Спосіб визначення води в біологічних об’єктах

Изобретение относится к биологии и может быть исполъзоваыо для изучения влияния физико-химических факторов на биологические объекты. Цель изобретения - определение изменения количества внутриклеточной воды. В контрольный и опытный образцы суспензии клеток вводят иминоксильный радикал в конечной концентрации 2>10~ - 10~ моль/л и парамагнитную соль Кь \?е(СЮ(~] в конечной концентр рации 0,09-0,11 моль/л, после чего регистрируют спектры ЭПР контрольного и опытного образцов и по соотношению интенсивностей спектров радикалов определяют изменение количест ва внутриклеточной воды. со со 00 Г"" Г\ 397813 Изобретение относится к биологии и может быть использозано для изучения влияния физико-химических факторов на биологические объекты. Ііель изобретения ' определение изменена* количества внутриклеточной воды. Способ осуществляют следующим образом, Б КОНТРОЛЬНЫЙ И ОПЫТН1ЫЙ О б р Й З Ц Ы Образец в капилляре поместили в резонатор спектрометра ЭПР и при 4 С сняли спектр контрольного образца. Затем к другой части суспензии в таком we соотношении добавили раствор, содержащий кроме нминоксильного радикала (4-10* моль/л) и парамагнитной соли (0,1 моль/л) 30% ПЭО-1500, и аналогичным образом сняли спектр ЭПР радикала. Интенсивность спектра контрольного образца Ь о = 86 о т н . е д . , * опытного h, ~ 57 о т н . е д . Таким образом, количество воды в клетке умень15 шилось на ~30%. суспензии клеток вводят иминоксильный радикал 2,2,6,6-тетраметия-^-ор-сопипериднн-! -очеил в конеччоЪ копиенггпации 2 • 10 10"* моль/л и парамагнитную соль Испытания показали, что предложенK-[Ve(CN) e ] з конечной концентрации ный способ позволяет определить изме0 , 0 9 - 0 , И моль/л и сччмают спектры нение количества воды внутри клетки ЭПР. Затем сравнивают интенсивность с достаточно высокой точностью (+-15%) спектров э ігонтропьйом я опытном 20 образцах. Интенсивность спектрз ЭПР Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я радикала пропорциональна кс*\кчеству Способ определения воды в биолорадикала BPVTTHS клеток н, с о о т в е т с т гических объектах, заключающийся во венно s количеству воды в них. Поэтовведении в контрольный и опытный обму изменение количества воды опреде- 25 разцы парамагнитной соли K 5 [Fe(CN) 6 ^ ляют по формуле и снятии спектров ЭПР радикалов, путем определения соотношения количестh, ™ - 100%, D ва воды в контрольном и опытном образцах, о т л и ч а ю щ и й с я тем, где h o .h - интенсивность спектров - что, с цель» определения изменения ЭПР радикала для контрольколичества внутриклеточной воды, в ного и опытного образцов, контрольный и опытный образцы, предсоответственно. ставляющие собой суспензии клеток, вводят дополнительно иминоксильный П р и м е р . Суспензию эритроцитов35 радикал 2,2,6,6-тетраметил-4~оксопиперидин'1-оксил в конечной конотмьши пт лейкоиитов физраствором путем центрифугирования в течение центрации 2'!0~ - !0~ моль/л, а пара~ 20 мин при 3000 об/мин. После этого магнитную соль КзГ^ е (СМ)б1 вводят к части сусттензчи добавили 1:1 р а с т в конечной концентрации 0,09 в о р , содержащий 4 • 1 0" моль/л имино- 40 0,11 моль/л и по соотношению интенксильного радикала 2, 2.6,6-*тeтpaмeсивностей спектров ЭПР контрольного тил-4-oкcoпнпepидин-^-оксила и и опытного образцов определяют изме0,1 моль/л парамагнитной соли. нение количества воды. Редактор В.Ланко Составитель А,Федоров Техред Л.Олийнык Корректор М.Демчик Заказ 2599/4? Тираж 847 Подписное В И Т И Государственного комитета ССС? Н ИТ по делам изобретений я открытий 11303% Москва, Ж-35, Раушская н а б . , д . 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г . Ужгород, ул. \ ~ і Проектная, 4 ,