Спосіб консервування еритроцитів

Изобретение относится к криобиологии, а именно, низкотемпературному консервированию эритроцитов человека, и может быть использовано на станциях переливания крови. Известен способ консервирований эритроцитов при -80°С под защитой глицерина. Однако этот способ является чрезмерно трудоемким, что ограничивает его применение. Наиболее близким к заявляемому является способ консервирования эритроцитов, включающий замораживание их под защитой глицерина до -196°С со скоростью 80-100°/мин и размораживание со скоростью 200-400°/мин. Однако этот способ не обеспечивает высокой сохранности размороженных эритроцитов. Настоящее изобретение направлено на повышение сохранности криоконсервированных эритроцитов. Это достигается за счет того, что замораживание эритроцитов осуществляют в медленном режиме (1012°/мин), а размораживание проводят в два этапа: медленное от -196°С до -100°С со скоростью 5-10°/мин, затем быстрое со скоростью 80-100°С/мин. Такие режимы позволяют предотвратить гибель клеток в процессе замораживания и отогрева. Пример 1. Из крови, заготовленной на растворе "Глюгицир" и хранившейся 3 дня при +4°С, отделяли надосадок путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 мин. К полученной эритромассе. в соотношений 1:1 добавляли криоконсервант ЦНИИГПК5, содержащий 40,0 г маннита, 7.0 г NaCI, 0,3 г Na2HPO4 х 12Н2О, 400.0 мл глицерина и воду бидистиллированную до 1000 мл. Суспензию помещали в алюминиевые контейнеры объемом 100 мл и замораживали на программном замораживателе со скоростью 11°/мин до 196°С. Размораживали в два этапа: сначала со скоростью 7°/мин до температуры начала фазовых превращений раствора (-100°С), затем со скоростью 90°/мин. Размороженную суспензию центрифугировали, удаляли надосадок и определяли сохранность эритроцитов по гемолизу. Гемолиз составил 2,2 ±0,2%. Пример 2. Способ осуществляли аналогично примеру 1, за исключением того, что изменяли скорость замораживания. Результаты представлены в табл.1. Из табл.1 видно, что наибольшую сохранность клеток обеспечивают скорости замораживания 10-12°/мин. Пример 3. Способ осуществляли аналогично примеру 1, за исключением того, что изменяли скорость размораживания на I этапе. Результаты представлены в табл.2. Из табл.2 видно, что наибольшая сохранность клеток достигается при скоростях размораживания на I этапе 5-10°/мин. Пример 4. Способ осуществляли аналогично примеру 1, за исключением того, что изменяли скорость размораживания на II этапе. Результаты представлены в табл.3. Из табл.3 видно, что наилучшие результаты достигаются при скоростях замораживания на II этапе 80100°/мин. Пример 5. Способ осуществляли аналогично примеру 1, за исключением того, что замораживание осуществляли как в прототипе со скоростью 90°/мин. Гемолиз составил 6,5 ± 1,1% (n=4). Пример 6. Способ осуществляли аналогично примеру 1, за исключением того, что размораживание осуществляли как в прототипе в один этап со скоростью 200°/мин. Гемолиз составил 3,5 ± 0,4% (n=4). Пример 7. Для сравнения эритроциты консервировали согласно прототипу: замораживали до -196°С со скоростью 90°/мин, размораживали со скоростью 200°/мин. Гемолиз составил 4,9 ± 0,8% (n=4). Таким образом, заявляемый способ обеспечивает повышение сохранности в 2 раза,