Штам вірусу західного нілу (virus nili occidentalis) № 3266 для виготовлення специфічних імунобіологічних препаратів

Штам вірусу Західного Нілу (Virus Nili Occidentalis) №3266, що відноситься до родини Flaviviridae, роду Flavivirus, комплексу японського енцефаліту, ізольований з крові грака, відстреленого в Чорноморському державному заповіднику "Ягорлицький кут" Херсонської області в 1980 році, депонований за № 54 від 01.01.2002 року в колекції арбовірусів Львівського НДІ епідеміології та гігієни МОЗ України і є кандидатом для виготовлення специфічного діагностикуму та вакцини. (19) (21) u200511875 (22) 12.12.2005 (24) 15.09.2006 (46) 15.09.2006, Бюл. № 9, 2006 р. (72) Лозинський Ігор Миколайович, Білецька Галина Вацлавівна, Козловський Михайло Михайлович, Рогочий Євген Георгійович, Семенишин Оксана Богданівна, Федорук Володимир Ілліч, Друль Оксана Стефанівна, Шоломей Михайло Володимирович (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ ІНСТИТУТ ЕПІДЕМІОЛОГІЇ ТА ГІГІЄНИ МОЗ УКРАЇНИ, Лозинський Ігор Миколайович 3 16963 4 Таблиця 1 Характеристика штаму №3266 вірусу Західного Нілу за ступенем вірулентності для білих мишей Штам 3266 нбм іс 9,6 Вірулентність для білих безпородних мишей lg LD50 3-тижневі дорослі іс ір II іс ір 8,0 7,0 1,0 7,5 6,5 II 1,0 Примітки: 1. іс - внутрішньомозкове інфікування. 2. ір - підшкірне інфікування. 3.11 - індекс інвазивності. 4. нбм - новонароджені білі миші. Штам №3266 добре розмножується в перещеплюваній культурі клітин СНЕВ, викликаючи чітку деструкцію клітин на 3-4 добу (середньостатистичний титр вірусу в культуральній рідині становить 6,04 lg LD50 в 0,1мл з вираженим цитопатогенним ефектом), високопатогенний для лінійних і безпородних дорослих та новонароджених білих мишей. При зараженні викликає типову картину експериментального енцефаліту з інкубаційним періодом при внутрішньомозковому шляху зараження 3-5 днів, при внутрішньоочеревинному шляху зараження - 4-7 днів. Гемаглютинуюча активність пропонованого штаму при репродукції в мозку мишей становить 1:320 в зонах рН6,0-6,4. Оптимальне значення рН - 6,0. Антигенні властивості штаму №3266 вивчені в реакції зв'язування комплементу (РЗК). Антиген 3266 в реакції з гомологічною імунною сироваткою дав титр 1:160, з імунною сироваткою Eg-101 1:10. Спостерігається спорідненість штаму 3266 з іншими штамами вірусу Західного Нілу, що циркулюють на території України. Отже, штам 3266 можна пропонувати для виготовлення імунобіологічних та діагностичних препаратів для РЗК, а також нРІФ, та РГГА. Накопичення біомаси штаму №3266 вірусу Західного Нілу здійснюється класичним способом шляхом пасажування вірусвмісного матеріалу в живих чутливих системах, в тому числі в організмі лабораторних мишей. Безпородних білих мишей вагою 6-8 грамів заражають у мозок по 0,03мл вірусною суспензією штаму №3266. При появі виражених паралічів на 4-5 добу мишей забивають за правилами евтаназії, асептично добувають мозок і шляхом розтирання мозку у фарфоровій ступці із додаванням фізіологічного розчину готують 10% завісину мозкової тканини. Отриману завісину Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко центрифугують при 1000-1500об/хв. протягом 10хв. Рідину, що утворилась над осадом використовують для зараження наступної партії мишей. Після проведення 2-3 пасажів інфікований мозок мишей використовується для приготування діагностикуму [4]. Таким чином, штам №3266 вірусу Західного Нілу, спричиняє захворювання людей в Україні, проявляє спорідненість з іншими циркулюючими в Україні такого ж роду збудниками, має суттєві відмінності по ряду біологічних, проявляючи при цьому високу специфічність, антигенну, імуногенну та репродуктивну активність і відповідає регламентованим параметрам відбору штамів-кандидатів для виробництва імунобіологічних препаратів [5]. Використання цього штаму для виготовлення специфічного діагностикуму та культуральної вакцини дозволить суттєво підвищити достовірність діагностики та ефективність профілактики захворювань лихоманкою Західного Нілу в Україні, та суміжних країнах де циркулюють споріднені збудники. Джерела інформації: 1. Львов Д.К., Клименко С.M., Гайдамович С.Я. //Арбовирусы и арбовирусные инфекции. -М.: Медицина, -1989. -335с. 2. Виноград И.А. Арбовирусы в Украинской ССР и их медико-биологическое значение: Дис. дра мед. наук. -Львов, 1983. -505с. 3. Лозинський I.М., Виноград І.А. Арбовіруси та арбовірусні інфекції у лісостеповій зоні України //Мікробіол. журнал. -1998. -т.60, №2. -С.49-60. 4. Арбовирусы. Сборник научних трудов. Москва, 1986 -180с. 5. Верета Л.А., Воробьева М.С. Природная гетерогенность и целенаправленный отбор штаммов вируса клещевого енцефалита //Москва.: Медицина- 1990. -123с. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601