Спосіб діагностики інфекції стафілококової етіології

Спосіб діагностики інфекції стафілококової етіології, що включає дослідження сироватки крові хворого з використанням антигену стафілококів, який відрізняється тим, що як антиген використовують клітинні стінки Staphylococcus aureus штаму Wood-46, які адсорбують на тверду фазу, вносять досліджувану сироватку крові, проводять імуноферментний аналіз, вимірюють оптичну густину одержаного розчину і визначають титр специфічних антитіл, за значенням якого діагностують інфекцію стафілококової етіології. (19) (21) u200710710 (22) 28.09.2007 (24) 10.01.2008 (72) ПОЗУР ВОЛОДИМИР КОСТЯНТИНОВИЧ, UA, СЕНЧИЛО НАТАЛІЯ ВАСИЛІВНА, UA, ОСТАПЧЕНКО ЛЮДМИЛА ІВАНІВНА, UA, СКІВКА ЛАРИСА МИХАЙЛІВНА, UA, ПОЗУР ВАЛЕНТИНА ВОЛОДИМИРІВНА, UA, ГРИЦЕНКО ЛЮДМИЛА МИХАЙЛІВНА, UA, ВОРОБЙОВА ГАННА МИХАЙЛІВНА, UA (73) КИЇВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ ТАРАСА ШЕВЧЕНКА, UA 3 інформативність, яка дає лише візуальну оцінку і не дає кількісної характеристики антитіл. В основу корисної моделі поставлена задача створити спосіб діагностики інфекції стафілококової етіології, шляхом виявлення специфічних антитіл до клітинних стінок Staphylococcus aureus Wood 46, який би забезпечив можливість діагностики інфекції стафілококової етіології і мав би високу точність за рахунок використання клітинних стінок стафілокока, в якості антигена, в тест-системі на основі імуноферментного аналізу. Поставлене завдання вирішується тим, що в способі діагностики інфекції стафілококової етіології, який включає дослідження сироватки крові хворого з використанням антигена стафілококів, згідно корисної моделі, в якості антигена використовують клітинні стінки Staphylococcus aureus штаму Wood 46, які адсорбують на тверду фазу, вносять досліджувану сироватку крові, проводять імуноферментний аналіз, вимірюють оптичну густину одержаного розчину і визначають титр специфічних антитіл, за значенням якого діагностують інфекцію стафілококової етіології. Досліджено 90 зразків сироваток крові хворих на гайморит, отит та ендокардит стафілококової етіології, та 30 контрольних сироваток. Етіологію захворювання встановлено на основі клінічних спостережень, даних анамнезу і підтверджено виділенням Staphylococcus aureus з урахуванням його патогенних властивостей. Приклад конкретного використання: У лунки планшета вносили клітинні стінки та інкубували в термостаті протягом 30 хвилин, при температурі 37°С, додавали розчин бичачого сироваткового альбуміну, інкубували протягом 30 хвилин при температурі 37°С, після кожної інкубації планшети відмивали розчином твіну - 20 при перемішуванні, вносили досліджувані сироватки крові, розведені у твін-фосфатному буфері, інкубували впродовж 30 хвилин при температурі 37°С, планшети відмивали в описаному вище режимі, вносили антитіла проти імуноглобулінів людини, мічені пероксидазою хріну у робочому розведенні 1:800 (в ТФБ), планшети інкубували протягом години при 37°С, відмивали чотири рази розчином твіну-20 в ЗФР, для проявлення реакції в лунки планшета вносили розчин хромоген-субстрата, що містить ортофенілендиамін і перекис водню, зупиняли реакцію внесенням двох-молярної сірчаної кислоти в лунки планшета, вимірювали оптичну густину одержаного розчину, визначали титр специфічних антитіл, який порівнювали з контрольними показниками. Час проведення реакції становив 2,5-3 години. Дослідження показали, що спосіб діагностики, з використанням клітинних стінок Staphylococcus aureus штаму Wood-46 в тест-системі на основі імуноферментного аналізу, які виступають в ролі специфічного діагностикума, забезпечує високу точність діагностики. Спосіб діагностики інфекції стафілококової етології, що патентується, дозволяє здійснити його 29409 4 технічно простими засобами, не потребує особливого обладнання і може бути здійснений на існуючому обладнанні.