Спосіб введення експериментальних тварин в стан штучного сну

УКРАЇНА (19) UA (11,11454 из) U (51)7A61D7/O4 МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ ОПИС ДЕРЖАВНИЙ ДЕПАРТАМЕНТ ІНТЕЛЕКТУАЛЬНОЇ ВЛАСНОСТІ ДО ДЕКЛАРАЦІЙНОГО ПАТЕНТУ НА КОРИСНУ МОДЕЛЬ видається під відповідальність власника патенту (54, СПОСІБ ВВЕДЕННЯ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ТВАРИН В СТАН ШТУЧНОГО СНУ 1 (21,и200506995 ' "(22, 15.07.2005 < ' (24)15.12.2005 (46) 15.12 2005, Бюл. № 12, 2005 р. (72) Звягінцева Тетяна Володимирівна, Герман Крістіна Борисівна (73, ХАРКІВСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ (57, Спосіб введення експериментальних тварин в стан штучного сну, що включає введення тіопенталу натрію, який відрізняється тим, що додатково перед початком хірургічного втручання вводять рекомбінантну супероксиддисмутазу в дозі 20мкг/кг. Корисна модель відноситься до експериментальної медицини, а саме до підготовки тварин до гострого експерименту І може бути використана для проведення наркозу. В експерименті на тваринах може бути використаний однокомпонентний наркоз різними анестетиками. Використання в якості основного анестетика ефіру має свої переваги і недоліки. Основний недолік полягає в тім, що ефірний наркоз в умовах експерименту важко дозується, велика можливість передозування і смерті тварини Разом з тим швидка елімінація ефіру викликає миттєве пробудження тварини і незручність у проведенні експерименту. Наркоз проводиться відкритим способом, що саме по собі є токсичним для всіх учасників експерименту Необхідно безупинне зволоження марлевої серветки (30-40 крапель ефіру в хвилину) [Костюченко А.Л., Дьяченко П.К. Внутривенный наркоз и антинаркотики. - СПб: Деан, 1998. 239с]. Більш прийнятні в даний момент препарати для проведення неінгаляційного наркозу (кетамін, тіопентал натрію, пропофол). Для внутрішньочеревинного введення використовується 5% розчин кетаміна. Однократною вну наркотики. - СПб1 Деан, 1998. -239с]. До недоліків кетамінового наркозу відноситься те, що навіть глибокий кетаміновий наркоз супроводжується гіпертонусом і фібрілярними посмикуваннями кістякових м'язів Препарат пропофол забезпечує могутній гіпнотичний ефект Викликає швидке настання наркотичного сну, протягом 8-Ю хвилин після внутрішньочеревинного введення препарату в дозі 5мг/кг. Тривалість анальгетичного ефекту однократно введеної дози складає 15-20 хвилин. Пропофол у терапевтичних дозах викликає виражену депресію дихання за рахунок гноблення дихального центра. Пробудження тварини настає протягом 40-50хв. після однократно введеної дози [Костюченко А.Л , Дьяченко П К. Внутривенный наркоз и антинаркотики. - СПб' Деан, 1998. -239с ] В анестезіологічній практиці широко використовуються класичні наркотичні препарати: похідні барбітурової і тіобарбітурової кислоти (метогекситал, тіопентал, гексенал). Після однократного внутрішньочеревинного введення тіопентала натрію в дозі 15мг/кг наркотичний сон настає протягом 58хв. Тривалість сну складає 15-20хв. Повне пробудження настає через 30хв. після введення дози Гарна переносимість, відносна дешевина препарату дозволяє широко використовувати його в експерименті на тваринах [Костюченко А.Л., Дьяченко П К Внутривенный наркоз и анти наркотики. -СПб: Деан, 1998.-239с]. Даний спосіб проведення наркозу для експериментальних тварин є найбільш близьким по результату та технічній суті до того, що заявляється, тому його обрано в якості прототипу трішньочеревинною ін'єкцією (у ДОЗІ 10-12МГ/КГ кетаміна) досягається могутній анальгетичний ефект. Максимальна дія основної дози настає на 6-8 хвилині. У тварини відзначається виражена тахікардія і гіпертензія. Тривалість анальгетичного ефекту однократно введеної дози складає 25-30 хвилин. Даний період часу цілком достатній для постановки гострого експерименту [Костюченко А Л , Дьяченко П.К. Внутривенный наркоз и анти ю 11454 Основним недоліком способу-прототипу і вівень продуктів перекисного окислювання ЛІПІДІВ домих аналогів є зростання показників перекиснопідвищувався Окислювальний стрес впливає на го окислювання ЛІПІДІВ, зниження активності фертермін загоєння експериментальної рани Введенментів антиоксидантної системи, що в ня, в дозі, що заявляється, ферментативного анпісляекспериментальному періоді приводить до тиоксиданта - рекомбінантної супероксиддисмутаподовження термінів загоєння експериментальних зи, як було встановлено експериментально ран захищає тварину від окислювального стресу Було доведено, що інтенсивність вільнорадикального У зв'язку з вищевикладеним, в основу корисної окислювання (за рівнем малонового діальдепду моделі покладена задача профілактики усклад(МДК), дієнових кон'югатів (ДК), супероксддисмунень, зв'язаних з хірургічною травмою таси (СОД) каталази (КТ)) знижувалася, рівень Задача, покладена в основу корисної моделі, ферментів антиоксидантного захисту підвищувирішується тим, що у відомому способі введення вався експериментальних тварин в стан штучного сну, що включає введення тюпентала натрію згідно з Ефективність методу ілюструється наступними корисною моделлю, додатково перед початком прикладами хірургічного втручання вводять рекомбінантну суПротокол 1 пероксиддисмутазу в дозі 20мкг/кг Щурам внутрішньочеревний о в дозі 15мг/кг вводять тюпентал натрію Через 3-5 хвилин настаПозитивний ефект корисної моделі досягають вав наркотичний сон Затим виконують лапарототим, що «окисний стрес» що розвивається в оргамію з наступним пошаровим ушиванням рани Як нізмі експериментальної тварини, пригнічується контрольну групу використовують групу інтактних введенням могутнього ферментативного антиоктварин МДА в контролі склав 0 64±0 02мкмоль/м, сиданту - рекомбінантної супероксиддисмутази ДК 16,11±1,22мкмоль/м, СОД 0,11±0,004у од /мг, Цей фермент є ключовим в процесах вільного КТ 3,23±0,08мккат/мг Рівень продуктів перекисноокислювання ЛІПІДІВ, лімітує швидкість усього цикго окислювання ЛІПІДІВ І ферментів антиоксидантлу перетворення супероксидного аніона в ІНШІ акної системи визначався після пробудження щура тивні форми кисню, контролюючи швидкість протіМДА в досліджуваних тварин складав кання вільного окислювання ЛІПІДІВ Фізіологічна 1,64±0,15мкмоль/м, ДК 37,11±1,32мкмоль/м, СОД роль супероксиддисмутази полягає в захисті клі1 47±0,11у од/мг, КТ4,23+0,18мккат/мг тини від токсичного впливу активних форм кисню шляхом перетворення їх у пероксид кисню [БараПісля відслідковувався термін загоєння післябой В А, Сутковой ДА Окислительноопераційної рані У даної групи тварин загоєння антиоксидатный гомеостаз в норме и патологии ран наставало на 12-14 добу за умови обробки Киев-1997] ран антисептиком, ЗМІНІ ПОВ'ЯЗОК ОДИН раз у два Спосіб виконують таким чином в експерименті перед початком знеболювання і проведення лапаротомії експериментальній тварині внутрішньом'язово вводять антиоксидант - рекомбінантну супероксиддисмутазу в дозі 20мкг/кг Затим тварині вводять анестетик Після настання хірургічної стадії наркозу відтворюють експериментальну модель хірургічної травми - лапаротомії з наступним пошаровим ушиванням рани Прооперовані тварини знаходяться під наглядом до повного загоєння рани При цьому стан оксидантно-антиоксидантної систем оцінюють до хірургічного втручання та після нього Так як задачею будь-якого анестезіологічного посібника є захист пацієнта від хірургічного стресу, а також підбір оптимального складу лікарських засобів різних фармакологічних груп, що знижують токсичну дію самої анестезії Оцінкою виразності хірургічного стресу можуть служити показники перекисного окислювання ЛІПІДІВ І антиоксидантної системи Відомо, ЩО на тлі різних видів знеболювання і подальшого проведення лапаротомії, рі Комп ютерна верстка Н Лисенко ДНІ Протокол 2 Щурам внутрішньом'язово в дозі 20мкг/кг вводилася рекомбінантна супероксиддисмутаза Затим внутрішньочеревинно в дозі 15мг/кг вводився тюпентал натрію Через 3-5 хвилин наставав наркотичний сон Далі виконувалась лапаротомія з наступним пошаровим ушиванням рани Після відслідковувався термін загоєння післяопераційної рани У даної групи тварин загоєння рани наставало на 8-10 добу за умови обробки рани антисептиком, ЗМІНІ пов'язок один раз у два дні Рівень МДА - 1,23±0,08мкмоль/м, ДК 36,11±2,12мкмоль/м, СОД 2,47±0 41 у од /мг, КТ 4 34±0 18мккат/мг Таким чином, корисна модель, що заявляється дозволяє знизити токсичну дію анестезії у експериментальних тварин, вказує на оптимальну дозу рекомбінантної супероксиддисмутази, яка використовується для цього, та тим самим виконати профілактику ускладнень, пов'язаних з хірургічною травмою Підписне Тираж 26 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності вул Урицького, 45 м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова 1,м К и ї в - 4 2 01601