Спосіб прискореного виявлення helicobacter pylori в слизовій оболонці шлунка у патолого-анатомічному матеріалі

Спосіб прискореного виявлення Helicobacter Pylori в слизовій оболонці шлунка у патологоанатомічному матеріалі, що полягає у приготуванні гістологічного мікропрепарату тканини слизової оболонки шлунка із забарвленням його за Романовським і мікроскопічному визначенні Helicobacter Pylori в гістологічному мікропрепараті, який відрізняється тим, що до забарвлення тканину заморожують в кріостаті з використанням гелю, а забарвлення проводять в термостаті при 37 °С. (19) (21) u200707709 (22) 09.07.2007 (24) 12.11.2007 (72) ТУМАНСЬКИЙ ВАЛЕРІЙ ОЛЕКСІЙОВИЧ, U A, ТИМОШЕНКО СВІТЛАН А ГЕННАДІЇВНА, U A (73) ЗАПОРІЗЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA, ТУ МАНСЬКИЙ ВАЛЕРІЙ ОЛЕКСІЙОВИЧ, UA, ТИМОШЕНКО СВІТЛАНА ГЕННАДІЇВНА, U A (56) 3 27721 що призводить до зниження ефективності виявлення Helicobacter Pylori. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу прискореного визначення Helicobacter Pylori в слизовій оболонці шлунку у патологоанатомічному матеріалі шляхом заморожування тканини шлунку з використанням гелю і проведення забарвлення зрізів у термостаті, що прискорює отримання результатів дослідження та забезпечує підвищення його достовірності. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який полягає у приготуванні гістологічного мікропрепарату тканини слизової оболонки шлунку із забарвленням його за Романовським і мікроскопічному визначенні Helicobacter Pylori в гістологічному мікропрепараті, новим є те, що до забарвлення тканину заморожують в кріостаті з використанням гелю, а забарвлення проводять в термостаті при 37°С. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому. Використання замороженого нативного матеріалу для виготовлення гістологічного мікропрепарату виключає етапи попередніх фіксації, зневоднення і заливання в парафін, а використання гелю при заморожуванні запобігає елімінації слизу і присутнього в ній Helicobacter Pylori з люмінальної поверхні фовеолярного епітелію. Процес від забору шматочка тканини до виготовлення мікропрепарату і його забарвлення скорочується до 40 хвилин, що значно прискорює отримання результатів у порівнянні з відомим способом. Скорочення часу на виготовлення гістологічних мікропрепаратів, забарвлених за Романовським, також прискорює мікроскопічну ідентифікацію Helicobacter Pylori. Більш повне збереження Helicobacter Pylori в заморожених мікропрепаратах обумовлює більшу достовірність розрахунку коефіцієнту обсіменіння бактеріями шлунку при мікроскопії. Таким чином, сукупність вищезазначених позитивних ознак дозволить прискорити та підвищити ефективність посмертного визначення Helicobacter Pylori в слизової оболонці шлунку. Спосіб здійснюють таким чином: Вирізаний шматочок тканини слизистої оболонки антрального відділу шлунку розміром 1x1x0,3см без попереднього промивання на 1-2 хвилини занурюють в ємність з петролейним ефіром, потім переносять в камеру кріостату на утримувач тканин і покривають шматочок шаром гелю сrуоembedding compound, що заморожує. Після повного заморожування шматочка тканини в камері кріостату при температурі -25°С з нього виготовляють зрізи завтовшки 3мкм. Зрізи зразу ж переносять на предметні скельця, витягують з кріостату, занурюють в лабораторну склянку з фарбувальним розчином Романовського кімнатної температури і на 30 хвилин ємність ставлять в термостат при 37°С. Забарвлені зрізи на предметних скельцях одноразово промивають проточною водою, просушують і диференціюють 4 2-3 секунди в 96° спирті, потім диференціюють 5 хвилин в ксилолі, укладають в канадський бальзам і проводять мікроскопічне визначення Helicobacter Pylori в слизової оболонці шлунку. Приклад. У померлого хворого на геморагичний інсульт С., 48 років, при розтині були узяті два шматочки слизової оболонки антрального відділу шлунку, які зразу ж заморозили в кріостаті з використанням гелю, виготовили в кріостаті зрізи, зафарбували їх за Романовським в термостаті при 37°С і при світловій мікроскопії визначили обсіменіння слизу фовеолярного епітелію шлунку Helicobacter Pylori, відповідне 3+.