Спосіб кількісного визначення активації лімфоїдних клітин

Изобретение позволяет повысить чувствительность определения активации лимфоцитов. Для этого предва рительно полученную биопробу помещают в кювету из нелюминесцирующего стекла с дном из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемую при 38 С, Определяют величину свечения кюветы и кюветы с биоітробой. Пробу лимфоцитов помещают в кювету и через 2—3 мин регистрируют интенсивность свечения, Добавляют раствор тимостимулина или другой индуктор, через 5-Ю мин после введения иммуностимулятора определяют хемотхюминесценцию и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу времени. I т-абл. § (Л с to 00 Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и касается способов выявления и объективной регистрации состояния активации лимфоцитов, может быть использовано при диагностике заболеваний, сопровождающихся изменениями иммунологической реактивности организма. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. Способ осуществляют следующим образом. 1 мл гепаринизироваиной крови наносят на 1 мл смеси фиколла и верографина (Р-1,077), Пробирки центрифугируют при 1000 об/мин 30 мин. Эритроциты оседают на дно пробирки, лимфоциты остаются в иптерфазе. Лимфоциты собирают, дважды отмыва от и подсчитывают (из 1 мл крови с нормальным содержанием лимфоцитов обычно удается получить около 10 клеИммуностимулятор Лимфоциты человека, Левамизол 237979 * ток, которые ресуспендиругат в 1 мл раствора Хэнкса). Полученную таким образом биопробу помещают в кювету из иелгаминесцирующего стекла с дном 5 из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом *ФЭУ, термостатируемую при 38°С. После эталонных измерений определяют "величину свечения кюветы (фон) и '0 кюветы с биопробой. Пробу лимфоцитов в объеме 0,7-1,0 мл (10 ? мм фоцитов) помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность 'свечения по описанному выше способу. 15 Затем добавляют 0,7 мл раствора тимостимулина или другого индуктора и через 5-Ю мин вновь регистрируют свечение стимулированных лимфоцитов. 20 Хемилюминесценция иммунокомпетентных клеток через 5 мин после воздействия стимулятора представлена в таблице. Конечная концентрация Число на блюде ний Хемилюминесценцяя М м 82 0,1 мкг/мл 10 25! нин 0,1 5 мг/мл 9 123 Тимостимулин 1,0 мг/мл 10 204 74 Левамизол 0,1 мкг/мл 6 145 36 Тимостимулин 1,0 мг/мл 6 Фитогемагглюти27 27 Ц-клетки* Лимфоциты крысы, Тимостимулин Ф о р м у л а 1,0 мг/мл и з о б р е т е н и я Способ количественного определения активации лимфоидных клеток путем добавления к суспензии лимфоцитов иммуностимулятора с последующим учетом полученных результатов, о тВНИКЛИ Заказ 3283/45 Произв-полнгр. 33 пр-тие э 6 127 41 л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности спо50 соба, определяют хемолюмииесценцию в течение 5-Ю мин после введения иммуностимулятора и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу времени. Тираж 778 Подписное г . Ужгород, ул. Проектная, 4