Сануюче середовище для розморожування сперми сільськогосподарських тварин

МЛК*А61Й7/О2 САНУЮЧЕ СЕРЕДОВИЩЕ ДЛЯ РОЗМОРОЖУВАННЯ СПЕРМИ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКИХ ТВАРИН Винахід відноситься до сільського господарства, а саме до штучного осіменіння сільськогосподарських тварин і знайде застосування при розморожуванні біологічних об'єктів, зокрема при розморожуванні сперми бугаїв і інших плідників сільськогосподарських тварин, яку заморожено у відкритих гранулах. Відоме середовище для відтавання гранульованої сперми, яке містить в своєму складі води дистильованої - 100 мл, натрію лимоннокислого тризаміщеного п'ятиводного - 3,1 г, глюкози медицинської - 1 г (Осташко Ф.И. и др. Рекомендации по взятию, обработке и глубокому замораживанию спермы быковпроизводителей. - Киев «Урожай». - 1977.). Не дивлячись на асептичність та антисептичність приготування даного середовища, під час розморожування сперми воно може бути контаміновано мікроорганізмами і тому до моменту осіменіння стерильним не буде. Найбільш близьким за складом до винаходу є середовище для розморожування сперми 2,9%-ний розчин натрію лимоннокислого тризаміщеного п'ятиводного (ГОСТ 22280-76), який використовується при розморожуванні сперми плідників сільськогосподарських тварин (Государственные стандарты Союза ССР. Сперма быков замороженная. Государственный комитет стандартов. Москва. - 1976.). Вказане середовище містить наступні інгредієнти: натрій лимоннокислий (ГОСТ 5.1314-72) - 2,9 г, вода дистильована (ГОСТ 6709-72) - до 100 мл. Суттєвим недоліком такого середовища є відсутність в його складі антимікробних компонентів, які б мали бактерицидну дію у відношенні мікроорганізмів, які знаходяться як у самому середовищі (такі що потрапляють в нього внаслідок нестерильності його приготування або ж в процесі розморожування при контакті з навколишнім середовищем), так і в спермі (обсімененій під час отримання, маніпуляцій і в процесі зберігання сперми). Особливо важливо це для сперми, яку заморожено у відкритих гранулах, в процесі зберігання якої при контакті з рідким азотом збільшується кількість мікроорганізмів. Задача винаходу - створення середовища для розморожування сперми, замороженої у відкритих гранулах, яке б мало бактерицидні властивості без зниження якісних показників і запліднювальної здатності сперми. Поставлена задача винаходу вирішується тим, що у відомий 2,9%-ний розчин натрію лимоннокислого тризаміщеного п'ятиводного, який містить 2,9 г натрію лимоннокислого, і води дистильованої - до 100 мл, додатково вводять антибіотики з групи пеніциліну (ампіцилін) і з групи аміноглікозидів (гентаміцин), які мають широкий спектр антимікробної дії і чинять сильний бактеріостатичний вплив на грам позитивні і грам негативні мікроби, в такому співвідношенні інгредієнтів (ваг. %): Лимоннокислий натрій ............................................2,9 Ампіциліна натрієва сіль ......................................... 0,01 Гентаміцина сульфат...............................................0,000025 Вода дистильована................................................... до 100 Для одержання оптимального варіанту середовища необхідно на 100 мілілітрів дистильованої води додати 2,9 г натрію лимоннокислого тризаміщеного п'ятиводного, 62,5 мікролітрів 4%-ного розчину гентаміцину сульфату і 10 міліграм ампіциліну натрієвої солі. Крім того, для запобігання зниження бактерицидної дії його зберігають в рідкому азоті при температурі - 196°С і використовують після розморожування по мірі використання. Запропоноване середовище дозволить не тільки підвищити якість сперми, заплідненість і приживляємість, але й знизити ембріональну смертність, число абортів, а також запобігти виникненню багатьох акушерсько-гінекологічних захворювань, визваних мікроорганізмами, які потрапляють в сперму. Ефективність дії розробленого середовища оцінюють за показниками запліднювальної здатності сперми. Проведено широкий виробничий дослід в держплемзаводі "Червоний Велетень" Харківської області по використанню даного середовища, для чого було створено дві групи корів. Одну з них осіменяли спермою, розмороженою у 2,9 %ному натрію лимоннокислому тризаміщеному п'ятиводному промислового виробництва (контрольна група), а іншу - спермою, розмороженою в запропонованому середовищі (дослідна група). Результати випробувань приведено в таблиці. Заплідненість корів при використанні сануючого середовища Групи тварин Осіменено 165 150 Тільних 118 81 % 72±3,5 54±4,1 1 .Дослід " 2. Контроль **-Р