Спосіб пластики післяопераційних кісткових порожнин щелеп

Винахід відноситься до галузі медицини і може використовуватися в хірургічній стоматології. Відомий спосіб пластики післяопераційних кісткових порожнин щелеп, який полягає в тому, що порожнину заповнюють адсорбованою желатиновою або колагеновою губкою, насиченою кров'ю хворого. Цей метод зменшує ретракцію кров'яного згустка і запобігає утворенню вторинних порожнин тому, що згусток стабілізується губчастим каркасом. Якщо Інфекція не проникає в кісткову порожнину, то адсорбуюча губка проростає сполучною тканиною, а потім остання заміщується кісткою. [1. Kruger Ε., Wartigton Ph. Хирургическое лечение кист// Квинтєссенция. - 1991. - №5-6. - С. 381-395; 2. Коллагенопластика в медицине. Под ред. КЬванова В.В. и Сыченикова И.А. - М., "Медицина", 1978. - 256 с.] Недоліком є те, що при застосуванні даного методу відбувається лише стабілізація кров'яного згустка, але не забезпечуються оптимальні умови загоєння кісткової рани. Через відсутність у губки антимікробних властивостей не виключається можливість її інфікування в післяопераційному періоді, особливо при видаленні нагноєних новоутворень великих розмірів. Губка не забезпечує оптимального заповнення дефекту кістковою тканиною через відсутність місцевих остеогенних клітин. При використанні тільки желатинової або колагенової губок загоєння кісткової рани довготривале, проходить за рахунок метаплазії кров'яного згустка, що не виключає можливості його Інфікування і гнійного розплавлення. В основу винаходу поставлено завдання удосконалення способу пластики післяопераційних кісткових порожнин щелеп у якому в післяопераційну кісткову порожнину вводиться високоактивний біологічний пластичний матеріал, чим забезпечується оптимізація процесів остеогенезу і досягається зменшення кількості ускладнень в післяопераційному періоді, скорочення термінів перебігу захворювання та лікування. Поставлене завдання вирішується тим, що спосіб пластики післяопераційних кісткових порожнин щелеп, який включає заповнення кісткової порожнини желатиновою або колагеновою губкою, яку, згідно винаходу, насичують суспензією первинних ембріональних фібробластів людини в концентрації 10-15 млн. клітин в 1 см 3, що взяті Із фрагментів кісткової тканини кінцівок 6-12 тижневих ембріонів і вирощені в культурі. Винахідницький рівень забезпечується неочевидністю можливості суттєвої оптимізації процесу загоєння післяопераційних кісткових порожнин щелеп та прискорення темпів утворення кісткового регенерату шляхом використання для пластики лише желатинової чи колагенової губок, яким властива низька остеогенезостимулююча здатність та відсутня антимікробна дія. Ембріональні фібробласти культивують за відомою методикою у лабораторії відділення регуляторних систем клітини інституту біохімії ім. О.В.Палладіна Національної академії наук України (м.Львів). [1. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимикатов. Пер. с англ. М., "Мир", 1983. - 264 с; 2. Руднева С.В., Голубков С.П., Гаряев А.А. и др. Контракция коллагенового геля фибробластами эмбриона человека: влияние факторов роста клеток// Биологические мембраны. - 1990, т.7. - №12. - С. 1283-1289]. Для трансплантації використовують фібробласти 6-12-тижневих ембріонів людини, які отримані внаслідок переривання вагітності. Для виключення специфічних і Ін фекційних захворювань у жінок, від яких отримують ембріони, проводиться їх ґрунтовне клінічне й лабораторне обстеження. Абортивний матеріал Інкубують в живильному середовищі з антибіотиками (1000 од/мл пеніциліну, 1000 од/мл стрептоміцину та 50 од/мл амфотерицину В) протягом 4-х годин при 37°С. Фрагменти кісткової тканини кінцівок ембріонів виділяють в стерильних умовах і промивають їх у розчині Хенкса (Підприємство по виготовленню бактерійних препаратів, Москва, Росія). Після цього їх подрібнюють, промивають розчином Ігла (Flow lads, Великобританія) і обробляють сумішшю 0,1% розчину трипсину (1:250, Serva, Німеччина) та версену (0,02%) при 37°С протягом 15 хв на магнітній мішалці. Отриману суспензію клітин відділяють від шматків тканин шляхом пропускання через нейлоновий фільтр, додають до неї сироватку крові (Підприємство діагностичних та лікарських препаратів Діалек, Мінськ, Білорусія) в пропорції 1:10 та осаджують клітини за допомогою центрифугування при 200 φ протягом 10 хв. Фібробласти ресуспендують в середовищі ДМЕ з додаванням 10% сироватки крові і висівають у культуральні флакони. Клітини культивують при 37°С в флаконах Карреля в середовищі Ігла, модифікованому Дальбекко (ДМЕ, Flow labs., Великобританія) з додаванням 10% сироваткикрові. Для відкріплення клітин від дна культурального посуду використовують суміш 0,1% трипсину (1:250. Serva, Німеччина) та версену (0,02%). Пересів клітин здійснюють по мірі загущення ними дна флаконів, але не більше 10 пасажів. Кількість клітин підраховують в камері Горяєва. В кінцевому підсумку в 1 мл суспензії, як правило, міститься 10-15 млн. клітин. Робота проводиться в умовах лабораторного боксу. Спосіб здійснюється наступним чином. Перед операцією клітини знімають з дна культурального посуду і готують клітинну суспензію, якою заповнюють стерильну желатинову (Spongostan, Данія) або колагенову (Губка гемостатическая коллагеновая, Лужський завод "Белкозин", Росія) губку, шля хом насмоктування, із розрахунку не менше 10-15 млн. клітин на 1 см 3 каркасу. Підготовлений трансплантат поміщають в післяопераційну кісткову порожнину щелепи, провівши відповідну антисептичну обробку. Слизово-окисний клапоть укладають на місце і ушивають швами. Приклад. Хворий К., 46 р. Рахує себе хворим на протязі трьох місяців, відколи помітив пухлиноподібне утворення на верхній щелепі справа. Об'єктивно: спостерігається асиметрія за рахунок припухлості щоки справа. В порожнині рота - вип'ячування в ділянці перехідної згортки над 6543J зубами еластичної консистенції, наявний симптом "пергаментного хрусту". На Rtg-грамІ бокового відділу верхньої щелепи справа визначається гомогенне затемнення овальної форми, з чіткими контурами, розміром 2,5 χ 3,0см в ділянці верхівок коренів 6543 зубів. Нижня границя верхньощелепової пазухи справа не визначається. Діагноз: радикулярна кіста верхньої щелепи в ділянці 6543 зубів Із відтисненням дна верхньощелепової пазухи. Лікування: проведено цистектомію Із заповненням кісткової порожнини желатиновою губкою, насиченою суспензією первинних ембріональних фібробластів людини. Післяопераційний період гладкий. Рана загоїлася первинним натягом. На Rtg-грамі через 3 місяці дефект кісткової тканини не визначається. Запропонований комбінований трансплантат має високі регенераторні здатності за рахунок наявності ембріональних фібробластів (живих проліферуючи х клітин) - детермінованих попередників, які здатні перетворюватися в зрілі остеогенні клітини після пересадки в післяопераційну кісткову порожнину [Фриденштейн А.Я., Лалыкина К.С. Индукция костной ткани и остеогенные клетки-предшественники. М.. "Медицина", 1973, 224 с]. Желатинова або колагенова губка визначає розмір і форму кісткового регенерату, що утворюють пересаджені фібробласти. Це значно прискорює процес відновлення кісткової тканини в післяопераційному дефекті як в центрі, так і по периферії. Трансплантату властива також виражена гемостатична, протизапальна дія і низька Імуногенність. Його з успіхом використовують для пластики інфікованих кісткових порожнин щелеп. Переваги способу полягають в тому, що. після його використання значно зменшується кількість ускладнень запального характеру в післяопераційному періоді (нагноєння рани, розходження швів) та кількість випадків появи вторинних деформацій щелеп. Використання ембріонального клітинного алогенного матеріалу дає змогу уникати додаткового втручання у хворого - взяття аутологічного трансплантату. Ембріональні фібробласти людини, вирощені в культурі, використовуються також для пересадки в амбулаторних умовах. Застосування пропонованого нами способу пластики післяопераційних кісткових порожнин щелеп приводить до зменшення кількості днів непрацездатності хворих у порівнянні Із контрольною групою.