Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб виготовлення і контролю алергену очищеного (ППД) для виявлення свиней - носіїв бактерій, що включає вирощування виробничих штамів на синтетичному живильному середовищі, інактивацію бактеріальної маси, фільтрацію, відокремлення культурального фільтрату з подальшим осаджуванням білка з фільтрату трихлороцтовою кислотою, виділенням цільового продукту, який відрізняється тим, що як виробничі штами використовують чотири штами бешихи патогенних для свиней: 93А, 149А, 419В, 1933В, контролюють антигенні властивості алергену введенням підшкірно інтактним кролям алергену дозою 1 см3 від 3 до 5 разів з інтервалом 12-14 днів, визначають безантигенність препарату при відсутності позитивних реакцій в РА (титр не вище 1:10) і в ПР ( титр не вище 1:10).

Текст

Спосіб виготовлення і контролю алергену очищеного (ППД) для виявлення свиней - носіїв бактерій, що включає вирощування виробничих штамів на синтетичному живильному середовищі, 3 18385 4 Після чого проводять виробничий посів культури ром 40 хвилин після чого перевіряли на стерільбешихи в бутелі для накопичення протеїну, потім ність. стерилізацію вирощеної бактеріальної маси. СліПриклад 4. Визначали відсутність сенсибілізудуючий етап - відокремлення культурального фіючих властивостей. 4 здорових кроля масою 2,5кг льтрату бактерій бешихи від бактеріальної маси, кожен, яких не використовували раніше ні в яких далі - осадження протеїну з культурального фільтдослідах, і двом з них вводили внутрішньошкірно рату розчином трихлороцтової кислоти, очищення триразове по 0,2см3п препарату з інтервалом у 5 протеїну насиченим розчином сірчанокислого діб. Через 15 діб після останнього введення Алерамонію. Потім проводять діаліз солей з напівфабгену дослідним і двом контрольним кролям вводирикату протеїну в целофановій плівці. Після чого ли внутрішньошкірно по 0,2см3 Алергену. Реакцію проводять контроль алергену. враховували через 24 години після введення АлеАлерген очищений (ППД) для свиней у станргену .Як що реакція у кролів на введення препадартному розчинні готують з 4-х штамів бешихи рату була відсутня - сенсибілізуючі властивості патогенної для свиней . відсутні. Порівняльний аналіз способу, що заявляється Приклад 5. Визначення антигенних властивоста прототипу показує, що цей спосіб відрізняється тей. Антигенні властивості Алергену вивчали шлявід існуючого конкретною спрямованістю щодо хом повторного, а саме 3-5 кратного (з інтервалом виготовлення алергену очищеного (ППД) для ви12-14 днів) введення, підшкірне інтактним кролям явлення свиней-носіїв бактерій бешихи та відповіАлергену в дозі 1см3. дає критерію "новизна". Відсутність позитивних реакцій в РА і в ПР свіПриклад 1. Для розмноження культури виробдчила про безантигенність препарату. ничих штамів збуднику бешихи свиней, яка виросПриклад 6. Оцінку специфічної активності ла на МПБ, засівали на синтетичне живильне сеАлергену проводили в дослідах на кролях масою редовище. В подальшому матриксами для 2-2,5кг в порівнянні з серологічними методиками виробничих посівів служили 5-добові культури з РА і ПР (по 4 кроля на варіант Алергену). Кролів синтетичного середовища. Вирощену бактерійну досліджували перед дослідом в РА і ПР за відомасу в бутелях розміщували у автоклаві і стерилімими методиками, потім половину з них заражали зували при 0,5 атмосфери одну годину. Культуракультурою бактерій бешихи внутрішньошкірно. льний фільтрат, що містився в бутелях відокремЗахворювання проявлялося почервонінням та лювали від бактерійної маси центрифугуванням припухлістю в місці введення культури, деяким при 5 тисячах обертів/хвилину 30 хвилин. Бактепригніченням та зниженням апетиту. рійну масу утилізували. Культуральний фільтрат Після видужання (через 2-3 тижні у тварин візливали у ємкість для виготовлення Алергену. дбирали проби крові з вен вуха, сироватки, які Приклад 2. Осаджування протеїну здійснювадосліджували в РА та в ПР, а також в шкірній пробі ли 50% водним розчином трихлороцтової кислоти. з серіями алергенів, які вводили в шкіру на боці Для повного осаджування протеїну в ємкість, що тулуба у дозі 0,2см3 (вміст загального білка містить Культуральний фільтрат виробничого 25,5мкг/см3). Шкірну реакцію у кролів враховували штаму заливали 50% розчин трихлороцтової кисчерез 24,48,72 години. Допускається паралельне лоти до кінцевого вмісту її в фільтраті 4% концендослідження дослідних та контрольних алергенів. трації. Отриманий осад центрифугували при 5 тиОдночасно за такою методикою алергени перевісячах обертів/хвилину 20 хвилин. Після ряли на здорових кролях (по дві тварини на варіцентрифугування Алерген осів на стінці стаканів ант). центрифуги, а відпрацьовану рідину злили. Осад Оцінку активності Алергенів проводили за протеїну, що утворився розчиняли дистильованою морфологічними показниками в місці введення водою у співвідношенні 1:5, нейтралізуючи розчин Алергенів (наявність припухлості, її розмір, почер10% нашатирним спиртом. Розчин протеїну воніння, підвищення місцевої температури, болюцентрифугували при 3000об/хв 20 хвилин і зливачість, наявність некрозу у дослідних та контрольли в ємкість. Після чого проводили очищення проних не заражених кролів) та за збіжністю теїну насиченим розчином сірчанокислого амонію. показників реакції з серологічними зрушеннями. Потім проводили діаліз напівфабрикату Алергену. Реакцію на # ( почервоніння 15-20мм) і +++ ( Приклад 3. Розчин протеїну-напівфабрикату почервоніння 10-15мм) вважали позитивною, на розводили стерильною дистильованою водою так, ++ ( почервоніння 5-10мм) і + ( почервоніння до щоб в 1см3 містився не менше 600мкг протеїну. До 4мм) -сумнівною. При негативній реакції через 24 нормалізованого розчину протеїну вносили стеригодини в місці введення Алергену змін не було. льний гліцерин. Препарат такого складу є АлергеСпосіб виготовлення алергену очищеного ном очищеним (ППД) ІЕКВМ для свиней у станда(ППД) для свиней та спосіб контролю алергену є ртному розчині. ефективними, отриманний алерген є якісним для В 1см3 алергену міститься 120-130мкг протеївиявлення свиней-носіїв бактерій бешихи. ну. Алерген очищений ППД ІЕКВМ для свиней у стандартному розчині стерилізували текучим паКомп’ютерна верстка Л. Купенко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for preparing and controlling purified allergen used for detecting pigs carrying erysipelas pathogen

Автори англійською

Stehnii Borys Tymofiiovych, Soloviov Serhii Tykhonovych, Korovin Ihor Viktorovych, Pavlenko Bohdan Mykhailovych

Назва патенту російською

Способ приготовления и контроля аллергена очищенного для выявления свиней - носителей возбудителя рожи

Автори російською

Стегний Борис Тимофеевич, Соловьев Сергей Тихонович, Коровин Игорь Викторович, Павленко Богдан Михайлович

МПК / Мітки

МПК: C12N 7/00, A61K 39/35

Мітки: свиней, бешихи, контролю, виготовлення, бактерій, виявлення, ппд, носіїв, алергену, очищеного, спосіб

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/2-18385-sposib-vigotovlennya-i-kontrolyu-alergenu-ochishhenogo-ppd-dlya-viyavlennya-svinejj-nosiv-bakterijj-beshikhi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб виготовлення і контролю алергену очищеного (ппд) для виявлення свиней – носіїв бактерій бешихи</a>

Подібні патенти