Хлоргідрат гліцил (2-бензоіл-4-бром) аналід як анестезувальна та антистресова речовина

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно к производным 1,4-бенздиазепина формулы и может быть использовано для анестезии рыб в промышленном рыбоводстве при заводском разведении рыб и транспортировки рыбопосадочного материала. Авторами предложено название глициланилид. Аналогами глициланилида являются бромнордиазепам - 7-бром-5-фенил-1,2-ди-гидро-3Н-1,4бенздиазепам-2-ОН и феназепам: 7-бром-5-фенил-1,2,3,4-тетрагидро-5Н-1,4-бенздиззепам-ОН [1]. Фенззепам. - Киев: Наукова думка, 1982. - С. 5,16,87-150. Бромнордиазепам является активным транквилизатором с благоприятным спектром фармакологического действия. Однако, бромнордиазепам обладает рядом свойств затрудняющих его применения в рыбоводстве. Это вещество в силу своих гидрофобных свойств практически не растворимо в воде, что делает невозможным использование его в водных растворах или инъекцирование. Задача, на решение которой направлено изобретение, заключается в том, что создается новое вещество с заданными свойствами, обладающее спектром фармакологической активности характерным для производных 1,4 бенздиазепама. Входящий в состав молекулы полярный радикал делает глициланилид водорастворимым, а последующий гидролиз придает молекуле гидрофобные свойства и позволяет выводить избыток препарата, не поступивший в организм рыбы, полностью из водных растворог, тем самым обеспечивая экологическую безопасность применения заявленного вещества, Кроме того, в силу своей высокой фармакологической активности глицианилид применяется в концентрациях в 4-40 раз меньших, чем аналогичные анестетики, что дополнительно уменьшает проблему загрязнения среды и делает работу более безопасной. Синтез осуществляется следующим стразом. Пример 1. В суспензию 60 г (0,8 моль) обезвоженного глицина в 250 мл безводного хлороформа при 3-4°С пропускают 6-8 л хлористого водорода, затем прибавляют 166 г (0,8 моль) пятихлористого фосфора, смесь перемешивают 2 ч при 3-4°С, 5 ч при нормальной температуре, выдерживают 15-16 ч и отфильтровывают осадок хлорангидрида хлоргидрата глицина. К полученному хлорангидриду глицина в 50 мл безводного хлороформа прибавляют раствор 138 г (0,5 моль) 2-амино-5-бромбензофена в 250 мл безводного хлороформа, смесь перемешивают 3,5-4 ч при 30-35°С, выпавший осадок отфильтровывают и промывают хлороформом (2x25 мл). Выделенный осадок переносят в кипящую смесь хлороформ-этанола (1:3, 800 мл), раствор фильтруют, из фильтрата после охлаждения выделяют осадок, высушивают при 35-40°С и остаточном давлении 0,2-0,3 атм и получают 128 г (70%) хлоргидрата глицил (2-бензо-ил-4-бром)-анилида. Т.пл, 173~174°С. Найдено, %: С 48,7; Η 3,8; N 7,6. С15Н14О2N2ВrСІ. Вычислено, %: С 48,7; Η 3,8; N 7,6. ИК спектр, см-1: 1640, 1685 (С=0); 3200-3380 (Ν-Η, в табл. КВГ). В предложенном препарате по формуле хлор гидрат глицил(2-бензопл-4-бром)анилид особенности строения его молекулы придают ему ряд новых свойств. Глициланилид представляет собой пролекарство, молекула которого состоит из гидрофобной физиологически активной части и полярного радикала аминокислоты глицина Введение глицинового радикала обеспечивает водорастворимость глицианилида. В водном растворе происходит гидролиз этой молекулы по схеме Скорость гидролиза зависит от наличия ферментативных систем. Так, при инъекции рыбам терапевтических доз глицианилида полный гидролиз протекает о течение 2-3 мин. По сути дела неактивную водорастворимую фракцию глициланилида выделить не удается. В воде, взятой из пруда или аквариума, то есть в присутствии ферментативных систем бактерий, водорослей и др. планктонных организмов гидролиз протекает в течение 24-26 ч (табл. 1), в стерильных водных растворах - 36 ч. В результате гидролиза, приобретя гидрофобные свойства, молекула глициланилида выпадает в водонорастворимый осадок и вода в течение указанного времени теряет физиологическую активность и, следовательно, происходит ее полная детоксикация. Препарат глициланилида используют путем внутримышечных инъекций или выдерживанием (экспозицией) рыб в растворах этого препарата в соответствующих концентрациях (от 2 до 20 мг/л). Рабочие растворы готовятся на воде в случае помещения рыб и рыбопосадочного материала в воду, содержащую препарат, и на физиологическом растворе при инъекции глициланилида производителям рыб. Растворы готовят непосредственно перед работой. Приготовленный раствор вносится в воду, исходя из расчета необходимой дозы на кг живого веса рыбы. Время выдерживания рыб в растворе зависит от цели, с которой применяется данный способ (получения половых продуктов, инъецирования, перевозки). Оптимальная концентрация глициланилида о воде 5-20 мг/л на 1 кг живого веса, до 5 мг/л рыбы сохраняют подвижность, что затрудняет проведение с ними рыбоводных мероприятий, а при превышении 25 мг/л появляется опасность, что в силу чрезмерного обездвиживания нарушается работа жабр и рыбы могут погибнуть. Для оказания длительного воздействия на производителей рыб, которые подвергаются повторным стрессам при многоразовых инъекциях, раствор глициланилида вводится внутримышечно совместно с суспензией гипофиза (или раствором хорионического гонадотропина) из расчета 2-4 мг/кг живого веса рыбы. Применение препарата поясняется следующими примерами. Пример 2. Для быстрого обездвиживания производителей рыб после отлова из прудов с целью их гипофизарного инъецирования или получения половых продуктов, раствор вносится в рыбоводные носилки из расчета 8 мг/л глициланилида. причем исходя из того, что на одного производителя 4-6 кг веса должно приходиться 10 л воды и, следовательно, доза препарата равна 16 мг/кг живого веса. Рыб сразу после отлова помещают в носилки и переносят к месту работы, через 10 мин рыбы полностью обездвижены и могут помещаться в проточную воду или использоваться для работы. Рыбы обездвижены в течение 2-х часов, что позволяет проводить необходимые рыбоводные мероприятия, инъекцирование, получения половых продуктов и т.п. Явления стресса при дозировке не наблюдается. Пример 3. Для предотвращения стрессирования и травмирования рыб раствор глициланилида вводят внутримышечно совместно с суспензией гипофиза или без нее из расчета 2-4 мг/кг живого веса. Пример 4. Для предотвращения стрессирования и травмирования рыб при их транспортировке глициланилид вносится в воду живорыбной машины. Сеголетки, годовики, ремонт и производители белого толстолобика помещают в живорыбную машину объемом 3 м3, общий вес рыб 300-400 кг. Глициланилид вносят до конечной концентрации в воде 1 мг/л, т.е. 3 г/3 м3, и, следовательно, его доза равна 8-10 мг/кг живого веса. Транквилизирующий эффект наступает через 15 мин и продолжается в течение 8 ч. Примеры приведены в отношении белого толстолобика, как наиболее стресс-реактивных и субтильных рыб. Другие виды рыб переносят действие глициланилида еще более благополучно. Данное вещество является водорастворимым и помимо внесения в воду может быть введено внутримышечно совместно с гипофизарными инъекциями с целью снятия стресс-реакции у производителей рыб при работе с ними или транспортировки. При этом исключаются вредные последствия применения препарата для рыб и окружающей среды. В силу особенностей химического строения препарат обладает способностью к полной дезактивации и выведению из водной среды через 24-36 ч с момента применения. Выживаемость производителей после получения половых продуктов увеличивается по сравнению с рыбоводно-биологическими нормативами на 70-75% и является практически 100-процентной. За счет применения глициланилида повышается экологическая безопасность в сравнении с аналогичными препаратами. Достигается удешевление способа снятия стресс-реакции у рыб и снижается уровень токсического действия на рыб. Глициланилид в применяемых дозах безвреден для человека, в связи с этим работа по получению половых продуктов у производителей рыб по предлагаемой технологии соответствует всем нормам техники безопасности.