Штам вірусу батаї (batai) № 1548 для виготовлення специфічних імунобіологічних препаратів

Штам вірусу Батаї (Batai) №1548, що відноситься до родини Bunjaviridae, роду Bunjavirus, комплексу Буньямвера, ізольований з комарів роду Ае. vexans, виловлених поблизу села Тарасівка Новоселицького району Чернівецької області в 1975 році, депонований за №37 від 01.01.2002 року в колекції арбовірусів Львівського НДІ епідеміології та гігієни МОЗ України і є кандидатом для виготовлення специфічного діагностикуму та вакцини. (19) (21) u200511919 (22) 12.12.2005 (24) 15.09.2006 (46) 15.09.2006, Бюл. № 9, 2006 р. (72) Лозинський Ігор Миколайович, Білецька Галина Вацлавівна, Козловський Михайло Михайлович, Рогочий Євген Георгійович, Шоломей Михайло Володимирович, Семенишин Оксана Богданівна, Федорук Володимир Ілліч, Друль Оксана Стефанівна (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ ІНСТИТУТ ЕПІДЕМІОЛОГІЇ ТА ГІГІЄНИ МОЗ УКРАЇНИ, Лозинський Ігор Миколайович 3 16965 4 Таблиця 1 Порівняння біологічних та фізико-хімічних властивостей штаму №1548 та показників еталонного штаму ММ-2222 № з/п 1. 2. 3. 4. 5. 6. Ознаки, за якими проводився відбір штамів вірусу КЕ Нейровірулентність при внутрішньомозковому (mNic) введенні Нейровірулентність при екстраневральному (mNsc) введенні Індекс інвазивності Індекс інактивації ефіром Індекс інактивації дезоксихолатом натрію Індекс терморезистентності Штам ММ-2222 Штам №1548 4,8 4,9 3,7 3,5 1,6 1,0 1,25 1,85 1,3 1,24 1,64 1,61 Таблиця 2 Характеристика штаму №1548 вірусу Батаї за ступенем вірулентності для білих мишей Штам 1548 нбм іс 6,3 Вірулентність для білих безпородних мишей (lg LD50) 2-тижневі дорослі іс іp II іс ір 4,5 3,5 1,0 1,2 неакт. II 1,2 Примітки: 1. ic - внутрішньомозкове інфікування. 2. ір - підшкірне інфікування. 3. II - індекс інвазивності. 4. нбм - новонароджені білі миші. Штам №1548 добре розмножується в перещеплюваній культурі клітин СНЕВ, викликаючи чітку деструкцію клітин на 3-4 добу (титр вірусу в культуральній рідині становить 5,08 lg LD50 в 0,1мл з вираженим цитопатогенним ефектом), високопатогенний для лінійних і безпородних дорослих та новонароджених білих мишей. При зараженні викликає типову картину експериментального енцефаліту з інкубаційним періодом при внутрішньомозковому шляху зараження 3-5 днів, при внутрішньоочеревинному шляху зараження - 4-7 днів. Гемаглютинуюча активність пропонованого штаму при репродукції в мозку мишей становить 1:320 в зонах рН5,8-6,2. Оптимальне значення рН - 6,0. Антигенні властивості штаму №1548 вивчені в реакції зв'язування комплементу. Антиген штаму №1548 в реакції з гомологічною імунною сироваткою дав титр 1:1280, з імунною сироваткою ММ2222 - 1:80. Спостерігається висока антигенна спорідненість штаму №1548 з еталонним штамом ММ2222, та іншими штамами вірусу Батаї, що циркулюють на території України. Таблиця 3 Антигенні зв’язки штамів вірусу Батаї, визначені в реакції зв'язування комплементу антигени Імунні сироватки ММ-2222 1548 499 2841 1548 499 2841 40\80* 640\1280 40\160 80\160 40\160 160\320 320\320 160\320 160\320 80\320 160\320 160\640 Примітка: 80* - титри подані у вигляді обернених величин Отже, штам №1548 можна пропонувати для виготовлення імунобіологічних препаратів для реакції зв'язування комплементу, реакції гальмування гемаглютинації. Накопичення біомаси штаму №1548 вірусу Батаї здійснюється класичним способом пасажування вірусвмісного матеріалу в живих чутливих системах, в тому числі в організмі лабораторних мишей. Безпородних білих мишей вагою 6-8 грамів заражають у мозок по 0,03мл вірусною суспензією штаму №1548. При появі виражених паралічів на 4-5 добу мишей забивають за правилами евтаназії, асептично добувають мозок і шляхом розтирання мозку у фарфоровій ступці із додаванням фізіологічного розчину готують 10% завісину мозкової тканини. Отриману завісину центрифугують 5 16965 6 при 1000-1500об/хв протягом 10хв. Рідину, що рювань лихоманкою Батаї в Україні, та інших країутворилась над осадом використовують для заранах де циркулюють споріднені арбовіруси. ження наступної партії мишей. Після проведення Джерела інформації: 2-3 пасажів інфікований мозок мишей використо1. Львов Д.К., Клименко С.М., Гайдамович С.Я. вується для приготування діагностикуму [4]. //Арбовирусы и арбовирусные инфекции. -М.: МеТаким чином, штам №1548 вірусу Батаї, спридицина, -1989. -335с. чиняє захворювання людей в Україні, проявляє 2. Виноград И.А. Арбовирусы в Украинской спорідненість з іншими циркулюючими в Україні ССР и их медико-биологическое значение: Дис. дтакого ж роду збудниками, має суттєві відмінності ра мед. наук. -Львов, 1983. -505с. по ряду біологічних та фізико-хімічних показників, 3. Лозинський І.М., Виноград І.А. Арбовіруси та проявляючи при цьому високу специфічність, анарбовірусні інфекції у лісостеповій зоні України тигенну, імуногенну та репродуктивну активність і //Мікробіол. журнал. -1998. -т.60, №2. -С.49-60. відповідає регламентованим параметрам відбору 4. Арбовирусы. Сборник научних трудов. штамів-кандидатів для виробництва імунобіологічМосква, 1986 -180с. них препаратів [5]. 5. Верета Л.А., Воробьева М.С. Природная геВикористання цього штаму для виготовлення терогенность и целенаправленный отбор штаммов специфічного діагностикуму та культуральної ваквируса клещевого енцефалита //Москва.: Медицицини дозволить суттєво підвищити достовірність на -1990. -123с. діагностики та ефективність профілактики захво Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601