Спосіб визначення сенсибілізації організму при інфекційних хворобах

Спосіб визначення сенсибілізації організму при інфекційних хворобах шляхом лабораторного дослідження культури лімфоцитів периферичної крові, який відрізняється тим, що сенсибілізацію організму визначають за синтезом фактора некрозу клітин a (ФНП- a ) у культурі лейкоцитів, стимульованій ре-комбінантним антигеном на твердій фазі, причому вміст ФНП- a у супернатанті визначається методом імуноферментного аналізу за допомогою комерційних тест-систем. (19) (21) u200706475 (22) 11.06.2007 (24) 25.09.2007 (46) 25.09.2007, Бюл. № 15, 2007 р. (72) Герасун Олександр Борисович, Задорожний Андрій Михайлович, Зінчук Олександр Миколайович (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ ДАНИЛА ГАЛИЦЬКОГО 3 26600 4 будують калібрувальну криву із використанням спрощує облік результатів і дозволяє їх автоматизувати. Використання в якості специфічного стистандартних розчинів з відомим вмістом ФНП-a. мулятора трансформації рекомбінантного антигеКлінічне спостереження за пацієнтами на хрону на твердій фазі, в тому числі комерційних тестнічний гепатит В (n=62) засвідчило, що найвищий систем для ІФА, робить спосіб доступним для ширівень сенсибілізації до антигенів HBV (HBeAg, рокого впровадження в клінічну практику. HBcAg) спостерігався у хворих з інтегративною Спосіб здійснюють таким чином. формою інфекційного процесу (>350пг/мл у 85% Лейкоцитарну масу виділяють з гепаринізовахворих); у хворих з реплікацією HBV DNA показниної венозної крові (4000од на 20мл крові) шляхом ки ПЧСТ (за вмістом ФНП-a у супернатанті культувідстоювання у силіконових пробірках під кутом ри лейкоцитів, були нижчими (100-150пкг/мл). У 45° при температурі 37°С протягом 60-80хв. При хворих з вірусологічною відповіддю на противіруссповільненій ШОЕ в окремих випадках попередньо ну терапію спостерігався високий вміст ФНП-a проводять центрифугування при 100g протягом 3(понад 1000-1500пкг/мл), що зберігався до шести х хв. Лейкоцитарну масу обережно відсмоктують і місяців після припинення реплікації, після чого двічі відмивають не менше, ніж у п'ятикратному починалося поступове зменшення інтенсивності об'ємі середовища №199, центрифугуючи при синтезу ФНП-a. 400g протягом 5хв. Осад ресуспензують у середоУ хворих на хронічний токсоплазмоз (n=11) 6 вищі №199 до кінцевої концентрації 4-5х10 клітин реакція була позитивною у 100% спостережень, на 1мл середовища. До культурального середоінтенсивність її корелювала з клінічним перебігом. вища додають пеніцилін та стрептоміцин по Так, у хворих із такими клінічними проявами як 100од/мл. ознаки діенцефального синдрому, артралгії, лімКультуральне середовище з лейкоцитами пефоаденопатії (при наявності низького або помірнореносять у флакони, до яких додають рекомбінанго вмісту anti-toxo за відсутності у крові DNA токтний антиген на твердій фазі. Попередньо його соплазм за методом PCR) показники ПЧСТ, тричі відмивають 0,9% розчином NaCl по 40с. отримані запропонованим способом, були статичКультивування проводять в атмосфері СО2 при но вищими, ніж у пацієнтів з аналогічними титрами 37°С протягом 48-72 годин. Для забезпечення ноanti-toxo без клінічних проявів (відповідно вміст рмального газообміну об'єм газу перевищує об'єм ФНП-a у сироватці крові становив ≤50пкг/мл та середовища у 8-10 разів. >100пкг/мл). Всі етапи дослідження виконуються стерильДослідження сенсибілізації до комплексу рено. Підготовка посуду відповідає вимогам до посукомбінантних антигенів різних геновидів борелій ду для культури тканин, основні етапи дослідженхворих на Лайм-бореліоз (n=10) свідчило про станя проводять у ламінарній шафі (боксі). тистичне вищі показники ПЧСТ у пацієнтів з безеКлітини осаджують центрифугуванням, а у суритемними формами хвороби, а також при наявпернатанті визначають вміст ФНП-a методом ІФА. ності ознак дисемінації (вторинна еритема, Для визначення ФНП-a у сироватці крові викорисрадикулонейропатії, артрити) порівняно з еритемтовують комерційні тест-системи. ними формами (відповідно