Штам вірусу тягіня (tahina) № 4486 для виготовлення специфічних імунобіологічних препаратів

Штам вірусу Тягіня (Tahina) №4486 родини Bunjaviridae, роду Bunjavirus, комплексу Каліфорнійського енцефаліту, виділений з комарів Culex pipiens, зібраних в активному природному вогнищі цього вірусу у Чорноморському державному заповіднику "Ягорлицький кут" Херсонської області в 1986 році, депонований за №87 від 01.01.2002 року в колекції арбовірусів Львівського НДІ епідеміології та гігієни МОЗ України та є кандидатом для виготовлення специфічного діагностикуму та вакцини. (19) (21) u200511918 (22) 12.12.2005 (24) 15.09.2006 (46) 15.09.2006, Бюл. № 9, 2006 р. (72) Лозинський Ігор Миколайович, Білецька Галина Вацлавівна, Козловський Михайло Михайлович, Рогочий Євген Георгійович, Семенишин Оксана Богданівна, Федорук Володимир Ілліч, Друль Оксана Стефанівна, Шоломей Михайло Володимирович (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ ІНСТИТУТ ЕПІДЕМІОЛОГІЇ ТА ГІГІЄНИ МОЗ УКРАЇНИ, Лозинський Ігор Миколайович 3 16964 4 Таблиця 1 Характеристика штаму вірусу Тягіня за ступенем вірулентності для білих мишей Вірулентність для білих безпородних мишей lg ТЦД50 Штам 4486 нбм іс 6,5 іс 5,4 2-тижневі іp 4,0 II 1,4 іс 3,0 дорослі ip 2,0 II 1,0 Примітки: 1. ic - внутрішньомозкове інфікування. 2. ір - підшкірне інфікування. 3. ІІ - індекс інвазивності. 4. нбм - новонароджені білі миші. Вплив фізико-хімічних факторів оцінювали за індексом інактивації, котрий становить різницю в десяткових логарифмах титрів вірусу до і після обробки відповідним чинником 10% суспензії. Для обробки вірусмісткої суспензії використовували 1% розчин дезоксихолату натрію і 100% ефір. Термоінактивацію здійснювали 15 хвилин при 50°С у водяній бані. Контрольний титр в lg ТЦД50 в 0,1мл з 8,75 знизився до 5,60, а індекс термоінактивації становить 3,15. Під дією 1% розчину дезоксихолату натрію цитопатогенний ефект на культурі клітин СНЕВ знижувався з 7,12 до 2,75, а індекс інактивації становить 4,37. Під впливом ефіру цитопатогенний ефект знижувався з 9,16 до 5,5. Індекс інактивації - 3,66. Гемаглютинуюча активність пропонованого штаму при репродукції в мозку мишей становить 1:640, при оптимальному значенні рН - 6,0. Комплементзв'язуюча активність штаму №4486 вірусу Тягіня з гомологічною імунною сироваткою склала 1:160. При визначенні антигенних зв’язків в РЗК антиген №4486 з імунною сироваткою еталонного штаму Bardos-92 дав титр 1:80, що свідчить про антигенну спорідненість вітчизняного і еталонного штамів. Отже, штам №4486 вірусу Тягіня можна рекомендувати для виготовлення діагностикуму для РЗК та РГГА. Накопичення біомаси штаму №4486 вірусу Тягіня здійснюється класичним способом шляхом пасажування вірусвмісного матеріалу в живих чутливих системах, в тому числі в організмі лабораторних мишей. Безпородних білих мишей вагою 68 грамів заражають у мозок по 0,03мл вірусною суспензією штаму №4486. При появі виражених паралічів на 4-5 добу мишей забивають за правилами евтаназії, асептично добувають мозок і шля Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко хом розтирання мозку у фарфоровій ступці із додаванням фізіологічного розчину готують 10% завісину мозкової тканини. Отриману завісину центрифугують при 1000-1500об/хв протягом 10хв. Рідину, що утворилась над осадом використовують для зараження наступної партії мишей. Після проведення 2-3 пасажів інфікований мозок мишей використовується для приготування діагностикуму [4]. Таким чином, єдиний виділений в Україні патогенний для людини штам №4486 вірусу Тягіня проявляє високу специфічність, антигенну, імуногенну та репродуктивну активність і відповідає регламентованим параметрам відбору штамівкандидатів для виробництва імунобіологічних препаратів [5]. Використання цього штаму для виготовлення специфічного діагностикуму та культуральної вакцини дозволить суттєво підвищити достовірність діагностики та ефективність профілактики захворювань лихоманкою Тягіня в Україні та в країнах, де циркулюють споріднені збудники. Джерела інформації 1. Львов Д.К., Клименко С.М., Гайдамович С.Я. //Арбовирусы и арбовирусные инфекции. -М.: Медицина, -1989. -335 2. Виноград И.А. Арбовирусы в Украинской ССР и их медико-биологическое значение: Дис. дра мед. наук. -Львов, 1983. -505с. 3. Лозинський І.М., Виноград І.А. Арбовіруси та арбовірусні інфекції у лісостеповій зоні України //Мікробіол. журнал. -1998. -т.60, №2. -С.49-60. 4. Арбовирусы. Сборник научних трудов. Москва, 1986 -180с. 5. Верета Л.А., Воробьева М.С. Природная гетерогенность и целенаправленный отбор штаммов вируса клещевого енцефалита //Москва.: Медицина -1990. -123с. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Українськийінститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601