшет з протеїном-А інфрачервоне світло, зростаючої інтенсивності, так (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, США), та що температура шкіри задньої лапи інкубували протягом 2 годин при струшуванні. підвищувалась приблизно лінійно. Як тільки Після 3 стадій промивання за допомогою 31 80837 32 тварина відсмикувала лану, лампу вимикали. 5 -9,7 18,6 Якщо температура лап в момент відсмикування 6 5,0 2,6 саме неприємна для тварини, то кажуть про 7 3,4 5,8 термічну больову межу. 24 -3,8 7,0 b) Визначення межі відсмикування лап при механічній стимуляції:(тест Frey) Піддослідну тварину вміщували в прозору пластикову камеру, дно якої виконане з дротяної Зміна межі відсмикування лап (% сітки. За допомогою каліброваних нейлонових ниток, так званого волосся Frey, здійснювали Час (години) після ін'єкції Середнє значення, SD, сполука 13 точкоподібне натиснення певної сили. Найбільш зимозану (0) сполука 13 слабке подразнення від натиснення, під час якого Базова лінія -0,5 0,0 0,0 тварина відсмикувала лапу, визначає механічну 0,5 -37,4 6,6 больову межу. 1 -43,1 20,5 Приблизно за півгодини до і в різні моменти 2 -36,0 17,8 часу після ін'єкції зимозану визначали термічні і 3 -35,1 13,1 механічні больові межі у випадку правої і лівої 4 -46,7 11,9 задньої лапи (див. таблиці 1, 2). Потім 5 -40,6 14,0 розраховували зниження іпсилатеральної больової межі, що виражається у % від 6 -33,1 23,3 контралатеральної больової межі (див. таблиці 1, 1 -44,7 21,5 2). Чим сильніше це зниження, тим більше яскраво 24 -9,7 26,6 вираженою є гіпералгезія (підвищена больова чутливість). Модель 2 У контрольній групі ін'єкція зимозану Здійснення тесту: індукувала яскраво виражену механічну і термічну У щурів під трапанальним наркозом гіпералгезію (див. контрольні дані в таблицях 1 і відкривали хребетний канал і ідентифікували 2). Приблизно за 15 хвилин до і через 2,5 години і спинномозкові нейрони, які "обробляють" "больові 5,5 годин після ін'єкції зимозану іншій групі тварин, імпульси" з колінного суглоба. Після ідентифікації що знаходяться під короткочасним наркозом за здійснювали тривале відведення, при якому допомогою ізофлурану, вводили реєстрували активність нервової клітини до і під інтраперитонеально (і.р.) шляхом ін'єкції час розвитку гострого запалення в колінному вищезгадану сполуку 13 (по 30мг/кг в суміші суглобі. Для цього в контрольний період до індукції поліетиленгліколь-вода (ПЕГ-вода у запалення і після індукції запалення протягом співвідношенні 1:1)). У цих тварин, починаючи з декількох годин визначали відповіді на нешкідливе двох годин після ін'єкції зимозану, термічна і шкідливе подразнення в колінному суглобі. гіпералгезія була менш вираженою, ніж в Гостре запалення індукували шляхом контрольній групі, після третього разу введення внутрішньосуглобної ін'єкції суспензії каоліну і речовини взагалі більш не було виявлено карагенану (К/С) (приблизно 150мкл). У латеральної відмінності у часі відсмикуваня лап контрольних експериментах в спинномозкову (таблиця 1). Цей ефект ще зберігався також поверхню вводили тільки ексципієнт, щоб протягом 18 годин після останнього введення досягнути розвитку підвищеної збудливості в речовини. контрольних умовах. Як правило, цей розвиток За рахунок сполуки 13 також значно підвищеної збудливості відбувається протягом 2-4 зменшувалась механічна гіпералгезія. Ефект годин і виражається у сильному збільшенні починався через 1 годину після ін'єкції зимозану і відповідей на нешкідливе і шкідливе подразнення продовжувався також ще протягом 18 годин після колінного суглоба (таблиця 3). У випадку останнього введення речовини (див. таблицю 2). експериментів, в яких застосовували вищезгадану Ефективність сполуки 13 у випадку обох тестсполуку 13, речовину вводили в спинний мозок моделей є дуже сильною. Порівняльні дані раніше приблизно за 30 хвилин до індукції запалення проведеного дослідження показують, що сполука (приблизно 30мкл розчину з концентрацією 13 значно сильніше знижує термічну гіпералгезію, 10мкМ). Після цього далі стежили за відповідями ніж NSAID Diclofenac. клітини на нешкідливе і шкідливе подразнення, як в контрольних експериментах. Таблиця 1 Порівняння змін відповідей в обох групах показує, що сполука 13 майже повністю придушує Зміна часу відсмикування лап (%) розвиток спінальної підвищеної збудливості у порівнянні з контролем (таблиця 3). Дія сполуки 13 Час (години) після ін'єкції Середнє значення, Середнє значення, SD,на відповіді на шкідливу стимуляцію контроль сполука 13 SD, колінного зимозану (0) сполука 13 суглоба, загалом, контроль виражена сильніше, ніж дія Базова лінія -0,5 0,0 0,0 0,0 індометацину, як 0,0 показує порівняння з опублікованими даними раніше проведеного 0,5 -16,6 6,6 -21,4 6,3 дослідження. 1 -31,3 14,1 -28,8 11,6 2 -30,2 15,4 -44,8 19,1 3 -15,3 -5,3 -49,2 17,9 4 -16,0 11,5 -50,6 23,0 33 80837 34 Нейронні відповіді до і під час запалення колінного суглоба (імпульс/15 секунд) інфрачервоне джерело позиціонували і включали світла. Лампа випромінювала фокусоване Шкідливе подразнення вінфрачервоне світло зростаючої інтенсивності, так колінному суглобі що температура значення, задньої лапи Середнє значення, Середнє шкіри Час (хв.) після К/С-ін'єкції SEM,підвищувалась приблизно лінійно. Як тільки сполука 13 SEM, контроль сполука 13 контроль тварина відсмикувала лану, лампу вимикали. Базова лінія 0,8 29,9 0 0 Якщо температура лап в момент відсмикування 30-60 62,3 49,3 161,6 43,7 саме неприємна для тварини, то кажуть про 60-120 26,9 35 458,1 125,4 термічну больову межу. 120-180 *8,5 58,9 544,2 140,0 Незадовго до ін'єкції зимозану і через 7-14 днів 180-240 19,5 59,9 616,3 174,7 після ін'єкції один раз на добу визначали термічну Не шкідливе подразнення больову межу у випадку правої і лівої задньої в колінному суглобі Середнє значення, Час (хв.) після К/С-ін'єкції SEM,лапи. Потім як міру гіпералгезії визначали інтеграл сполука 13 Середнє значення, SEM, контроль сполука 13 площі, яку одержували з кривих часів Базова лінія 0,92 16,90 0 відсмикування лап 0 випадку запаленої і у 30-60 8,66 23,76 21,4 11,9 незапаленої лапи (AUC, площа між кривими, див. 60-120 2,71 25,94 74,6 таблиці 5 і 6). Чим більше це значення, 38,3 більш тим 120-180 11,16 24,22 39,0 яскраво виражена 105,7 гіпералгезія, і чим менше 180-240 39,78 25,09 149,7 44,3 значення у тварин, які одержують речовину, тим сильніший ефект лікування. При дослідженні протягом 7 днів ін'єкція Далі, вивчали дію ((S)-1-карбамоїл-2зимозану в контрольній групі індукувала яскраво дифеніламіноетил)аміду 2-(2виражену термічну гіпералгезію (див. ексципієнт, метиламінопіримідин-4-іл)-1Н-бензімідазол-5таблиця 5). В інших групах ведення речовини карбонової кислоти, названого надалі як сполука починали через добу після ін'єкції зимозану, після 22. того як вже виникла виразна термічна гіпералгезія. Контрольні дані: див. таблицю 3. Сполуку 13 вводили перорально двічі на добу протягом 7 днів, а саме по 25мг/кг абоТаблиця 4 75мг/кг в гідроксіетилцелюлоза/ліпофундині (1% гідроксіетилцелюлози в ліпофундині). Нейронні відповіді до і під час запалення колінного суглоба (імпульс/15 секунд) Оцінка часів відсмикування лап протягом всього періоду Шкідливе подразнення вдослідження (7 днів) показала, що AUC при колінному суглобі введенні речовини, в Сполука 22, дослід 2 дози, залежності від Час (хв.) після К/С-ін'єкції Сполука 22, дослід 1 зменшена. При дозах починаючи з 0 8,3мг/кг разової Базова лінія 0 дози ефект лікування значний -9,2 порівнянні з у 30-60 -109,1 групою, що одержувала ексципієнт (таблиця 5). 60-120 -101,1 Ефективність сполуки 13 в тест-моделі є дуже 120-180 -37,8 60 сильною. Групі тварин, що паралельно 180-240 96,7 використовується, також двічі на добу вводили Нешкідливе подразнення парацетамол в дуже високій дозі. Сполука 13 в колінному суглобі Час (хв.) після К/С-ін'єкції (0) Сполука 22, дослід термічну гіпералгезію сильніше, ніж Сполука 22, дослід 2 зменшувала 1 Базова лінія 0 0 парацетамол (таблиця. 5). 30-60 -34,1 -30,6 60-120 -37,2 120-180 -32,1 -50,3 Термічна гіпералгезія протягом семи діб після 180-240 68,7 Дані підтверджують хорошу дію сполуки 22 у випадку моделі 2. Модель 3: Індуковане зимозаном запалення лап у миші; параметр: час відсмикування лапи при термічній стимуляції задньої лапи. Здійснення тесту: Під короткочасним наркозом за допомогою ізофлурану піддослідній тварині шляхом ін'єкції вводили 25мкл суспензії, що містить 50мг/мл зимозану, в праву задню лану. Потім кількісно визначали розвиток гіпералгезії таким чином: Визначення часу відсмикування лап при термічній стимуляції (тест Hargreaves, див, вище) Піддослідну тварину вміщували в прозору пластикову камеру зі скляним дном. Як тільки піддослідна тварина після фази освоєння (приблизно 5 хвилин) більше не рухалась, прямо під задньою лапою, що стимулюється, Ексципієнт Парацетамол, 200мг/кг Сполука 13, 2,8мг/кг Сполука 13, 8,3мг/кг Сполука 13, 25мг/кг Сполука 13, 75мг/кг AUC, середнє значення [міра гіпералгезії] 45,1 24,6 40,4 32,3 19,4 17,4 Стандартна похибка арифметичного способу (SEM) 1,5 4,1 2,4 2,2 2,9 2,6 При подальшому дослідженні на мишах ефективність сполуки 13 порівнювали зі специфічним інгібітором СОХ-2 целекоксибом. Ін'єкція зимозану і схема дозування були ідентичні таким вищеописаного дослідження. Єдина відмінність полягала в тому, що це наступне дослідження тривало більше 14 днів. Завдяки сполуці 13, в залежності від дози, знов змогли зменшити термічну гіпералгезію 35 80837 (таблиця 6). При цьому ефекти сполуки 13 і целекоксибу при високому дозуванні були однаково сильними (таблиця 6). Ексципієнт Целекоксиб, 8,3мг/кг Целекоксиб, 25мг/кг Сполука 13, 8,3мг/кг Сполука 13, 25мг/кг 36 Стандартна похибка арифметичного способу (SEM) Ексципієнт 108,8 12,5 Таблиця 6 47,7 Парацетамол, 200мг/кг 187,2 Сполука 13, 2,8мг/кг 131,1 23,3 Термічна гіпералгезія протягом 14Сполука 13, 8,3мг/кг діб після ін'єкції зимозану 142,1 29,1 Сполука 13, 25мг/кг 216,7 58,5 AUC, середнє СтандартнаСполука 13, 75мг/кг похибка Статистична різниця 251,7 41,9 Число тварин значення [міра арифметичного способу по відношенню до на групу гіпералгезії] (SEM) ексципієнта 90,0 5,1 8 79,9 5,9 5 Ні 51,5 3,7 9 Так 64,5 5,0 5 Так 47,6 4,4 9 Так AUC, середнє значення Модель 4: індуковане зимозаном запалення лап у миші; параметр: спонтанний пробіг в бігунковому колесі Піддослідна тварина в своїй клітці, в якій утримується, має доступ до бігункового колеса, обороти якого реєструються за допомогою електроніки. Миші С57/В6 в нічні години добровільно користуються бігунковим колесом і після фази звикання протягом одного тижня проходять в середньому 4100 метрів за ніч. Після ін'єкції зимозану нічний шлях пробігу скорочується. Це зменшення пробігу вважається параметром для зумовленого болем за рахунок запалення обмеження функції. Здійснення тесту: Шлях пробігу за 24 години вимірювали після фази освоєння протягом тижня для визначення базової лінії. Потім під короткочасним наркозом за допомогою ізофлурану піддослідній тварині вводили шляхом ін'єкції 25мкл суспензії, що містить 50мг/мл зимозану, в праву задню лапу. Після цього визначали шлях пробігу за 24 години протягом найближчих семи діб. Для оцінки визначали площу під кривою значень шляху пробігу (AUC, таблиця 7): чим менше AUC, тим незначніше пробіг на тиждень після ін'єкції зимозану. Сполуку 13 вводили перорально двічі на добу протягом 7 днів, а саме по 25мг/кг або 75мг/кг в гідроксіетилцелюлоза/ліпофундині (1% гідроксіетилцелюлози в ліпофундину). Введення речовини починали в день 1 після ін'єкції зимозану. При дослідженні визначали дію сполуки 13 у порівнянні з парацетамолом на пробіг після ін'єкції зимозану. Показане залежне від дози збільшення шляху пробігу, який у випадку обох підвищених дозувань був значним у порівнянні з групою, що одержувала ексципієнт (таблиця 7). При використанні парацетамолу у надзвичайно високій дозі (також 2 рази на добу), в протилежність цьому, не досягали ніякого підвищення у порівнянні з групою, що одержувала ексципієнт (таблиця 7). Таблиця 7 Активність відносно бігункового колеса протягом семи днів після ін'єкції зимозану